CN105717214A - 一种适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取样品萃取、离心后过滤膜，即得供试品溶液；(2)混合对照品溶液的制备：分别称取对照品加入乙醇溶解后混合定容，即得混合对照品溶液；(3)测定：称取1μL供试品溶液和混合对照品溶液，注入气相色谱质谱联用仪，采用选择离子模式进行监测，对供试品溶液中的多味凉味剂含量进行测定。本发明方法测定食品及日化用品中凉味剂，其应用范围广，不仅可应用于固体样品的检测，也适用于膏体及液体样品中凉味剂的测定，可应用于多种食品及日化用品中凉味剂的检测。

Description

一种适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法
技术领域
本发明涉及凉味剂含量的分析方法，特别涉及一种适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法。
背景技术
凉味剂是指所有能产生清凉效果且药性不强的化学物质的总称，具有很优雅的凉香、薄荷香、醚香、辛香和按叶样香气及独特的清新凉味，对人体有良好的药效和生理作用的一类化学物质，现作为添加剂已广泛应用于食品、日化、烟草和医药等领域中，如牙膏、口香糖和漱口水中，是一类十分重要的添加剂。
薄荷醇是最传统的凉味剂，虽具有非常明显薄荷的味道，但其带苦味及刺激性气味，用量低时清凉效果不明显，挥发性强故作用短暂和几乎不溶于水和对眼睛有较强的刺激性等缺点，使得薄荷醇在很多产品中的使用受到了限制。为解决上述难题，研究者以薄荷醇作母体，对其结构进行改造，合成出多种不同类型的新型凉味剂，按其结构可以分为薄荷氧基系列、缩羰基类系列、WS系列、其他类型凉味剂。由于各种凉味剂都存在一定的缺点，使得人们在产品的研发中加入多种凉味剂，以寻求更为长效清凉的产品,以满足获得凉感持续时间长、感觉较为均匀的加香产品的要求。凉味剂作为食品添加剂，其直接影响入口，对口腔的味觉存在一定的影响作用。目前，中国没有正式的国家标准对食品和日化用品中的凉味剂进行检测和对其用量进行限制，也无相关文献对其含量测定进行报道，故建立合适方法测定食品中的凉味剂已成为目前研究凉味剂的最迫切的问题。现采用气质联用法对食品中各种凉味剂的含量，分析不同产品中各凉味剂的添加类型和添加量，为指导今后建立食品中凉味剂测定的国家标准奠下基础，也并为企业提供添加凉味剂提供添加依据。
发明内容
本发明旨在针对现有分析方法的不足，专门设计了一种普遍适用于食品及日化用品中多种凉味剂含量测定的气相色谱质谱联用法。本方法选取不同基质的样品，通过对前处理条件优化，采用选择离子模式和扫描模式同时对各凉味剂进行监测，其具有抗干扰能力强，精密度高，重现性好，定性准确，检出限低等特点。
为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备：取样品萃取、离心后过滤膜，即得供试品溶液；
(2)混合对照品溶液的制备：分别称取对照品薄荷脑、异胡薄荷醇、乙酸薄荷酯、N,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺(WS-23)、乳酸薄荷酯、薄荷酮甘油缩酮、薄荷酰胺(WS-3)、薄荷氧基-1,2丙二醇、乙酸(N-乙基-对薄荷基-3-羧酰胺)乙酯(WS-5)，加入乙醇溶解后混合定容，即得混合对照品溶液；
(3)测定：称取1μL供试品溶液和混合对照品溶液，注入气相色谱质谱联用仪，采用选择离子模式进行监测，对供试品溶液中的多味凉味剂含量进行测定；气相色谱质谱分析条件：色谱柱：DB-1701MS(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度：260℃，(MSD)传输线温度：280℃，柱温：80℃维持2min，以15℃/min升至200℃，再以20℃/min升至260℃，保持10min；不分流进样，进样量1μL；载气为氦气，柱流量：1.0mL/min；质谱条件：离子源(EI)温度：230℃；四级杆温度：150℃；溶剂延迟4min；扫描方式：SIM；凉味剂定量和定性选择离子如下表：
其中带“*”的为定量离子。
优选地，所述样品的性状包括固态、膏状和液态。
进一步的，步骤(1)中所述固态供试品溶液的制备包括以下步骤：取固体样品0.2～0.5g，碾碎后置于试剂瓶中，分两次用20mL乙醇在40℃水浴中超声30min，合并两次的萃取液，氮吹浓缩到10-25mL，离心后过滤膜即得供试品溶液。
进一步的，步骤(1)中所述膏状供试品溶液的制备包括以下步骤：取膏状样品0.2～0.5g，置于试剂瓶中，加1mL蒸馏水将样品分散后，分两次用20mL乙醇在40℃水浴中超声30min，合并两次的萃取液，氮吹浓缩到10-25mL，离心后过滤膜即得供试品溶液。
进一步的，步骤(1)中所述液态供试品溶液的制备包括以下步骤：取液体样品0.1～0.2g，用乙醇定容10-25mL后，过滤膜即得供试品溶液。
本发明的方法克服了现有技术样品处理方法的不足，与现有技术相比，本发明有以下优良效果：
1、从食品及日化用品的安全质量标准的技术要求方面，多成分的含量测定是一个较优的方法，而选择离子模式和扫描模式共同监测能提高多成分含量的准确度和灵敏度；基于此，本发明所述食品及日化用品中9种凉味剂成分(薄荷脑、异胡薄荷醇、乙酸薄荷酯、N,2,3.三甲基-2-异丙基丁酰胺(WS-23)、乳酸薄荷酯、薄荷酮甘油缩酮、薄荷酰胺(WS-3)、薄荷氧基-1,2丙二醇、乙酸(N-乙基-对薄荷基-3-羧酰胺)乙酯(WS-5))的含量测定方法，通过了大量的实验对供试品溶液的制备以及气相色谱质谱联用方法的测定条件进行研究，能够更为全面反应食品及日化用品中凉味剂的组成；
2、本发明方法测定食品及日化用品中凉味剂，其应用范围广，不仅可应用于固体样品的检测，也适用于膏体及液体样品中凉味剂的测定，可应用于多种食品及日化用品中凉味剂的检测。
附图说明
图1为本发明的操作流程图；
图2为9种凉味剂标准品、样品及空白的总离子流图。
具体实施方法
本发明通过以下具体实施例作进一步描述，但不限制本发明。
实验仪器、试剂及仪器工作条件
1)仪器
Agilent7890B+5977A气相色谱质谱联用仪(美国安捷伦公司)；Sartorius电子天平(BSA224S)(广州市深华实验仪器设备有限公司)；微型涡旋混合仪XW-80A(上海泸西分析仪器有限公司)；离心机TDZ5-WS(湖南赛特湘仪)；超声波发器仪(昆山市超声波清洗机有限公司)。
2)试剂
薄荷脑(中国食品药品检定研究所，纯度≥99％)；薄荷酰胺(WS-3)(阿拉丁，纯度≥98％)；N,2,3.三甲基-2-异丙基丁酰胺(WS-23)(北京百灵威科技有限公司，纯度≥98％)；乙酸(N-乙基-对薄荷基-3-羧酰胺)乙酯(WS-5)(北京百灵威科技有限公司，纯度≥98％；异胡薄荷醇(上海安谱实验科技股份有限公司，纯度≥98％)；乙酸薄荷酯(上海安谱实验科技股份有限公司；纯度≥99％)；乳酸薄荷酯(上海安谱实验科技股份有限公司，纯度≥98％)；薄荷氧基-1,2丙二醇(上海安谱实验科技股份有限公司，纯度≥98％)；薄荷酮甘油缩酮(上海安谱实验科技股份有限公司，纯度≥98％)；甲醇、乙醇、乙腈、正己烷均为(分析纯，广州化学试剂厂)；实验室用水为二次蒸馏水。
3)色谱条件
色谱条件：色谱柱：DB-1701MS(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度：260℃，(MSD)传输线温度：280℃，柱温：80℃维持2min，以15℃/min升至200℃，再以20℃/min升至260℃，保持10min；不分流进样，进样量1μL；载气为氦气，柱流量：1.0mL/min。
质谱条件：离子源(EI)温度：230℃；四级杆温度：150℃；溶剂延迟4min；扫描方式：SIM(选择离子详见表1)。
实施例1
1.一种适用于食品及日化用品中多种凉味剂含量测定的方法，按照以下步骤进行：
1)供试品溶液的制备：
固体样品(口香糖、薄荷糖)：取0.2～0.5g样品，碾碎后置于30mL带塞三角瓶中，分两次用20mL乙醇在40℃水浴中超声30min，合并两次的萃取液，氮吹浓缩到10-25mL，离心后过滤膜待测。
膏状样品(牙膏)：取0.2～0.5g样品，置于30mL带塞三角瓶中，加1mL蒸馏水将样品分散后，分两次用20mL乙醇在40℃水浴中超声30min，合并两次的萃取液，氮吹浓缩到10-25mL，离心后过滤膜待测。
液体样品(漱口水)：取0.1～0.2g样品，用乙醇定容10～25mL后，过滤膜待测。
2)多种凉味剂混合标准品溶液的制备：
分别精密称取对照品薄荷脑29.29mg、异胡薄荷醇22.40mg、乙酸薄荷酯22.40mg、N,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺(WS-23)25.16mg、乳酸薄荷酯19.18mg、薄荷酮甘油缩酮26.08mg、薄荷酰胺(WS-3)24.61mg、薄荷氧基-1,2丙二醇28.82mg、乙酸(N-乙基-对薄荷基-3-羧酰胺)乙酯(WS-5)25.48，加入乙醇溶解后混合定容至50mL，即得混合对照品溶液储备液。
分别取混合对照溶液储备液25.0mL、10.0mL、5.00mL、1.00mL、0.250mL、0.025mL于100mL容量瓶中，配制浓度范围为0.25～250μg.mL-1标准曲线溶液。
3)测定：分别精密吸取1μL供试品溶液和混合对照品溶液，注入气相色谱质谱联用仪，采用选择离子模式进行监测。
4)气相色谱条件：色谱柱：DB-1701MS(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度：260℃，(MSD)传输线温度：280℃，柱温：80℃维持2min，以15℃/min升至200℃，再以20℃/min升至260℃，保持10min；不分流进样，进样量1μL；载气为氦气，柱流量：1.0mL/min。
质谱条件：离子源(EI)温度：230℃；四级杆温度：150℃；溶剂延迟4min；扫描方式：SIM，选择离子详见表1：
表1凉味剂的选择离子
其中带“*”的为定量离子。
在本发明的实施例中，固体样品为口香糖和薄荷糖，膏状样品为牙膏，液体样品为漱口水，本发明对测定样品的保护范围不限于实施例中指出的这几种样品，本领域技术人员可以想到的样品均在本发明的保护范围之内。
2.线性关系考察
将混合对照品溶液稀释至一定浓度系列的线性溶液，分别进样，取其峰面积(Y)为纵坐标，浓度(X)为横坐标，进行回归分析，所得回归方程见表2，表2为9种凉味剂化合物的回归方程、相关系数、线性范围、检出限及定量限。
表29种化合物的回归方程、相关系数、线性范围、检出限及定量限
由表2可以得出：本发明方法的检出限低：采用标准添加法进行测定，以定量离子信噪比(S/N)≥3确定样品的检出限(LOD)，9种凉味剂的LOD为0.0075～0.26μg/g。
3.样品的凉味剂测定结果
按上述测定方法及测定条件进行凉味剂的测定实验，不同样品的检测结果见表3：
表3样品样品测定结果
其中：“ND”代表该项目未检出。
实施例2
重复性和加样回收率实验：
向薄荷糖、牙膏、漱口水样品中添加3个浓度水平的9种化合物混合标准溶液，按实施例1处理方法及测定条件进行回收率实验，每个添加水平做3个平行，结果见表4，表4为加样回收率试验结果。
表4加样回收率试验结果
由表4可以得出：各化合物的平均回收率为82.8％～103.5％，相对标准偏差(RSD)为0.7％～3.7％，本发明方法的重复性好和加标回收率满足分析测定的要求。
上列详细说明是针对本发明可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本案的专利保护范围中。

Claims (5)

1.一种适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)供试品溶液的制备：取样品萃取、离心后过滤膜，即得供试品溶液；
(2)混合对照品溶液的制备：分别精密称取对照品薄荷脑29.29mg、异胡薄荷醇22.40mg、乙酸薄荷酯22.40mg、N,2,3-三甲基-2-异丙基丁酰胺(WS-23)25.16mg、乳酸薄荷酯19.18mg、薄荷酮甘油缩酮26.08mg、薄荷酰胺(WS-3)24.61mg、薄荷氧基-1,2丙二醇28.82mg、乙酸(N-乙基-对薄荷基-3-羧酰胺)乙酯(WS-5)25.48，加入乙醇溶解后混合定容至50mL，即得混合对照品溶液储备液。
(3)测定：称取1μL供试品溶液和混合对照品溶液，注入气相色谱质谱联用仪，采用选择离子模式进行监测，对供试品溶液中的多味凉味剂含量进行测定；气相色谱质谱分析条件：色谱柱：DB-1701MS(30m×0.25mm×0.25μm)；进样口温度：260℃，(MSD)传输线温度：280℃，柱温：80℃维持2min，以15℃/min升至200℃，再以20℃/min升至260℃，保持10min；不分流进样，进样量1μL；载气为氦气，柱流量：1.0mL/min；质谱条件：离子源(EI)温度：230℃；四级杆温度：150℃；溶剂延迟4min；扫描方式：SIM；凉味剂定量和定性选择离子如下表：
其中带“*”的为定量离子。
2.如权利要求1所述的适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法，其特征在于，所述样品的性状包括固态、膏状和液态。
3.如权利要求2所述的适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法，其特征在于，步骤(1)中所述固态供试品溶液的制备包括以下步骤：取固体样品0.2～0.5g，碾碎后置于试剂瓶中，分两次用20mL乙醇在40℃水浴中超声30min，合并两次的萃取液，氮吹浓缩到10-25mL，离心后过滤膜即得供试品溶液。
4.如权利要求2所述的适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法，其特征在于，步骤(1)中所述膏状供试品溶液的制备包括以下步骤：取膏状样品0.2～0.5g，置于试剂瓶中，加1mL蒸馏水将样品分散后，分两次用20mL乙醇在40℃水浴中超声30min，合并两次的萃取液，氮吹浓缩到10-25mL，离心后过滤膜即得供试品溶液。
5.如权利要求2所述的适用于食品和日化用品中多种凉味剂含量测定的方法，其特征在于，步骤(1)中所述液态供试品溶液的制备包括以下步骤：取液体样品0.1～0.2g，用乙醇定容10-25mL后，过滤膜即得供试品溶液。
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