CN105510460A - 一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法 - Google Patents

一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN105510460A
CN105510460A CN201510889421.9A CN201510889421A CN105510460A CN 105510460 A CN105510460 A CN 105510460A CN 201510889421 A CN201510889421 A CN 201510889421A CN 105510460 A CN105510460 A CN 105510460A
Authority
CN
China
Prior art keywords
acid
lactone
glucaric acid
sample
chromatographic column
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201510889421.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105510460B (zh
Inventor
王淼
邓莉川
吕梦娴
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangnan University
Original Assignee
Jiangnan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangnan University filed Critical Jiangnan University
Priority to CN201510889421.9A priority Critical patent/CN105510460B/zh
Publication of CN105510460A publication Critical patent/CN105510460A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105510460B publication Critical patent/CN105510460B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/38—Flow patterns
    • G01N30/46—Flow patterns using more than one column
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/027—Liquid chromatography

Abstract

本发明公开了一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法，属于分离检测技术领域。本发明主要利用SB-Aq色谱柱与氨基色谱柱联合，对混合样品中葡萄糖系列酸及内酯(葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸与葡萄糖二酸1,4-内酯)进行定性、定量检测。本发明首先采用SB-Aq色谱柱对样品中的葡萄糖二酸-1,4-内酯直接定量分析，然后通过氨基色谱柱对样品中的葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸直接定量分析，再通过计算得到样品中葡萄糖一酸的含量。本发明前处理简便、灵敏度高、测定组分多，对于提高检测工作效率、控制红茶菌生产质量和提高功能因子产量，具有重要的意义。

Description

一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法
技术领域
本发明涉及一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法，具体涉及高效液相色谱对红茶菌发酵产生的葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸与葡萄糖二酸-1,4-内酯(DSL)的分离检测，属于分离检测技术领域。
背景技术
红茶菌在发酵过程中，红茶培养液中的葡萄糖被醋酸菌氧化为葡萄糖酸类及乙酸等代谢产物，其中葡萄糖酸类包括葡萄糖一酸，逐步转化为葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸、葡萄糖二酸-1,4-内酯。
葡萄糖醛酸是人体肝脏中最主要的解毒物质之一，可与外源的毒素或人体代谢产生的内源有毒物质相结合，变成水溶性的葡萄糖苷酸，并一起排出体外，从而使可能引起身体各种病变的或已经发生病变的毒素被及时清除，起到防病和治病的良好效果；葡萄糖二酸及其衍生物葡萄糖二酸-1,4-内酯能够有效抑制β-葡萄糖醛酸酶的活性，通过参与人体代谢活动调节体内激素环境发挥化学防癌作用，预防和有效抑制如食道癌、结肠癌、激素依赖性癌症乳腺癌、肝癌、皮肤癌和膀胱癌等病症；葡萄糖二酸-1,4-内酯还具有很强的解毒和抗氧化性能，它可以抑制胰岛β细胞凋亡减轻四氧嘧啶(ALX)诱导的糖尿病，缓解盐酸伊立替康(CPT-11)引起的肠道黏膜损伤。
国内外学者对葡萄糖系列酸及内酯的分离检测也有不少研究，主要集中在葡萄糖二酸、葡萄糖二酸-1,4-内酯、葡萄糖醛酸中其中一种或两种的检测分离。检测方法主要有高效液相色谱法和气相色谱法，其中气相色谱法对于样品前期处理过程相对繁杂，检测效率较低；高效液相色谱法主要采用C18柱和SB-Aq色谱柱，该方法前处理简便、灵敏度高、检测效果较好。但同时检测分离葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸与葡萄糖二酸-1,4-内酯的方法国内外未见报道，因此，目前需要探索一种新型、简便、高效的分离方法把这四种葡萄糖系列酸及内酯进行有效的分离测定，切实解决目前存在的葡萄糖酸分离不开、检测不出、方法繁杂、无法定量等问题，推动红茶菌发酵饮料产业的发展。
发明内容
为了克服上述问题，本发明针对目前由葡萄糖衍生而成的葡萄糖系列酸及其内酯在分离过程中存在的缺陷和局限性，提供了一种能够定性、定量检测葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸与葡萄糖二酸1,4-内酯的方法。本发明前处理简便、灵敏度高、测定组分多，不仅能有效的分离检测这四种葡萄糖酸及内酯，还能对其进行定量分析，对于提高检测工作效率、控制红茶菌生产质量和提高功能因子产量，具有重要的意义。
本发明提供的一种定性或定量检测葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸与葡萄糖二酸1,4-内酯的方法，是先通过SB-Aq色谱柱对样品中的葡萄糖二酸-1,4-内酯直接进行定性或定量分析，若检测结果显示样品中不含葡萄糖二酸-1,4-内酯，则通过氨基色谱柱对样品中的葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸直接进行定性或定量分析；若SB-Aq色谱柱检测结果显示含有葡萄糖二酸-1,4-内酯，则通过氨基色谱柱对样品中的葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸直接进行定性或定量分析，再通过这4种化合物的总量计算分析得到样品中葡萄糖一酸的含量。
在本发明的一种实施方式中，所述方法中利用SB-Aq色谱柱进行检测的色谱条件是：AgilentSB-Aq色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相为pH2.5的0.025mol/LKH2PO4，流速0.3-0.7mL/min(最佳为0.5mL/min)，柱温25～30℃(最佳为30℃)，进样量10μL，紫外检测波长为210nm。
在本发明的一种实施方式中，所述SB-Aq色谱条件条件下，葡萄糖一酸、葡萄糖二酸、葡萄糖醛酸的保留时间接近，但三者均与葡萄糖二酸-1,4-内酯得到较好的分离。
在本发明的一种实施方式中，所述SB-Aq色谱条件条件下，葡萄糖一酸、葡萄糖二酸、葡萄糖醛酸的保留时间均在5.20-6.0min，而葡萄糖二酸-1,4-内酯保留时间为6.7-7.1min；葡萄糖二酸-1,4-内酯的回归方程y＝1.0×106x-81382，相关系数R为0.9998。
在本发明的一种实施方式中，所述方法利用氨基色谱柱进行检测的色谱条件是：YMC-PackPolyamineⅡ氨基色谱柱，流动相为含有乙腈10％的80～120mM/L磷酸二氢铵溶液(最佳为100mM/L)，流速为0.4～1.0mL/min(最佳0.5mL/min)，柱温25～30℃(最佳为30℃)，进样量25μL，紫外检测波长210nm。
在本发明的一种实施方式中，所述氨基色谱柱色谱条件下，葡萄糖一酸和葡萄糖二酸-1,4-内酯的保留时间接近，而葡萄糖二酸和葡萄糖醛酸均能够与葡萄糖一酸和/或葡萄糖二酸-1,4-内酯分离。
在本发明的一种实施方式中，所述氨基色谱柱色谱条件下，葡萄糖醛酸的回归方程y＝1.3×106x+19744，相关系数R为0.9997；葡萄糖二酸的回归方程y＝4.3×105x+11113，相关系数R为0.9995；葡萄糖二酸-1,4-内酯的回归方程y＝1.6×106x-4.4×105，相关系数R为0.9998；葡萄糖一酸的回归方程y＝1.4×106x-2.7×105，相关系数R为0.9998。
在本发明的一种实施方式中，所述样品是红茶菌的发酵液。
在本发明的一种实施方式中，所述样品是将红茶菌的发酵菌液去除菌体、蛋白类大分子物质后收集得到的滤液。
本发明的有益效果：
本发明的方法通过利用SB-Aq色谱柱与氨基色谱柱联合检测，对混合样品中葡萄糖系列酸及内酯(葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸与葡萄糖二酸1,4-内酯)进行定性、定量检测，克服了目前存在的葡萄糖酸分离不开、检测不出、方法繁杂、无法定量等问题，推动红茶菌发酵饮料产业的发展。本发明的方法简便、高效、灵敏准确、精密度、稳定性好。
附图说明
图1是葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸、葡萄糖二酸-1,4-内酯混合标准品的氨基柱色谱图；1是葡萄糖二酸，2是葡萄糖一酸和葡萄糖二酸-1,4-内酯的混合，3是葡萄糖醛酸。
图2是葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸、葡萄糖二酸-1,4-内酯混合标准品的的SB-Aq色谱图；1是葡萄糖一酸、二酸、醛酸的混合，2是葡萄糖二酸-1,4-内酯。
图3是红茶发酵液的SB-Aq色谱图；1是葡萄糖一酸、二酸、醛酸混合，2是葡萄糖二酸-1,4-内酯。
图4是红薯发酵液的SB-Aq色谱图；1是葡萄糖一酸、二酸、醛酸混合，2是葡萄糖二酸-1,4-内酯。
图5是红薯发酵液的氨基柱色谱图；1是葡萄糖二酸，2是葡萄糖一酸、葡萄糖二酸-1,4-内酯混合，3是葡萄糖醛酸。
具体实施方式
实施例1：SB-Aq色谱柱和氨基色谱柱联合检测混合样品中葡萄糖系列酸及内酯
通过以下方法实现：
(1)分别用流动相0.025mol/LKH2PO4(pH2.5)溶液配制葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸钙和葡萄糖二酸-1,4-内酯标准样品各5mg/mL，经0.22μm微孔滤头过滤后，4个标品各取500μL混合，即浓度为1.25mg/mL的混合标准品，分别进行高效液相色谱测定。采用AgilentSB-Aq色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，色谱条件：流动相为0.025mol/LKH2PO4(pH2.5)，流速0.5mL/min，柱温30℃，进样量10μL，紫外检测波长为210nm。在此检测条件下，葡萄糖一酸、葡萄糖二酸、葡萄糖醛酸的保留时间接近，但三者均与葡萄糖二酸-1,4-内酯能够得到较好的分离(图1)。
(2)分别用流动相中100mM/L磷酸二氢铵溶液配制葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸钙和葡萄糖二酸-1,4-内酯标准样品各5mg/mL，pH为弱酸性，经0.22μm微孔滤头过滤后，4个标品各取500μL混合，即浓度为1.25mg/mL的混合标准品，分别进行高效液相色谱测定。采用YMC-PackPolyamineⅡ氨基色谱柱，色谱条件：流动相为100mM/L磷酸二氢铵(含乙腈10％)溶液，流速为0.5mL/min，柱温30℃，进样量25μL，紫外检测波长210nm。在此检测条件下，葡萄糖一酸和葡萄糖二酸-1,4-内酯的保留时间接近，色谱峰重叠，较难分开，但两者均与葡萄糖二酸、葡萄糖醛酸能够得到较好的分离(图2)。
本发明可以先通过SB-Aq色谱柱对样品中的葡萄糖二酸-1,4-内酯直接进行定性、定量分析，若检测结果显示样品中不含葡萄糖二酸-1,4-内酯，则可以通过氨基色谱柱对样品中的葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸直接进行定性、定量分析；若SB-Aq色谱柱检测结果显示含有葡萄糖二酸-1,4-内酯，则可以通过氨基色谱柱对样品中的葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸直接进行定性、定量分析，再通过计算分析得到样品中葡萄糖一酸的含量。
本发明以峰面积y对质量浓度x(g/L)，绘制标准曲线，将各标准品溶液适当稀释，根据噪声大小与峰面积，以3倍信噪比(S/N)计算出最小检出限，结果如表1、表2。由表1可见本发明中SB-Aq色谱柱定量灵敏准确、精密度和稳定性较好、回收率高。由表2可见本发明中采用的氨基柱灵敏度高、精密度好且回收率高，但在对该发明进行稳定性检测中发现，氨基柱在运作8h后样品的保留时间均会延迟(约30秒)，而相同样品的峰面积之间RSD(％)仍小于3％，故在检测未知样品之前可以重新制备标准品进行检测，再对照定性，在实验结束后需对氨基柱进行清洗和重生，延长氨基柱使用寿命。
表1SB-Aq柱检测的标品保留时间、回归分析、检出限、精密度、回收率
表2氨基柱检测的标品保留时间、回归分析、检出限、精密度、回收率
实施例2
SB-Aq色谱柱测定红茶发酵液中的葡萄糖二酸-1,4-内酯的含量。
(1)菌液样品前处理：取菌液500μL，置于3K超滤管中离心超滤，去除菌体、蛋白等大分子物质，收集滤液置于2mL离心管中。
(2)采用AgilentSB-Aq色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，色谱条件：流动相为0.025mol/LKH2PO4(pH2.5)，流速0.5mL/min，柱温30℃，进样量10μL，紫外检测波长为210nm。将处理好的菌液上样，得到红茶发酵液的SB-Aq色谱图(图3)，保留时间6.867min为葡萄糖二酸-1,4-内酯，其峰面积为3234720，根据葡萄糖二酸-1,4-内酯在SB-Aq色谱柱上测得的回归方程计算可知该样品中葡萄糖二酸-1,4-内酯的浓度为3.32g/L。
实施例3
氨基柱/SB-Aq色谱柱结合分离并测定红薯发酵液中的葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸和葡萄糖二酸-1,4-内酯的含量。
(1)菌液样品前处理：取菌液500μL，置于3K超滤管中离心超滤，去除菌体、蛋白等大分子物质，收集滤液置于2mL离心管中。
(2)采用AgilentSB-Aq色谱柱，色谱条件：流动相为0.025mol/LKH2PO4(pH2.5)，流速0.5mL/min，柱温30℃，进样量10μL，紫外检测波长为210nm。将处理好的菌液上样，得到红薯发酵液的SB-Aq色谱图(图4)，保留时间6.877min为葡萄糖二酸-1,4-内酯，其峰面积为863069，根据葡萄糖二酸-1,4-内酯在SB-Aq色谱柱上测得的回归方程计算可知该样品中葡萄糖二酸-1,4-内酯的浓度为0.94g/L。
(3)采用YMC-PackPolyamineⅡ氨基色谱柱，色谱条件：流动相为100mM/L磷酸二氢铵(含乙腈10％)溶液，流速为0.5mL/min，柱温30℃，进样量25μL，紫外检测波长210nm。将处理好的菌液调节pH至弱酸性后上样，得到红薯发酵液的氨基色谱图(图5)，保留时间为10.017min(峰面积为1119125)是葡萄糖二酸，其浓度为1.58g/L；保留时间为10.384min(峰面积为2662803)是葡萄糖一酸和葡萄糖二酸-1,4-内酯混合，根据已知的葡萄糖二酸-1,4-内酯浓度以标准曲线法计算葡萄糖一酸浓度为1.33g/L；保留时间为11.851min(峰面积为1985161)是葡萄糖醛酸，其浓度为1.51g/L。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (10)

1.一种定性或定量检测葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸、葡萄糖二酸与葡萄糖二酸1,4-内酯的方法，其特征在于，所述方法是先通过SB-Aq色谱柱对样品中的葡萄糖二酸-1,4-内酯直接进行定性或定量分析，若检测结果显示样品中不含葡萄糖二酸-1,4-内酯，则通过氨基色谱柱对样品中的葡萄糖一酸、葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸直接进行定性或定量分析；若SB-Aq色谱柱检测结果显示含有葡萄糖二酸-1,4-内酯，则通过氨基色谱柱对样品中的葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸直接进行定性或定量分析，再通过这4种化合物的总量计算分析得到样品中葡萄糖一酸的含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法中利用SB-Aq色谱柱进行检测的色谱条件是：AgilentSB-Aq色谱柱，流动相为pH2.5的0.025mol/LKH2PO4，流速为0.3-0.7mL/min，柱温25～30℃，紫外检测波长为210nm。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述流速为0.5mL/min，柱温30℃。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法利用氨基色谱柱进行检测的色谱条件是：YMC-PackPolyamineⅡ氨基色谱柱，流动相为含有乙腈10％的80～120mM/L磷酸二氢铵溶液，流速为0.4～1.0mL/min，柱温25～30℃，紫外检测波长210nm。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸二氢铵溶液为100mM/L，流速为0.5mL/min，柱温30℃，紫外检测波长210nm。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品是红茶菌的发酵液。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述样品是将红茶菌的发酵菌液去除菌体、蛋白类大分子物质后收集得到的滤液。
8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述色谱条件下，葡萄糖一酸、葡萄糖二酸、葡萄糖醛酸的保留时间接近，能够将葡萄糖二酸-1,4-内酯与其他三者分离。
9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述色谱条件下，葡萄糖一酸和葡萄糖二酸-1,4-内酯的保留时间接近，而葡萄糖二酸和葡萄糖醛酸均能够与葡萄糖一酸和/或葡萄糖二酸-1,4-内酯分离。
10.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述色谱条件下，葡萄糖二酸-1,4-内酯的回归方程y＝1.0×106x-81382，相关系数R为0.9998。
CN201510889421.9A 2015-12-07 2015-12-07 一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法 Active CN105510460B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510889421.9A CN105510460B (zh) 2015-12-07 2015-12-07 一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510889421.9A CN105510460B (zh) 2015-12-07 2015-12-07 一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105510460A true CN105510460A (zh) 2016-04-20
CN105510460B CN105510460B (zh) 2017-07-18

Family

ID=55718590

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510889421.9A Active CN105510460B (zh) 2015-12-07 2015-12-07 一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN105510460B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109490461A (zh) * 2017-09-12 2019-03-19 北京凯莱天成医药科技有限公司 达格列净中间体a中葡萄糖酸内酯残留量的检测方法
CN111208223A (zh) * 2020-01-13 2020-05-29 浙江大学 一种用于心脏死亡后捐献受体术前预警移植肾延迟复功的代谢物组合及其筛选方法
CN112305139A (zh) * 2019-07-24 2021-02-02 中国科学院大连化学物理研究所 一种增强氨基柱稳定性的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060160237A1 (en) * 2004-12-06 2006-07-20 Applera Corporation Method of screening urine for organic acids
CN104312987A (zh) * 2014-10-21 2015-01-28 江南大学 一种生物合成葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060160237A1 (en) * 2004-12-06 2006-07-20 Applera Corporation Method of screening urine for organic acids
CN104312987A (zh) * 2014-10-21 2015-01-28 江南大学 一种生物合成葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KAN WANG ET AL.: "Determination of d-saccharic acid-1,4-lactone from brewed kombucha broth by high-performance capillary electrophoresis", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》 *
吴薇等: "红茶菌中D- 葡萄糖二酸1,4 内酯的气相色谱检测法", 《食品科学》 *
张红等: "高效液相色谱法测定红茶菌中的功能因子", 《食品科技》 *
朱璇等: "反相离子对液相色谱测定葡萄糖化学氧化过程中的6种有机酸", 《分析试验室》 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109490461A (zh) * 2017-09-12 2019-03-19 北京凯莱天成医药科技有限公司 达格列净中间体a中葡萄糖酸内酯残留量的检测方法
CN112305139A (zh) * 2019-07-24 2021-02-02 中国科学院大连化学物理研究所 一种增强氨基柱稳定性的方法
CN111208223A (zh) * 2020-01-13 2020-05-29 浙江大学 一种用于心脏死亡后捐献受体术前预警移植肾延迟复功的代谢物组合及其筛选方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN105510460B (zh) 2017-07-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Xiong et al. A rapid and simple HPLC–FLD screening method with QuEChERS as the sample treatment for the simultaneous monitoring of nine bisphenols in milk
CN103713077B (zh) 高效液相色谱法测定红曲中γ-氨基丁酸含量的方法
CN103543218B (zh) 一种测定富含蛋白质样品中四环素类抗生素残留的方法
Misra et al. Study of extraction and HPTLC-UV method for estimation of caffeine in marketed tea (Camellia sinensis) granules
CN105510460A (zh) 一种定量检测葡萄糖系列酸及内酯的方法
Xinmin et al. Determination of glucosamine and lactose in milk-based formulae by high-performance liquid chromatography
CN104678031B (zh) 高效液相色谱法检测苍术苷和/或羧基苍术苷的方法
CN106596771B (zh) 一种测定大豆肽蛋白质粉中β-羟基-β-甲基丁酸含量的方法
CN105116063A (zh) 一种牛奶产品中头孢类药物残留的多联检测方法
CN109709258A (zh) 一种检测猪可食性组织中氟苯尼考总残留物的方法及应用
CN103197022A (zh) 一种检测食醋中所含氨基酸的方法
CN103217498A (zh) 一种液-质联用检测奶粉中双氰胺的方法及样品前处理方法
Swamy et al. A validated RP-HPLC method for Simultanious determination of Metformin and Canagliflozin in Pharmaceutical Formulation
CN115372497B (zh) 一种小活络丸中6种生物碱成分的含量测定方法
CN103728389B (zh) 使用hplc法测定丁酸和丁酸钠的方法
CN106770765B (zh) 一种阿苯达唑及其代谢物的检测方法及应用
CN104535683B (zh) 一种精氨洛芬中游离布洛芬的高效液相色谱测定方法
CN109884239A (zh) 一种高效薄层色谱联用明亮发光杆菌生物传感快速定量筛检水果中克菌丹残留的方法
CN109738554A (zh) 固相萃取-液相色谱联用测定水中微量苯乙酸的方法
Ding et al. Determination of 5′-mononucleotides in infant formula by capillary electrophoresis with ultraviolet detection
CN111208214B (zh) 液相法检测药物制剂中吐温含量的方法
CN106198821A (zh) 一种检测牛奶中磺胺类抗生素残留的方法
CN107290468B (zh) 一种液质联用定量检测小儿消食片中槟榔碱含量的方法
Amritkar et al. Single-Laboratory Validation of AOAC Official Method 2011.10 for Vitamin B12 in ‘Indian’Infant and Pediatric Formulas and Adult Nutritionals
CN102866221B (zh) 一种乳制品中蛋白掺假的分析方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant