CN105727262A - 胰再生源蛋白在制备促进过度炎症伤口愈合的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了胰再生源蛋白在制备促进过度炎症伤口愈合的药物中的应用，局部应用胰再生源蛋白能有效抑制皮肤伤口过度炎症反应，促进伤口愈合，本发明可专用于治疗糖尿病伤口愈合，具有广泛应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及胰再生源蛋白或其衍生物在制备促进过度炎症伤口愈合的药物中的应用。
背景技术
炎症是机体对感染、刺激或损伤的防御性反应，通常情况下，它对人体是有益的，能够帮助人体清除因刺激或损伤产生的坏死细胞或感染细胞等。然而过度的炎症反应会损伤机体组织，导致一些疾病的发生，比如类风湿性关节炎、银屑病、伤口不愈合等。过度炎症是皮肤伤口特别是糖尿病皮肤伤口不愈合的主要原因之一。过度炎症反应导致皮肤角质形成细胞和成纤维细胞的增殖及迁移能力下降，细胞的凋亡增加，从而抑制伤口的正常愈合。糖尿病伤口愈合困难已成为糖尿病病人入院率最高的主要原因。在糖尿病病患中，15％的糖尿病病人具有伤口不愈合的症状，而在这些病人中84％病人会因为伤口不能愈合而面临截肢的危险。因此，找到抑制糖尿病伤口炎症的药物及方法对糖尿病伤口的治疗具有重要意义。
胰再生源蛋白(regeneratingislet-derivedprotein，Reg)属于C-类凝集素(C-typelectin)家族，含有一个N端信号肽，和一个Zn2+依赖的而非Ca2+依赖的C类凝集素结构域。人源REG3A(由REG3a编码)蛋白属于其中一种，与其对应的是鼠源的RegIIIγ蛋白(由Reg3g编码)，两者具有高度同源性。REG3A/RegIIIγ蛋白最初被发现在胰腺损伤时产生，具有促进胰腺再生的能力，在胰腺受损后能促进胰岛细胞的增殖，后来发现REG3A能在急性肝功能衰竭中防止肝细胞凋亡，从而有望成为治疗急性肝功能衰竭的药物之一。Reg蛋白同时还能作为一种控制肠道菌群的扩散和防止病原菌感染肠道的抗菌蛋白。
本发明人实验室于2012年首次报导REG3A/RegIIIγ在皮肤受损时产生，而且能通过抑制角质形成细胞分化来促进皮肤角质形成细胞增殖，从而调节正常伤口的愈合，开辟了Reg蛋白在皮肤伤口研究的新领域。
发明内容
本发明的目的之一在于提出一种胰再生源蛋白的新用途，所述胰再生源蛋白能有效抑制皮肤伤口过度炎症反应，促进伤口特别是糖尿病伤口愈合。
本发明的另一目的在于提出了一种新的胰再生源蛋白衍生物，以及其在制备抑制炎症反应、促进伤口愈合、抗感染的药物中的应用。
本发明中，所述胰再生源蛋白包括SEQIDNO.1所示的人源的胰再生源蛋白REG3A、SEQIDNO.2所示的鼠源的胰再生源蛋白RegIIIγ。
其中，人源的胰再生源蛋白REG3A，含175个氨基酸，成熟肽为149个氨基酸(第27个至175个氨基酸)，其序列如SEQIDNO.1所示：
EEPQRELPSARIRCPKGSKAYGSHCYALFLSPKSWTDADLACQKRPSGNLVSVLSGAEGSFVSSLVKSIGNSYSYVWIGLHDPTQGTEPNGEGWEWSSSDVMNYFAWERNPSTISSPGHCASLSRSTAFLRWKDYNCNVRLPYVCKFTD(SEQIDNO.1)
鼠源的胰再生源蛋白RegIIIγ，含174个氨基酸，成熟肽为148个氨基酸(第27个至174个氨基酸)，其序列如SEQIDNO.2所示：
EVAKKDAPSSRSSCPKGSRAYGSYCYALFSVSKNWYDADMACQKRPSGHLVSVLSGAEASFLSSMIKSSGNSGQYVWIGLHDPTLGYEPNRGGWEWSNADVMNYINWETNPSSSSGNHCGTLSRASGFLKWRENYCNLELPYVCKFKA(SEQIDNO.2)
本发明提出的一种胰再生源蛋白衍生物，其包括SEQIDNO.3所示的胰再生源蛋白衍生物C-REG3A(40-173)、SEQIDNO.4所示的胰再生源蛋白衍生物C-RegIIIγ(40-174)。
其中，所述胰再生源蛋白衍生物C-REG3A(40-173)，即人源胰再生源蛋白REG3A的CTLD结构域，由REG3A第40到第173的134个氨基酸构成，其序列如SEQNO.3所示：
CPKGSKAYGSHCYALFLSPKSWTDADLACQKRPSGNLVSVLSGAEGSFVSSLVKSIGNSYSYVWIGLHDPTQGTEPNGEGWEWSSSDVMNYFAWERNPSTISSPGHCASLSRSTAFLRWKDYNCNVRLPYVCKF(SEQIDNO.3)
其中，所述胰再生源蛋白衍生物C-RegIIIγ(40-174)，即鼠源再生源蛋白RegIIIγ的CTLD结构域，由RegIIIγ第40到第174的135个氨基酸构成，其序列如SEQIDNO.4所示：
CPKGSRAYGSYCYALFSVSKNWYDADMACQKRPSGHLVSVLSGAEASFLSSMIKSSGNSGQYVWIGLHDPTLGYEPNRGGWEWSNADVMNYINWETNPSSSSGNHCGTLSRASGFLKWRENYCNLELPYVCKFKA(SEQIDNO.4)
本发明中，所述胰再生源蛋白可以是来源于天然的、合成的、基因重组的、动物的或人的。所述胰再生源蛋白衍生物可以是合成的或是基因重组获得。
胰再生源蛋白或其衍生物可利用现有技术制备，例如，通过PCR方法扩增得到目的基因，用含有REG3A/RegIIIγ蛋白或其衍生物的基因序列的表达载体转化适当的原核生物的宿主细胞，如大肠杆菌，获得基因工程菌株，基因工程菌株发酵获得胰再生源蛋白或其衍生物。
本发明提出胰再生源蛋白在制备促进过度炎症伤口愈合的药物中的应用。本发明提出了所述胰再生源蛋白可应用于制备抑制伤口过度炎症反应发生、促进糖尿病伤口愈合的药物中。其中，所述胰再生源蛋白包括SEQIDNO.1所示的人源胰再生源蛋白REG3A、SEQIDNO.2所示的鼠源胰再生源蛋白RegIIIγ。其中，所述药物是利用所述胰再生源蛋白抑制过度炎症反应促进伤口愈合。其中，所述伤口为慢性炎症伤口、压迫性溃疡伤口、褥疮伤口、烧伤伤口、手术伤口等。其中，所述慢性炎症伤口包括糖尿病伤口、糖尿病足部溃疡等。
本发明中，所述皮肤伤口炎症指皮肤在伤口发生时的炎症反应，炎症是机体对于刺激的一种防御反应，通常情况是有益的，但是有的时候，过度的炎症反应会对机体造成损伤。
本发明中，所述过度炎症是指机体在炎症反应中，无法抵抗致炎症因子或感染引起的损伤，常表现为炎症因子如TNF、IL-6的持续高表达或扩散，不断损伤组织，造成炎症过程迁延不愈。
本发明中，所述过度炎症伤口可以是慢性炎症伤口、压迫性溃疡伤口、褥疮伤口、烧伤伤口、手术伤口等。其中，所述慢性炎症伤口包括糖尿病患伤口、糖尿病性足部溃疡。慢性炎症相对于急性炎症，致炎因子持续时间较长，数月至数年以上。
本发明还提供了胰再生源蛋白在制备治疗糖尿病伤口愈合的药物中的应用。本发明还提供了胰再生源蛋白在抑制糖尿病皮肤伤口过度炎症发生中的应用。局部应用胰再生源蛋白能降低糖尿病伤口周围炎症反应，促进伤口愈合。在一个具体实施方案中，通过将胰再生源蛋白注射糖尿病伤口，从而抑制皮肤伤口过度炎症发生，促进伤口愈合。
本发明还提供了胰再生源蛋白或其衍生物在抑制Toll-样受体3的配体poly(I：C)诱导的炎症中的应用，其中，胰再生源蛋白、胰再生源蛋白衍生物均可用于作为Poly(I：C)诱导的炎症反应的抑制剂。所述胰再生源蛋白抑制伤口周围炎症因子TNF-α及IL-6的表达。研究表明：非感染伤口的炎症反应主要依赖Toll-样受体3，而本发明中，胰再生源蛋白或其衍生物抑制Toll-样受体3的配体poly(I：C)诱导的人原代角质形成细胞TNF-α和IL-6的表达，从细胞水平证明胰再生源蛋白或其衍生物对伤口炎症有抑制作用。
本发明提出了胰再生源蛋白衍生物在制备抑制炎症反应、制备促进伤口愈合的药物中的应用。本发明提供了利用胰再生源蛋白衍生物抑制炎症反应、促进伤口愈合的方法。在一个具体实施方案中，通过将胰再生源蛋白衍生物注射伤口，从而促进伤口愈合。其中，所述胰再生源蛋白衍生物包括SEQIDNO.3所示的人源胰再生源蛋白衍生物C-REG3A、SEQIDNO.4所示的鼠源胰再生源蛋白C-RegIIIγ。
其中，所述伤口包括感染伤口或非感染伤口；所述非感染伤口包括正常伤口、慢性炎症伤口、压迫性溃疡伤口、褥疮伤口、烧伤伤口、手术伤口；所述慢性炎症伤口包括糖尿病伤口、糖尿病足部溃疡。
本发明还提供了胰再生源蛋白或其衍生物在化妆品、护肤用品中作为伤口愈合促进剂或伤口发炎抑制剂或抗感染剂的应用。胰再生源蛋白或其衍生物可用于配制成化妆品、护肤品、日常用品或药品等。其中，所述胰再生源蛋白包括SEQIDNO.1所示的人源的胰再生源蛋白REG3A、SEQIDNO.2所示的鼠源的胰再生源蛋白RegIIIγ。其中，所述胰再生源蛋白衍生物包括SEQIDNO.3所示的人源的胰再生源蛋白衍生物C-REG3A、SEQIDNO.4所示的鼠源的胰再生源蛋白衍生物C-RegIIIγ。
本发明还提供了胰再生源蛋白衍生物在制备杀菌药物、在制备抗感染药物中的应用。本发明胰再生源蛋白衍生物可作为杀菌剂。胰再生源蛋白衍生物可用于制备抗感染药物。其中，所述胰再生源蛋白衍生物包括SEQIDNO.3所示的人源的胰再生源蛋白衍生物C-REG3A、SEQIDNO.4所示的鼠源的胰再生源蛋白衍生物C-RegIIIγ。
本发明还提出了一种组合物或试剂盒，其含有胰再生源蛋白；所述胰再生源蛋白包括SEQIDNO.1所示的人源的胰再生源蛋白REG3A和/或SEQIDNO.2所示的鼠源的胰再生源蛋白RegIIIγ。所述组合物或试剂盒可用于有效促进过度炎症伤口愈合；可用于有效抑制糖尿病皮肤伤口过度炎症发生、促进糖尿病伤口愈合；可用在化妆品、护肤用品中作为伤口愈合促进剂或伤口炎症抑制剂；可用于抑制伤口周围炎症因子TNF-α及IL-6的表达、抑制Poly(I：C)诱导的炎症反应。
本发明还提出了一种组合物或试剂盒，其包含胰再生源蛋白衍生物；所述胰再生源蛋白衍生物包括SEQIDNO.3所示的人源的胰再生源蛋白衍生物C-REG3A、SEQIDNO.4所示的鼠源的胰再生源蛋白衍生物C-RegIIIγ。所述组合物或试剂盒可用于抑制炎症反应、促进伤口愈合、抗感染；可用于抑制皮肤伤口过度炎症发生；可作为伤口愈合促进剂、伤口炎症抑制剂、抗感染剂用在化妆品或护肤用品中；可用于作为抗感染药物；可用于作为杀菌剂；可用于抑制Poly(I：C)诱导的炎症反应。
所述组合物包括有效量的胰再生源蛋白和/或胰再生源蛋白衍生物、以及一种或多种药学上可接受的任何载体、赋形剂及辅剂等，包括但不限于稀释剂、粘合剂、湿润剂等。其可制成适用于人或动物的任何剂型，包括但不限于注射剂、涂抹剂、缓释剂等。其可根据公知方法制备得到。所述组合物或试剂盒中的胰再生源蛋白或胰再生源蛋白衍生物的含量为0.1～99％重量比。在具体实施方案中，所述组合物为：例如，胰再生源蛋白及其衍生物以磷酸盐缓冲液(pH6.5，20mM)稀释配制而成。例如，胰再生源蛋白及其衍生物的注射剂按100ug蛋白与100ul磷酸盐缓冲液(pH6.5，20mM)配制而成。例如，胰再生源蛋白衍生物以MES溶液配制而成(MES：25mM，NaCl：25mM，pH：6.0)。
本发明首次提出了胰再生源蛋白、胰再生源蛋白衍生物在抑制皮肤伤口炎症的用途。本发明首次提出了胰再生源蛋白、胰再生源蛋白衍生物能降低糖尿病伤口的炎症反应，有效抑制皮肤伤口过度炎症反应，从而促进糖尿病伤口的愈合。本发明公开了胰再生源蛋白、胰再生源蛋白衍生物具有杀菌作用及促进伤口愈合的功能。慢性炎症伤口特别是糖尿病伤口愈合困难是世界性的难题，目前尚未有很好的治疗办法，本发明提出了胰再生源蛋白、胰再生源蛋白衍生物不仅能抑制伤口炎症，促进糖尿病伤口愈合，而且还有杀菌效果，具有极好的应用前景。
附图说明
图1A表示REG3A蛋白表达；
图1B表示REG3A蛋白纯化；
图2A表示RegIIIγ蛋白表达；
图2B表示RegIIIγ蛋白纯化；
图3A表示C-REG3A蛋白表达；
图3B表示C-REG3A蛋白纯化；
图4A表示C-RegIIIγ蛋白表达；
图4B表示C-RegIIIγ蛋白纯化；
图5A表示REG3A抑制poly(I：C)诱导的TNF-α的mRNA表达；
图5B表示REG3A抑制poly(I：C)诱导的IL-6的mRNA表达；
图6A表示RegIIIγ抑制poly(I：C)诱导的TNF-α的mRNA表达；
图6B表示RegIIIγ抑制poly(I：C)诱导的IL-6的mRNA表达；
图7A表示RegIIIγ促进糖尿病皮肤伤口愈合；
图7B表示RegIIIγ促进糖尿病皮肤伤口愈合的愈合曲线；
图7C表示RegIIIγ抑制糖尿病皮肤伤口中TNF-α的mRNA表达；
图7D表示RegIIIγ抑制糖尿病皮肤伤口中IL-6的mRNA表达；
图8A表示REG3A促进糖尿病皮肤伤口愈合；
图8B表示REG3A促进糖尿病皮肤伤口愈合的统计图；
图8C表示REG3A抑制糖尿病皮肤伤口中TNF-α的mRNA表达；
图9A表示C-REG3A抑制poly(I：C)诱导的TNF-α的mRNA表达；
图9B表示C-REG3A抑制poly(I：C)诱导的IL-6的mRNA表达；
图10A表示C-RegIIIγ抑制poly(I：C)诱导的TNF-α的mRNA表达；
图10B表示C-RegIIIγ抑制poly(I：C)诱导的IL-6的mRNA表达；
图11A表示C-REG3A促进皮肤伤口愈合；
图11B表示C-REG3A促进皮肤伤口愈合的愈合曲线；
图12A表示C-RegIIIγ促进皮肤伤口愈合；
图12B表示C-RegIIIγ促进皮肤伤口愈合的愈合曲线；
图13A表示C-REG3A的杀菌作用；
图13B表示C-RegIIIγ的杀菌作用。
具体实施方式
结合以下具体实施例和附图，对本发明作进一步的详细说明，本发明的保护内容不局限于以下实施例。在不背离发明构思的精神和范围下，本领域技术人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中，并且以所附的权利要求书为保护范围。实施本发明的过程、条件、试剂、实验方法等，除以下专门提及的内容之外，均为本领域的普遍知识和公知常识，本发明没有特别限制内容。
实施例1：制备胰再生源蛋白REG3A/RegIIIγ及其衍生物C-REG3A/C-RegIIIγ
制备胰再生源蛋白REG3A/RegIIIγ及其衍生物C-REG3A/C-RegIIIγ的方法相同，以下以胰再生源蛋白REG3A的制备为例：
(1)利用PCR方法扩增得到目的基因，经限制性内切酶酶切后，将其克隆于大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中，IPT6(1mM)诱导4h表达胰再生源蛋白REG3A；
(2)收集菌体，超声破菌，人胰再生源蛋白REG3A以包涵体的形式存在于沉淀中，如图1A的5所示；
(3)将包涵体变性后复性，用透析袋将盐离子去除；
(4)将透析后的蛋白，用阳离子柱进行纯化，超滤浓缩，得到胰再生源蛋白REG3A，由图1B可知，大部分的胰再生源蛋白REG3A从200mMNaCl溶液中洗脱下来；
(5)收集200mMNaCl的洗脱液，透析去除盐离子，过阴离子柱去除内毒素；
(6)超滤浓缩后，冻于-80℃保存。
图1所示为REG3A蛋白的表达纯化；图2所示为RegIIIγ蛋白的表达纯化；图3为C-REG3A蛋白的表达纯化；图4所示为C-RegIIIγ蛋白的表达纯化。
实施例2：胰再生源蛋白REG3A/RegIIIγ及其衍生物C-REG3A/C-RegIIIγ在体外抑制Poly(I：C)诱导的炎症反应
将原代培养的人角质形成细胞接种于24孔板内，当细胞长至70％-80％满时，分别提前加入胰再生源蛋REG3A、RegIIIγ、胰再生源蛋衍生物C-REG3A、C-RegIIIγ0.03nM，10min后，加入5μg/ml的Poly(I：C)，24h后抽提RNA或蛋白，检测TNF-α和IL6的表达。
实验结果如图5A、5B、6A、6B、9A、9B、10A、10B所示，表明poly(I：C)可以诱导TNF-α和IL-6的大量表达；加入胰再生源蛋白REG3A/RegIIIγ或胰再生源蛋白衍生物C-REG3A及C-RegIIIγ，均能抑制poly(I：C)诱导的TNF-α和IL-6的表达。而且，胰再生源蛋白衍生物C-REG3A及C-RegIIIγ的抑制效果明显强于胰再生源蛋白REG3A及RegIIIγ(*，P＜0.05，**，P＜0.01，***P＜0.001)。
实施例3：胰再生源蛋白REG3A或RegIIIγ抑制糖尿病伤口的炎症反应，促进糖尿病小鼠伤口愈合。
步骤1：C57BL/6野生型小鼠按体重连续注射50mg/kg链脲霉素(STZ)5天。稳定10天以后，检测小鼠血糖，小鼠随机血糖值大于16mmol/L视为糖尿病小鼠造模成功。
步骤2：糖尿病小鼠脱毛24小时后分为两组，糖尿病小鼠对照组：注射PB，糖尿病小鼠实验组：皮间注射100μgREG3A或RegIIIγ。6小时后在注射部位制造直径为8mm的伤口，第三天，将小鼠伤口周围组织剪下，抽提RNA或蛋白，检测TNF-α和IL-6的表达。
在观察小鼠伤口愈合的时间曲线时，每天拍照记录伤口的面积，统计分析伤口愈合速度。
实验结果如图7A、7B及图8A、8B所示：REG3A和RegIIIγ都能促进糖尿病小鼠伤口愈合。如图7C、7D及8C所示：与远离伤口部位皮肤中TNF-α和IL-6的表达相比，糖尿病伤口处TNF-α和IL-6的表达升高；胰再生源蛋白REG3A和RegIIIγ都能够有效降低糖尿病小鼠组伤口的TNF-α或IL-6的表达，表明REG3A和RegIIIγ在体内能有效抑制糖尿病伤口的炎症反应，进而促进糖尿病伤口愈合(*，P＜0.05，**，P＜0.01，***P＜0.001)。
实施例4：胰再生源蛋白衍生物C-REG3A及C-RegIIIγ促进小鼠伤口愈合的功能
将C57正常小鼠脱毛24小时后分为三组，正常小鼠对照组：注射PB；正常小鼠实验组：皮间注射100μgC-REG3A或REG3A。6小时后在注射部位制造直径为8mm的伤口，每天拍照记录伤口的面积，统计分析伤口的愈合速度。如图11A、11B所示，C-REG3A能有效促进小鼠伤口愈合(*，P＜0.05)。C-REG3A促进伤口愈合能力与REG3A促进伤口愈合能力相同。
C-RegIIIγ促进伤口愈合的实施例与C-REG3A的方法相同，如12A、12B所示，C-RegIIIγ也能有效促进小鼠伤口愈合(*，P＜0.05)。C-RegIIIγ促进伤口愈合能力RegIIIγ促进伤口愈合的能力相同。
实施例5：胰再生源蛋白衍生物C-REG3A及C-RegIIIγ的杀菌作用
第一步：细菌收集
1)将金黄色葡萄球菌划线于固态培养基TSA上，待长出菌落后，挑取单菌落接种于液态培养基TSB中，37℃，220rpm振荡培养过夜。2)将过夜培养活化的细菌按照4％接种至新鲜培养基中，37℃，220rpm振荡培养，期间不定时检测细菌生长的OD600值。3)当OD600＝0.6-0.8时，收集菌体。用过膜除菌的MES溶液(MES2-morpholino-ethanesulfonicacid：25mM，NaCl：25mM，pH：6.0)重悬，5000rpm离心5min，弃去上清。该操作重复两次。4)以MES溶液作为空白对照，测定金黄色葡萄球菌的OD600值。
第二步：细菌孵育
1)配制孵育体系：金黄色葡萄球菌：1×105CFU；C-REG3A/C-RegIIIγ：0uM，2uM，4uM，6uM，8uM；用MES定容至100uL。
2)用移液枪将金黄色葡萄球菌分别与C-REG3A或C-RegIIIγ混匀后，将样品放在37℃细菌培养箱恒温孵育3h。
3)点板。将细菌孵育体系进行梯度稀释(1：10、1：100、1：1000、1：10000等)，每一个稀释浓度均取样在TSA固态培养基上点板，每组三个重复，每个重复为10uL稀释样品。
4)将培养板倒置放在37℃细菌培养箱恒温培养16-20h。
5)待培养板上长出单菌落并且清晰可见时，进行计数。统计算出原液中细菌的数目，进而分析C-REG3A或C-RegIIIγ的抑菌率。
实验结果如图13所示：图13A表明C-REG3A的杀菌活性效果，图13B表明C-RegIIIγ的杀菌活性效果，均有显著性差异(***P＜0.001)，表明C-REG3A/C-RegIIIγ均具有杀菌活性，即保留了REG3A/RegIIIγ的杀菌活性。
上述实施例2中所用胰再生源蛋白及其衍生物是由磷酸盐缓冲液(pH6.5，20mM)稀释配制而成。上述实施例3与实施例4中所用胰再生源蛋白及其衍生物的注射剂按100ug蛋白与100ul磷酸盐缓冲液(pH6.5，20mM)配制而成。上述实施例5中所用胰再生源蛋白衍生物杀菌剂由MES溶液配制而成(MES：25mM，NaCl：25mM，pH：6.0)。
Claims (8)
1.胰再生源蛋白在制备促进过度炎症伤口愈合的药物中的应用，其特征在于，所述胰再生源蛋白包括SEQIDNO.1所示的人源的胰再生源蛋白REG3A、SEQIDNO.2所示的鼠源的胰再生源蛋白RegIIIγ；所述药物是利用所述胰再生源蛋白抑制过度炎症反应促进伤口愈合。
2.胰再生源蛋白在制备抑制糖尿病皮肤伤口过度炎症发生、促进糖尿病伤口愈合的药物中的应用；其中，所述胰再生源蛋白包括SEQIDNO.1所示的人源的胰再生源蛋白REG3A、SEQIDNO.2所示的鼠源的胰再生源蛋白RegIIIγ。
3.胰再生源蛋白作为伤口愈合促进剂或伤口炎症抑制剂在化妆品、护肤用品中的应用；其中，所述胰再生源蛋白包括SEQIDNO.1所示的人源的胰再生源蛋白REG3A、SEQIDNO.2所示的鼠源的胰再生源蛋白RegIIIγ。
4.胰再生源蛋白在制备抑制Poly(I：C)诱导的炎症反应的药物中的应用，其中，所述胰再生源蛋白包括SEQIDNO.1所示的人源的胰再生源蛋白REG3A、SEQIDNO.2所示的鼠源的胰再生源蛋白RegIIIγ。
5.如权利要求1～3之任一项所述的应用，其特征在于，所述胰再生源蛋白抑制伤口周围炎症因子TNF-α及IL-6的表达。
6.如权利要求1～3之任一项所述的应用，其特征在于，所述伤口为慢性炎症伤口、压迫性溃疡伤口、褥疮伤口、烧伤伤口、手术伤口；所述慢性炎症伤口包括糖尿病伤口、糖尿病足部溃疡。
7.一种组合物或试剂盒，其特征在于，其含有胰再生源蛋白；所述胰再生源蛋白包括SEQIDNO.1所示的人源的胰再生源蛋白REG3A、SEQIDNO.2所示的鼠源的胰再生源蛋白RegIIIγ。
8.如权利要求7所述的组合物或试剂盒，其特征在于，其用于促进过度炎症伤口愈合；用于抑制糖尿病皮肤伤口过度炎症发生、促进糖尿病伤口愈合；用于作为伤口愈合促进剂或伤口炎症抑制剂；用于抑制伤口周围炎症因子TNF-α及IL-6的表达、抑制Poly(I：C)诱导的炎症反应。
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