CN105902604A - 治疗急性t淋巴细胞白血病的复方药物 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗急性T淋巴细胞白血病的复方药物,其由以下重量份的原料制成:当归多糖10‑30份,黄芪总苷10‑25份,川芎嗪5‑10份,西洋参总皂苷5‑15份。本发明为中药提取物复方药物,其不良反应和副作用相比于西药明显降低,且作用全面,治疗效果更佳;相比于化学治疗方法,显著提高了患者用药的依从性,提高患者的生活质量;可明显提高对白血病的抑制效果,且对白血病细胞具有选择性;能有效抑制T‑ALL类癌细胞,对治疗白血病具有良好的应用价值。
Description
技术领域
本发明属于医药领域,特别是一种治疗急性T淋巴细胞白血病的复方药物。
背景技术
白血病是一种造血系统的恶性肿瘤,白血病发病迅猛、病情险恶、病因复杂,对人类的生命安全造成巨大威胁。多年来全球科研工作者不断探索白血病的致病机理,逐渐获得了一些共识:人体对造血的调控方式极为精细,主要包括造血干细胞上各基因的相互作用,正常造血微环境的影响,正、负造血调控因子的诱导等。造血干细胞上各基因协调的相互作用使造血祖细胞适度的自我更新、分化成熟或发生凋亡,以保证体内正常血细胞数量维持在一定范围。造血干细胞中的某些基因突变造成未成熟的造血细胞不受控制地无限增殖,大量这类未成熟不分化的细胞增生累积引发了白血病。
白血病较为常见,约占癌症总发病率的5%左右,尤其以儿童和青年居多。在我国各年龄组恶性肿瘤的死亡率中白血病占第6位(男性)和第8位(女性),在儿童及35岁以下的人群中则占第一位。同时白血病的分布是世界性的。
急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)就是这一类以基因突变所致的原始T淋巴细胞分化出现障碍、凋亡受阻、异常增殖为特点的血液系统恶性克隆性疾病。加上目前环境污染的原因,T-ALL的发病率逐年上升,主要表现为骨髓和外周血中的原始T淋巴细胞还未完全分化,但犹豫基因突变出现无限恶性增殖,阻碍了正常的红细胞、淋巴细胞和粒细胞的分化和功能,不仅如此,还会牵涉到转移至中枢神经系统,死亡率很高而且容易复发。
目前白血病的治疗可从三个方面入手:诱导细胞凋亡、诱导细胞分化、及干细胞移植重建造血功能。迄今为止白血病的治疗仍然主要采用传统的联合化疗,但此疗法副作用很大,复发率较高,尤其对机体免疫与造血系统有较大损害。
现有技术中化学治疗过程对白血病患者的副作用较大,并且对于白血病细胞的杀灭不能令人满意。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是:为了克服上述技术的不足,提供一种能够治疗白血病的复方药物。
本发明解决其技术问题采用以下的技术方案:
本发明提供的治疗急性T淋巴细胞白血病的复方药物,其由以下重量份的原料制成:当归多糖10-30份,黄芪总苷10-25份,川芎嗪5-10份,西洋参总皂苷5-15份。
该复方药物可以由以下替换的重量份的原料制成:当归多糖30份,黄芪总苷25份,川芎嗪10份,西洋参总皂苷15份。
该复方药物可以由以下替换的重量份的原料制成:当归多糖20份,黄芪总苷20份,川芎嗪10份,西洋参总皂苷15份。
该复方药物可以由以下替换的重量份的原料制成:当归多糖20份,黄芪总苷15份,川芎嗪5份,西洋参总皂苷10份。
该复方药物可以由以下替换的重量份的原料制成:当归多糖10份,黄芪总苷10份,川芎嗪5份,西洋参总皂苷5份。
该复方药物的剂型可以为片剂、胶囊剂或滴丸。
该复方药物用于治疗白血病。
该复方药物用于治疗急性T淋巴细胞白血病。
根据中医理论,本发明复方药物组方分析如下:。
所述当归性甘、辛,温。归肝、心、脾经。补血活血,调经止痛,润肠通便。用于血虚萎黄、眩晕心悸、月经不调、经闭痛经、虚寒腹痛、肠燥便秘、风湿痹痛、跌扑损伤、痈疽疮疡。采用当归的根部,作为本复方药物的提取物。
所述黄芪性甘温,善入脾胃经,为补中益气要药。脾气虚弱,倦怠乏力,食少便溏者,可单用熬膏服,或与党参、白术等补气健脾药配伍。因其能升阳举陷,故长于治疗脾虚中气下陷之久泻脱肛,内脏下垂。常与人参、升麻、柴胡等品同用。采用黄芪的根部,作为本复方药物的提取物。
所述川芎味辛;性温。归肝经、胆经、心包经。能行气开郁,祛风燥湿,活血止痛,治头痛旋晕、肋痛腹疼、经闭、难产、痈疽疮疡等症。采用川芎的根茎,作为本复方药物的提取物。
所述西洋参性味甘、微苦,凉。归心、肺、肾经。补气养阴,清热生津。用于气虚阴亏,内热,咳喘痰血,虚热烦倦,消渴,口燥咽干。采用西洋参的根部,作为本复方药物的提取物。
上述四种药物中,当归与川芎配伍,具有补血活血药对,具有养血补血、活血化瘀的功效,当归偏养血和血,川芎偏行血散血,二药每相使配对同用,可增强活血祛瘀、养血和血之功。黄芪与当归配伍,具有益气生血的功效,可用于治疗劳倦内伤、气血两虚、阳浮于外的热证等症状。川芎与黄芪配伍,临床中常用其治疗中风;黄芪为补气要药,为“气中血药”,川芎辛散温通,既能活血,又能行气,为“血中气药”,重用可引药上达巅顶,旁通四肢;二者配伍,使补而不滞,从而消散血瘀。作为常用的两种补气药物,西洋参和黄芪配伍可显著提高小鼠足跖肿胀度值、脾淋巴细胞增殖能力、碳廓清能力及脾脏抗体生成数,从而提高免疫功能。
本发明通过上述四种药物的有效部位提取物组成一个以中医指导理论为基础的中药有效成分复方药物,目的是为了治疗白血病。经实验检测,有良好的效果。
本发明与现有技术相比具有以下主要的优势:
1.作用全面,治疗效果更佳,相比于化学治疗,显著提高了患者用药的依从性,提高患者的生活质量。
2.为中药提取物复方药物,经实验证明,其不良反应和副作用相比于西药明显降低,且作用全面,治疗效果更佳。
3.含有多种成分,各成分之间协同作用,作用靶点更多,相较于单一成分治疗效果明显提升。
4.可明显提高对白血病的抑制效果,且对白血病细胞具有选择性,能有效抑制T-ALL类癌细胞,对治疗白血病具有良好的应用价值。经实验证明该复方药物可有效抑制急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞,延长白血病小鼠模型的生存时间,且无明显不良反应。
5.可采用制剂学常规方法制备成片剂、胶囊剂、滴丸等剂型,以方便进行生产加工。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明,但并不局限于下面所述内容。
实施例1:治疗急性T淋巴细胞白血病的复方药物
该复方药物由以下重量份的原料制成:
当归多糖30份,黄芪总苷25份,川芎嗪10份,西洋参总皂苷15份。
实施例2:治疗急性T淋巴细胞白血病的复方药物
该复方药物由以下重量份的原料制成:
当归多糖20份,黄芪总苷20份,川芎嗪10份,西洋参总皂苷15份。
实施例3:治疗急性T淋巴细胞白血病的复方药物
该复方药物由以下重量份的原料制成:
当归多糖20份,黄芪总苷15份,川芎嗪5份,西洋参总皂苷10份。
实施例4:治疗急性T淋巴细胞白血病的复方药物
该复方药物由以下重量份的原料制成:
当归多糖10份,黄芪总苷10份,川芎嗪5份,西洋参总皂苷5份。
上述实施例1-实施例4中,所述当归多糖、黄芪总苷、川芎嗪和西洋参总皂苷提取方法如下:
使用的当归多糖由当归提取得到,其方法为:取干燥当归粉末,加入10倍量纯化水在热水浴中浸提,其间不断搅拌,静置冷却后离心,收集上清液,减压浓缩,在冷却后的上清液中加入4倍体积无水乙醇,4℃静置过夜,离心,收集沉淀,Sevag法除蛋白,冷冻干燥,得当归粗多糖。
使用的黄芪总苷由黄芪提取得到,其方法为:取黄芪干燥粉末用8倍量体积浓度为70%乙醇浸泡过夜,用超声波提取法提取2次,每次30min,提取液减压浓缩,过D101型大孔树脂分离柱,利用体积浓度为47.5%的乙醇溶液洗脱得总苷,得到的总苷醇溶液利用旋转蒸 发器回收至无醇味,即得黄芪总苷。
使用的川芎嗪由川芎提取得到,其方法为:取川芎干燥粉末用10倍量的体积浓度为75%乙醇水溶液超声提取3小时,提取3次,提取液减压浓缩,得到的浓缩液利用AB-8型大孔吸附树脂分离柱进行分离,利用体积浓度为30%的乙醇溶液洗脱,洗脱液浓缩即得川芎嗪。
使用的西洋参总皂苷由西洋参提取得到,其方法为:取西洋参干燥切片用8倍量的体积浓度为70%乙醇水溶液常温下浸润提取2次,每次3小时,提取液减压浓缩,得到的浓缩液利用D101型大孔吸附树脂分离柱进行分离,利用体积浓度为40%的乙醇溶液洗脱,洗脱液浓缩即得西洋参总皂苷。
实施例5:片剂的制备
取上述实施例1-4药物组合共100g,加入淀粉50g,将药物与淀粉混匀,加入旋转式制粒机制粒,将所得的颗粒经流化床式干燥机干燥,加微晶纤维素15g,硬脂酸镁2g,与干燥颗粒混匀,用旋转式自动压片机压片制得共1000片,即得本发明药物片剂。
该药物片剂适合于白血病患者,其服用方法是:每次一片,每日三次。注意事项:有严重心脑血管疾病者应遵循医嘱用药。
实施例6:胶囊剂的制备
取上述实施例1-4药物组合共150g,加入淀粉60g,将药物与淀粉混匀,加入旋转式制粒机制粒,将所得的颗粒经流化床式干燥机干燥,加入2g硬脂酸镁,与干燥颗粒混匀,通过半自动胶囊填充机制得胶囊1000粒,即得本发明药物胶囊。
该药物胶囊适合于白血病患者,其服用方法是:每次一粒,每日两次。注意事项:有严重心脑血管疾病者应遵循医嘱用药。
实施例7:滴丸的制备
称取聚乙二醇6000 200g水浴(80℃),加热将其煮熔,加入上述实施例1-4药物组合共50g,充分搅拌均匀,以液体石蜡为冷却剂,置玻璃管(4*80cm)中,冷却温度为10℃,滴口内外径为7.0/2.0(mm/mm),滴口距离液面为2cm,滴速以每分钟50滴为最佳条件,用棉布吸干滴丸表面的冷凝级,即得本发明药物滴丸。
该药物滴丸适合于白血病患者,其服用方法是:每次两粒,每日三次。注意事项:有严重心脑血管疾病者应遵循医嘱用药。
下面通过实验来证实本发明中复方药物对急性T淋巴细胞白血病所具有的作用。
实验例1:本发明中复方药物对急性T淋巴细胞白血病细胞的抑制作用
通过MTT药效学实验(比色法检测药效)测定本发明中复方药物对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的抑制作用。
1.实验材料:胎牛血清RPMIIMDM培养基(美国Gibico生命技术公司),CO2细胞培养基(美国PAA公司),细胞培养基(美国PAA公司),四氮唑蓝(美国Sigma公司),DMSO(美国Sigma公司)。
2.细胞培养方法:人急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞用10%胎牛血清的RPMIIMDM培养基置于37℃,5%CO2细胞培养箱中进行培养,隔天传代、换液。
3.MTT药效学实验(比色法检测药效)方法:
将培养的Jurkat细胞离心后,用培养基配成8.0*104细胞/ml细胞悬液,按每孔100μl加到96孔板中。培养24小时后,每孔加入100μl不同浓度的复方药物,每个浓度4个平行孔。培养72小时后,每孔加入20μl的50mg/ml的MTT无血清培养基。培养4小时后,弃培养基,每孔加入200μl DMSO,轻微震荡10分钟,甲臢充分溶解后,用酶标仪在570nm波长下测定细胞光吸收值(OD值)。设定中复方药物的终浓度为200.00ug/L,100.00ug/L,50.00ug/L,25.00ug/L,12.50ug/L,6.00ug/L,3.00ug/L,1.50ug/L,0.75ug/L,计算各个暴露浓度中的Jurkat细胞生长抑制率,得出Jurkat细胞的半效抑制浓度IC50。
4.实验结果:
由MTT实验结果显示,Jurkat细胞在200.00ug/L,100.00ug/L,50.00ug/L,25.00ug/L,12.50ug/L,6.00ug/L,3.00ug/L,1.50ug/L,0.75ug/L的本发明复方药物中暴露72小时,细胞生长抑制率分别为85.17%、84.12%、84.59%、77.21%、54.24%、31.72%、31.19%、12.11%、4.74%,这表明,本发明对急性T淋巴细胞白血病细胞Jurkat细胞具有很强的抑制作用,所述的复方药物非常适宜开发为一种治疗白血病,尤其是急性T淋巴细胞型白血病的治疗药物。
实验例2:本发明中复方药物治疗白血病的药效学与毒性研究
通过对急性T淋巴细胞白血病模型的小鼠进行动物实验,通过观察小鼠的存活时间以及不良反映来判断复方药物的药效与毒性。
1、实验材料:裸鼠(湖北省实验动物中心)、实施例1、实施例2、实施例4得到的复方药物、环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司)、人类Jurkat T淋巴细胞白血病细胞株(中国科学院上海生命科学院细胞资源中心)、胎牛血清RPMIIMDM培养基(美国Gibico生命技术公司)与细胞培养基(美国PAA公司)。
2、急性T淋巴细胞白血病小鼠模型的建立:
取裸鼠在新饲养条件下适应2d后于无菌条件下进行脾切除术,第7天拆线,并开始给予环磷酰胺腹腔注射,连续3d,第4天接受直线加速器全身亚致死剂量照射。然后将肿瘤细胞通过皮下注射的方式从小鼠右肋部注射0.2ml,使肿瘤细胞接种至裸鼠体内。研究表明,1×104~1×107个白血病细胞都能使NOD/SCID小鼠发生白血病。
3、试验方法:
将50只小鼠随机分为五组,组1为对照组,组2为西药组,在小鼠接种白血病细胞3天后开始按照200mg/kg的药量注射环磷酰胺,每日一次。组3-组5分别为实施例1、实施例2、实施例4的实验组。这三组小鼠分别在接种白血病细胞3天后给予药物(分别为实施例1、2、4)灌胃,80mg每次,上下午各一次。组6-组9分别为单独应用等量当归多糖,黄芪总苷,川芎嗪,西洋参总皂苷的实验组。实验方案同组3-组5。
观察内容包括饮食及精神状态,有无精神委糜、食欲缺乏、消瘦、弓背、腹泻、脱毛、皮肤溃疡、偏瘫、失明等表现及肿块生长情况,定期监测受体鼠体质量,记录小鼠存活时间观察至移植后60天,存活40天定为长期存活。
4、实验结果:
对照组小鼠于第4天开始出现精神萎靡的症状,几乎停止进食,于第6日开始出现死亡。西药组小鼠存活时间比对照组更长,出现症状的时间也更靠后、但是药效并不明显,且出现皮肤溃疡和腹泻等不良反应。复方药物组别小鼠能长时间保持相对健康的状态,较组1、组2都更加有精神食欲旺盛体重无减轻情况,总体健康状况良好,存活时间明显延长。三组服用复方药物的小鼠存活时间无明显区别,复方药物组相比于组6-组9的单一组分实验组小鼠生存时间明显延长。组6-组9实验组小鼠存活时间接近于西药组但远低于复方药物组。组6-组9实验组小鼠虽无明显不良反应,但是其生存时间远不及复方药物组,这也证明复方药物的协同作用和多靶点效果良好,相较与单一组分,更适合作为一种治疗白血病的药物进行研究与开发。如表1所示。
结论:本发明设计的一种治疗急性T淋巴细胞白血病的复方药物在动物实验中没有明显的毒副作用,并且药效显著,对病情的控制情况良好,小鼠生存时间相较于对照组、西药组和单一组分实验组均有明显延长。通过细胞实验证明本发明复方药物确实能针对急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞进行有效的抑制。证明本发明用药安全且疗效显著,适合开发成为一种治疗白血病尤其是急性T淋巴细胞白血病的药物。
表1
Claims (8)
1.一种治疗急性T淋巴细胞白血病的复方药物,其特征在于该复方药物由以下重量份的原料制成:当归多糖10-30份,黄芪总苷10-25份,川芎嗪5-10份,西洋参总皂苷5-15份。
2.根据权利要求1所述的复方药物,其特征在于该复方药物由以下替换的重量份的原料制成:当归多糖30份,黄芪总苷25份,川芎嗪10份,西洋参总皂苷15份。
3.根据权利要求1所述的复方药物,其特征在于该复方药物由以下替换的重量份的原料制成:当归多糖20份,黄芪总苷20份,川芎嗪10份,西洋参总皂苷15份。
4.根据权利要求1所述的复方药物,其特征在于该复方药物由以下替换的重量份的原料制成:当归多糖20份,黄芪总苷15份,川芎嗪5份,西洋参总皂苷10份。
5.根据权利要求1所述的复方药物,其特征在于该复方药物由以下替换的重量份的原料制成:当归多糖10份,黄芪总苷10份,川芎嗪5份,西洋参总皂苷5份。
6.根据权利要求1至5中任一所述的复方药物,其特征在于该复方药物剂型为片剂、胶囊剂或滴丸。
7.根据权利要求6所述的复方药物,其特征在于该复方药物用于治疗白血病。
8.根据权利要求6所述的复方药物,其特征在于该复方药物用于治疗急性T淋巴细胞白血病。
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