CN105434212B - 具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤组合物、乳液及其制备方法 - Google Patents
具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤组合物、乳液及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤组合物及其制备方法。该外用护肤组合物将金银花、丹参、党参、黄芪、麦冬和仙人掌有效地组合在一起,形成复方,并将其作为活性组分,制备成护肤制剂,其具有防护辐射致成纤维细胞增殖抑制、抑制皮肤病源微生物及修护皮肤屏障功效,从而能有效预防与改善皮肤衰老。本发明经实验证实对皮肤安全无刺激,对电子辐射造成的皮肤成纤维细胞增殖抑制具有很好的保护作用,还可以有效地清除皮肤自由基,同时兼具抑菌剂皮肤屏障修复功效。本发明的原材料获取容易、制备方法简便,绿色安全,易于被过敏人群接受,具有很好的应用前景和市场前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种外用护肤组合物,具体地说是一种基于中药组合物提出的具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤组合物及由该外用护肤组合物制备得到的护肤制剂。
背景技术
人类是生态系统的一个组成部分。人们通过改造环境条件来维持生存,改善生活;同时,环境的变化也影响人类的衣食住行与人类的健康。我们生活的外部环境中存在多种影响皮肤健康的因素,如我们熟悉的紫外线、电器辐射、雾霾、酸雨、环境化学物质等。近年来随着人们生活水平的提高,人们对环境污染危害性认识不断提高。为了保护皮肤免受外界侵害,研究环境污染危害及其防护正在成为健康护理领域研究的热点之一。
目前市场中防御侵害型的护肤品极受消费者追捧。防御侵害型护肤品研发被不少行业专家所看好。消费者关注的主要产品功效有防雾霾(防空气污染)、防辐射、防刺激等。市场上防御侵害型护肤品的防御原理主要仍以隔离为主,辅助以舒缓功效。防护途径或单一(如防晒产品)、或片面(如抗刺激产品),或缺乏科学研究成果支持。亦没有综合型防御侵害的产品,消费者只能在使用一款产品之后,在使用另外一款,增加了消费者使用复杂程度。
另外,随着手机的逐渐普及和移动电话基站的覆盖越来越密集,人们时刻处于手机的辐射场中。手机的光子能量虽然低于最低的电离辐射能量1000万倍,但也可引发远场辐射的威胁。而此时的皮肤是暴露面积最大接触时间最长的器官之一,因此,手机微波辐射对皮肤形态结构的影响也不容忽视。发明人发现,人们在长时间使用手机后,手机辐射会造成皮肤成纤维细胞的增殖抑制,皮肤上病原微生物增多,从而破坏皮肤屏障,造成皮肤衰老。目前市售的护肤产品均不能有效抑制手机及其他电磁辐射对皮肤造成的此种损伤。因此通过清除自由基、抑制辐射致成纤维细胞增殖、抑制皮肤病源微生物、修护皮肤屏障功效途径,达到综合的抵御环境污染对皮肤的损伤为本发明研究的重点。
发明内容
本发明的首要目的在于提出一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤组合物。
本发明的再一目的在于提出一种上述护肤组合物的制备方法及得到的护肤乳液。
本发明的发明思路为:
本发明利用先进的生物技术,结合中国传统的中医理论,将金银花、丹参、党参、黄芪、麦冬和仙人掌有效的组合在一起,形成复方,并将其作为活性组分,制备成护肤制剂,其具有防护辐射致成纤维细胞增殖抑制、抑制皮肤病源微生物及修护皮肤屏障功效,从而能有效预防与改善皮肤衰老。各组分简介如下:
金银花:性寒,味甘,入肺、心、胃经,具有清热解毒、抗炎、补虚疗风的功效,主治胀满下疾、温病发热,热毒痈疡和肿瘤等症。
丹参:性味苦,微寒。归心、肝经。有祛瘀止痛,活血通经,清心除烦之功效。用于月经不调,经闭痛经,症瘕积聚,胸腹刺痛,热痹疼痛,疮疡肿痛,心烦不眠;肝脾肿大,心绞痛。
党参:味甘,性平。有补中益气、止渴、健脾益肺,养血生津功效。用于脾肺气虚,食少倦怠,咳嗽虚喘,气血不足,面色萎黄,心悸气短,津伤口渴,内热消渴。
黄芪:性味:甘,微温。归肺、脾、肝、肾经。对表虚自汗、阳气虚弱、疮疡溃破及肺气虚证有一定功效。
麦冬:性味甘,微苦,微寒。归心、肺、胃经。功能与主治:养阴生津,润肺清心。用于肺燥干咳,阴虚痨嗽,喉痹咽痛,津伤口渴,内热消渴,心烦失眠,肠燥便秘。
仙人掌:性味微苦,凉。归心、肺、胃三经。具有清热解毒,舒筋活络,散瘀消肿,解肠毒,凉血止痛,润肠止血,健胃止痛及镇咳的功效。
为实现本发明的目的,本发明采用如下具体技术方案:
一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤组合物,其中,所述组合物由A相、B相和C相组成,所述A相、B相和C相分别由下述重量百分比的原料组成:
所述中药提取物由下述重量份配比的原料药制成:
金银花2~6、丹参1~4、党参1~4、黄芪1~3、麦冬1~2和仙人掌1~2。
上述中药提取物的较佳制备方法为:
(1)将上述原料药粉碎后按所述重量份配比称取,混匀;
(2)体积百分比为60%~90%乙醇提取,原料药与乙醇质量体积比g/ml为1:8~1:20,70℃~90℃提取1~4小时;
(3)将步骤(2)得到的提取液冷却至20℃~30℃,200~400目过滤,滤出药渣后进行真空抽滤,收集滤液;
(4)将滤液旋转蒸发全部乙醇得到浓缩液,浓缩液中加入1,3-丁二醇,加入量为步骤(3)所得滤液量体积百分比的60%~90%;混溶均匀,过滤,取清液,即得。
所述步骤(3)中真空抽滤条件为在布氏漏斗里铺两层滤纸,滤纸中间夹0.3~0.6cm硅藻土进行真空抽滤。
一种上述护肤组合物的制备方法,其中,所述方法步骤如下:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至80~85℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热到80~85℃混合均匀;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,2000~3000转/分钟,均质5~6min;30~50转/分钟,搅拌5~10min后,开始搅拌降温,搅拌速率30~50转/分钟,降温速率为1~2℃/分钟;
(4)当温度降到45~50℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤乳液,其中,所述乳液由上述方法制备得到的。
另一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤组合物,其中,所述组合物由A相、B相和C相组成,所述A相、B相和C相分别由下述重量百分比的原料组成:
所述中药提取物由下述重量份配比的原料药制成:
金银花2~6、丹参1~4、党参1~4、黄芪1~3、麦冬1~2和仙人掌1~2。
上述中药提取物的较佳制备方法同上述。
一种上所述护肤组合物的制备方法,其中,所述方法步骤如下:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至80~85℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热到80~85℃混合均匀;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,2000~3000转/分钟,均质5~6min;30~50转/分钟,搅拌5~10min后,开始搅拌降温,搅拌速率30~50转/分钟,降温速率为1~2℃/分钟;
(4)当温度降到45~50℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤乳液,其中,所述乳液由上述方法制备得到的。
利用本发明所述中药提取物及护肤品领域常规方法及辅料也可以制备得到其他剂型,如膏霜、爽肤水、喷雾剂等。本发明中药组合物的制备方法不局限于本说明书记 载,中药领域常规制备方法均可起到所述功效。本发明所述方法最佳。
本发明所述制剂的推荐使用方法为:以涂抹方法施于人体皮肤表面,轻轻按摩直至吸收。
本发明的有益结果:
本发明经实验证实对皮肤安全无刺激,对电子辐射造成的皮肤成纤维细胞增殖抑制具有很好的保护作用,还可以有效的清除皮肤自由基,同时兼具抑菌剂皮肤屏障修复功效。本发明原材料获取容易、制备方法简便,绿色安全,易于被过敏人群接受,具有很好的应用前景和市场前景。
附图说明
图1为中药组合物A、B、C的DPPH清除率图。
图2为皮肤表面的失水率百分比随时间的变化曲线。
具体实施方式
本实施例所用药材均可以从中国药材集团公司购买得到,符合中华人民共和国药典2005版标准。其他原料均可通过市售购买获得,本发明使用原料的来源见表1,本发明所用的仪器名称及厂家见表2。
表1
表2
名称 | 型号 | 厂家 |
恒温水浴锅 | HH·S1-M | 北京长安科学仪器厂 |
高速多功能粉碎机 | JP-400B-8 | 永康市九品工贸有限公司 |
智能控温加热搅拌器 | SZCL | 巩义市予华仪器有限公司 |
旋转蒸发器 | RE-2000 | 上海亚荣生化仪器厂 |
循环水式真空泵 | SHB-Ⅲ | 郑州长城科工贸有限公司 |
实施例1本发明中药组合物的制备
(1)按照下述原料药粉碎后按所述重量份配比称取,混匀;
金银花40g、丹参20g、党参20g、黄芪20g、麦冬10g和仙人掌10g。
(2)体积百分比为70%乙醇提取,原料药与乙醇质量体积比g/ml为1:15,放置于电热恒温水浴锅中,80℃提取3小时;
(3)将步骤(2)得到的提取液从恒温水浴锅中取出,静置冷却至常温(20℃),200目粗过滤,滤出药渣,再进行真空抽滤,抽滤条件:在布氏漏斗里铺两层滤纸, 滤纸中间夹0.5cm硅藻土真空抽滤,收集滤液;
(4)在真空度0.1,43℃条件下旋转蒸发全部乙醇得浓缩液;浓缩液中加入1,3-丁二醇,加入量为步骤(3)所得滤液量体积百分比的70%,混溶均匀。真空抽滤,抽滤条件同步骤(3),取清液,即得。
实施例2本发明中药组合物的制备
(1)按照下述原料药粉碎后按所述重量份配比称取,混匀;
金银花60g、丹参10g、党参10g、黄芪10g、麦冬20g和仙人掌10g。
(2)体积百分比为90%乙醇提取,原料药与乙醇质量体积比g/ml为1:8,放置于电热恒温水浴锅中,70℃提取4小时;
(3)将步骤(2)得到的提取液从恒温水浴锅中取出,静置冷却至常温,200目粗过滤,滤出药渣,得滤液;将该滤液再进行真空抽滤,抽滤条件:在布氏漏斗里铺两层滤纸,滤纸中间夹0.3cm硅藻土真空抽滤,收集滤液;
(4)在真空度0.1,43℃条件下旋转蒸发全部乙醇得浓缩液;浓缩液中加入1,3-丁二醇,加入量为步骤(3)所得滤液量体积百分比的90%,混溶均匀。真空抽滤,抽滤条件同步骤(3),取清液,即得。
实施例3本发明中药组合物的制备
(1)按照下述原料药粉碎后按所述重量份配比称取,混匀;
金银花20g、丹参40g、党参40g、黄芪30g、麦冬10g和仙人掌20g。
(2)体积百分比为60%乙醇提取,原料药与乙醇质量体积比g/ml为1:20,放置于电热恒温水浴锅中,90℃提取1小时;
(3)将步骤(2)得到的提取液从恒温水浴锅中取出,静置冷却至常温,100目粗过滤,滤出药渣,得滤液;将该滤液再进行真空抽滤,抽滤条件:在布氏漏斗里铺两层滤纸,滤纸中间夹0.6cm硅藻土真空抽滤,收集滤液;
(4)在真空度0.1,43℃条件下旋转蒸发全部乙醇得浓缩液;浓缩液中加入1,3-丁二醇,加入量为步骤(3)所得滤液量体积百分比的60%,混溶均匀。真空抽滤,抽滤条件同步骤(3),取清液,即得。
实施例4本发明乳液的制备
原料及配比(质量百分比),见表3:
表3
原料 | 用量 | |
A相 | 甲基葡糖倍半硬脂酸酯 | 0.5wt% |
鲸蜡硬脂醇 | 2.0wt% | |
肉豆蔻酸异丙酯 | 1.0wt% | |
合成角鲨烷 | 6.0wt% | |
B相 | 实施例1制备中药提取物 | 10.0wt% |
海藻糖 | 0.1wt% | |
甘油 | 10.0wt% | |
汉生胶 | 0.3wt% | |
PEG-20甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯 | 3.0wt% | |
EDTA二钠 | 0.1wt% | |
去离子水 | 余量 | |
C相 | 防腐剂 | 0.2wt% |
制备方法:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至80℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热80℃;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,2000转/分钟,均质5min;30转/分钟,搅拌10min后,开始搅拌降温,搅拌速率30转/分钟,降温速率为1℃/分钟;
(4)当温度降到50℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
实施例5本发明乳液的制备
原料及配比(质量百分比),见表4:
表4
原料 | 用量 | |
A相 | 甲基葡糖倍半硬脂酸酯 | 2.0wt% |
鲸蜡硬脂醇 | 0.5wt% | |
肉豆蔻酸异丙酯 | 4.0wt% | |
合成角鲨烷 | 3.0wt% | |
B相 | 实施例2制备中药提取物 | 5.0wt% |
海藻糖 | 6.0wt% | |
甘油 | 6.0wt% |
汉生胶 | 0.1wt% | |
PEG-20甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯 | 2.5wt% | |
EDTA二钠 | 0.01wt% | |
去离子水 | 余量 | |
C相 | 防腐剂 | 0.1wt% |
制备方法:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至85℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热85℃;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,3000转/分钟,均质6min;50转/分钟,搅拌5min后,开始搅拌降温,搅拌速率50转/分钟,降温速率为2℃/分钟;
(4)当温度降到45℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
实施例6本发明乳液的制备
原料及配比(质量百分比),见表5:
表5
原料 | 用量 | |
A相 | 甲基葡糖倍半硬脂酸酯 | 3.0wt% |
鲸蜡硬脂醇 | 0.1wt% | |
肉豆蔻酸异丙酯 | 6.0wt% | |
合成角鲨烷 | 1.0wt% | |
B相 | 实施例3制备中药提取物 | 1.0wt% |
海藻糖 | 3.0wt% | |
甘油 | 1.0wt% | |
汉生胶 | 0.01wt% | |
PEG-20甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯 | 0.5wt% | |
EDTA二钠 | 0.05wt% | |
去离子水 | 余量 | |
C相 | 防腐剂 | 0.05wt% |
制备方法:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至85℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热85℃;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,2000转/分钟,均质5min;50转/分钟,搅拌8min后,开始搅拌降温,搅拌速率50转/分钟,降温速率为2℃/分钟;
(4)当温度降到48℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
实施例7本发明乳液的制备
原料及配比(质量百分比),见表6:
表6
制备方法:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至80℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热80℃;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,2000转/分钟,均质5min;30转/分钟,搅拌10min后,开始搅拌降温,搅拌速率30转/分钟,降温速率为1℃/分钟;
(4)当温度降到50℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
实施例8本发明乳液的制备
原料及配比(质量百分比),见表7:
表7
制备方法:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至85℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热85℃;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,3000转/分钟,均质6min;50转/分钟,搅拌5min后,开始搅拌降温,搅拌速率50转/分钟,降温速率为2℃/分钟;
(4)当温度降到45℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
实施例9本发明乳液的制备
原料及配比(质量百分比),见表8:
表8
制备方法:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至85℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热85℃;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,2000转/分钟,均质5min;50转/分钟,搅拌8min后,开始搅拌降温,搅拌速率50转/分钟,降温速率为2℃/分钟;
(4)当温度降到48℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
本发明功效实验
一、实施例1、实施例2、实施例3所得中药提取物A、B、C的防辐射功效评价
(1)研究目的
通过观察中药提取物A、B、C(分别由实施例1、实施例2及实施例3制备得到) 对手机辐射后小鼠皮肤成纤维细胞株3T6生长的影响,评价中药组合物A、B、C对手机辐射抑制细胞生长的保护作用。
(2)实验材料
受试品:实施例1、实施例2、实施例3所得中药提取物A、B、C
细胞株:小鼠皮肤成纤维细胞株3T6,购自中国科学院细胞库,本实验室传代后使用。
试剂:FBS(批号:1428479)、0.25%Trypsin-EDTA(批号:1213981)购自GIBCO公司。改良型RPMI-1640型培养基(批号:NXL0745)购自HYCLONE公司。DMSO(批号:20121102)购自国药集团化学试剂有限公司。细胞增值-毒性检测—CCK-8试剂盒为日本DOJINDO同仁化学研究所产品。
实验仪器:X71型倒置显微镜为Olympus公司产品。HH CP-01W型二氧化碳细胞培养箱为上海博迅实业有限公司医疗设备厂产品。SW-CJ-IFD型单人单面净化工作台为苏州净化设备有限公司产品。RT-6000型酶标仪,深圳雷杜公司产品。诺基亚手机1050型,频段为GSM900MHz。
(3)实验方法
实验分为空白对照组、辐射对照组、药物不同浓度组,每组8个复孔。收集对数期细胞,计数,按1×104/ml浓度接种到96孔板,每孔200μl。置37℃,5%CO2细胞培养箱中培养24小时,使细胞贴壁。用药组加入不同中药提取物100μl,空白对照组和辐射对照组加入100μl无血清培养基,继续培养。24小时后,将细胞板置于CO2培养箱外适应1小时,除空白对照组细胞外,将其他细胞板放置在手机上方,手机保持通话状态,空白对照组细胞板于另一房间置于手机上方,手机保持关闭状态。6小时后使用CCK法检测细胞活性,并计算增殖抑制率及增殖抑制保护率。
(4)实验结果
结果显示,使用手机辐射6小时后,皮肤成纤维细胞增殖受到抑制,使得吸光度降低,辐射对照组细胞OD值较空白对照组比较有显著性差异(P<0.01),增殖抑制率达到16.89%;中药提取物A、B、C剂量在1000μg·ml-1时均对辐射后细胞增殖抑制具有明显的保护作用,可以有效的降低辐射对成纤维细胞的抑制作用,从而吸光度上升,与辐射对照组比较有显著性差异(P<0.05)。(见表9)中药提取物A的对成纤维细胞增殖抑制保护率可达11.86%。
表9中药提取物A、B、C对辐射后细胞增殖/毒性的影响
二、实施例1、实施例2、实施例3所得中药提取物A、B、C对辐射间接作用的防护功效
辐射对生物活性物质的作用有两个途径:一是直接作用于生物大分子如DNA,通过电离和激发使其发生化学键的断裂,造成分子结构的改变和生物活性的丧失,这种作用称为直接作用;二是射线与水分子相互作用,产生自由基等活化产物,后者再作用于生物分子,引起其损伤,此类作用称为间接作用。在生物体内,由于水分子的大量存在,间接作用具有更重要的意义。因此,针对辐射间接作用,可以选择清除自由基功效来评价中药提取物A、B、C对辐射间接作用的防护功效。
将实施例1~3所得中药提取物和去离子水以3:97的质量比混匀,得到中药提取物的水溶液;以该中药提取物的水溶液作为试验组;其中,实施例1所得中药提取物A对应样品1;实施例2所得中药提取物B对应样品2;实施例3所得中药提取物C对应样品3;将试验组中的中药提取物替换为维生素C衍生物,所得水溶液作为阳性对照。
测定结果如图1。实验结果表明,各实施例所得中药提取物在其水溶液中的质量百分含量为3.0%时,均已具有明显对DPPH清除能力,具有降低羟自由基、烷自由基或氧化自由基的有效浓度和打断脂质过氧化链反应的作用,从而具有良好的延缓皮肤辐射老化的作用。
三、实施例1、实施例2、实施例3所得中药提取物A、B、C的抑菌功能评价
雾霾等空气污染,令环境中的微生物含量增加,其中常见的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌接触皮肤易造成皮肤痤疮、敏感等现象。
将实施例1~3所得中药提取物A、B、C进行大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌抑制功效评价。
牛津杯法:依据不同供试菌株配置相应培养基,高压蒸汽灭菌121℃,20min。制作固体培养基平板,每个培养皿约倒入20mL培养基,待培养基凝固后,用移液枪取100μL菌液(已经过麦氏比浊法测定浓度的菌悬液)滴入培养皿中,采用平板涂布法,将菌悬液均匀涂布于固体培养基上。在培养基表面直接垂直放上牛津杯(内径6mm、外径8mm、高10mm的圆形小管),轻轻加压,使其与培养基接触无空隙。每个培养皿放置三个牛津杯。每个牛津杯中加入200μL待测样品,将细菌的培养皿轻置于细菌培养箱中37℃培养16个小时左右。
其中,实施例1所得中药提取物A对应样品1;实施例2所得中药提取物B对应样品2;实施例3所得中药提取物C对应样品3;阳性对照为0.2%MTI(甲基异噻唑啉酮/碘丙炔基丁基甲氨酸酯)。MTI是化妆品中常用的防腐剂,建议用量为0.05%~0.02%。对细菌、真菌均有优异的抗菌活性。测定结果如表10。
表10中药提取物A、B、C抑菌功能评价
抑菌圈直径(mm) | 大肠杆菌 | 金黄色葡萄球菌 | 痤疮丙酸杆菌 |
样品1 | 24.95±0.22 | 14.71±0.18 | 16.94±0.42 |
样品2 | 20.36±0.46 | 16.09±0.17 | 14.27±0.11 |
样品3 | 19.90±0.57 | 13.04±0.39 | 14.65±0.78 |
阳性对照 | 21.23±0.64 | 17.92±0.37 | 20.90±0.98 |
注:抑菌圈直径≥20mm为极敏感“+++”判为有抑菌作用,抑菌圈越大抑菌效果越好;15mm≤抑菌直径<20mm为高敏“++”;10mm≤抑菌直径<15mm为中敏“+”;抑菌直径<10mm为无效,判为无抑菌作用。参考陈玉萍.抗菌药物的药敏试验方法[J].畜牧兽医科技信息,2007,(5):88-89。
从实验结果可以看出,样品1、样品2、样品3均具有良好的抑菌效果,能够有效降低环境中微生物对皮肤的有害影响。
四、实施例7、实施例8、实施例9所得制剂的防辐射功效评价
将实施例7所得制剂对应乳液1;实施例8所得制剂对应乳液2;实施例9所得制剂对应乳液3。
另以表11乳液作为阴性对照。所用阴性对照乳液制备方法如下:
按照表11所得配方,(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;B相其他原料加入该水相中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热83℃;(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热83℃;(3)将A相全部加入到B相中,3000转/分钟,均质5min;50转/分钟,搅拌5min后,开始搅拌降温,速率50转/分钟,降温速率为1~2℃/分钟;(4)当温度降到50℃以下时,加入C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即可得所述乳液。
表11阴性对照乳液配方
60只小鼠随机分为6组,即:①正常对照组,②辐射对照组,③样品1组,④样品2组,⑤样品3组,⑥阴性对照组。每组10只,按性别及组别分笼饲养,在相同环 境下,控制温度维持20~25℃,12h光照,12h黑暗,常规饲食饮水,无不良因素影响,饲养一周适应实验室环境后开始进行试验。
将手机放置在专门为这个实验设计的笼子里(直径45cm,高11cm)。采用诺基亚手机1050型,作为辐射源进行辐射测试。
将60只小鼠随机分为6组(每组10只),一组不涂抹样品,实验期间手机保持关闭状态,作为正常对照组。一组不涂抹样品,实验期间手机保持开通状态,并于每日10时、14时、16时,处于接通状态,每次接通15min,作为辐射对照组。另外四组作为实验组,实验期间,手机保持开通状态,并于每日10时、14时、16时,处于接通状态,每次接通15min。分别涂抹样品1,样品2,样品3,阴性对照样品。分别将样品均匀涂擦于小鼠背部,每次均为0.5mL,每天一次,涂抹均匀后将小鼠放置在有辐射源的笼子里,每次45min,每天一次,持续96天。
第96天,将无毛小鼠背部器械脱毛,面积为2cm×3cm。断颈处死全部小鼠后立即取下背部脱毛处全层皮肤(不含皮下脂肪),冷冻于-70℃冰箱内保存待测。采用病理组织切片制片技术,HE染色,以40倍光镜观察真皮结构改变,并以生化分析方法测定SOD活性,MDA含量。
SOD能清除超氧阳离子(即氧自由基),保护细胞免受损害。SOD活力高低可间接反映机体清除氧自由基的能力。自由基攻击膜脂中的不饱和脂肪酸,使其发生氧化,过氧化脂质的分解产物MDA就会升高,通过测定体内MDA含量,可间接反映体内自由基对机体的损伤程度。
所有数据均通过SPSS19.0软件进行处理,各组实验参数以.x±s表示。
表12各组无毛小鼠皮肤组织中SOD、MDA含量(x±s) (n=10)
小鼠皮肤中SOD、MDA含量见表12。结果显示:实施例7(对应样品1)、实施例8(对应样品2)实施例9(对应样品3)均具有抗辐射效果。且实施例7的防护效果最显著。发明人利用实施例4、5、6制备得到的制剂重复上述实验,结果同样显示具 有抗辐射功效。
五、实施例7所得制剂的修护屏障评价
1.角质层水分散失试验
测试样品为乳液,均按照如下方法配制而得:
将实施例7所得制剂对应乳液1。
另以表11乳液作为空白对照。所用空白对照乳液制备方法与制剂的防辐射功效评价中的阴性对照制备方法相同:
测试前经专业人员培训过的健康受试者30名(男女各15名),年龄在20~30岁,所有受试者均无皮肤或系统性疾患史,受试部位无异常,且受试期间不涂抹任何与实验无关的药物或者化妆品。
测试场所室温(25±1)℃,相对湿度(40±5)%,测试前受试者应保持机体为稳定状态。使用35℃左右的清水擦拭受试者双臂后,于测试环境下静坐30min后开始测试。
在受试者手臂内侧距手掌基部5cm处,标记受测区域(4cm×4cm),同一手臂可同时标记多个区域(间隔1cm),测试样品均随机分布。先测量各测试区域的空白值,然后测试样按(2.0±0.1)mg/cm2的用量进行单次涂布,涂布后采用多功能皮肤水分测试仪和皮肤水分散失仪分别测量0.5h、1h、2h和4h受试区域和空白对照区域的水分散失量值。
测试将受试者涂抹同一样品区域内5次测得的数据取平均值,采用SPSS统计软件进行t检验分析。
实验结果
皮肤水分散失变化
皮肤水分散失量(Transepidermal water loss,TEWL)反映了测试周期内,实验区域水分散失随时间的变化规律,它可以表征测试样品的皮肤屏障修护功能,其值越小,水分散失越少,皮肤修护能力越强;反之,皮肤修护能力越弱。
失水率(%)=(样品组水分散失量—起始水分散失量)/起始水分散失量×100
水分散失结果见图2。结果显示:4h内,实施例7(对应乳液)具有皮肤修护能力效果。发明人用实施例4、5、6、8、9制备的样品重复上述实验结果同上。且实施例7的修护效果最显著。
Claims (10)
1.一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤组合物,其特征在于,所述外用护肤组合物由A相、B相和C相组成,所述A相、B相和C相分别由下述重量百分比的原料组成:
所述中药提取物由下述重量份配比的原料药制成:
金银花2~6、丹参1~4、党参1~4、黄芪1~3、麦冬1~2和仙人掌1~2。
2.如权利要求1所述的外用护肤组合物,其特征在于,所述中药提取物的制备方法为:
(1)将权利要求1所述原料药粉碎后按所述重量份配比称取,混匀;
(2)体积百分比为60%~90%乙醇提取,原料药与乙醇质量体积比g/ml为1:8~1:20,70℃~90℃提取1~4小时;
(3)将步骤(2)得到的提取液冷却至20℃~30℃,200~400目过滤,滤出药渣后进行真空抽滤,收集滤液;
(4)将滤液旋转蒸发全部乙醇得到浓缩液,浓缩液中加入1,3-丁二醇,加入量为步骤(3)所得滤液量体积百分比的60%~90%;混溶均匀,过滤,取清液,即得。
3.如权利要求2所述的外用护肤组合物,其特征在于,所述步骤(3)中真空抽滤条件为在布氏漏斗里铺两层滤纸,滤纸中间夹0.3~0.6cm硅藻土进行真空抽滤。
4.一种权利要求1至3中任意一项所述外用护肤组合物的制备方法,其特征在于,所述方法步骤如下:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至80~85℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热到80~85℃混合均匀;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,2000~3000转/分钟,均质5~6min;30~50转/分钟,搅拌5~10min后,开始搅拌降温,搅拌速率30~50转/分钟,降温速率为1~2℃/分钟;
(4)当温度降到45~50℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
5.一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤乳液,其特征在于,所述外用护肤乳液由权利要求4所述方法制备得到。
6.一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤组合物,其特征在于,所述外用护肤组合物由A相、B相和C相组成,所述A相、B相和C相分别由下述重量百分比的原料组成:
所述中药提取物由下述重量份配比的原料药制成:
金银花2~6、丹参1~4、党参1~4、黄芪1~3、麦冬1~2和仙人掌1~2。
7.如权利要求6所述的外用护肤组合物,其特征在于,所述中药提取物的制备方法为:
(1)按照上述原料药粉碎后按所述重量份配比称取,混匀;
(2)体积百分比为60%~90%乙醇提取,原料药与乙醇质量体积比g/ml为1:8~1:20,70℃~90℃提取1~4小时;
(3)将步骤(2)得到的提取液冷却至20℃~30℃,200~400目粗过滤,滤出药渣后进行真空抽滤,收集滤液;
(4)将滤液旋转蒸发全部乙醇得到浓缩液,浓缩液中加入1,3-丁二醇,加入量为步骤(3)所得滤液量体积百分比的60%~90%;混溶均匀,过滤,取清液,即得。
8.如权利要求7所述的外用护肤组合物,其特征在于,所述步骤(3)中真空抽滤条件为在布氏漏斗里铺两层滤纸,滤纸中间夹0.3~0.6cm硅藻土进行真空抽滤。
9.一种权利要求6至8中任意一项所述外用护肤组合物的制备方法,其特征在于,所述方法步骤如下:
(1)B相:将甘油与汉生胶搅拌均匀,待用;除中药提取物外的B相其他原料加入水相锅中,搅拌均匀后加入甘油汉生胶混合物,加热至80~85℃;
(2)A相:按照配比要求称量A相原料,加热到80~85℃混合均匀;
(3)将步骤(2)得到的A相全部加入到步骤(1)的B相中,2000~3000转/分钟,均质5~6min;30~50转/分钟,搅拌5~10min后,开始搅拌降温,搅拌速率30~50转/分钟,降温速率为1~2℃/分钟;
(4)当温度降到45~50℃,加入中药提取物和C相原料,搅拌均匀;当温度降到40℃以下,即得。
10.一种具有防辐射及修复皮肤屏障功效的外用护肤乳液,其特征在于,所述外用护肤乳液由权利要求9所述方法制备得到。
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