CN105770192A - 一种治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂,该凝胶剂1000份由下述重量配比的组分混合制成:普洱茶提取物5~15份,基质5~20份,保湿剂50~150份,助溶剂100~300份,防腐剂0.5~3份,余量为蒸馏水。该凝胶剂制备方法如下:制备普洱茶提取物;将普洱茶提取物粉末与保湿剂、助溶剂、防腐剂共研,得混合物;取基质粉末均匀撒入到蒸馏水表面,静置过夜,使其充分溶胀,得到凝胶剂基质;将的混合物于搅拌下缓慢加入凝胶剂基质中并混合均匀,调节pH值,然后加蒸馏水充分搅拌即得治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂。本发明能够有效地预防和治疗特应性皮炎,并且在治疗的过程中不会有副作用。
Description
技术领域
本发明属于抗皮肤超敏反应外用药及其制备方法技术领域,具体涉及一种治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂及其制备方法。
背景技术
特应性皮炎是以慢性湿疹性皮肤肿块为特征的临床疾病。目前认为是由个体的多基因遗传与环境相互作用而产生的。近年研究发现多条染色体多个部位的基因与皮肤特应性有关。环境因素主要包括过敏原(如花粉、室尘螨、动物毛皮等)、微生物(如金黄色葡萄球菌等)、环境污染物、气候及精神压力等因素。其发病机理目前尚不明确,但研究表明特应性皮炎可能是一种Th1/Th2细胞亚群失衡条件下的以优势Th1细胞介导的皮肤过敏性炎症反应。在发病过程中,以IFN-Y、TNF-α、IL-1β为代表的I型细胞因子和以IL-4、IL-10为代表的II型细胞因子在特应性皮炎的发生、发展及恢复过程中起重要作用。
在特应性皮炎的治疗中使用最广泛的是类固醇外用药。这些类固醇外用药根据临床效果分为从弱到强的5级,根据患者的患病严重程度和年龄分别使用。然而,类固醇在用作外用药时,可能会伴有皮肤的萎缩、血管扩张、毛囊炎等副作用,因此在面部应尽可能避免使用类固醇外用药。面对已有药物存在的缺陷,有必要开发出副作用小,而且可以简便使用的药物。而开发此类药物最有效的手段之一便是从天然物的提取物中寻找能够作为特应性皮炎的预防剂或治疗剂的物质。
发明内容
本发明目的是提供一种治疗效果好、无毒副作用的治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂。
为了达到这个目的,本发明的治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂1000份由下述重量配比的组分混合制成:普洱茶提取物5~15份,基质5~20份,保湿剂50~150份,助溶剂100~300份,防腐剂0.5~3份,余量为蒸馏水。
优选的,上述治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂1000份由下述重量配比的组分组成:普洱茶提取物10份,基质10份,保湿剂100份,助溶剂200份,防腐剂1份,余量为蒸馏水。
所述基质选自卡波姆-934、羟甲基纤维素中的一种或两种。
所述保湿剂选自甘油、丙二醇中的一种或两种。
所述助溶剂为乙醇、吐温-80中的一种或两种。
所述防腐剂为苯甲醇、三氯叔丁醇、羟苯甲酯、羟苯乙酯中的一种。
上述治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂的制备方法如下:
①制备普洱茶提取物:将经后发酵的云南普洱茶干燥后剪碎将云南普洱茶按料液比为1g:10~15mL加入100℃水中溶解10~20min,过滤;然后将残渣按料液比为1g:8~12mL加入100℃水中溶解10~20min,过滤;再次将残渣按料液比为1g:6~10mL加入100℃水中溶解10~20min;将三次过滤所得滤液混合,蒸馏浓缩至云南普洱茶与水混合液初始总体积的1/4~1/5,然后于170~190℃条件下干馏,得到普洱茶提取物粉末;
②将步骤①所得到的普洱茶提取物粉末5~15份与保湿剂50~150份、助溶剂100~300份、防腐剂0.5~3份共研,得混合物;
③取基质粉末5~20份,均匀撒入到100-400份蒸馏水表面,静置过夜,使其充分溶胀,得到凝胶剂基质;
④将步骤②所得到的混合物于搅拌下缓慢加入步骤③所得凝胶剂基质中,并混合均匀,用三乙醇胺调节pH至6.5~7.0,然后加蒸馏水至1000份,充分搅拌即得治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂;
其中步骤②、③中的物料和蒸馏水用量均为重量份。
普洱茶,是指在云南省一定区域内以云南大叶种晒青毛茶为原料,经过发酵加工而成的散茶和紧压茶,其历史悠久,在中国茶文化中占有重要的地位。具有止渴生津、清热消暑、提神明目、消食利肠、通便利尿、定心安神、杀菌解毒、去腻醒酒等功效,是传统医学中的重要保健饮料,一直为人们所喜爱。近年来,随着人们对普洱茶研究的日渐深入,普洱茶在降血脂、抗癌、抗衰老、预防心血管疾病等方面的药理功效,特别是在人体综合免疫功能上的作用不断得到现代医学的验证。发明人通过大量实验证明,普洱茶能够显著促进Th2型抗炎细胞因子IL-10表达,并且抑制Th1型发炎细胞因子IFN-γ、TNF-α,而这些因子恰恰在特应性皮炎的发生、发展及恢复过程中起着重要的作用。本发明将普洱茶提取物制成凝胶剂,能够有效地预防和治疗特应性皮炎。由于普洱茶是健康饮品,因此在治疗的过程中不会有副作用。
附图说明
图1:各组小鼠耳厚度差的比较结果示意图;
图2:各组小鼠胸腺指数比较结果示意图;
图3:各组小鼠脾指数比较结果示意图;
图4:各组小鼠右耳局部组织病理学改变结果示意图;其中,A变应性接触性皮炎(ACD)组,B基质组,C普洱茶组,D曲咪新组;
图5:各组小鼠IFN-γ表达结果示意图;
图6:各组小鼠TNF-α表达结果示意图;
图7:各组小鼠IL-10的表达结果示意图。
具体实施方式
下面我们将结合具体实施例对本发明做进一步的说明。
实施例1
①普洱茶提取物由普洱茶研究院提供。具体获得过程为:经后发酵的100g,干燥后剪碎,按料液比为1g:10mL将云南普洱茶加入100℃水中溶解10min,过滤;将残渣按料液比为1g:8/mL加入100℃水中溶解10min,过滤;将残渣按料液比为1g:6mL加入100℃水中溶解10min。将三次过滤所得滤液混合,蒸馏浓缩至初始云南普洱茶与水混合液总体积的四分之一,然后于180℃干馏塔中干馏,得到普洱茶提取物粉末10.6g.
②将10g普洱茶提取物粉末,1g羟苯乙酯,100g丙二醇,200g乙醇共研,得混合物。
③取卡波姆-934粉末10g,逐渐撒于200g蒸馏水表面静置过夜,使其充分溶胀,得到卡波姆基质。
④将步骤②得到的混合物于搅拌下缓慢加入步骤③所得卡波姆基质中,并混合均匀,用三乙醇胺调节凝胶pH至7.0,加蒸馏水至1000g,充分搅拌即得1000g普洱茶凝胶剂。
实施例2
①普洱茶提取物由普洱茶研究院提供。具体获得过程为:经后发酵的云南普洱茶200g,干燥后剪碎,将云南普洱茶按物料比为1g:10mL加入100℃水中溶解10min,过滤;将残渣按物料比为1g:8mL加入100℃水中溶解10min,过滤;将残渣按物料比为1g:6mL在100℃水中溶解10min。将三次过滤所得滤液混合,蒸馏浓缩至云南普洱茶与水混合液初始总体积的四分之一,然后于180℃干馏塔中干馏,得到21.2g普洱茶提取物粉末。
②将5g普洱茶提取物粉末,0.5g羟苯乙酯,50g丙二醇,100g乙醇共研,得混合物。
③取卡波姆-934粉末5g,分次撒于200g蒸馏水表面静置过夜,使其充分溶胀,得到卡波姆基质。
④将步骤②得到的混合物于搅拌下缓慢加入步骤③所得卡波姆基质中,并混合均匀,用三乙醇胺调节凝胶pH至7.0,加蒸馏水至1000g,充分搅拌即得1000g普洱茶凝胶剂。
实施例3
①普洱茶提取物由普洱茶研究院提供。具体获得过程为:经后发酵的云南普洱茶200g,干燥后剪碎,将云南普洱茶按料液比为1g:15mL加入100℃水中溶解10min,过滤;将残渣按料液比为1g:12mL加入100℃水中溶解10min,过滤;将残渣按料液比为1g:10mL加入100℃水中溶解10min。将三次过滤所得滤液混合,蒸馏浓缩至云南普洱茶与水混合液初始总体积的五分之一,然后于180℃干馏塔中干馏,得到21.2g普洱茶提取物。
②将15g普洱茶提取物粉末,3g羟苯乙酯,150g丙二醇,300g乙醇共研,得混合物。
③取卡波姆-934粉末20g,分次撒于200g蒸馏水表面静置过夜,使其充分溶胀,得到卡波姆基质。
④将步骤②得到的混合物于搅拌下缓慢加入步骤③所得卡波姆基质中,并混合均匀,用三乙醇胺调节凝胶pH至7.0,加蒸馏水至1000g,充分搅拌即得1000g普洱茶凝胶剂。
上述实施案例经实验证实,以处方筛选而得普洱茶提取物配比(10-15份重量比)制备的普洱茶凝胶剂能明显抑制DNCB诱导的小鼠变应性接触性皮炎(ACD)反应。下调过高表达的IFN-γ和TNF-α两种促炎症细胞因子,上调一种抗炎症细胞因子(IL-10),从而减弱增强的炎症反应,有助于几种细胞因子的平衡。且经该普洱茶提取物配比(10-15)份重量比)制备的普洱茶凝胶剂外观优良。
本发明的使用方法:
涂敷于患者皮肤的发炎部位,根据病情轻重为10-50mg/cm2,每日早、中、晚各一次。实施例4:
本发明质量评价:本发明产品经外观检测,均匀、细腻,在常温下不干涸、不液化;本发明产品(以下均指实施例1产品)经检测pH=6.5~7.0;本发明经微生物限度检查,每1g凝胶剂中细菌数、霉菌和酵母菌数均未超过100CFU,每1g凝胶剂中均未检出金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌,符合中国药典2010版一部(附录XIII)的规定。本发明产品经过三个月稳定性观察,结果如表1:
表1:普洱茶凝胶剂的稳定性观察结果数据
以上结果表明本发明治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂是稳定的。
本发明产品主要药效学研究:从动物实验方面验证本发明产品的抗特应性皮炎的作用。
1材料
1.1动物
ICR小鼠,普通级,雌性,体重18~22g,购自白求恩医科大学实验动物中心。
1.2药物与试剂
造模试剂:2,4-二硝基氯苯(DNCB):天津市光复精细化工研究所;丙酮:北京化工厂。
治疗药物:本发明产品——普洱茶凝胶剂。
1.3主要仪器
手动剃须刀:宁海埃克日用品厂;
螺旋测微器:上海恒量量具有限公司。
2方法与结果
2.1建立DNCB诱导的小鼠变应性接触性皮炎(ACD)模型
取18-22gICR雌性小鼠20只,在实验前1天将ICR小鼠腹部进行去毛处理,范围一般为2.00×2.00cm。分别于第1天和第2天在腹部去毛部位均匀涂上0.8%(质量分数)的100μLDNCB的丙酮溶液致敏。第7天分别在每只小鼠的右耳腹、耳背面皮肤涂上0.2%(质量分数)的25μLDNCB的丙酮溶液激发皮炎。
2.2给药方案
将ICR小鼠随机分成4组,每组5只,分别为变应性接触性皮炎模型组(ACD组)、普洱茶凝胶剂基质组(基质组)、普洱茶凝胶剂组(普洱茶组)、曲咪新组。于实验第8天、9天和10天分别在以上几组小鼠的右耳腹和耳背面皮肤均匀涂布相应的外用药物约10-50mg,其中ACD组不做任何处理。每天早、中、晚各一次。
2.3普洱茶凝胶剂对小鼠ACD的抑制作用
2.3.1耳厚度变化
最后一次用药24小时后(即第11天),将小鼠放入微量乙醚的小烧杯中进行麻醉,用螺旋测微器测量左、右耳靠近中央的相同部位的厚度,计算耳厚度差,依次表示各组小鼠的耳肿胀度,结果如表2和图1所示。根据公式:
[(ACD组耳厚度差-其他组耳厚度差)/ACD组耳厚度差]×100%
求得各组外用药物对ACD反应的抑制率。
凝胶剂基质对小鼠ACD反应没有影响,说明凝胶剂基质安全、无毒副作用,并且对ACD反应没有治疗作用;与ACD组相比,曲咪新对小鼠右耳肿胀,抑制率为53.2%;普洱茶凝胶剂也能抑制DNCB所致的小鼠右耳肿胀,抑制率比曲咪新要低一些,约为33.7%,但是与ACD组间有显著的差异(P<0.01)。在ACD反应中,右耳出现的红斑、水肿、组织液渗出等症状在普洱茶组和曲咪新组都有明显改善。
表2:各组小鼠耳厚度差的比较数据
2.3.2普洱茶凝胶剂对ACD小鼠胸腺、脾脏的影响
治疗结束后,先称量小鼠自身的重量,然后用断髓法处死小鼠,解剖取出胸腺和脾脏,用电子天平称重。计算用每10g小鼠体重中所包含的胸腺和脾的毫克数来分别表示胸腺指数和脾指数,用如下公式表示:
胸腺指数=胸腺重量(mg)/小鼠的体重(10g)
脾指数=脾重量(mg)/小鼠的体重(10g)
数据统计如表3、表4和图2、图3所示。小鼠发生ACD反应时,由于免疫功能亢进,胸腺和脾脏重量都明显增加。连续给小鼠耳部均匀涂布普洱茶凝胶剂和曲咪新,能够使小鼠胸腺、脾脏重量减轻,与ACD组比较有明显的差异(P<0.01)。这一结果表明曲咪新软膏剂和普洱茶凝胶剂都能够抑制小鼠ACD反应中的免疫亢进作用,即减轻两种主要免疫器官的重量。
表3:各组小鼠胸腺指数比较数据
表4:各组小鼠脾指数比较数据
2.3.3耳部切片病理检查
治疗结束后,取右耳部组织块,用质量分数10%的中性甲醛固定,进行常规的伊红-美兰染色,并且在光学显微镜下观察其组织病理学变化,结果如图4所示。ACD组与基质组中可见大量炎症细胞的浸润,组织明显肥厚、水肿;与ACD组相比,普洱茶组病变组织的肥厚、水肿有一定程度的减轻,浸润的各种炎症细胞明显减少;曲咪新组的组织病变的减轻则更加明显,只有少量炎症细胞浸润。
2.3.4普洱茶凝胶剂对ACD小鼠Th1型/Th2型细胞因子的影响
治疗结束后,将小鼠进行眼球摘除取血,室温下放置两小时后,2000r/min离心,分离血清,用ELISA方法检测各组小鼠血清中几种细胞因子的表达量。数据经处理后如表5和图5、6、7,所示。当小鼠被激发产生ACD反应时,IFN-γ、TNF-α的表达量都有明显的增加,尤其是IFN-γ表达增加量更加明显,相反IL-10的表达量却有一定程度的下降。当在ACD小鼠右耳均匀涂布普洱茶凝胶剂时,在ACD反应中上升的IFN-γ、TNF-α表达量都有所下降;同样ACD反应中下降的IL-10的表达量有所增加。曲咪新组小鼠同样表现出了IFN-γ、TNF-α两种细胞因子表达量下降,但却不能使下降的IL-10得到恢复。普洱茶组和曲咪新组对ACD反应中IFN-γ、TNF-α表达量增加的抑制作用有统计学上的差异(P<0.01)。以上结果表明:普洱茶凝胶剂能够显著降低ACD反应时增高的两种Th1型细胞因子(IFN-γ、TNF-α),上调一种Th2型细胞因子(IL-10),具有平衡这几种细胞因子的作用。曲咪新仅能下调ACD反应中上升的IFN-γ、TNF-α(Th1型细胞因子),而对IL-10几乎没有作用,只是简单地抑制了ACD反应,没有根本改变机体免疫失调状态,不能从根本上治疗ACD。
表5:各组小鼠IFN-γ,TNF-α,IL-10的表达数据
本发明不限于上述实施例,各组分中普洱茶提取物能够显著促进Th2型抗炎细胞因子IL-10表达,并且抑制Th1型发炎细胞因子IFN-γ、TNF-α,有效治疗特应性皮炎。根据公知常识,本领域技术人员能够合理预见当基质选用羟甲基纤维素或者选用卡波姆-934与羟甲基纤维素的混合物,保湿剂选用甘油或甘油与乙醇的混合液,助溶剂选用吐温-80或乙醇与吐温-80的混合液,防腐剂选用苯甲醇、三氯叔丁醇、羟苯甲酯时仍能够达到实施例4所列的技术效果。因此凡是采用本发明权利要求1技术方案的各组分及其配比的,均在本发明意图保护范围之内。
Claims (7)
1.一种治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂,其特征在于该凝胶剂1000份由下述重量配比的组分混合制成:普洱茶提取物5~15份,基质5~20份,保湿剂50~150份,助溶剂100~300份,防腐剂0.5~3份,余量为蒸馏水。
2.根据权利要求1所述的治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂,其特征在于普洱茶提取物为10份,基质为10份,保湿剂为100份,助溶剂为200份,防腐剂为1份。
3.根据权利要求1所述的治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂,其特征在于所述基质选自卡波姆-934、羟甲基纤维素中的一种或两种。
4.根据权利要求1所述的治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂,其特征在于所述保湿剂选自甘油、丙二醇中的一种或两种。
5.根据权利要求1所述的治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂,其特征在于所述助溶剂为乙醇、吐温-80中的一种或两种。
6.根据权利要求1所述的治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂,其特征在于所述防腐剂为苯甲醇、三氯叔丁醇、羟苯甲酯、羟苯乙酯中的一种。
7.一种如权利要求1所述的治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂的制备方法如下:
①制备普洱茶提取物:将经后发酵的云南普洱茶干燥后剪碎将云南普洱茶按料液比为1g:10~15mL加入100℃水中溶解10~20min,过滤;然后将残渣按料液比为1g:8~12mL加入100℃水中溶解10~20min,过滤;再次将残渣按料液比为1g:6~10mL加入100℃水中溶解10~20min;将三次过滤所得滤液混合,蒸馏浓缩至云南普洱茶与水混合液初始总体积的1/4~1/5,然后于170~190℃条件下干馏,得到普洱茶提取物粉末;
②将步骤①所得到的普洱茶提取物粉末5~15份与保湿剂50~150份、助溶剂100~300份、防腐剂0.5~3份共研,得混合物;
③取基质粉末5~20份,均匀撒入到100-400份蒸馏水表面,静置过夜,使其充分溶胀,得到凝胶剂基质;
④将步骤②所得到的混合物于搅拌下缓慢加入步骤③所得凝胶剂基质中,并混合均匀,用三乙醇胺调节pH至6.5~7.0,然后加蒸馏水至1000份,充分搅拌即得治疗特应性皮炎的普洱茶凝胶剂;
其中步骤②、③中的物料和蒸馏水用量均为重量份。
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傅强: "普洱茶凝胶剂抑制变应性接触性皮炎及调节炎症反应中相关细胞因子的研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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WO2022106718A1 (fr) * | 2020-11-23 | 2022-05-27 | Isp Investments Llc | Procede d'obtention d'extraits aqueux de feuilles de thes, compositions comprenant de tels extraits et leurs utilisations cosmetiques |
FR3116438A1 (fr) * | 2020-11-23 | 2022-05-27 | ISP Investments LLC. | Procede d’obtention d’extraits aqueux de feuilles de thes, compositions comprenant de tels extraits et leurs utilisations cosmetiques |
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