CN105483173A - 一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,该诱导子组合物优选了葡萄糖、肌醇、硫胺素、聚乙烯酰胺、吡哆醇、泛酸钙、钴胺素、天冬氨酸、叶酸、橙皮油等成分并对其用量配比进行了合理化设计,其使用方法是直接添加至细胞培养液中,可以在培养开始阶段添加也可以在细胞进入培养稳定期后添加。实验发现,添加本发明诱导子组合物后虽然不会直接提升细胞培养密度,但是同等生物量的细胞培养液中紫杉醇产率显著提升,这表明本发明诱导子组合物对红豆杉细胞代谢特性产生了一定的影响。本发明以创新性的技术手段实现了突出的技术效果,通过本发明的诱导子组合物有望全面提升紫杉醇的规模化生产现状,带来广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及细胞工程技术领域,具体涉及一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物。
背景技术
紫杉醇(paclitaxel)是从红豆杉科红豆杉属(Taxus)植物的树皮中提取得到的二萜类化合物。它是一种新型的微管稳定剂,具有独特抗癌活性,被美国国立癌症研究所认为是近15~20年来肿瘤化疗的最重要的进展。作为晚期卵巢癌的二线治疗药,至今已在40多个国家获准上市,并在乳腺癌、肺癌、白血病、胃肠道癌及介入治疗后的血管再狭窄等治疗上显示了令人鼓舞的疗效。紫杉醇由于资源匮乏和水溶性低的问题而限制了它的临床应用。
紫杉醇及其类似物迄今为止仅存在于裸子植物红豆杉科的红豆杉属和澳洲红豆杉属中,红豆杉属植物全世界共有11种,广泛分布于欧亚大陆和北美的寒带、温带及亚热带地区,但分布零散且生长缓慢。澳洲红豆杉属仅分布于南半球,数量稀少,紫杉醇在红豆杉植物中含量普遍很低,即使当前公认含量最高的短叶红豆杉树皮中也不到0.1%。
如果直接通过植物组织提取紫杉醇,则需要大量的红豆杉树木实体,其种植周期和种植成本过高;若采取组织培养的方式,虽然可以适当降低成本,但由于紫杉醇在红豆杉树木不同细胞中的分布不均匀,因此其产率较低。如果能直接针对高产紫杉醇的红豆杉细胞系进行纯培养,则有可能提升紫杉醇的生产效率。为实现紫杉醇的高产率,仅仅提升细胞培养密度是不够的,紫杉醇分泌量的提升往往低于生物量的提升,因此应当依据细胞自身特性匹配适宜的培养条件,以促进其定向分泌紫杉醇。
发明内容
本发明旨在针对现有技术的技术缺陷,提供一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,以解决红豆杉细胞培养过程中紫杉醇分泌量较低的技术问题。
为实现以上技术目的,本发明采用以下技术方案:
一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,包括以下重量份的成分:葡萄糖8~10份,肌醇4~6份,硫胺素2~3份,聚乙烯酰胺1~2份,吡哆醇1~2份,泛酸钙1~2份,钴胺素1~2份,天冬氨酸1~2份,叶酸1~2份,橙皮油1~2份,水50~60份。
作为优选,还包括1~2重量份的酪蛋白。
作为优选,还包括1~2重量份的脱落酸。
作为优选,还包括1~2重量份的吲哚乙酸。
作为优选,还包括1~2重量份的萘乙酸。
作为优选,所述诱导子组合物由以下重量份的成分组成:葡萄糖9份,肌醇5份,硫胺素2.5份,聚乙烯酰胺1.5份,吡哆醇1.5份,泛酸钙1.5份,钴胺素1.5份,天冬氨酸1.5份,叶酸1.5份,橙皮油1.5份,水55份。
作为优选,所述诱导子组合物由以下重量份的成分组成:葡萄糖8.5份,肌醇5.5份,硫胺素2.1份,聚乙烯酰胺1.3份,吡哆醇1.7份,泛酸钙1.6份,钴胺素1.2份,天冬氨酸1.1份,叶酸1.4份,橙皮油1.5份,酪蛋白1.4份,脱落酸1.1份,吲哚乙酸1.5份,萘乙酸1.8份,水57份。
本发明提供的诱导子组合物,用于促进红豆杉细胞定向分泌紫杉醇,其使用方法是直接添加至细胞培养液中,可以在培养开始阶段添加也可以在细胞进入培养稳定期后添加。实验发现,添加本发明诱导子组合物后虽然不会直接提升细胞培养密度,但是同等生物量的细胞培养液中紫杉醇产率显著提升,这表明本发明诱导子组合物对红豆杉细胞代谢特性产生了一定的影响。本发明以创新性的技术手段实现了突出的技术效果,通过本发明的诱导子组合物有望全面提升紫杉醇的规模化生产现状,带来广阔的应用前景。
具体实施方式
以下将对本发明的具体实施方式进行详细描述。为了避免过多不必要的细节,在以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。除有定义外,以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。
实施例1
一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,由以下重量份的成分组成:葡萄糖8份,肌醇4份,硫胺素2份,聚乙烯酰胺1份,吡哆醇1份,泛酸钙1份,钴胺素1份,天冬氨酸1份,叶酸1份,橙皮油1份,水50份。
实施例2
一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,由以下重量份的成分组成:葡萄糖10份,肌醇6份,硫胺素3份,聚乙烯酰胺2份,吡哆醇2份,泛酸钙2份,钴胺素2份,天冬氨酸2份,叶酸2份,橙皮油2份,水60份。
实施例3
一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,由以下重量份的成分组成:葡萄糖9份,肌醇5份,硫胺素2.3份,聚乙烯酰胺1.8份,吡哆醇1.5份,泛酸钙1.6份,钴胺素1.7份,天冬氨酸1.8份,叶酸1.2份,橙皮油1.8份,水55份。
实施例4
一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,由以下重量份的成分组成:葡萄糖8.8份,肌醇5.4份,硫胺素2.7份,聚乙烯酰胺1.2份,吡哆醇1.2份,泛酸钙1.2份,钴胺素1.5份,天冬氨酸1.6份,叶酸1.4份,橙皮油1.7份,酪蛋白1份,萘乙酸1.1份,水52份。
实施例5
一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,由以下重量份的成分组成:葡萄糖9.4份,肌醇4.2份,硫胺素2.1份,聚乙烯酰胺1.3份,吡哆醇1.1份,泛酸钙1份,钴胺素2份,天冬氨酸1.9份,叶酸1.2份,橙皮油1.9份,脱落酸1.3份,吲哚乙酸1.2份,萘乙酸1.6份,水58份。
实施例6
一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,由以下重量份的成分组成:葡萄糖8.8份,肌醇5.4份,硫胺素2.7份,聚乙烯酰胺1.2份,吡哆醇1.2份,泛酸钙1.2份,钴胺素1.5份,天冬氨酸1.6份,叶酸1.4份,橙皮油1.7份,酪蛋白1.5份,水55份。
实施例7
一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,由以下重量份的成分组成:葡萄糖9.2份,肌醇5.7份,硫胺素2.4份,聚乙烯酰胺1.5份,吡哆醇1.5份,泛酸钙1.7份,钴胺素1.7份,天冬氨酸1.2份,叶酸1.9份,橙皮油2份,吲哚乙酸1.8份,水59份。
实施例8
一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,由以下重量份的成分组成:葡萄糖8.5份,肌醇5.5份,硫胺素2.1份,聚乙烯酰胺1.3份,吡哆醇1.7份,泛酸钙1.6份,钴胺素1.2份,天冬氨酸1.1份,叶酸1.4份,橙皮油1.5份,酪蛋白1.4份,脱落酸1.1份,吲哚乙酸1.5份,萘乙酸1.8份,水57份。
以上对本发明的实施例进行了详细说明,但所述内容仅为本发明的较佳实施例,并不用以限制本发明。凡在本发明的申请范围内所做的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.一种调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,其特征在于包括以下重量份的成分:葡萄糖8~10份,肌醇4~6份,硫胺素2~3份,聚乙烯酰胺1~2份,吡哆醇1~2份,泛酸钙1~2份,钴胺素1~2份,天冬氨酸1~2份,叶酸1~2份,橙皮油1~2份,水50~60份。
2.根据权利要求1所述的调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,其特征在于还包括1~2重量份的酪蛋白。
3.根据权利要求1所述的调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,其特征在于还包括1~2重量份的脱落酸。
4.根据权利要求1所述的调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,其特征在于还包括1~2重量份的吲哚乙酸。
5.根据权利要求1所述的调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,其特征在于还包括1~2重量份的萘乙酸。
6.根据权利要求1所述的调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,其特征在于所述诱导子组合物由以下重量份的成分组成:葡萄糖9份,肌醇5份,硫胺素2.5份,聚乙烯酰胺1.5份,吡哆醇1.5份,泛酸钙1.5份,钴胺素1.5份,天冬氨酸1.5份,叶酸1.5份,橙皮油1.5份,水55份。
7.根据权利要求1所述的调节红豆杉细胞次级代谢产物的诱导子组合物,其特征在于所述诱导子组合物由以下重量份的成分组成:葡萄糖8.5份,肌醇5.5份,硫胺素2.1份,聚乙烯酰胺1.3份,吡哆醇1.7份,泛酸钙1.6份,钴胺素1.2份,天冬氨酸1.1份,叶酸1.4份,橙皮油1.5份,酪蛋白1.4份,脱落酸1.1份,吲哚乙酸1.5份,萘乙酸1.8份,水57份。
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