CN106109287A - 一种植物胎盘素的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种植物胎盘素的制备方法，该方法是以水生花卉中名贵花卉睡莲的胎座为原料，将新鲜睡莲胎座去杂清洗干净，沥干水分，打浆后用超声波做细胞破碎然后高速匀浆，匀浆液高速离心分离取上清液，对上清液进行脱色处理，透析纳滤即得植物胎盘素；本发明为化妆品领域提供了一种纯天然，高效的活性美肤物质，而且原料取材广泛，大大降低了其生产成本，且制备方法简单，适于产业化生产，具有很高的市场推广价值。

Description

一种植物胎盘素的制备方法
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种植物胎盘素的制备方法，提取物具有有效的刺激细胞再生，改善细胞的氧气供应，增加皮肤蛋白质合成，保持皮肤青春，令皮肤容光焕发的功效。
背景技术
秦汉时代，先民们就将睡莲作为滋补药用，荷花药用在中国也有2000年以上的历史。《本草纲目》中记载说荷花，莲子、莲衣、莲房、莲须、莲子心、荷叶、荷梗、藕节等均可药用。荷花能活血止血、去湿消风、清心凉血、解热解毒。莲子能养心、益肾、补脾、涩肠。莲须能清心、益肾、涩精、止血、解暑除烦，生津止渴。荷叶能清暑利湿、升阳止血，减肥瘦身，其中荷叶成分对于清洗肠胃，减脂排瘀有奇效。藕节能止血、散瘀、解热毒。荷梗能清热解暑、通气行水、泻火清心。
根据对睡莲的营养成分分析，结果表明睡莲富含17种氨基酸，睡莲蛋白属优质蛋白。分析结果还表明睡莲含有丰富的VC、黄酮甙、微量元素锌，这二者配合具有很强的排铅功能。
动物急性毒性实验、微核试验及精子畸变实验都表明睡莲是一种安全可靠无任何毒副作用物质。睡莲花粉营养丰富，具有完全性、均衡性、浓缩性等特点，是具有开发利用前景的天然营养源。
植物胎座是植物子房内与种子接触的部位，植物胎盘素是以植物胎座为原料，经特殊工艺分离纯化所制的具有和动物性胎盘精华素功能相类似的活性成分。
植物胎盘素有效成分包括氨基酸，维他命类，矿物质、核糖核酸及多种细胞活性物质。目前已经得到功效认定的有从玉米、大豆、黑麦、樱桃、哈密瓜等分离提取的植物胎盘素。从睡莲胎座中提取植物性胎盘素尚没有相关研究。
发明内容
本发明的目的是提供一种专门为爱美人士使用的日用化妆品活性成分添加剂；即一种植物胎盘素的制备方法，首先将新鲜睡莲胎座去杂清洗干净，沥干水分，打浆后用超声波做细胞破碎然后高速匀浆，匀浆液高速离心分离取上清液，对上清液进行脱色处理，透析纳滤即得植物胎盘素。
具体方法如下：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分在转速16000-31000r/min条件下打浆2-5min，再在转速为30-80r/min的搅拌状态下200-650w超声波处理8-12min，然后在转速20000-22000r/min下高速匀浆3-7min；
（2）将匀浆好的混悬液在8000-50000r/min下高速离心，离心时间为2-4min，取上清液备用；
（3） 测定步骤（2）上清液的pH，然后将上清液调节pH至3-5，升高溶液的温度在40-50℃，加入溶液质量0.5-1%的活性炭30-80r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为30-50min，紧接着用氢氧化钠回调溶液pH至上清液的pH；
（4）选择分子截流量为1000-3000Da的透析膜，将经过步骤（3）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为50-70min，透析出的黄色澄明液体即为睡莲植物胎盘素。
其中所述透析膜为常规市售合成高分子聚合透析膜，分子截流量（MWCO）为1000-3000Da。
本发明植物胎盘素的制备方法中还可以在步骤（1）匀浆好的混悬液中加入混悬液质量1~3%的蛋白酶，45~65℃恒温搅拌水解，监控水解度，水解度达到15~30%时，90℃灭酶10min，冷却后，再进行高速离心。
本发明还提供了一种植物胎盘素复合液，其是在上述方法制得的植物胎盘素中添加植物胎盘素质量0.05-0.2%的虾青素和植物胎盘素质量5-10%的甘油，混合搅拌5-10min制得。
本发明与现有技术相比，其有益效果为：（1）本发明采用纯天然植物新鲜睡莲胎座为原料，胎座较为质嫩肥大，是植物胎盘素的良好来源；（2）产品的提取过程未加入其他有机溶剂，整套工艺有效浓缩睡莲胎盘植物精华，无有机溶剂残留；（3）选用特殊孔径的透析膜对提取物分子进行有效截留，产品分子量小，能够有效透皮吸收；（4）添加虾青素和甘油助溶剂，有效增加了植物胎盘素的抗氧化性和稳定性。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明保护范围不局限于所述内容。
实施例1：本植物胎盘素的制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分在转速18000r/min条件下打浆3min，再在转速为30r/min的搅拌状态下200w超声波处理12min，然后在转速20000r/min下高速匀浆7min；
（2）将匀浆好的混悬液在10000r/min下高速离心，离心时间为3min，取上清液备用；
（3） 测定步骤（2）上清液的pH，然后将上清液调节pH至4，升高溶液的温度在40℃，加入溶液质量1%的活性炭50r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为30min，紧接着用氢氧化钠回调溶液pH至上清液的pH；
（4）选择分子截流量为1000Da的透析膜，将经过步骤（3）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为50min，透析出的黄色澄明液体即为睡莲植物胎盘素。
检测本产品氨基酸的含量达到3.00%，测定方法符合化妆品中氨基酸的含量测定方法QB/T2409-1998。
植物胎盘素抗氧化能力测定：
。
实施例2：本植物胎盘素的制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分在转速25000r/min条件下打浆2min，再在转速为50r/min的搅拌状态下400w超声波处理10min，然后在转速21000r/min下高速匀浆5min；
（2）将匀浆好的混悬液在20000r/min下高速离心，离心时间为2min，取上清液备用；
（3） 测定步骤（2）上清液的pH，然后将上清液调节pH至3，升高溶液的温度在50℃，加入溶液质量0.5%的活性炭30r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为50min，紧接着用氢氧化钠回调溶液pH至上清液的pH；
（4）选择分子截流量为1500Da的透析膜，将经过步骤（3）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为60min，透析出的黄色澄明液体即为睡莲植物胎盘素。
检测本产品氨基酸的含量达到3.05%，测定方法符合化妆品中氨基酸的含量测定方法QB/T2409-1998。
植物胎盘素抗氧化能力测定：
。
实施例3：本植物胎盘素及复合液的制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分在转速30000r/min条件下打浆3min，再在转速为70r/min的搅拌状态下600w超声波处理8min，然后在转速22000r/min下高速匀浆5min；
（2）将匀浆好的混悬液在40000r/min下高速离心，离心时间为3min，取上清液备用；
（3） 测定步骤（2）上清液的pH，然后将上清液调节pH至5，升高溶液的温度在45℃，加入溶液质量0.8%的活性炭80r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为30min，紧接着用氢氧化钠回调溶液pH至上清液的pH；
（4）选择分子截流量为2500Da的透析膜，将经过步骤（3）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为70min，透析出的黄色澄明液体即为植物胎盘素；
（5）在制备得到的植物胎盘素中添加植物胎盘素质量0.1%的虾青素和植物胎盘素质量5%的甘油，制得植物胎盘素复合液。
检测本植物胎盘素氨基酸的含量达到3.07%，测定方法符合化妆品中氨基酸的含量测定方法QB/T2409-1998。
植物胎盘素复合液抗氧化能力测定：
。
实施例4：本植物胎盘素的制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分后用转速为16000r/min打浆机打浆3min，再在转速为80r/min的搅拌状态下用200w功率的超声波对植物细胞破碎12min，然后22000r/min高速匀浆3min；
（2）在步骤（1）匀浆好的混悬液中加入混悬液质量1%的木瓜蛋白酶和1%的风味蛋白酶，65℃恒温搅拌水解，监控水解度，水解度达到30%时，90℃灭酶10min，冷却；
（3）将酶处理好的混悬液20000r/min进行高速离心，离心时间为3min，取其上清液备用；
（4）测定步骤（3）取得的上清液得pH，用醋酸调节溶液的pH在4，升高溶液的温度在45℃，加入溶液质量1%的活性炭70r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为40min，紧接着用氢氧化钠回调溶液的pH；
（5）选择分子截流量（MWCO）为3000Da的透析膜，将经过步骤（4）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为70min，透析出的黄色澄明液体即为睡莲植物胎盘素。
检测本产品氨基酸的含量达到3.13%，测定方法符合化妆品中氨基酸的含量测定方法QB/T2409-1998。
植物胎盘素抗氧化能力测定：
。
实施例5：本植物胎盘素的制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分后用转速为20000r/min打浆机打浆3min，再在转速为50r/min的搅拌状态下用300w功率的超声波对植物细胞破碎10min，然后20000r/min高速匀浆5min；
（2）在步骤（1）匀浆好的混悬液中加入混悬液质量1.5%的酸性蛋白酶，50℃恒温搅拌水解，监控水解度，水解度达到20%时，90℃灭酶10min，冷却；
（3）将酶处理好的混悬液30000r/min进行高速离心，离心时间为4min，取其上清液备用；
（4）测定步骤（3）取得的上清液得pH，用醋酸调节溶液的pH在3.5，升高溶液的温度在50℃，加入溶液质量0.5%的活性炭50r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为30min，紧接着用氢氧化钠回调溶液的pH；
（5）选择分子截流量（MWCO）为2500Da的透析膜，将经过步骤（4）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为60min，透析出的黄色澄明液体即为睡莲植物胎盘素。
检测本产品氨基酸的含量达到3.15%，测定方法符合化妆品中氨基酸的含量测定方法QB/T2409-1998。
植物胎盘素抗氧化能力测定：
。
实施例6：本植物胎盘素的制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分后用转速为30000r/min打浆机打浆2min，再在转速为70r/min的搅拌状态下用650w功率的超声波对植物细胞破碎8min，然后21000r/min高速匀浆3min；
（2）在步骤（1）匀浆好的混悬液中加入混悬液质量3%的中性蛋白酶，45℃恒温搅拌水解，监控水解度，水解度达到15%时，90℃灭酶10min，冷却；
（3）将酶处理好的混悬液40000r/min进行高速离心，离心时间为4.5min，取其上清液备用；
（4）测定步骤（3）取得的上清液得pH，用醋酸调节溶液的pH在4.5，升高溶液的温度在45℃，加入溶液质量0.8%的活性炭40r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为40min，紧接着用氢氧化钠回调溶液的pH；
（5）选择分子截流量（MWCO）为1500 Da的透析膜，将经过步骤（4）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为65min，透析出的黄色澄明液体即为睡莲植物胎盘素。
检测本产品氨基酸的含量达到3.17%，测定方法符合化妆品中氨基酸的含量测定方法QB/T2409-1998。
植物胎盘素抗氧化能力测定：
。
实施例7：本植物胎盘素及复合液的制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分后用转速为18000r/min打浆机打浆3min，再在转速为80r/min的搅拌状态下用250w功率的超声波对植物细胞破碎10min，然后22000r/min高速匀浆3min；
（2）在步骤（1）匀浆好的混悬液中加入混悬液质量1%的胰蛋白酶和1%的碱性蛋白酶，50℃恒温搅拌水解，监控水解度，水解度达到30%时，90℃灭酶10min，冷却；
（3）将酶处理好的混悬液25000r/min进行高速离心，离心时间为3min，取其上清液备用；
（4）测定步骤（3）取得的上清液得pH，用醋酸调节溶液的pH在4，升高溶液的温度在45℃，加入溶液质量1%的活性炭70r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为40min，紧接着用氢氧化钠回调溶液的pH；
（5）选择分子截流量（MWCO）为3000Da的透析膜，将经过步骤（4）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为70min，透析出的黄色澄明液体即为植物胎盘素；
（6）在制备得到的植物胎盘素中添加植物胎盘素质量0.2%的虾青素和植物胎盘素质量8%的甘油，混合搅拌10min，即为植物胎盘素复合液。
检测本植物胎盘素氨基酸的含量达到3.12%，测定方法符合化妆品中氨基酸的含量测定方法QB/T2409-1998。
植物胎盘素复合液抗氧化能力测定：
。
实施例8：本植物胎盘素及复合液的制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分后用转速为30000r/min打浆机打浆2min，再在转速为70r/min的搅拌状态下用550w功率的超声波对植物细胞破碎11min，然后21000r/min高速匀浆3min；
（2）在步骤（1）匀浆好的混悬液中加入混悬液质量0.2%的木瓜蛋白酶和0.8%的风味蛋白酶，65℃恒温搅拌水解，监控水解度，水解度达到15%时，90℃灭酶10min，冷却；
（3）将酶处理好的混悬液40000r/min进行高速离心，离心时间为4.5min，取其上清液备用；
（4）测定步骤（3）取得的上清液得pH，用醋酸调节溶液的pH在4.5，升高溶液的温度在45℃，加入溶液质量0.8%的活性炭40r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为40min，紧接着用氢氧化钠回调溶液的pH；
（5）选择分子截流量（MWCO）为2000Da的透析膜，将经过步骤（4）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为65min，透析出的黄色澄明液体即为睡莲植物胎盘素；
（6）在制备得到的睡莲植物胎盘素中添加植物胎盘素质量0.05%的虾青素和植物胎盘素质量10%的甘油，混合搅拌5min即为植物胎盘素复合液。
检测本植物胎盘素氨基酸的含量达到3.19%，测定方法符合化妆品中氨基酸的含量测定方法QB/T2409-1998。
植物胎盘素复合液抗氧化能力测定：
。
实施例9：本植物胎盘素及复合液的制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分后用转速为25000r/min打浆机打浆3min，再在转速为50r/min的搅拌状态下用400w功率的超声波对植物细胞破碎9min，然后20000r/min高速匀浆5min；
（2）在步骤（1）匀浆好的混悬液中加入混悬液质量1.5%的胰蛋白酶和1%的碱性蛋白酶，50℃恒温搅拌水解，监控水解度，水解度达到20%时，90℃灭酶10min，冷却；
（3）将酶处理好的混悬液30000r/min进行高速离心，离心时间为4min，取其上清液备用；
（4）测定步骤（3）取得的上清液得pH，用醋酸调节溶液的pH在3.5，升高溶液的温度在50℃，加入溶液质量0.5%的活性炭50r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为30min，紧接着用氢氧化钠回调溶液的pH；
（5）选择分子截流量（MWCO）为1000Da的透析膜，将经过步骤（4）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为60min，透析出的黄色澄明液体即为睡莲植物胎盘素；
（6）制备得到的睡莲植物胎盘素中添加植物胎盘素质量0.08%的虾青素和植物胎盘素质量8%的甘油，混合搅拌5min即为植物胎盘素复合液。
检测本植物胎盘素氨基酸的含量达到3.13%，测定方法符合化妆品中氨基酸的含量测定方法QB/T2409-1998。
植物胎盘素复合液抗氧化能力测定：
。

Claims (5)

1.一种植物胎盘素的制备方法，其特征在于：首先将新鲜睡莲胎座去杂清洗干净，沥干水分，打浆后用超声波做细胞破碎然后高速匀浆，匀浆液高速离心分离取上清液，对上清液进行脱色处理，透析纳滤即得植物胎盘素。
2.根据权利要求1所述的植物胎盘素的制备方法，其特征在于包括如下具体步骤：
（1）将新鲜睡莲胎座去杂后清洗干净，沥干水分在转速16000-31000r/min条件下打浆2-5min，再在转速为30-80r/min的搅拌状态下200-650w超声波处理8-12min，然后在转速20000-22000r/min下高速匀浆3-7min；
（2）将匀浆好的混悬液在8000-50000r/min下高速离心，离心时间为2-4min，取上清液备用；
（3） 测定步骤（2）上清液的pH，然后将上清液调节pH至3-5，升高溶液的温度在40-50℃，加入溶液质量0.5-1%的活性炭30-80r/min搅拌进行脱色处理，处理时间为30-50min，紧接着用氢氧化钠回调溶液pH至上清液的pH；
（4）选择分子截流量为1000-3000Da的透析膜，将经过步骤（3）处理的混合液体进行过滤透析处理，处理时间为50-70min，透析出的黄色澄明液体即为植物胎盘素。
3.根据权利要求1所述的植物胎盘素的制备方法，其特征在于：在步骤（1）匀浆好的混悬液中加入混悬液质量1-3%的蛋白酶，45-65℃恒温搅拌水解，监控水解度，水解度达到15-30%时，90℃灭酶10min，冷却后，再进行高速离心。
4.根据权利要求2所述的植物胎盘素的制备方法，其特征在于：蛋白酶为胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、碱性蛋白酶，酸性蛋白酶和中性蛋白酶的一种或任意比两种。
5.含有权利要求1或2所述植物胎盘素的制备方法制得的植物胎盘素的植物胎盘素复合液，其特征在于：在植物胎盘素中添加植物胎盘素质量0.05-0.2%的虾青素和植物胎盘素质量5-10%的甘油，混合制得。
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