CN105943798A - 龙血竭在制备治疗肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了龙血竭在制备治疗肝切除肝损伤修复的药物中的应用。将龙血竭经过二次85％乙醇提取纯化，减压回收，得流浸膏，将浓缩物喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉，将龙血竭浸膏粉用CMC‑Na混悬，或用1％‑50％甘油溶解，用0.2μm滤膜过滤，制成药物制剂，用于口服或注射，0.1‑5mg/kg体重，然后进行肝功能指标检测观察肝组织修复情况，发现肝功能恢复正常，龙血竭具有促进肝切除肝损伤修复的作用。

Description

龙血竭在制备治疗肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用
技术领域
本发明属于天然药物化学、药理学领域，具体涉及一种龙血竭在制备治疗肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用
背景技术
据世界卫生组织统计：全世界有3.5亿人患有肝病，肝病每年造成100多万人死亡，在我国约有3000万肝病患者，每年新增肝病患者约200万。近年来,由化学因素和生物因素(如肝炎病毒)导致的的肝硬化和肝癌的发病率逐年增高。区域性切除病变肝脏是治疗这类疾病的重要手段。在肝脏部分切除或者大范围肝切除后,如何有效地修复肝脏损伤是术后病人得以存活的关键。
血竭，是一种常用的传统名贵中药，性平，味甘、咸，归心胞、肝经，有活血化瘀、消肿止痛、止血补血的功效，主要用于外伤出血、溃疡不敛、跌打损伤、淤血阻滞等症，具有活血不伤血，止血不留瘀的特点，素有“活血之圣药”的美誉。龙血竭(Dragon’s blood)，是上世纪70年代在云南省发现的血竭资源，临床上替代麒麟竭(药典血竭)用于活血止血、敛疮生肌。龙血竭中含有挥发油、黄酮类、蒽醌类、皂苷类、甾醇类、萜类等化合物,其药理作用有镇痛、解痉、抗炎、降血糖等作用，已经被临床用于治疗消化性溃疡、缺血性心脏病、急性心肌梗死、子宫肌瘤、子宫出血等疾病。
目前龙血竭的研究主要集中在活血止血双向调节作用上，鲜见愈创作用的研究。本发明发现龙血竭能够增强2/3肝切除后的修复功能，使2/3肝切除后余肝肝组织再生能力增强，使肝重/体重比较快回升，使肝功能较快改善。目前，未见龙血竭在2/3肝切除后肝损伤修复中起作用的报道。
发明内容
本发明目的是发现龙血竭在制备治疗或预防肝切除后急性肝损伤的药物中的应用，提供龙血竭新的应用领域和肝切除后急性肝损伤修复的新方法。本发明为龙血竭的开发利用和肝脏疾病的治疗提供新的方法。
本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：
龙血竭在制备治疗肝切除肝损伤修复的药物中的应用。
如所述的龙血竭在制备治疗肝切除肝损伤修复的药物中的应用，是将龙血竭经过二次85％乙醇提取纯化，减压回收，得流浸膏，将浓缩物喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉，将龙血竭浸膏粉用CMC-Na混悬，或用1％-50％甘油溶解，用0.2μm滤膜过滤，制成药物制剂，用于口服或注射，0.1-5mg/kg体重，然后进行肝功能指标检测观察肝组织修复情况。
如所述的龙血竭在制备治疗肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其中所述龙血竭是用于肝切除后的急性肝损伤修复。
如所述的龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其中所述的龙血竭是经过75％-100％醇纯化后的喷雾干燥细粉。
如所述的龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其中所述的肝损伤修复是2/3肝切除术后的急性肝损伤修复。
如所述的龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其中所述的应用是取龙血竭经过75％-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉。
如所述的龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其中所述的应用是于术前1天，或手术前8小时，手术后1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天注射龙血竭甘油溶液，于术后第2，4，6，8，10天取血液进行肝功能检测，观察肝组织修复情况。
龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，将龙血竭，经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，将流浸膏喷雾干燥，过120目筛得浸膏粉，取浸膏粉，用1％CMC-Na混悬，配置成200mg/mL，于肝切除手术前一天，术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，口服给药，0.1-5mg/kg体重，于手术当天和术后第2，4，6，8，10天，取血液，进行肝功能指标检测，结果龙血竭增强2/3肝切除后的修复功能，增强2/3肝切除后余肝的肝组织再生能力，改善肝功能。
龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，取龙血竭经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉，将龙血竭浸膏粉溶解于1％-50％甘油中，配置成200mg/mL，用0.2μm滤膜过滤，于手术前一天和术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，口服给药，0.1-5mg/kg体重，于手术当天和术后第2，4，6，8，10天取血液，进行肝功能指标检测。
本发明的龙血竭在急性肝损伤中的应用方法包括如下步骤：1)精制纯化龙血竭浸膏粉：将龙血竭经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，流浸膏经喷雾干燥，过120目筛，得龙血竭浸膏粉。2)给药：将龙血竭浸膏粉混悬于1％－10％CMC-Na中，配置成200mg/mL，在手术前一天，术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，口服给药(0.1-5mg/kg)；或将龙血竭浸膏粉溶解于1％－50％甘油中，配置成200mg/mL，用0.2μm滤膜过滤，于手术前一天和术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，注射给药(0.1-5mg/kg)。3)疗效观察：于术后第2，4，6，8，10天，量体重，取血，进行肝功能指标检测。
如所述的龙血竭在急性肝损伤中的应用，其中所述龙血竭是以市场产品龙血，经75％-100％乙醇提取纯化，喷雾干燥，过120目筛得的。其中所述的龙血竭混悬液是用1％CMC-Na配置，或用1％-50％甘油溶液配制。其中所述龙血竭得给药剂量为0.1-5mg/kg。其中所述给药时间为术前1天，术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天。其中所述肝脏修复状况、及肝功能检测为手术当天和术后第2，4，6，8，10天。
本发明提供一种龙血竭在急性肝损伤中的应用，取龙血竭经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉，用1％CMC-Na混悬，配置成200mg/mL。于肝切除手术前一天，术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，口服给药(0.1-5mg/kg)。于手术当天和术后第2，4，6，8，10天，称重，取血，进行肝功能指标检测。
本发明另外还提供了如下龙血竭在急性肝损伤中的应用，取龙血竭经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉，将龙血竭浸膏粉溶解于1％-50％甘油中，配置成200mg/mL，用0.2μm滤膜过滤，于手术前一天和术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，注射给药(0.1-5mg/kg)。于手术当天和术后第2，4，6，8，10天，称重，取血，进行肝功能指标检测。
与现有使用相比，本发明的优势是:本发明发现龙血竭在术后急性肝损伤中第应用。全世界有3.5亿人患有肝病，肝病每年造成100多万人死亡。近年来,由化学因素和生物因素(如肝炎病毒)导致的的肝硬化和肝癌的发病率逐年增高。肝脏是一种再生能力极强的器官。人类或其它哺乳动物肝脏在严重损伤后的再生能力比任何其它器官都要强。区域性切除病变肝脏是治疗这类疾病的重要手段。在肝脏部分切除或者大范围肝切除后,如何有效地激发残余肝细胞的再生潜能，修复肝脏功能是术后病人得以存活的关键。本发明采用2/3肝切除术，通过观察肝组织再生情况和肝功能修复情况，发现龙血竭对肝切除后肝组织的再生和肝功能的修复具有较好的作用。
本发明龙血竭可以以组合物的形式通过口服、鼻吸入、直肠或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂、胶囊等，制成液体制剂如水或油悬浮剂或其他液体制剂如糖浆、酏剂等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、水或油性悬浮剂等。本发明药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。例如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。
本发明的含龙血竭的药物优选含有重量比为0.1％-99.5％的活性成分，最优选含有重量比为0.5％-95％的活性成分。
本发明龙血竭的施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，其日剂量可以是0.01-10mg/kg体重，优选0.1-5mg/kg体重。可以一次或多次施用。
附图说明：
图1为手术当天和术后第2，4，6，8，10天小鼠体重变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤模型组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤模型组，给予龙血竭治疗。
图2为手术当天和术后第2，4，6，8，10天小鼠肝重/体重比变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤模型组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤模型组，给予龙血竭治疗。
图3为手术当天和术后第2，4，6，8，10天小鼠血浆中总蛋白变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤模型组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤模型组，给予龙血竭治疗。
图4为手术当天和术后第2，4，6，8，10天小鼠血浆中白蛋白变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤模型组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤模型组，给予龙血竭治疗。
图5为手术当天和术后第2，4，6，8，10天小鼠血浆中碱性磷酸酶变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤模型组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤模型组，给予龙血竭治疗。
图6为手术当天和术后第2，4，6，8，10天小鼠血浆中谷丙转氨酶变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤模型组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤模型组，给予龙血竭治疗。
图7为手术当天和术后第2，4，6，8，10天小鼠血浆中谷草转氨酶变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤模型组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤模型组，给予龙血竭治疗。
图8为手术当天和术后第2，4，6，8，10天注射给予龙血竭，各组体重变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤组，给予龙血竭治疗。
图9为手术当天和术后第2，4，6，8，10天注射给予龙血竭，各组肝重/体重比变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤组，给予龙血竭治疗。
图10为手术当天和术后第2，4，6，8，10天注射给予龙血竭，各组血浆中总蛋白变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤组，给予龙血竭治疗。
图11为手术当天和术后第2，4，6，8，10天注射给予龙血竭，各组血浆中白蛋白变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤模型组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤模型组，给予龙血竭治疗。
图12为手术当天和术后第2，4，6，8，10天注射给予龙血竭，各组血浆中碱性磷酸酶变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤组，给予龙血竭治疗。
图13为手术当天和术后第2，4，6，8，10天注射给予龙血竭，各组血浆中谷丙转氨酶变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤组，给予龙血竭治疗。
图14为手术当天和术后第2，4，6，8，10天注射给予龙血竭，各组血浆中谷草转氨酶变化情况图，图中，sham+vehicle为假手术组，给予相同体积空白溶剂；PH+vehicle为肝损伤组，给予相同体积空白溶剂；PH+LXJ为肝损伤组，给予龙血竭治疗。
具体实施方式：
下面结合附图，用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明的实质性内容。
实施例1：
将龙血竭5kg,经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏4.375kg。将流浸膏喷雾干燥，过120目筛得臭灵丹浸膏粉4.174kg。取龙血竭浸膏粉0.5kg，用1％CMC-Na混悬，配置成200mg/mL。于肝切除手术前一天，术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，灌胃给予模型小鼠(0.2mL/20g)。于手术当天和术后第2，4，6，8，10天，称重，取小鼠血液，进行肝功能指标检测，同时处死小鼠，取出小鼠肝脏，称重，测定小鼠肝重/体重比。结果小鼠体重变化见图1；小鼠肝重/体重比见图2；小鼠血浆总蛋白含量见图3；小鼠血浆白蛋白含量见图4；小鼠血浆碱性磷酸酶含量见图5；小鼠血浆谷丙转氨酶酶含量见图6；小鼠血浆谷草转氨酶酶含量见图7。
临床应用：将龙血竭，经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，将流浸膏喷雾干燥，过120目筛得浸膏粉，取浸膏粉，用1％CMC-Na混悬，配置成200mg/mL，于肝切除手术前一天，术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，口服给药，0.1-5mg/kg体重，于手术当天和术后第2，4，6，8，10天，取血液，进行肝功能指标检测，结果肝功能指标正常，表示龙血竭增强2/3肝切除后的修复功能，能增强2/3肝切除后余肝的肝组织再生能力，能很好地改善肝功能。
结果显示：肝切除术患者在术前和术后口服给予龙血竭后，与未给药组相比，其体重在第2，4，6，8，10天回升明显较快(p<0.05)，肝功能修复明显快于空白组(p<0.05)，第10天后肝功能指标趋于正常(与正常组比p<0.05)。龙血竭能够增强2/3肝切除后的修复功能，使2/3肝切除后余肝肝组织再生能力增强，使肝重/体重比较快回升，使肝功能较快改善。
实施例2：
将龙血竭4.6kg,经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏4.126kg。将流浸膏喷雾干燥，过120目筛得臭灵丹浸膏粉4.012kg。取龙血竭浸膏粉0.5kg，将龙血竭浸膏粉溶解于10％甘油中，配置成200mg/mL，用0.2μm滤膜过滤，于手术前一天和术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，灌胃给予模型小鼠(0.1mL/20g)。于手术当天和术后第2，4，6，8，10天，称重，取小鼠血液，进行肝功能指标检测，同时处死小鼠，取出小鼠肝脏，称重，测定小鼠肝重/体重比。结果小鼠体重变化见图8；小鼠肝重/体重比见图9；小鼠血浆总蛋白含量见图10；小鼠血浆白蛋白含量见图11；小鼠血浆碱性磷酸酶含量见图12；小鼠血浆谷丙转氨酶酶含量见图13；小鼠血浆谷草转氨酶酶含量见图14。
临床应用：取龙血竭经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉，将龙血竭浸膏粉溶解于1％-50％甘油中，配置成200mg/mL，用0.2μm滤膜过滤，于手术前一天和术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，口服给药，0.1-5mg/kg体重，于手术当天和术后第2，4，6，8，10天取血液，进行肝功能指标检测。结果肝功能指标正常，表示龙血竭增强2/3肝切除后的修复功能，能增强2/3肝切除后余肝的肝组织再生能力，能很好地改善肝功能。
结果显示：肝切除术患者在术前和术后注射给予龙血竭，与未给药组相比，其体重在第2，4，6，8，10天回升明显较快(p<0.05)，肝功能修复明显快于空白组(p<0.05)，第10天后肝功能指标趋于正常(与正常组比p<0.05)。龙血竭能够增强2/3肝切除后的修复功能，使2/3肝切除后余肝肝组织再生能力增强，使体重比较快回升，使肝功能较快改善。
实施例3：
片剂：将龙血竭5kg,经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏4.375kg。将流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉4.174kg，取龙血竭浸膏粉10mg，乳糖180mg，淀粉55mg，硬脂酸镁5mg、乳糖和淀粉混和，用水均匀湿润、把湿润后的混合物过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁，然后将混合物压片，每片重250mg，化合物含量为10mg。
实施例4：
安瓿剂：将龙血竭4.6kg,经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏4.126kg。将流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉4.012kg，取龙血竭浸膏粉2mg，氯化钠10mg，溶解于适量的注射用水中，过滤所得溶液，在无菌条件下装入安瓿瓶中。
实施例5：
注射用冻干剂：将龙血竭4.6kg,经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏4.126kg。将流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉4.012kg，取龙血竭浸膏粉10mg，碳酸氢钠2mg，甘露醇252mg。
制备方法：将碳酸氢钠、甘露醇，加注射用水溶解，加活性碳吸附30min除热原，过滤除去活性碳，在滤液中加入龙血竭浸膏粉，超声处理使溶解，用1N盐酸调节PH为5.0-7.0，微孔滤膜滤过，加注射用水，分装，冷冻干燥，上塞，轧盖，即得。
实施例6：
胶囊剂：将龙血竭5kg,经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏4.375kg。将流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉4.174kg，取龙血竭浸膏粉10mg，乳糖187mg，硬脂酸镁3mg；制备方法：将龙血竭浸膏粉与助溶剂混和，过筛，均匀混合，把得到的混合物装入硬明胶胶囊，每个胶囊重200mg，活性成分含量为10mg。

Claims (8)

1.龙血竭在制备治疗肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用。
2.如权利要求1所述的龙血竭在制备治疗肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其特征在于将龙血竭经过二次85％乙醇提取纯化，减压回收，得流浸膏，将浓缩物喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉，将龙血竭浸膏粉用CMC-Na混悬，或用1％-50％甘油溶解，用0.2μm滤膜过滤，制成药物制剂，用于口服或注射，0.1-5mg/kg体重，然后进行肝功能指标检测观察肝组织修复情况。
3.如权利要求1所述的龙血竭在制备治疗肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其特征在于所述龙血竭是用于肝切除后的急性肝损伤修复。
4.如权利要求1所述的龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其特征在于所述的肝损伤修复是2/3肝切除术后的急性肝损伤修复。
5.如权利要求1所述的龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其特征在于所述的应用是龙血竭经过75％-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉。
6.如权利要求1所述的龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其特征在于所述的应用是于术前1天，或手术前8小时，手术后1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天注射龙血竭甘油溶液，于术后第2，4，6，8，10天取血液进行肝功能检测，观察肝组织修复情况。
7.龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其特征在于将龙血竭，经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，将流浸膏喷雾干燥，过120目筛得浸膏粉，取浸膏粉，用1％CMC-Na混悬，配置成200mg/mL，于肝切除手术前一天，术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，口服给药，0.1-5mg/kg体重，于手术当天和术后第2，4，6，8，10天，取血液，进行肝功能指标检测，结果龙血竭增强2/3肝切除后的修复功能，增强2/3肝切除后余肝的肝组织再生能力，改善肝功能。
8.龙血竭在制备肝切除急性肝损伤修复的药物中的应用，其特征在于取龙血竭经过75-100％乙醇提取，减压回收，得流浸膏，流浸膏喷雾干燥，过120目筛得龙血竭浸膏粉，将龙血竭浸膏粉溶解于1％-50％甘油中，配置成200mg/mL，用0.2μm滤膜过滤，于手术前一天和术后第1，2，3，4，5，6，7，8，9，10天，注射给药，0.1-5mg/kg体重，于手术当天和术后第2，4，6，8，10天取血液，进行肝功能指标检测。
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