CN105746317B - 一种耐低钙结球甘蓝品系的早期筛选方法 - Google Patents
一种耐低钙结球甘蓝品系的早期筛选方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及蔬菜育苗技术,旨在提供一种耐低钙结球甘蓝品系的早期筛选方法。包括:取多个品系结球甘蓝种子催芽后,以改良Hoagland营养液水培,过程中根据幼苗生长情况调节电导率;再以无钙营养液定植水培,打氧通气、保温;定植后观察莲座叶或结球叶叶缘干烧心发病情况,如出现枯边即视为发病,以某品系的30%植株发病作为确定该品种发病时间的指标;以到达发病时间早晚来判断各品系的耐低钙性强弱,到达发病时间最晚的即为耐低钙性最强的结球甘蓝品系。本发明避免了田间鉴定植株生长前期多种环境因素的干扰;可以解决同期一起鉴定的准确性问题;既可以避免田间栽培水分失调因素影响,又可以加快症状表现,达到准确快速鉴定目的。
Description
技术领域
本发明涉及蔬菜育苗技术,特别涉及耐低钙结球甘蓝品系的早期筛选方法。
背景技术
结球甘蓝干烧心是一种生理性病害,是由于甘蓝植株体内钙代谢失调和钙缺乏引起,该病主要发生在甘蓝莲座期以及结球期,一般外叶无明显症状,但心叶叶缘出现半透明水浸状,随后叶缘褐变干枯,呈干纸状,结球后在叶球内部形成夹叶腐烂。
结球甘蓝(又名包心菜、卷心菜等)起源于地中海沿岸,16世纪开始传入中国。由于其耐寒、抗病、适应性强、易贮耐运、品质好等特点,在中国各地普遍栽培,是春、夏、秋季的主要蔬菜之一。在甘蓝栽培中,干烧心现象时有发生,严重年份的发病率甚至达到80%,严重影响叶球品质和商品性,给生产带来极大损失。相关研究报道认为,干烧心是由于植株体内钙代谢失调和钙缺乏引起的一种生理性病害,该病主要发生在甘蓝莲座后期以及结球期,一般外叶无明显症状,但心叶叶缘出现半透明水浸状,随后叶缘褐变干枯,呈干纸状,结球后再叶球内部形成夹叶腐烂,干烧心抗性与品种本身的遗传背景密切相关,不同品种抗干烧心能力有着明显差异,因此选育抗干烧心病品种是解决生产上甘蓝干烧心问题的重要方法,而准确有效的抗干烧心品种(自交系)鉴定方法是技术关键。
田间自然鉴定鉴定法是目前结球甘蓝主要鉴定方法,该方法是将不同品种(自交系)育苗后定植在田间,在莲座后期和结球期观察植株莲座叶和球叶的枯边症状,确定干烧心抗性强弱,如果前期症状不明显,则要等到叶球成熟后纵切叶球观察内部干烧心发病情况。因田间鉴定所需时间长、环境条件复杂,发病情况受土壤、水分、施肥等多种因素影响,叶球成熟后鉴定时需要进行割球操作才能鉴定,鉴定准确度差。
发明内容
本发明要解决的技术问题是,克服现有技术中的不足,提供一种耐低钙结球甘蓝品系的早期筛选方法,通过准确控制发病条件解决田间鉴定受多种生长条件因素影响而准确度差的问题。
为解决技术问题,本发明的解决方案是:
提供一种耐低结球甘蓝品系的早期筛选方法,包括下述步骤:
1)以多个品系的结球甘蓝作为同期筛选的对象,每个品系取100粒籽粒饱满的种子;用蒸馏水洗净后放入带湿润滤纸的培养皿中,在25℃的培养箱中催芽36小时;
(2)各品系中分别挑选36粒发芽势一致的种子,用镊子放入圆筒水培海绵;将水培海绵放入36孔穴盘中,穴盘底部放置塑料托盘;托盘中加入电导率值为0.2mS/cm的改良Hoagland营养液,调节托盘中营养液pH值为6.0,营养液的液面高度达到水培海绵高度一半,进行育苗管理;
(3)幼苗真叶长出后,将托盘中改良Hoagland营养液的浓度调整为电导率值为0.5mS/cm,调节托盘中营养液pH值为6.0,继续培养;
(4)培养幼苗至5叶1心时,将托盘中改良Hoagland营养液的浓度调整到电导率值为1.0mS/cm,调节托盘中营养液pH值为6.0,继续培养至10叶1心;
(5)挑选各品系长势整齐一致的幼苗,定植到盛有无钙营养液的水培箱中,调节无钙营养液EC值为2.2mS/cm,pH值为6.0;每个品种定植30株,定植株行距20×20厘米;水培箱置于控温温室中,采用打氧通气;保持温室内昼温25~28℃、夜温22~24℃;
(6)定植培养7天后开始观察莲座叶或结球叶叶缘干烧心发病情况,如出现枯边即视为发病,以某品系的30%植株发病作为确定该品种发病时间的指标;以到达发病时间早晚来判断各品系的耐低钙性强弱,到达发病时间最晚的即为耐低钙性最强的结球甘蓝品系。
本发明中,所述改良Hoagland营养液包括以下成分:
大量元素:Ca(NO3)2·4H2O 945mg/L、KNO3 506mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4136mg/L、NH4NO3 80mg/L;和
微量元素:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L;铁盐10ml/L,由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解混合定容到1L制得。
本发明中,所述无钙营养液包括以下成分:
大量元素:NH4H2PO4 230mg/L、KNO3 1010mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4136mg/L、NH4NO3 160mg/L;和
微量元素:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L;铁盐10ml/L,由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解、混合并定容到1L制得;使用时调节营养液pH值在5.8~6.6之间,EC值在2.0~2.4之间。
与现有技术相比,本发明的有益效果在于:
(1)本发明根据结球甘蓝对养分的需求特性,以不同浓度改良Hoagland营养液分阶段培养,保证植株正常生长,在莲座期再进行无钙营养液培养鉴定,避免了田间鉴定植株生长前期多种环境因素的干扰。
(2)结球甘蓝从莲座期开始生长迅速,需水需肥量大。而在无钙营养液条件培养下,各品系在长期无钙营养液栽培下,都会因植株迅速生长而由缺钙引发干烧心病。在莲座期开始鉴定,可以根据植株生长特性和需水需肥规律在关键时期准确快速鉴定。本发明根据结球甘蓝莲座期开始发病的特性,以发病天数和发病株率作为判断指标,可以解决同期一起鉴定的准确性问题。
(3)在甘蓝后期生长中,当遇上高温干旱天气、空气湿度小、土壤水分含量低的情况,叶片蒸腾量会比较大。如果水分管理不到位,未及时浇水灌溉,则较易发生干烧心。本发明根据结球甘蓝植株生长特性,在控温温室内保持适宜结球甘蓝快速生长的温度条件,用无钙营养液栽培进行筛选,既可以避免田间栽培水分失调因素影响,又可以加快症状表现,达到准确快速鉴定目的。
具体实施方式
下面结合具体实施方式,对本发明的实现方式进行详细阐述。
品系选择:
选择4个干烧心病田间症状表现有显著差异的结球甘蓝纯合品系G01、G35、G42、SXGL(纯合品系由浙江省农业科学院蔬菜研究所大白菜甘蓝育种组提供,其中G01、G35表现高感干烧心病,G42、SXGL表现抗干烧心病)为研究对象。
品系的催芽:
每个品系取100粒籽粒饱满的种子,分别用蒸馏水冲洗净;准备4个9厘米直径的带盖玻璃培养皿,将9厘米定性滤纸铺入培养皿中,盖子铺一层滤纸,培养皿铺2层滤纸,将滤纸用蒸馏水湿润,并在培养皿盖子和底部进行品系编号;将洗净的4个品系种子对应编号用镊子放入培养皿中,盖好培养皿盖子,放入25℃的恒温培养箱中催芽36小时;
改良Hoagland营养液的配制:
改良Hoagland营养液包括以下成分:大量元素:Ca(NO3)2·4H2O 945mg/L、KNO3506mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4 136mg/L、NH4NO3 80mg/L;和微量元素KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L;铁盐10ml/L,由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解、混合并定容到1L制得。
先配制含钙大量元素(浓缩100倍)、无钙大量元素(浓缩100倍)、微量元素(浓缩100倍)、铁盐(浓缩200倍)贮备液,然后取10L刻度塑料量杯,取含钙大量元素、无钙钙大量元素、微量元素浓缩贮备液各100ml,铁盐浓缩贮备液100ml,加蒸馏水至10升刻度,然后调整溶液pH值为6.0备用。
营养液育苗:
1.准备4个36孔穴盘的塑料托盘并按品系名称编号,在塑料托盘内加入自来水至塑料托盘1/2高度,托盘中加入适量配好的营养液并混匀,用便携式电导率仪测定溶液EC值,直到溶液EC值达到0.20-0.21mS/cm为止,调节托盘中营养液pH值为6.0,将36孔育苗穴盘放入塑料拖盘中。
2.准备白色圆筒水培海绵144个,海绵直径4.0-4.2cm,高度3.5cm,海绵顶部中间有一字型切口,切口长度和深度约为1.0-1.2cm。
3.挑选4个品系催芽完毕的种子,将发芽势一致且芽长达到0.5cm的种子挑出,芽向下放入水培海绵切口中,使种子顶端与海绵切口面平齐。将放有种子的水培海绵对应放入穴盘中,调节海绵高度,使营养液面达到水培海绵高度一半。进行常规育苗管理。
不同浓度营养液阶段培养
1.幼苗真叶长出后,在托盘中加入适量配好的营养液并混匀,用便携式电导率仪测定溶液EC值,直到溶液EC值达到0.50-0.51mS/cm为止,调节托盘中营养液pH值为6.0进行常规育苗管理,每天观察一次营养液高度,保证海绵与营养液面接触,每两天检测一次营养液pH值和EC值,超出pH值变化阈值(5.8-6.2)和EC值变化阈值(0.35-0.60)进行调节。
2.培养至幼苗呈5叶1心时,在托盘中加入适量配好的营养液并混匀,用便携式电导率仪测定溶液EC值,直到溶液EC值达到1.0-1.1mS/cm为止,调节托盘中营养液pH值为6.0,进行常规育苗管理,每天观察一次营养液高度,保证海绵与营养液面接触,每两天检测一次营养液pH值和EC值,超出pH值变化阈值(5.8-6.2)和EC值变化阈值(0.9-1.2)进行调节。常规苗期管理,继续培养至10叶1心;
无钙营养液的配制:
无钙营养液包括以下成分:大量元素:NH4H2PO4 230mg/L、KNO3 1010mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4 136mg/L、NH4NO3 160mg/L;和微量元素:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H200.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L;铁盐10ml/L,由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解、混合并定容到1L制得;使用时调节营养液PH值在5.8~6.6之间,EC值在2.0~2.4之间;
先配制大量元素(浓缩100倍)、微量元素(浓缩100倍)、铁盐(浓缩200倍)贮备液,备用。
定植培养及发病观察
1.在控温温室中放置内径长6m、宽1.2m,高15cm厘米的泡沫水培箱1个,内铺双色反光膜,白色面向上,加入自来水,水面高度达到12cm,体积约870L,加入大量元素贮备液8.7L,微量元素储备液8.7L,铁盐8.7L,用便携式电导率仪测定溶液EC值,调节溶液EC值达到2.2为止,调节营养液pH值为6.0。
2.将打孔泡沫板铺到营养液上漂浮,孔径与水培海绵直径相同,孔间距20cm,共5行24列,泡沫板下部每隔一列粘有厚度1cm的泡沫条,避免打孔泡沫板与营养页面贴合。
3.挑选4个品系长势整齐一致的幼苗,定植到泡沫板上,每个品系定植30株,定植株行距20×20厘米,采用打氧通气;保持温室内昼温25~28℃、夜温22~24℃。每两天检测一次营养液pH值和EC值,超出pH值变化阈值(5.8-6.2)和EC值变化阈值(2.0-2.4)进行调节,常规苗期管理。
4.定植培养7天后开始观察4个品系莲座叶或结球叶叶缘干烧心发病情况,如新叶的叶缘出现枯边即视为发病,以品系的30%植株发病作为确定该品系发病时间的指标;以到达发病时间早晚来判断各品系的耐低钙性强弱,到达发病时间最晚的即为耐低钙性最强的结球甘蓝品系。
试验结果
感干烧心品系G01培养7天开始有发病症状,10天有30%植株发病;感干烧心品系G35培养9天有植株发病症状,11天有30%植株发病;抗干烧心病品系G42培养18天有发病症状,21天有30%植株发病,抗干烧心病品系SXGL培养21天有发病症状,23天有30%植株发病,通过该方法可以明确区分抗、感干烧心病品系发病差异,达到准确鉴定的目的。
Claims (3)
1.一种耐低钙结球甘蓝品系的早期筛选方法,其特征在于,包括下述步骤:
(1)以多个品系的结球甘蓝作为同期筛选的对象,每个品系取100粒籽粒饱满的种子;用蒸馏水洗净后放入带湿润滤纸的培养皿中,在25℃的培养箱中催芽36小时;
(2)各品系中分别挑选36粒发芽势一致的种子,用镊子放入圆筒水培海绵;将水培海绵放入36孔穴盘中,穴盘底部放置塑料托盘;托盘中加入电导率值为0.2mS/cm的改良Hoagland营养液,调节托盘中营养液pH值为6.0,营养液的液面高度达到水培海绵高度一半,进行育苗管理;
(3)幼苗真叶长出后,将托盘中改良Hoagland营养液的浓度调整为电导率值为0.5mS/cm,调节托盘中营养液pH值为6.0,继续培养;
(4)培养幼苗至5叶1心时,将托盘中改良Hoagland营养液的浓度调整到电导率值为1.0mS/cm,调节托盘中营养液pH值为6.0,继续培养至10叶1心;
(5)挑选各品系长势整齐一致的幼苗,定植到盛有无钙营养液的水培箱中,调节无钙营养液EC值为2.2mS/cm,pH值为6.0;每个品种定植30株,定植株行距20×20厘米;水培箱置于温室中,采用打氧通气;保持温室内昼温25~28℃、夜温22~24℃;
(6)定植培养7天后开始观察莲座叶或结球叶叶缘干烧心发病情况,如出现枯边即视为发病,以某品系的30%植株发病作为确定该品种发病时间的指标;以到达发病时间早晚来判断各品系的耐低钙性强弱,到达发病时间最晚的即为耐低钙性最强的结球甘蓝品系。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述改良Hoagland营养液包括以下成分:
大量元素:Ca(NO3)2·4H2O 945mg/L、KNO3 506mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4136mg/L、NH4NO3 80mg/L;和
微量元素:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L;铁盐10ml/L,由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解混合定容到1L制得。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述无钙营养液包括以下成分:
大量元素:NH4H2PO4 230mg/L、KNO3 1010mg/L、MgSO4·7H2O 493mg/L、KH2PO4 136mg/L、NH4NO3 160mg/L;和
微量元素:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.3mg/L、MnSO4·4H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H20 0.25mg/L、CuSO4·5H20 0.025mg/L、COCl2·6H2O 0.025mg/L;铁盐10ml/L,由FeSO4·7H20 2.78g和Na2-EDTA 3.73g溶解、混合并定容到1L制得;使用时,调节营养液的pH值为6.0,EC值为2.2mS/cm。
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Legal Events
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---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
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