CN105884723B

CN105884723B - 丹参酮衍生物、其制备方法及其应用

Info

Publication number: CN105884723B
Application number: CN201410819765.8A
Authority: CN
Inventors: 栾德刚; 秦立玙; 黄文武; 栾松平
Original assignee: Shanghai Sanfan Biological Medical Science And Technology Co Ltd
Current assignee: Shanghai Viking biological medicine & Technology Co., Ltd.
Priority date: 2014-12-25
Filing date: 2014-12-25
Publication date: 2019-08-02
Anticipated expiration: 2034-12-25
Also published as: CN105884723A

Abstract

本发明涉及一类新型丹参酮衍生物、其制备方法及其应用。该类化合物为丹参酮I结构式中呋喃环2位取代基的修饰物，以丹参酮I为原料，通过化学合成的方法制备新型丹参酮衍生物，其可以用于治疗癌症、肿瘤多药耐药逆转剂及辅助用药、CYP1家族特异性抑制剂、心脑血管疾病、羧酸酯酶抑制剂、与雄性激素相关疾病、抗菌药。

Description

丹参酮衍生物、其制备方法及其应用

技术领域

本发明公开了一类新型丹参酮衍生物、其制备方法及其应用。

背景技术

丹参酮亦称总丹参酮。是从中药丹参中提取的具有抑菌作用的脂溶性菲醌化合物，从中分得丹参酮I、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮、异隐丹参酮等10余个丹参酮单体，其中隐丹参酮、二氢丹参酮Ⅱ，羟基丹参酮、丹参酸甲酯、丹参酮ⅡB 5个单体具有抗菌作用，尚有抗炎、降温作用。丹参酮ⅡA的磺化产物丹参酮ⅡA磺酸钠能溶于水，经临床试用证明治疗心绞痛效果显著，副作用小，为一治疗冠心病的新药。总丹参酮有抗菌、消炎、活血化瘀、促进伤口愈合等多方面作用，长期服用未见有明显副作用。

丹参酮I为脂溶性成分，不溶于水，所以其在体内的生物利用度很低，至今未有以丹参酮I直接作为药物应用于临床。所以将丹参酮I进行结构修饰，增加其水溶性，才可以从分发挥其药效。

发明内容

本发明提供了新型的丹参酮I衍生物、其制备方法及其应用。丹参酮衍生物结构式为：

A类化合物的合成按照如下方法：

通式1

方法a为在反应瓶中加入丹参酮I(TanI)，二甲基甲酰胺，三氯氧磷，在30-100摄氏度下反应1-10小时，反应液倒入冰水中，过滤，粗品经硅胶柱层析得产物丹参酮I甲醛(化合物2)。其中原料丹参酮I、二甲基甲酰胺、三氯氧磷得摩尔比为1:1-5:2-5，反应温度为30-100摄氏度，反应时间1-30小时。

方法b为在反应瓶中加入化合物2，丙酮、四丁基溴化铵和质量浓度为5％的高锰酸钾水溶液，在20-80摄氏度，反应1-30小时，过滤，母液用盐酸调节pH为5，收集沉淀，硅胶柱层析得丹参酮I甲酸(化合物3)。其中化合物2、四丁基溴化铵、5％高锰酸钾水溶液、丙酮得摩尔比为1:0.05-0.2:1-5:5-30，反应温度为30-100摄氏度，反应时间1-30小时。

方法c为在反应瓶中加入化合物3，无水乙醇、乙醇钠立即有固体析出，过滤得产物丹参酮甲酸钠。其中化合物3、无水乙醇、乙醇钠的摩尔比为1：2-5:2-5.反应温度为20-80摄氏度，反应时间0.1-2小时。

通式2：

方法d为在反应瓶中加入化合物3、二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶、无水醇类化合物、溶剂，在室温下反应1-20小时，过滤除去固体，滤液蒸干，硅胶柱层析，得丹参酮I甲酸酯类化合物。化合物3、二环己基碳二亚胺、4-二甲氨基吡啶、无水醇类化合物、溶剂的摩尔比为1:1-3:0.05-0.2:1-3:5-50，反应温度0-80摄氏度。反应溶剂可以为二氯甲烷，四氢呋喃，氯仿，甲苯，乙醚中的1种或1种以上的混合溶剂。R3为权利要求1所述基团。

通式3

方法e为在反应瓶中加入丹参酮I、乙酸酐、冰乙酸和发烟硝酸，反应1-10小时后倒入冰水中，析出大量黄色固体，过滤，水洗，干燥得产物丹参酮I硝基化合物。其中丹参酮I、乙酸酐、冰乙酸和发烟硝酸的摩尔比1:1-20:2-20:2-5。反应温度为-20摄氏度至30摄氏度。

通式4：

方法f为在反应瓶中加入丹参酮I、乙酸、卤代试剂，20-100摄氏度下反应1-10小时，加水，二氯甲烷萃取，蒸干得产物。卤代试剂为NBS，NCS，NIS或卤素单质。

B类化合物的合成按照如下方法：

反应瓶中加入丹参酮I、R2取代的酰氯、三氯化铝、二氯甲烷，在20-100摄氏度下，反应1-10小时，经硅胶柱层析得B类化合物。其中丹参酮I、R2取代的酰氯、三氯化铝、二氯甲烷的摩尔比为1:1-5:0.1-2:1-50。

C类化合物的合成按照如下方法：

反应瓶中加入丹参酮I、酸酐、无水氯化铝、溶剂，在0-100摄氏度下反应1-10小时，经硅胶柱层析得产物C-1。其中丹参酮I、酸酐、无水氯化铝、溶剂的摩尔比为1:1-5:0.1-2:1-50。所述酸酐为丁二酸酐或戊二酸酐。所述溶剂为二氯甲烷或氯仿。

上述产物C-1按照权利要求2所述(4)的方法得到C类化合物。

D类化合物的合成按照如下方法：

反应瓶中加入丹参酮I、α或β氯代羧酸酯、四氯化锆、溶剂，在0-100摄氏度下反应1-10小时，经硅胶柱层析得产物。其中丹参酮I、α或β氯代羧酸酯、四氯化锆、溶剂的摩尔比为1:1-5:0.1-2:1-50。所述溶剂为二氯甲烷或氯仿。

所述的衍生物，其用于治疗癌症、糖尿病、艾滋病、乙型肝炎、丙型肝炎。

具体实施方式

以下结合实施例进一步说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。在不违背本发明的精神和原则的前提下，对发明个别技术步骤进行的任何改动和改变都属于本发明要求保护的范围。

例1.化合物1的合成

将5g原料TanI溶于50ml干燥的DMF溶液中，室温加入三氯氧磷10ml，反应在氮气保护下，75度搅拌反应4小时，降温至室温，反应液倒入到200ml冰水中，100ml二氯甲烷萃取2次，合并二氯甲烷层，200ml水洗2次，200ml盐水洗1，干燥，减压浓缩。粗品用硅胶柱层析，得化合23.8g。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ9.91(s,1H),9.03(d,J＝8.9Hz,1H),8.40(d,J＝8.7Hz,1H),7.94(d,J＝8.8Hz,1H),7.70–7.57(m,1H),7.46(d,J＝6.9Hz,1H),2.74(d,6H)。

例2.化合物2的合成

将2g化合物1溶于15ml丙酮，冰浴滴加5％得高锰酸钾溶液15ml，20摄氏度搅拌16小时，过滤，滤液用稀盐酸调节pH为6-7，过滤得到粗品，硅胶柱层析得化合物21.2g。¹H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.77(d,J＝8.7Hz,1H),8.38(d,J＝8.5Hz,1H),7.66(d,J＝8.6Hz,1H),7.30–7.15(m,1H),7.06(d,J＝6.9Hz,1H),2.70(s,3H)，2.76(s,3H)。LC-Ms：ESI：321.2(M+H)。

例3：化合物3的合成

化合物2100mg溶于无水乙醇，加入等量的乙醇钠，析出固体，过滤得目标产物，收率95％。LC-Ms：ESI：342.2

例4

化合物2100mg(0.31mmol)，二环己基碳二亚胺(DCC，80mg，0.38mmol)，4-二甲氨基吡啶(10mg)，无水乙醇0.2ml，二氯甲烷10ml，室温搅拌反应3小时，滤去固体，经硅胶薄层色谱分离，得产物，收率85％。¹H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.88(d,J＝8.7Hz,1H),8.46(d,J＝8.5Hz,1H),7.82(d,J＝8.6Hz,1H),7.50–7.37(m,1H),7.12(d,J＝6.9Hz,1H),4.18(Q,J＝7.1Hz 2H)，2.95(t,J＝6.3Hz，3H)，2.78(s,3H)，2.76(s,3H)。LC-Ms：ESI：349.2(M+H)。

例5：

化合物2100mg(0.31mmol)，二环己基碳二亚胺(DCC，80mg，0.38mmol)，4-二甲氨基吡啶(10mg)，苄醇0.2ml，二氯甲烷10ml，室温搅拌反应3小时，滤去固体，硅胶柱层析，得产物，收率82％。¹H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.68(d,J＝8.67Hz,1H),8.50(d,J＝8.2Hz,1H),7.84(d,J＝8.5Hz,1H),7.50–7.37(m,4H),7.32-20(m，3H),5.60(s,2H)，2.72(s,3H)，2.74(s,3H)。LC-Ms：ESI：411.3(M+H)。

例6：

在反应瓶中加入丹参酮I 200mg、乙酸酐0.2ml、冰乙酸1ml和发烟硝酸0.1ml，5摄氏度反应3小时后倒入冰水中，析出大量黄色固体，过滤，水洗，干燥得产物丹参酮I硝基化合物6120mg。¹H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.70(d,J＝8.2Hz,1H),8.44(d,J＝8.6Hz,1H),7.69(d,J＝8.2Hz,1H),7.40–7.23(m,1H),7.16(d,J＝6.5Hz,1H),2.82(s,3H)，2.76(s,3H)。例7：

反应瓶中加入丹参酮I 20mg、乙酸2ml、冰浴滴加溴水(0.2ml)，30摄氏度下反应2小时，加水10ml，二氯甲烷萃取，合并萃取液，水洗3遍，干燥，蒸干得产物185mg。¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ8.90(d,J＝8.5Hz,1H),8.48(d,J＝8.2Hz,1H),7.90(d,J＝8.0Hz,1H),7.73–7.60(m,1H),7.33(d,J＝6.9Hz,1H),2.74(s,3H).2.70(s,3H)。

例8：

将丹参酮I 200mg溶于氯仿2ml，加入乙酰氯0.2ml，加入无水氯化铝50mg，60摄氏度反应4小时，降至室温，减压浓缩。粗品经硅胶柱层析纯化得乙酰化产物150mg。¹H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.60(d,J＝8.2Hz,1H),8.40(d,J＝8.0Hz,1H),7.73(d,J＝6.8Hz,1H),7.33–7.21(m,1H),7.13(d,J＝6.2Hz,1H),2.78(s,3H)，2.73(s,3H)，2.66(s,3H)。LC-Ms：ESI：319.2(M+H)。

例9：

将丹参酮I 200mg溶于氯仿2ml，加入丁二酸酐100mg，加入无水氯化铝50mg，60摄氏度反应2小时，降至室温，减压浓缩。粗品经制备HPLC纯化得产物160mg。¹H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.60(d,J＝8.2Hz,1H),8.43(d,J＝7.5Hz,1H),7.82(d,J＝6.4Hz,1H),7.70–7.58(m,1H),7.32(d,J＝7.2Hz,1H),3.46(t,2H)，2.74-2.58(m,8H)。LC-Ms：ESI：377.2(M+H)。例10：

将例9产物50mg溶于无水乙醇，加入等量的乙醇钠，析出固体，过滤得目标产物，收率96％。LC-Ms：ESI：398.3

例11：

将例9产物50mg，二环己基碳二亚胺(DCC，50mg)，4-二甲氨基吡啶(10mg)，无水甲醇0.2ml，二氯甲烷5ml，室温搅拌反应3小时，滤去固体，经硅胶薄层色谱分离，得产物，收率85％。¹H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.96(d,J＝8.8Hz,1H),8.60(d,J＝8.6Hz,1H),7.99(d,J＝6.4Hz,1H),7.77–7.62(m,1H),7.44(d,J＝6.9Hz,1H),3.55(s,3H)，3.46(t,2H)，2.82-2.68(m,5H),2.63(s，3H)。LC-Ms：ESI：391.2(M+H)。

例12：

将丹参酮I 200mg溶于氯仿2ml，加入戊二酸酐100mg，加入无水氯化铝50mg，60摄氏度反应2小时，降至室温，减压浓缩。粗品经制备HPLC纯化得产物125mg。¹H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.80(d,J＝8.0Hz,1H),8.53(d,J＝7.8Hz,1H),7.94(d,J＝6.9Hz,1H),7.72–7.55(m,1H),7.33(d,J＝6.9Hz,1H),3.33(t,2H)，2.64-2.46(m,8H)，2.23(m，2H)。LC-Ms：ESI：391.2(M+H)。

例13：

丹参酮I 200mg溶于氯仿2ml，加入氯乙酸乙酯100mg，加入四氯化锆200mg，40摄氏度反应2小时，降至室温，减压浓缩。粗品经制备HPLC纯化得产物105mg。¹H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.63(d,J＝7.8Hz,1H),8.50(d,J＝7.2Hz,1H),7.82(d,J＝6.2Hz,1H),7.70–7.58(m,1H),7.30(d,J＝6.9Hz,1H),3.38(s,2H)，2.64(m,3H)，2.28(s，3H)。LC-Ms：ESI：335.2(M+H)。

例14：

将例13产物30mg，二环己基碳二亚胺(DCC，30mg)，4-二甲氨基吡啶(10mg)，无水乙醇0.1ml，二氯甲烷5ml，室温搅拌反应3小时，滤去固体，经硅胶薄层色谱分离，得产物，收率85％。¹H NMR(300MHz,CDCl3)δ9.03(d,J＝8.8Hz,1H),8.92(d,J＝8.2Hz,1H),7.89(d,J＝6.2Hz,1H),7.79–7.62(m,1H),7.42(d,J＝6.9Hz,1H),4.32(q，J＝6.2Hz，2H)，3.62(s,2H)，3.12(t，J＝4.6Hz,3H)，2.68(m,3H)，2.36(s，3H)。LC-Ms：ESI：363.3(M+H)。

例15：

丹参酮I 200mg溶于氯仿2ml，加入氯丙酸乙酯100mg，加入四氯化锆200mg，40摄氏度反应2小时，降至室温，减压浓缩。粗品经制备HPLC纯化得产物102mg。¹H NMR(300MHz,CD3OD)δ8.64(d,J＝7.6Hz,1H),8.32(d,J＝7.2Hz,1H),7.70(d,J＝6.2Hz,1H),7.50–7.38(m,1H),7.21(d,J＝6.8Hz,1H),2.82-2.53(m,7H)，2.18(m,3H)。LC-Ms：ESI：349.2(M+H)。

例16：

将例15产物20mg溶于无水乙醇，加入等量的乙醇钠，析出固体，过滤得目标产物，收率86％。LC-Ms：ESI：370.2。

实施例17：抗肿瘤活性试验

丹参酮(TanI)和上述衍生物采用肿瘤细胞株进行活性试验，结果显示衍生物的活性强于丹参酮I(见表1)。癌细胞株，C1：宫颈癌Hela细胞，C2：白血病HL-60细胞，C3：胃癌BGC-823细胞，C4：肝癌Bel-7402，C5：膀胱癌NTUB1细胞，C6：胰腺癌Panc-1细胞，C7：前列腺癌PC-3，C8：乳腺癌MCF-7细胞，C9：肺癌A549细胞，C10：结肠癌HCT-15细胞。

表1抗肿瘤活性试验结果(IC50,μmol/L)

Claims

1.一类丹参酮衍生物，具有下述任一化学结构式：

2.如权利要求1所述的丹参酮衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用，所述的肿瘤为宫颈癌、白血病、胃癌、肝癌、膀胱癌、胰腺癌、前列腺癌、乳腺癌、肺癌或结肠癌。