CN105859734A

CN105859734A - 基于罗丹明b和氨乙基硫醚的化合物、其制备方法及应用

Info

Publication number: CN105859734A
Application number: CN201610335656.8A
Authority: CN
Inventors: 徐冬梅; 洪苗苗
Original assignee: Suzhou University
Current assignee: Suzhou University
Priority date: 2016-05-19
Filing date: 2016-05-19
Publication date: 2016-08-17
Anticipated expiration: 2036-05-19
Also published as: CN105859734B

Abstract

本发明公开了一种基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物、其制备方法及应用，其是一个具有优良综合性能和可逆传感机理的新型罗丹明类Hg²⁺比色和荧光探针。其优良综合性能包括：原料易得，合成方法简单，分子结构简单；对Hg²⁺选择性好、灵敏度高、抗干扰能力强、细胞毒性小；检测可以在接近中性的几乎纯水缓冲溶液中进行；可以有效检测池塘和自来水样中的Hg²⁺；可以检测HgCl₂中的Hg²⁺；分子中含有一个脂肪族伯氨基，可以进一步进行自身改性或者修饰其他材料。

Description

基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物、其制备方法及应用

技术领域

本发明属于重金属离子探针技术领域，具体涉及一种基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物及其制备方法，以及该化合物作为汞离子探针在检测汞离子中的应用。

背景技术

汞是毒性排行第二的常见有毒重金属，无论是单质汞、无机汞，还是有机汞，都会破坏肾、中枢神经系统以及大脑等器官，导致认知和运动功能的紊乱，甚至癌症。汞及其化合物若存在天然水体中，极易污染水环境，对大范围人群造成伤害。Hg²⁺是汞污染物中最常见的形式，具有较高的水溶性，因此，其检测至关重要。光谱探针由于操作简单、检测灵敏快速、选择性高、成本低等优点而备受关注。罗丹明类光谱探针由于摩尔吸收系数大、荧光量子产率高、吸收和发射波长长等优点而得到了广泛的发展。

但是目前已报道的罗丹明类光谱探针有些原料难得、结构复杂、合成困难，有些只能在纯有机溶剂（比如无水乙醇）下检测Hg²⁺，或抗干扰能力和实用性欠佳，综合性能好的罗丹明类Hg²⁺光谱探针非常少（参见：Xu L, Wang S, Lv YN, Son YA, Cao DR. A highly selective and sensitive photo switchable fluorescent probe for Hg²⁺ based on bisthienylethene-rhodamine 6G dyad and for live cells imaging. Spectrochim. Acta Part A 2014; 128: 567-574；Bhalla V, Tejpal R, Kumar M. Rhodamine appended terphenyl: A reversible “off-on” fluorescent chemosensor for mercury ions. Sens. Actuators B 2010; 151: 180-185；Zhang X, Zhu YY. A new fluorescent chemodosimeter for Hg²⁺-selective detection in aqueous solution based on Hg²⁺-promoted hydrolysis of rhodamine-glyoxylic acid conjugate. Sens. Actuators B 2014; 202: 609-614）。另外，罗丹明类Hg²⁺光谱探针的信号的转换一般通过两种方法实现，一种是加入汞离子，与探针配位并诱导螺内酰胺开环，这样常常会对其他金属阳离子有响应或者延迟反应；另一种是汞离子激活硫代羰基化学剂量反应，这个最大问题就是汞离子的反应是不可逆的，因此就不能作后续分析，探针无法重复使用，汞离子也无法回收，导致无法实用。现有含有S原子的罗丹明类光谱探针大多具有不可逆的传感机理（Jia-Sheng Wu, In-Chul Hwang, Kwang S. Kim and Jong Seung Kim. Rhodamine-based Hg²⁺-selective chemodosimeter in aqueous solution: fluorescent OFF-ON. Organic Letters. 2007, 5(9): 907-910；Satheshkumar Angupillai, Ji-Yong Hwang, Jae-Young Lee, Boddu Ananda Rao, Young-A. Son. Efficient rhodamine-thiosemicarbazide-based colorimetric/fluorescent ‘turn-on’ chemodosimeters for the detection of Hg²⁺ in aqueous samples. Sens. Actuators B 2015; 214: 101-110），而可逆型探针可以通过加入强络合剂等条件使探针再生，实现重金属离子的回收和探针的循环利用，从而提高探针的实用价值。因此，很有必要通过研发新的反应合成一个具有优良综合性能和可逆识别机理的新型罗丹明类Hg²⁺比色和荧光探针。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物及其制备方法；得到的化合物不但可以从比色和荧光双通道检测Hg²⁺，而且具有优良的综合性能，特别是本发明的化合物可以在几乎纯水体系中检测汞离子，真正意义上实现了对自然水体的检测。

为达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是：一种基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物的制备方法为，氮气环境下，有机溶剂中，以罗丹明B和氨乙基硫醚为原料，以乙胺化合物为添加剂，搅拌反应得到基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物；简称为RMTE。

上述技术方案中，有机溶剂为乙腈、乙醇、二氯甲烷中的一种或者几种，本发明公开的溶剂体系有利于原料的分散，增加罗丹明B和氨乙基硫醚的反应性，提高产物收率。

上述技术方案中，添加剂为N,N-二异丙基乙胺；与反应体系具有良好的相容性，有利于提高罗丹明B和氨乙基硫醚的反应性，提高产物收率。

上述技术方案中，反应温度为20～60℃，反应时间为18～36 h；罗丹明B和氨乙基硫醚的摩尔比为1∶(1～7)。优选的，所述添加剂用量为罗丹明B摩尔量的7倍；反应温度为30～50℃，反应时间为20～30 h；罗丹明B和氨乙基硫醚的摩尔比为1∶(3～5)。本发明首次利用氨乙基硫醚改性罗丹明B，在公开的条件下，仅需要一步反应，即可较高收率的得到产物RMTE，取得了意想不到的技术效果。

优选的，在反应结束后，旋转蒸发除去溶剂，进行柱层析分离，真空干燥后得到基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物。柱层析分离时淋洗液为甲醇/三氯甲烷/石油醚混合液，优选的体积比为甲醇∶三氯甲烷∶石油醚为1∶12∶2。得到的产物RMTE为黄色固体粉末，产率为35.1%～54.4%，熔点为167.4℃。

具体合成方法比如，以乙腈，或乙醇，或二氯甲烷为溶剂，N,N-二异丙基乙胺为添加剂，摩尔比为1∶(1～7)的罗丹明B和氨乙基硫醚，在N₂保护下，在温度为20～60℃条件下搅拌反应18～36h，冷却至室温，旋转蒸发除去溶剂，进行柱层析分离，淋洗液为甲醇/三氯甲烷/石油醚，1/12/2 (v/v/v)，真空干燥，得到黄色固体粉末目标产物RMTE，熔点为167.4℃，提纯前收率最高到约80%，提纯后产率最高到约55%，达到本领域罗丹明B类化合物的较高收率。

本发明还公开了根据上述制备方法制备的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物，其化学结构式如下：

。

反应方程式可表示为：

通过紫外-可见吸收光谱和荧光光谱分析证实，本发明的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物对于Hg²⁺具有非常高的灵敏度以及优异的选择性，不受共存离子的影响。因此，本发明还公开了上述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物在检测Hg²⁺中的应用。

本发明公开的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物不但可以从比色和荧光双通道检测Hg²⁺，而且具有优良的综合性能；因此本发明还公开了上述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物作为Hg²⁺比色探针的应用；以及上述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物作为Hg²⁺荧光探针的应用。

本发明的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物可以有效检测来自于HgCl₂中的Hg²⁺；解决了现有Hg²⁺探针对HgCl₂中的Hg²⁺检测效果差甚至不能检测的缺陷，取得了意想不到的技术效果，有效检测来自于HgCl₂中的Hg²⁺更加具有工业实用性。并且本发明的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物检测范围广，可以检出Hg²⁺的浓度低至0.1μM，利于工业化应用。

根据本发明的实施例，发现多种金属离子中只有Hg²⁺可使RMTE在561 nm处的吸光度和在578 nm处的荧光大大增强，其荧光增强达到170倍，众多其他离子对RMTE的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱基本没影响，表明在CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1∶1～99, v/v, pH=7.05) 中RMTE对Hg²⁺有很好的选择性和灵敏度；同时表明本发明的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物适用于接近纯水的溶剂体系，克服了现有探针需要在纯有机溶剂中才能检测的缺陷。

特别的，本发明的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物可以直接用于水环境中汞离子的检测，可有效的检测水中Hg²⁺；无论是自然水、生活水等，只要含有Hg²⁺，都可以有效检出，克服了现有技术不能用于环境水检测汞离子的缺陷，既节约又环保，从而可以低成本的检测出与群众生活息息相关的环境水中的汞离子，在实地环境水样中的Hg²⁺检测方面有很好的应用前景，很强的实用性。因此本发明进一步公开了基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物在检测水环境中Hg²⁺的应用。

由于上述技术方案的运用，本发明与现有技术相比具有如下优点：

1. 本发明采用一步法，从罗丹明B和氨乙基硫醚出发，简单地合成了一种结构简单的新型罗丹明衍生物RMTE，反应条件温和；克服了现有罗丹明B化合物制备需要多步反应（至少两步）、需要毒性很大的原料（氯化亚砜、三氯氧磷等）等一系列缺陷；而且得到的产物提纯简单、收率较高（提纯前收率最高到约80%，提纯后产率最高到约55%），取得了意想不到的技术效果。

2. 本发明用简单的方法合成了一种结构简单的新型罗丹明衍生物RMTE，其分子结构合理，含有一个脂肪族伯氨基，不但可以进一步进行自身改性或者修饰其他材料；而且能够很好的与罗丹明B分子配合，在遭遇汞离子时，能够高效、准确的检测汞离子，最低检出限低至0.1μM 。

3. 本发明公开的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物可以从比色和荧光双通道检测Hg²⁺，特别是可以检测HgCl₂中的Hg²⁺，比检测来自Hg(ClO₄)₂的Hg²⁺具有更好的实用性；成功解决了现有罗丹明B类汞离子探针无法检出或者无法准确检出来自HgCl₂中的Hg²⁺的问题，为推进罗丹明B类汞离子探针实用化作出重大贡献。

4. 本发明公开的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物克服了现有技术需要在大量有机溶剂中甚至在无水乙醇中才能检测汞离子的缺陷，可用于近100%水相中Hg²⁺的检测，根据本发明实施例，在CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/99, v/v, pH=7.05，本领域认为其为纯水体系) 中RMTE对Hg²⁺有很好的选择性和灵敏度；取得了意想不到的技术效果。

5. 本发明公开的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物对Hg²⁺检测灵敏度高、选择性优异、检测范围广；特别是具有可逆性，成功解决了现有探针不可逆的缺陷，为罗丹明B类汞离子探针实现工业实用化作出重大贡献。

附图说明

图1为在RMTE的CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/1, v/v, pH=7.05) 中加入Hg²⁺，测定加入离子前后的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱图；

图2为在RMTE的CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (2/8, v/v, pH=7.05) 中加入Hg²⁺，测定加入离子前后的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱图；

图3为在RMTE的CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/99, v/v, pH=7.05) 中加入金属离子，测定加入离子前后的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱图；

图4为含有不同浓度Hg²⁺的RMTE溶液的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱图；

图5为共存离子对含有Hg²⁺的RMTE溶液的吸光度和荧光强度影响图；

图6为RMTE检测Hg²⁺的可逆性的荧光光谱图；

图7为RMTE对sf-9细胞的毒性图。

具体实施方式

实施例一：Hg²⁺探针RMTE的制备

根据表1的原料比例（罗丹明B和氨乙基硫醚的摩尔比）以及反应条件，以二氯甲烷为溶剂，N,N-二异丙基乙胺为添加剂，在N₂保护下，搅拌反应，冷却至室温，旋转蒸发除去溶剂，进行柱层析分离，淋洗液为甲醇/三氯甲烷/石油醚，1/12/2 (v/v/v)，干燥，得到黄色固体粉末目标产物RMTE。

核磁，¹H NMR (400 MHz, CDCl₃), δ /ppm: 1.16 (t, 12H, J=6.8 Hz), 2.23 (t, 2H, J=8 Hz), 2.50 (t, 2H, J=6.4 Hz), 2.77 (t, 2H, J=6.4 Hz), 3.27–2.37 (m, 10H), 3.66 (s, 2H), 6.27 (d, 2H, J=6.4 Hz), 6.37 (d, 2H, J=2.4 Hz), 6.44 (s, 2H), 7.08–7.10 (m, 1H), 7.43–7.46 (m, 2H), 7.89–7.91 (m, 1H)，¹³C NMR (300 MHz, CDCl₃), δ /ppm: 12.35, 29.37, 34.71, 40.24, 40.83, 44.31, 64.69, 97.34, 105.62, 107.96, 122.63, 123.74, 128.02, 128.89, 131.11, 132.33, 148.82, 153.13, 167.90；质谱，LC-MS: [M+H]⁺= 545.2944, [M+Na]⁺= 567.2755；红外光谱，FTIR (cm^-1):v(NH) 3431;v(CH₃, CH₂) 2972, 2925, 2854;v(C=O) 1695;v(ArH) 1548, 1519, 1463;v(C-O-C) 1118；元素分析，C₃₂H₄₀N₄O₂S₃(%): 计算值C, 70.55; N, 10.28; H, 7.40，实验值 C, 70.34; N, 10.04; H, 7.42。

表1 原料比例以及反应条件

实施例二：RMTE对Hg²⁺的响应

在RMTE的CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/1, v/v, pH=7.05) 中加入Hg²⁺，测定加入离子前后的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱，结果如图1，溶剂：CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/1, v/v, pH=7.05)，浓度：20 μM (RMTE)，200 μM (Hg²⁺)。激发波长：520 nm，狭缝宽度：5 nm。Hg²⁺的加入使RMTE的紫外-可见吸收光谱在560 nm处出现新的吸收峰（图1左图），荧光显著增强33.9倍（图1右图）。

在RMTE的CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (2/8, v/v, pH=7.05) 中加入Hg²⁺，测定加入离子前后的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱，结果如图2，溶剂：CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (2/8, v/v, pH=7.05)，浓度：20 μM (RMTE)，200 μM (Hg²⁺)。激发波长：520 nm，狭缝宽度：5 nm。Hg²⁺的加入使RMTE的紫外-可见吸收光谱在560 nm处出现新的吸收峰（图2左图），荧光显著增强143.3倍（图2右图）。

在RMTE的CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/50, v/v, pH=7.05) 中加入Hg²⁺，测定加入离子前后的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱，溶剂：CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/50, v/v, pH=7.05)，浓度：20 μM (RMTE)，200 μM (Hg²⁺)，激发波长：520 nm，狭缝宽度：5 nm。Hg²⁺的加入使RMTE的紫外-可见吸收光谱在560 nm处出现新的吸收峰，荧光显著增强156.4倍。

在RMTE的CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/99, v/v, pH=7.05) 中，加入Na⁺、K⁺、Ag⁺、Ca²⁺、Mg²⁺、Fe³⁺、Cu²⁺、Zn²⁺、Cr³⁺、Pb²⁺、Ni²⁺、Fe²⁺、Mn²⁺、Co²⁺、Cd²⁺ 和Hg²⁺，测定加入离子前后的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱，结果如图3，紫外-可见吸收光谱 (a) 和荧光光谱 (b)，溶剂：CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/99, v/v, pH=7.05)，浓度：20 μM (RMTE)，200 μM (金属离子)，激发波长：520 nm，狭缝宽度：5 nm。发现只有Hg²⁺可使RMTE在561 nm处的吸光度（图3a）和在578 nm处的荧光（图3b）大大增强，其荧光增强达到170倍，众多其他离子对RMTE的紫外-可见吸收光谱和荧光光谱基本没影响。表明在CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/99, v/v, pH=7.05) 中RMTE对Hg²⁺有很好的选择性和灵敏度。

实施例三：RMTE与Hg²⁺浓度的关系

图4为含有不同浓度Hg²⁺的RMTE溶液的紫外-可见吸收光谱 (左) 和荧光光谱 (右)，溶剂：CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/99, v/v, pH=7.05)，浓度：20 μM（RMTE），Hg²⁺浓度从下至上为 0、10、20、30、40、60、80、100、120、140、160、180和200 μM，插图分别为在561 nm处RMTE吸光度 (A) 与Hg²⁺浓度的关系和在578 nm处RMTE荧光强度 (F) 与Hg²⁺浓度的关系，激发波长：520 nm，狭缝宽度：5 nm。从图4左图可以看到，随着Hg²⁺浓度增加，RMTE在561 nm处的吸光度先增加，后趋于稳定。在Hg²⁺浓度很广的范围内，吸光度A与Hg²⁺浓度呈有良好的线性关系，线性方程为A=0.00096×[Hg²⁺]，相关系数R=0.994。从图4右图可以看到，不加Hg²⁺时，RMTE几乎无荧光，加入Hg²⁺后，RMTE荧光大幅增强，并且在Hg²⁺浓度0~120 μM范围内，在578 nm处的荧光强度F与Hg²⁺浓度具有良好的线性关系，线性方程为F=24.7536×[Hg²⁺]+15.57，相关系数R=0.990。根据公式δ=3S/K计算得到利用紫外-可见吸收光谱和荧光光谱检测Hg²⁺的检测限δ分别为2.08 μM和0.144 μM，其中S为不含Hg²⁺的空白溶液5次测定的吸光度或荧光强度的标准偏差，K为溶液吸光度或荧光强度与Hg²⁺浓度线性关系中的直线斜率。

实施例四：共存离子对RMTE检测Hg²⁺的影响

为了考察RMTE检测Hg²⁺的实用性，在含有Hg²⁺的RMTE溶液中，分别加入200 μL Na⁺、Ca²⁺、Mg²⁺、Cd²⁺、Fe²⁺、Ni²⁺、Zn²⁺、Co²⁺和Ag⁺，或150 μL K⁺、Fe³⁺、Pb²⁺、Cr³⁺、Mn²⁺、Cu²⁺等常见金属离子中的一种，图5为共存离子对含有Hg²⁺的RMTE溶液的吸光度 (图5a) 和荧光强度 (图5b) 影响，溶剂：CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/99, v/v, pH=7.05)，浓度：20 μM (RMTE)，200 μM (Hg²⁺、Na⁺、Ca²⁺、Mg²⁺、Cd²⁺、Fe²⁺、Cr³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺、Co²⁺、Zn²⁺和Ag⁺)，150 μM (K⁺、Fe³⁺、Pb²⁺和Cu²⁺)，激发波长：520 nm，狭缝宽度：5 nm。加入这些金属离子几乎不影响含有Hg²⁺的RMTE溶液的最大吸光度和最大荧光强度。因此RMTE在检测Hg²⁺时具有很强的抗干扰能力。

实施例五：用RMTE分析环境水样中的Hg²⁺

在与前面所用的相同的检测条件下，用RMTE对苏州大学独墅湖校区的自来水和池塘水进行加标分析，具体的检测方法：分别取1 mL 苏州大学独墅湖校区的池塘水（过滤后用）和自来水，加入100 μL的RMTE储备液，再分别加入35 μM和80 μM的Hg²⁺，用0.02 mol/L的HEPES缓冲溶液定容，体系为CH₃CN/HEPES缓冲溶液（pH=7.05）（1/99, v/v）。测定溶液的荧光光谱，根据荧光强度与Hg²⁺浓度之间的线性关系得到所测Hg²⁺浓度。结果如表2所示。被检测到的Hg²⁺浓度与所加入的Hg²⁺浓度相近，Hg²⁺的回收率在96%到102%之间，三次平行实验的相对标准偏差都小于2.26 %。因此，RMTE可以用于检测环境水样中的Hg²⁺。

表 2 检测水样中的Hg²⁺

溶剂：CH₃CN/HEPES缓冲溶液 (1/99, v/v, pH=7.05)，浓度：20 μM (RMTE)。

实施例六：RMTE检测Hg²⁺的可逆性

用Na₂S研究RMTE检测Hg²⁺的可逆性。图6为RMTE检测Hg²⁺的可逆性的荧光光谱，溶剂：CH₃CN/HEPES缓冲溶液(1/99, v/v, pH=7.05)，浓度：20 μM (RMTE)，200 μM (金属离子)，激发波长：520 nm，狭缝宽度：5 nm；由图6可见，不加Hg²⁺时的RMTE的CH₃CN/HEPES缓冲溶液（1/99, v/v, pH=7.05）呈现无荧光状态，加入Hg²⁺后，溶液的荧光明显增强，但是，继续加入过量的Na₂S，溶液几乎恢复到无荧光状态，说明RMTE检测Hg²⁺是一个可逆过程。

实施例七：RMTE的细胞毒性

在27℃条件下，以含有10 %胎牛血清的TC-100作为培养液，将sf-9细胞置于24孔板中培养24 h，保证每一个孔中细胞的密度为1×10⁴。然后将12个孔平均分为4组，每组3个平行样品。第1组作为参照组；第2、3、4组分别加入20、30、40 µM RMTE，培养24 h后，用Muse智能触控细胞分析仪自动分析RMTE对sf-9细胞的毒性，结果如图7所示，把不加RMTE处理的细胞的存活率视作100%，经过含有20、30和40 μM RMTE的培养液培养24 h后细胞存活率分别为98.72 %、94.54 %和96.92 %。这说明RMTE没有对sf-9细胞的存活率产生很大影响。因此RMTE是一个毒性很低的物质，可以在活体细胞中应用。

综上所述，本申请公开的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物，是一个具有优良综合性能和可逆传感机理的新型罗丹明类Hg²⁺比色和荧光探针。其优良综合性能包括：原料易得，合成方法简单，分子结构简单；对Hg²⁺选择性好、灵敏度高、抗干扰能力强、细胞毒性小；检测可以在接近中性的几乎纯水缓冲溶液中进行；可以有效检测池塘和自来水样中的Hg²⁺；可以检测HgCl₂中的Hg²⁺；分子中含有一个脂肪族伯氨基，可以进一步进行自身改性或者修饰其他材料。

Claims

1.一种基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物的制备方法，包括以下步骤，氮气环境下，有机溶剂中，以罗丹明B和氨乙基硫醚为原料，以乙胺化合物为添加剂，搅拌反应得到基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物。

2.根据权利要求1所述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂为乙腈、乙醇、二氯甲烷中的一种或者几种；所述添加剂为N,N-二异丙基乙胺；反应温度为20～60℃，反应时间为18～36h；罗丹明B和氨乙基硫醚的摩尔比为1∶(1～7)。

3.根据权利要求2所述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物的制备方法，其特征在于：所述添加剂用量为罗丹明B摩尔量的7倍；反应温度为30～50℃，反应时间为20～30 h；罗丹明B和氨乙基硫醚的摩尔比为1∶(3～5)。

4.根据权利要求1所述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物的制备方法，其特征在于：在反应结束后，旋转蒸发除去溶剂，进行柱层析分离，真空干燥后得到基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物。

5.根据权利要求1～4所述任意一种基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物的制备方法制备的基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物；所述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物的化学结构式如下：

。

6.权利要求5所述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物作为Hg²⁺比色探针和/或作为Hg²⁺荧光探针的应用。

7.权利要求5所述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物在检测Hg²⁺中的应用。

8.根据权利要求7所述应用，其特征在于：检测Hg²⁺时的溶液体系为CH₃CN/HEPES缓冲溶液体系。

9.根据权利要求8所述应用，其特征在于：CH₃CN/HEPES缓冲溶液体系中，CH₃CN与HEPES缓冲溶液的体积比为1∶1～99。

10.权利要求5所述基于罗丹明B和氨乙基硫醚的化合物在检测水环境中Hg²⁺的应用。