CN105594590A - 一种玫瑰多倍体品种的培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种玫瑰多倍体品种的培育方法，包括以下步骤：（1）待母本玫瑰结蕾时，将母本玫瑰移入-5~0℃的室内，进行1~2h的预处理，用低温杀灭母本玫瑰的病毒；（2）将母本玫瑰移入常温的室内；对母本玫瑰的花蕾采用秋水仙素进行喷雾法诱导；（3）在母本玫瑰的蕾裂期，采集父本玫瑰的花粉进行人工授粉，将花粉授于母本玫瑰的柱头，授粉后进行日常管理，获得玫瑰种子；（4）将玫瑰种子进行花田种植或无土栽培，种植后取茎尖或根尖采用改良苯酚品红染色法制片，然后在显微镜下观察并摄像，查看其染色体的数目，染色体数目为21的植株为所获得的玫瑰三倍体品种。本发明的方法诱变成功率高、成本低、试验条件易控制。
Description
技术领域
本发明涉及一种花卉的培育方法，特别是一种玫瑰多倍体品种的培育方法。
背景技术
玫瑰是我国的传统名花，属蔷薇科蔷薇属落叶灌木，花色艳丽，香气宜人，不仅是优良的园林绿化和水土保持植物，也是珍贵的中药材，更是食品工业和香料工业的重要原料。其花可用来制作香料、花茶和食品，尤其是玫瑰花提炼的玫瑰精油经济价值极高，在国际市场上被誉为“液体黄金”，其果实富含多种微量元素，尤其是维生素C含量很高，可用来制作果酱、果汁；其花蕾、果实和根均可入药，有理气活血和滋补强壮的功效。但是，长久以来，玫瑰虽然一直以食品和香料工业原料的身份活跃在国际市场上，在园林绿化中应用较少。究其主要原因是品种少、花期短、花色花型单调。虽然部分研究者已进行了多年育种工作，但所育出的品种仍然非常少。就目前来看，全国玫瑰品种只有50多个，花期多为5-6月份，花色只有玫红色、粉色和白色，花朵大小、形态也差异不大。而且这些品种大多用来提取玫瑰香精油，真正用作观赏的品种很少。因此，尽快培育出兼具芳香、高抗性和高观赏性的玫瑰新品种，实现玫瑰育种的新突破，具有重要的理论和现实意义。
但是，玫瑰育种过程中遇到一个的突出难题就是玫瑰授粉亲和性差，因此，诱导获得2n花粉在玫瑰育种的过程中具有重要价值。
化学诱变是获得2n花粉的常用方法，是利用化学诱变剂诱变产生多倍体的方法。此方式是目前应用最广泛，操作简单易行，突变频率高，专一性强，适用范围广的方法。秋水仙素是目前主要采用的诱变剂。诱导材料通常选取种子、顶芽、侧芽以及组织培养中的愈伤组织、圆球茎、不定芽等分裂旺盛的器官或组织。
化学诱变多倍体较常用的诱导方法有浸根法、浸种法、注射法等。在实际工作中运用最简便有效的方式之一是：浸根法，将植株根部浸泡在化学试剂中，浸泡完成后洗净根部再把植株栽在土中，此法多用于加倍远缘杂交产生的不孕杂种和用其它方法未能加倍而又必要的小孢子单位体苗，但浸根法所需药剂量大，成本较高，且移栽后，幼苗成活率低；浸种法，先将植物种子在化学试剂中浸泡处理之后，在转入预先制作好的培养基中进行培养的方法，此种方法非常简单，但加倍功率较低；注射法，将化学试剂注入茎尖、花托或花蕾，此法高效、省工、成本低，但注射时容易损伤植株材料，成功率较低。因此，研究一种成功率高、成本低、试验条件易控制的诱导技术具有非常重要的现实意义。
发明内容
本发明提供了一种玫瑰多倍体的培育方法，成功率高、成本低、试验条件易控制。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
（1）待母本玫瑰结蕾时，将母本玫瑰移入-5~0℃的室内，进行1~2h的预处理，用低温杀灭母本玫瑰的病毒；
（2）步骤（1）的预处理完成后，将母本玫瑰移入常温的室内；对母本玫瑰的花蕾采用秋水仙素进行喷雾法诱导；
（3）在母本玫瑰的蕾裂期，采集父本玫瑰的花粉进行人工授粉，将花粉授于母本玫瑰的柱头，授粉后进行日常管理，获得玫瑰种子；
（4）将步骤（3）所获得的种子进行花田种植或无土栽培，种植后取茎尖或根尖采用改良苯酚品红染色法制片，然后在显微镜下观察并摄像，查看其染色体的数目，染色体数目为21的植株为所获得的玫瑰三倍体品种。
进一步的，所述步骤（2）的具体操作方法为：选取两端开口的塑料袋，一端开口扎在花托靠近花枝的一端上，另一端开口扎在一根留置管上，留置管不用时自由端用塞子封闭，喷雾诱导时，打开塞子，向塑料袋内以喷雾的形式喷入浓度为0.2~0.5%的秋水仙碱溶液；更进一步的，在喷入秋水仙碱溶液之后，立即喷入浓度为0.5~0.8%的二甲基亚砜和浓度为1~3%的山梨醇混合溶液。
优选的，所述步骤（2）中，每隔2~3h向花蕾实施1次喷雾操作。
优选的，所述步骤（2）中，向花蕾实施7~9次喷雾操作。
优选的，所述步骤（1）中，常温的室内为18±3℃。
以上所述的玫瑰多倍体品种的培育方法，具有以下优点
（1）对母本玫瑰采用低温处理进行脱病毒，可降低病毒对诱导变异的影响，提高诱变多倍体的成功率：
（2）喷雾法对玫瑰花蕾进行诱导，可使诱导药剂直接作用于花蕾上，药剂用量少、成本低，且培育周期短，也不会对植株或花蕾产生损害，试验条件易于控制，成功率高；
（3）利用喷入二甲基亚砜和山梨醇的混合溶液作为渗透剂，尤其是通过喷雾法加入山梨醇，山梨醇具有良好的保湿和渗透效果，可使花蕾能长期处在湿润的环境中，更有利于秋水仙碱能均匀地渗入花蕾直达花柱中，提高诱变多倍体的成功率；
（4）将父本花粉直接授于具有2n花粉的母本花柱上，缩短了玫瑰品种的培育周期，提供了诱变玫瑰新品种的效率；
（5）本发明所获得的玫瑰三倍体幼苗，与二倍体玫瑰相比，株高、叶宽、叶厚和茎粗明显比二倍体玫瑰粗大，植株性状稳定性好、抗寒性好，可在10~12月开花。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围不限于以下实施例：
实施例1
一种玫瑰多倍体品种的培育方法，包括以下步骤：
（1）待母本玫瑰结蕾时，将母本玫瑰移入-5~0℃的室内，进行1~2h的预处理，用低温杀灭母本玫瑰的病毒；
（2）步骤（1）的预处理完成后，将母本玫瑰移入常温的室内，温度为18±3℃；对母本玫瑰的花蕾采用秋水仙素进行喷雾法诱导；
喷雾法诱导的具体过程为：选取两端开口的塑料袋，一端开口扎在花托靠近花枝的一端上，另一端开口扎在一根留置管上，留置管不用时自由端用塞子封闭，喷雾诱导时，打开塞子，向塑料袋内以喷雾的形式喷入浓度为0.3%的秋水仙碱溶液；然后又立即喷入浓度为0.6%的二甲基亚砜和浓度为2%的山梨醇混合溶液。每隔2~3h向花蕾实施1次喷雾操作，共喷雾8次。
（3）在母本玫瑰的蕾裂期，采集父本玫瑰的花粉进行人工授粉，将花粉授于母本玫瑰的柱头，授粉后进行日常管理，获得玫瑰种子；
（4）将步骤（3）所获得的种子进行花田种植或无土栽培，种植后取茎尖或根尖采用改良苯酚品红染色法制片，然后在显微镜下观察并摄像，查看其染色体的数目，染色体数目为21的植株为所获得的玫瑰三倍体品种。
实施例2
一种玫瑰多倍体品种的培育方法，包括以下步骤：
（1）待母本玫瑰结蕾时，将母本玫瑰移入-5~0℃的室内，进行1~2h的预处理，用低温杀灭母本玫瑰的病毒；
（2）步骤（1）的预处理完成后，将母本玫瑰移入常温的室内；对母本玫瑰的花蕾采用秋水仙素进行喷雾法诱导；
喷雾法诱导的具体过程为：选取两端开口的塑料袋，一端开口扎在花托靠近花枝的一端上，另一端开口扎在一根留置管上，留置管不用时自由端用塞子封闭，喷雾诱导时，打开塞子，向塑料袋内以喷雾的形式喷入浓度为0.2%的秋水仙碱溶液；然后又立即喷入浓度为0.8%的二甲基亚砜和浓度为1%的山梨醇混合溶液。每隔2~3h向花蕾实施1次喷雾操作，共喷雾9次。
（3）在母本玫瑰的蕾裂期，采集父本玫瑰的花粉进行人工授粉，将花粉授于母本玫瑰的柱头，授粉后进行日常管理，获得玫瑰种子；
（4）将步骤（3）所获得的种子进行花田种植或无土栽培，种植后取茎尖或根尖采用改良苯酚品红染色法制片，然后在显微镜下观察并摄像，查看其染色体的数目，染色体数目为21的植株为所获得的玫瑰三倍体品种。
实施例3
一种玫瑰多倍体品种的培育方法，包括以下步骤：
（1）待母本玫瑰结蕾时，将母本玫瑰移入-5~0℃的室内，进行1~2h的预处理，用低温杀灭母本玫瑰的病毒；
（2）步骤（1）的预处理完成后，将母本玫瑰移入常温的室内；对母本玫瑰的花蕾采用秋水仙素进行喷雾法诱导；
喷雾法诱导的具体过程为：选取两端开口的塑料袋，一端开口扎在花托靠近花枝的一端上，另一端开口扎在一根留置管上，留置管不用时自由端用塞子封闭，喷雾诱导时，打开塞子，向塑料袋内以喷雾的形式喷入浓度为0.5%的秋水仙碱溶液；然后又立即喷入浓度为0.5%的二甲基亚砜和浓度为3%的山梨醇混合溶液。每隔2~3h向花蕾实施1次喷雾操作，共喷雾8次。
（3）在母本玫瑰的蕾裂期，采集父本玫瑰的花粉进行人工授粉，将花粉授于母本玫瑰的柱头，授粉后进行日常管理，获得玫瑰种子；
（4）将步骤（3）所获得的种子进行花田种植或无土栽培，种植后取茎尖或根尖采用改良苯酚品红染色法制片，然后在显微镜下观察并摄像，查看其染色体的数目，染色体数目为21的植株为所获得的玫瑰三倍体品种。
从上述实施例1~3中获得的玫瑰种子中，分别选取30粒，放入温水中浸泡24h，然后采用无土栽培基质进行种子萌发，时间为30天，然后取茎尖或根尖采用改良苯酚品红染色法制片，再在显微镜下观察并摄像，查看其染色体的数目，测试结果如下：
| 发芽种子的数量 | 发芽率 | 三倍体品种的数量 | 三倍体品种比例 | |
| 实施例1 | 27 | 90% | 10 | 30% |
| 实施例2 | 24 | 80% | 7 | 23.3% |
| 实施例3 | 22 | 73.3% | 8 | 26.7% |
由上表可以看出，采用喷雾法进行诱导，对植株本身损伤较小，玫瑰种子仍保持有较高的发芽率及活性；且诱导成功率较高，获得三倍体品种的几率达30%。
Claims (6)
1.一种玫瑰多倍体品种的培育方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）待母本玫瑰结蕾时，将母本玫瑰移入-5~0℃的室内，进行1~2h的预处理，用低温杀灭母本玫瑰的病毒；
（2）步骤（1）的预处理完成后，将母本玫瑰移入常温的室内；对母本玫瑰的花蕾采用秋水仙素进行喷雾法诱导；
（3）在母本玫瑰的蕾裂期，采集父本玫瑰的花粉进行人工授粉，将花粉授于母本玫瑰的柱头，授粉后进行日常管理，获得玫瑰种子；
（4）将步骤（3）所获得的种子进行花田种植或无土栽培，种植后取茎尖或根尖采用改良苯酚品红染色法制片，然后在显微镜下观察并摄像，查看其染色体的数目，染色体数目为21的植株为所获得的玫瑰三倍体品种。
2.根据权利要求1所述的玫瑰多倍体品种的培育方法，其特征在于：
所述步骤（2）的具体操作方法为：选取两端开口的塑料袋，一端开口扎在花托靠近花枝的一端上，另一端开口扎在一根留置管上，留置管不用时自由端用塞子封闭，喷雾诱导时，打开塞子，向塑料袋内以喷雾的形式喷入浓度为0.2~0.5%的秋水仙碱溶液。
3.根据权利要求2所述的玫瑰多倍体品种的培育方法，其特征在于：
在喷入秋水仙碱溶液之后，立即喷入浓度为0.5~0.8%的二甲基亚砜和浓度为1~3%的山梨醇混合溶液。
4.根据权利要求1~3任一项所述的玫瑰多倍体品种的培育方法，其特征在于：
所述步骤（2）中，每隔2~3h向花蕾实施1次喷雾操作。
5.根据权利要求4所述的玫瑰多倍体品种的培育方法，其特征在于：
所述步骤（2）中，向花蕾实施7~9次喷雾操作。
6.根据权利要求1所述的玫瑰多倍体品种的培育方法，其特征在于：
所述步骤（1）中，常温的室内为18±3℃。
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