CN105534913B - 一种结冷胶微球固化纳米白藜芦醇的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种结冷胶微球固化纳米白藜芦醇的方法，属于白藜芦醇领域。本发明先制备出结冷胶微球并对其表面进行处理，再通过乳化法制成物理化学性质稳定的纳米白藜芦醇颗粒，将其负载结冷胶微球表面，使得白藜芦醇不仅可以具有亲水功能，不易被氧化分解，而且白藜芦醇在结冷胶微球表面的负载率高，不仅产生团聚。

Description

一种结冷胶微球固化纳米白藜芦醇的方法
技术领域
本发明公开了一种结冷胶微球固化纳米白藜芦醇的方法，属于白藜芦醇领域。
背景技术
白藜芦醇是含有芪类结构的非黄酮类多酚化合物，又称为芪三酚。广泛存在于葡萄、松树、虎杖、决明子和花生等天然植物或果实当中，主要来源于葡萄（红葡萄酒）、虎杖、花生、桑椹等植物。到目前为止至少已在21科、31属的72种植物中被发现。白藜芦醇是许多植物受到生物或非生物胁迫（如真菌感染、紫外照射等）时产生的一种植物抗毒素。白藜芦醇除了能提高植物的抗病性，研究发现它还有有益于人类健康的多种生物学活性及药理作用，深受生物医学界的重视。到目前为止，发现白藜芦醇是肿瘤的化学预防剂，也是对降低血小板聚集，预防和治疗动脉粥样硬化、心脑血管疾病的化学预防剂，同时证实白藜芦醇具有对对抗癌症的有益作用。
然而，由于白藜芦醇难溶于水，易氧化分解，致使普通口服制剂的生物利用度较低。为了提高白藜芦醇生物利用度，增加稳定性，当前主要是将其制备成环糊精包合物、纳米乳、脂质体、固体分散体等新剂型。固体脂质纳米粒利用生理相容、生物可降解的高熔点固体脂质为骨架材料，既能提高药物溶解性和靶向性，又能增强药物稳定性和缓控释性。食品脂质纳米粒使用高熔点的硬脂酸甘油酯为载体，结晶度较高，脂质结晶容易导致分散在脂质晶格间的食品因子被排挤泄露，脂质粒子容易相互融合，造成负载率低、团聚、稳定性差等问题。
发明内容
本发明主要解决的技术问题：针对目前由于白藜芦醇难溶于水，自身性质不稳定，在光、热等作用下容易被氧化分解，传统采用的硬脂酸甘油酯为白藜芦醇载体容易导致粒子相互融合，造成负载率低、团聚、稳定性差的问题，提供了一种结冷胶微球固化纳米白藜芦醇的方法，本发明先制备出结冷胶微球并对其表面进行处理，再通过乳化法制成物理化学性质稳定的纳米白藜芦醇颗粒，将其负载结冷胶微球表面，使得白藜芦醇不仅可以具有亲水功能，不易被氧化分解，而且白藜芦醇在结冷胶微球表面的负载率高，不仅产生团聚。
为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：
（1）称取100～200g结冷胶加入1L的三口烧瓶中，再加入500～600mL离子水，放入水浴中在70～80℃恒温下搅拌至胶体充分溶解，向结冷胶溶液中按体积比5:1加入油酸，在1000～1200r/min转速下搅拌10～20min，即可得到结冷胶/油酸乳液；
(2)将上述乳液倒入1L的烧杯中，向杯中加入30～50mL色拉油，放在0～5℃冰浴中搅拌15～20min，将搅拌后的乳液再放入-10℃的冰箱中冷却静置20～30min，静置后取出，将烧杯中乳液用丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液进行冲洗4～6次，将冲洗后乳液放入65～75℃的烘箱中干燥3～5h，干燥后取出、过筛，收集100～150μm的结冷胶微球，将微球进行用砂纸轻轻打磨进行表面处理后备用，所述的丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液质量比为5:3:2；
（3）向500mL的烧杯中分别加入5～8g单硬脂酸甘油酯、3～5g大豆卵磷脂、50～80mL丙酮，将烧杯放入水浴中加热至60～80℃，并搅拌至固体完全溶解，再向溶液中加入8～10g白藜芦醇，将得到的混合溶液在搅拌下加入到150～250mL的蒸馏水中，并称取100～200mL质量分数0.1%泊洛沙姆溶液加入蒸馏水中，搅拌混合均匀，将混合溶液转移到透析袋中透析10～12h，将透析后得到的分散液用孔径为180～200nm的过滤膜进行过滤，将过滤得到的物质进行冷冻干燥，即可得到纳米白藜芦醇颗粒；
（4）取3～5g上述制得纳米白藜芦醇颗粒和步骤（2）结冷胶微球按溶解在200mL乙二醇中，进行超声振荡15～20min，形成有机相，在800～1000r/min的转速下，用注射器取有机相缓慢注射到200mL的蒸馏水中，控制在100～120min注射完全，注射后在70～80℃下搅拌蒸馏水至乙二醇完全蒸发，将剩下的蒸馏水进行旋转蒸发至原来体积1/10，将浓缩液快速加入到冰水中，并保持在-5～5℃恒温下搅拌80～100min，即可得到悬浊液，将悬浊液进行冷冻干燥，即可得到淡黄色粉末，所述的纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球的质量比5:1。
本发明的应用方法：本发明制得的产品了可用适当工艺制成各种剂型，如粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、溶液剂、油膏剂、霜剂等，作为药品、保健品、化妆品；也可以作为食品添加剂加入食品、饮料、制成各种形式的保健食品、饮料、酒类，可以直接溶于水相中，方便其操作使用。
本发明的有益效果是：
（1）本发明通过乳化法制成物理化学性质稳定的纳米白藜芦醇颗粒，将其负载结冷胶微球表面，使得白藜芦醇可以具有亲水功能，不易被氧化分解；
（2）本发明使纳米白藜芦醇颗粒在结冷胶微球表面的负载率高，不仅产生团聚。
具体实施方式
首先称取100～200g结冷胶加入1L的三口烧瓶中，再加入500～600mL离子水，放入水浴中在70～80℃恒温下搅拌至胶体充分溶解，向结冷胶溶液中按体积比5:1加入油酸，在1000～1200r/min转速下搅拌10～20min，即可得到结冷胶/油酸乳液；将乳液倒入1L的烧杯中，向杯中加入30～50mL色拉油，放在0～5℃冰浴中搅拌15～20min，将搅拌后的乳液再放入-10℃的冰箱中冷却静置20～30min，静置后取出，将烧杯中乳液用丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液进行冲洗4～6次，将冲洗后乳液放入65～75℃的烘箱中干燥3～5h，干燥后取出、过筛，收集100～150μm的结冷胶微球，将微球进行用砂纸轻轻打磨进行表面处理后备用，所述的丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液质量比为5:3:2；向500mL的烧杯中分别加入5～8g单硬脂酸甘油酯、3～5g大豆卵磷脂、50～80mL丙酮，将烧杯放入水浴中加热至60～80℃，并搅拌至固体完全溶解，再向溶液中加入8～10g白藜芦醇，将得到的混合溶液在搅拌下加入到150～250mL的蒸馏水中，并称取100～200mL质量分数0.1%泊洛沙姆溶液加入蒸馏水中，搅拌混合均匀，将混合溶液转移到透析袋中透析10～12h，将透析后得到的分散液用孔径为180～200nm的过滤膜进行过滤，将过滤得到的物质进行冷冻干燥，即可得到纳米白藜芦醇颗粒；取3～5g制得纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球按溶解在200mL乙二醇中，进行超声振荡15～20min，形成有机相，在800～1000r/min的转速下，用注射器取有机相缓慢注射到200mL的蒸馏水中，控制在100～120min注射完全，注射后在70～80℃下搅拌蒸馏水至乙二醇完全蒸发，将剩下的蒸馏水进行旋转蒸发至原来体积1/10，将浓缩液快速加入到冰水中，并保持在-5～5℃恒温下搅拌80～100min，即可得到悬浊液，将悬浊液进行冷冻干燥，即可得到淡黄色粉末，所述的纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球的质量比5:1。
实例1
首先称取100g结冷胶加入1L的三口烧瓶中，再加入500mL离子水，放入水浴中在70℃恒温下搅拌至胶体充分溶解，向结冷胶溶液中按体积比5:1加入油酸，在1000r/min转速下搅拌10min，即可得到结冷胶/油酸乳液；将乳液倒入1L的烧杯中，向杯中加入30mL色拉油，放在0～5℃冰浴中搅拌15min，将搅拌后的乳液再放入-10℃的冰箱中冷却静置20min，静置后取出，将烧杯中乳液用丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液进行冲洗4次，将冲洗后乳液放入65℃的烘箱中干燥3h，干燥后取出、过筛，收集100μm的结冷胶微球，将微球进行用砂纸轻轻打磨进行表面处理后备用，所述的丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液质量比为5:3:2；向500mL的烧杯中分别加入5g单硬脂酸甘油酯、3g大豆卵磷脂、50mL丙酮，将烧杯放入水浴中加热至60℃，并搅拌至固体完全溶解，再向溶液中加入8g白藜芦醇，将得到的混合溶液在搅拌下加入到150mL的蒸馏水中，并称取100mL质量分数0.1%泊洛沙姆溶液加入蒸馏水中，搅拌混合均匀，将混合溶液转移到透析袋中透析10h，将透析后得到的分散液用孔径为180nm的过滤膜进行过滤，将过滤得到的物质进行冷冻干燥，即可得到纳米白藜芦醇颗粒；取3g制得纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球按溶解在200mL乙二醇中，进行超声振荡15min，形成有机相，在800r/min的转速下，用注射器取有机相缓慢注射到200mL的蒸馏水中，控制在100min注射完全，注射后在70℃下搅拌蒸馏水至乙二醇完全蒸发，将剩下的蒸馏水进行旋转蒸发至原来体积1/10，将浓缩液快速加入到冰水中，并保持在-5℃恒温下搅拌80min，即可得到悬浊液，将悬浊液进行冷冻干燥，即可得到淡黄色粉末，所述的纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球的质量比5:1。
本发明制得的产品了可用适当工艺制成各种剂型，如粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、溶液剂、油膏剂、霜剂等，作为药品、保健品、化妆品；也可以作为食品添加剂加入食品、饮料、制成各种形式的保健食品、饮料、酒类，可以直接溶于水相中，方便其操作使用。
实例2
首先称取150g结冷胶加入1L的三口烧瓶中，再加入550mL离子水，放入水浴中在75℃恒温下搅拌至胶体充分溶解，向结冷胶溶液中按体积比5:1加入油酸，在1100r/min转速下搅拌15min，即可得到结冷胶/油酸乳液；将乳液倒入1L的烧杯中，向杯中加入40mL色拉油，放在3℃冰浴中搅拌17min，将搅拌后的乳液再放入-10℃的冰箱中冷却静置25min，静置后取出，将烧杯中乳液用丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液进行冲洗5次，将冲洗后乳液放入70℃的烘箱中干燥4h，干燥后取出、过筛，收集125μm的结冷胶微球，将微球进行用砂纸轻轻打磨进行表面处理后备用，所述的丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液质量比为5:3:2；向500mL的烧杯中分别加入6g单硬脂酸甘油酯、4g大豆卵磷脂、65mL丙酮，将烧杯放入水浴中加热至70℃，并搅拌至固体完全溶解，再向溶液中加入9g白藜芦醇，将得到的混合溶液在搅拌下加入到200mL的蒸馏水中，并称取150mL质量分数0.1%泊洛沙姆溶液加入蒸馏水中，搅拌混合均匀，将混合溶液转移到透析袋中透析11h，将透析后得到的分散液用孔径为190nm的过滤膜进行过滤，将过滤得到的物质进行冷冻干燥，即可得到纳米白藜芦醇颗粒；取4g制得纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球按溶解在200mL乙二醇中，进行超声振荡17min，形成有机相，在900r/min的转速下，用注射器取有机相缓慢注射到200mL的蒸馏水中，控制在110min注射完全，注射后在75℃下搅拌蒸馏水至乙二醇完全蒸发，将剩下的蒸馏水进行旋转蒸发至原来体积1/10，将浓缩液快速加入到冰水中，并保持在0℃恒温下搅拌90min，即可得到悬浊液，将悬浊液进行冷冻干燥，即可得到淡黄色粉末，所述的纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球的质量比5:1。
本发明制得的产品了可用适当工艺制成各种剂型，如粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、溶液剂、油膏剂、霜剂等，作为药品、保健品、化妆品；也可以作为食品添加剂加入食品、饮料、制成各种形式的保健食品、饮料、酒类，可以直接溶于水相中，方便其操作使用。
实例3
首先称取200g结冷胶加入1L的三口烧瓶中，再加入600mL离子水，放入水浴中在80℃恒温下搅拌至胶体充分溶解，向结冷胶溶液中按体积比5:1加入油酸，在1200r/min转速下搅拌20min，即可得到结冷胶/油酸乳液；将乳液倒入1L的烧杯中，向杯中加入50mL色拉油，放在5℃冰浴中搅拌20min，将搅拌后的乳液再放入-10℃的冰箱中冷却静置30min，静置后取出，将烧杯中乳液用丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液进行冲洗6次，将冲洗后乳液放入75℃的烘箱中干燥5h，干燥后取出、过筛，收集150μm的结冷胶微球，将微球进行用砂纸轻轻打磨进行表面处理后备用，所述的丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液质量比为5:3:2；向500mL的烧杯中分别加入8g单硬脂酸甘油酯、5g大豆卵磷脂、80mL丙酮，将烧杯放入水浴中加热至80℃，并搅拌至固体完全溶解，再向溶液中加入10g白藜芦醇，将得到的混合溶液在搅拌下加入到250mL的蒸馏水中，并称取200mL质量分数0.1%泊洛沙姆溶液加入蒸馏水中，搅拌混合均匀，将混合溶液转移到透析袋中透析12h，将透析后得到的分散液用孔径为200nm的过滤膜进行过滤，将过滤得到的物质进行冷冻干燥，即可得到纳米白藜芦醇颗粒；取5g制得纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球按溶解在200mL乙二醇中，进行超声振荡20min，形成有机相，在1000r/min的转速下，用注射器取有机相缓慢注射到200mL的蒸馏水中，控制在120min注射完全，注射后在80℃下搅拌蒸馏水至乙二醇完全蒸发，将剩下的蒸馏水进行旋转蒸发至原来体积1/10，将浓缩液快速加入到冰水中，并保持在5℃恒温下搅拌100min，即可得到悬浊液，将悬浊液进行冷冻干燥，即可得到淡黄色粉末，所述的纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球的质量比5:1。
本发明制得的产品与食品或药品上可接受的辅剂、赋形剂混合后，用适当工艺制成各种剂型，如粉剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、溶液剂、油膏剂、霜剂等，作为药品、保健品、化妆品；也可以作为食品添加剂加入食品、饮料、制成各种形式的保健食品、饮料、酒类，可以直接溶于水相中，方便其操作使用。

Claims (1)

1.一种结冷胶微球固化纳米白藜芦醇的方法，其特征在于具体步骤为：
（1）称取100～200g结冷胶加入1L的三口烧瓶中，再加入500～600mL离子水，放入水浴中在70～80℃恒温下搅拌至胶体充分溶解，向结冷胶溶液中按体积比5:1加入油酸，在1000～1200r/min转速下搅拌10～20min，即可得到结冷胶/油酸乳液；
(2)将上述乳液倒入1L的烧杯中，向杯中加入30～50mL色拉油，放在0～5℃冰浴中搅拌15～20min，将搅拌后的乳液再放入-10℃的冰箱中冷却静置20～30min，静置后取出，将烧杯中乳液用丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液进行冲洗4～6次，将冲洗后乳液放入65～75℃的烘箱中干燥3～5h，干燥后取出、过筛，收集100～150μm的结冷胶微球，将微球进行用砂纸轻轻打磨进行表面处理后备用，所述的丙酮、甘油、碳酸二乙酯的混合溶液质量比为5:3:2；
（3）向500mL的烧杯中分别加入5～8g单硬脂酸甘油酯、3～5g大豆卵磷脂、50～80mL丙酮，将烧杯放入水浴中加热至60～80℃，并搅拌至固体完全溶解，再向溶液中加入8～10g白藜芦醇，将得到的混合溶液在搅拌下加入到150～250mL的蒸馏水中，并称取100～200mL质量分数0.1%泊洛沙姆溶液加入蒸馏水中，搅拌混合均匀，将混合溶液转移到透析袋中透析10～12h，将透析后得到的分散液用孔径为180～200nm的过滤膜进行过滤，将过滤得到的物质进行冷冻干燥，即可得到纳米白藜芦醇颗粒；
（4）取3～5g上述制得纳米白藜芦醇颗粒和步骤（2）结冷胶微球按溶解在200mL乙二醇中，进行超声振荡15～20min，形成有机相，在800～1000r/min的转速下，用注射器取有机相缓慢注射到200mL的蒸馏水中，控制在100～120min注射完全，注射后在70～80℃下搅拌蒸馏水至乙二醇完全蒸发，将剩下的蒸馏水进行旋转蒸发至原来体积1/10，将浓缩液快速加入到冰水中，并保持在-5～5℃恒温下搅拌80～100min，即可得到悬浊液，将悬浊液进行冷冻干燥，即可得到淡黄色粉末，所述的纳米白藜芦醇颗粒和结冷胶微球的质量比5:1。
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