CN105424843B - 一种测定多西他赛或紫杉醇的高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用方法 - Google Patents

一种测定多西他赛或紫杉醇的高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种测定多西他赛或紫杉醇的方法。更具体而言，涉及一种基于高效液相色谱‑三重四级杆质谱联用技术定量分析多西他赛或紫杉醇的方法，其中，所述方法包括在高效液相色谱仪中使用包含甲酸铵或甲酸的流动相的步骤，以及在ESI(‑)或APCI(‑)电离模式下采用MRM模式测定多西他赛或紫杉醇的加甲酸根准分子离子峰和子离子峰的步骤。

Description

一种测定多西他赛或紫杉醇的高效液相色谱-三重四级杆质 谱联用方法
技术领域
本发明属于药物分析领域，涉及一种测定多西他赛或紫杉醇的方法。更具体而言，涉及一种基于高效液相色谱-三重四级杆质谱联用(液-质联用)技术定量分析多西他赛或紫杉醇的方法。
背景技术
多西他赛和紫杉醇为紫杉烷类抗癌药物，是一类从短叶紫杉树皮中提取的天然产物，临床用于治疗乳腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、胃癌、卵巢癌以及头颈癌等[1-2]。其作用机制为通过与肿瘤细胞的微管蛋白结合，促进微管蛋白形成稳定的微管，同时抑制其解聚，阻断细胞有丝分裂，对肿瘤细胞产生抑制和杀伤作用[3]。
根据文献查阅结果，生物样品中多西他赛和紫杉醇的定量分析方法研究常用高效液相色谱法分离目标化合物后在紫外检测器上进行定量[4-6]。近年来，灵敏特异的液-质联用分析技术也越来越多地应用到紫杉烷类抗癌药物的定量中，成为快速分离和鉴定的有力手段[7-11]。文献报道的测定生物样品中多西他赛和紫杉醇含量的方法中，均采用电喷雾正离子(ESI+)电离模式，通过检测[M+H]+或[M+Na]+的准分子离子峰→特征性子离子的离子传输通道，实现基于液-质联用技术的定量分析。文献中未见采用ESI(-)或APCI(-)电离模式对紫衫烷类化合物进行定量分析的方法，这可能与该类化合物在负离子检测模式下不易形成去质子化的[M-H]-峰有关。
然而，基于液-质联用技术的定量分析也存在一些问题，如：基质效应和加合离子的形成。ESI(+)电离模式的液-质联用检测中，某些化合物容易形成多种加合离子，且丰度很高。紫杉烷类抗癌药物由于其结构上含有多个可被氧化的基团(结构参见下文)，在ESI(+)电离模式下，容易与碱金属离子产生加合的准分子离子峰(如：[M+Na]+和[M+K]+等)。质谱图上表现为多种离子化形式并存的情况，导致检测灵敏度和重现性的下降。因此，形成信号强且重现性好的单一离子化形式是最为理想的结果。由于钠广泛存在于玻璃或不锈钢等实验器具，化合物或试剂中也有含钠的杂质，为了避免在离子化过程中形成钠的加合离子而完全去除实验体系中的钠并非易事。文献报道[12]通过在流动相中添加伯胺的方法促进单一离子的形成；或通过加入可与碱金属离子形成螯合物的特殊试剂(如冠醚类化合物)来减少[M+Na]+的形成[13]。然而伯胺类化合物的碱性极强，可能会造成色谱柱填料的劣化和紫杉烷类化合物的降解。
紫杉烷类抗癌药物的[M+Na]+准分子离子峰可在ESI(+)电离模式下产生特征性的子离子碎片，使二级质谱检测成为可能。但[M+Na]+的准分子离子峰打碎效率低，且ESI(+)电离模式下该类化合物可产生除[M+Na]+峰以外的多种离子化形式，不利于液-质联用定量分析。此外，选择[M+Na]+峰进行测定时还可能受到样品或环境中的钠离子浓度变化的影响，使测定结果产生误差。Mortier[14]等采用向流动相中加入非挥发性的试剂，如乙酸钠的方法对检测体系中的钠离子浓度进行控制，使待测化合物形成稳定、单一的[M+Na]+准分子离子峰。范亚新[15]等探索了加入金属离子的液相色谱-串联质谱联用方法，通过向液相流动相中加入碳酸锂试剂，在ESI(+)电离模式下利用紫杉醇的锂加合离子进行检测。但非挥发性试剂可能对质谱检测仪造成污染。且加入锂离子后虽然[M+Li]+峰成为基峰，[M+Na]+峰得到了一定程度的抑制，但质谱图上多种离子化形式并存的情况依然存在，[M+Na]+峰信号强度约为基峰信号的50％，另可观察到[M+K]+峰[15]。
参考文献：
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发明内容
本发明旨在针对多西他赛或紫杉醇在质谱检测ESI(+)电离模式下易形成[M+Na]+等碱金属加合的准分子离子峰，造成多种离子化形式并存，影响测定结果的灵敏度和重现性这一现象提出合理的解决方案：即通过在高效液相色谱仪的流动相中加入一定量的甲酸铵或甲酸(液-质联用分析中常用的流动相添加试剂)，采用ESI(-)或APCI(-)电离模式，使待测化合物在电离后能够形成单一的加甲酸根准分子离子峰，继而在给予一定能量下被打碎产生特征性的碎片离子，通过检测准分子离子峰→子离子的离子通道实现灵敏特异的二级质谱检测。与ESI(+)电离模式的定量分析方法比较，紫杉烷类化合物在ESI(-)或APCI(-)电离模式下均可形成单一的一级质谱准分子离子峰，具有特异、灵敏、稳定、重现性好等特点。
因此，本发明提供了一种基于高效液相色谱-三重四级杆质谱联用技术测定多西他赛或紫杉醇的方法，所述方法包括在高效液相色谱仪中使用包含甲酸铵或甲酸的流动相的步骤，以及在ESI(-)或APCI(-)电离模式下采用MRM模式测定多西他赛或紫杉醇的加甲酸根准分子离子峰和子离子峰的步骤。
优选地，所述流动相为：溶剂A：甲酸或甲酸铵的水溶液；
溶剂B：乙腈(ESI-)/甲醇(APCI-)。
优选地，本发明方法中，待测样品中的多西他赛或紫杉醇的浓度为2.00～4000ng/mL；
优选地，本发明方法中，在ESI(-)电离模式下，所述溶剂A中的甲酸铵或甲酸的浓度为20～1000μM，优选甲酸铵或甲酸的浓度为40～800μM；最优选甲酸铵或甲酸的浓度为约100μM。
以及，在APCI(-)电离模式下，所述溶剂A中的甲酸铵或甲酸的浓度为500μM～50000μM，优选2000μM～50000μM，最优选5000μM。
优选地，本发明方法中，检测多西他赛的m/z为852→206(ESI-)或852→280(APCI-)离子对，及紫杉醇的m/z为898→525(ESI-/APCI-)离子对。
根据本发明的测定多西他赛或紫杉醇的方法，其包括如下步骤：
1)制备待测样品；
2)采用高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪对所述待测样品进行分离和检测多西他赛或紫杉醇，
所述高效液相色谱系统的条件为：
色谱柱：Agilent Eclipse plus C18柱(2.1×50mm ID,5μm)；
柱温：35～45℃，优选40℃；
流动相：
溶剂A：甲酸或甲酸铵的水溶液；
溶剂B：乙腈(ESI-)/甲醇(APCI-)；
梯度洗脱条件：0min以20％溶剂B洗脱，0～0.50min溶剂B从20％匀速增加至60％，0.51～0.80min溶剂B从60％匀速增加至90％，0.81～1.50min以90％溶剂B洗脱，1.51～1.60min溶剂B从90％匀速下降至20％，1.61～3.50min以20％溶剂B进行柱平衡；
流速：0.40(ESI-)/0.80(APCI-)mL/min；
进样量：10μL；
质谱条件：采用ESI/APCI源负离子检测模式
在ESI(-)电离模式下：
电离模式：ESI(-)电离模式；
检测模式：MRM模式；
喷雾电压：-4000～-5000V，优选-4500V；
雾化温度：400～600℃，优选550℃；
去簇电压：-30～-50V，优选-42V；
碰撞能量：多西他赛，-45～-55V，优选-51V；紫杉醇，-20～-30V，优选-24V；
雾化气压力：40～60psi，优选50psi；
辅助气压力：50～65psi，优选60psi；
气帘气：20～40psi，优选30psi；
或者在APCI(-)电离模式下：
电离模式：APCI(-)电离模式；
检测模式：MRM模式；
喷雾电压：-4500～-5500V，优选-5000V；
雾化温度：350～450℃，优选400℃；
去簇电压：多西他赛，-42～-52V，优选-47V；紫杉醇，-38～-48V，优选-43V；
碰撞能量：多西他赛，-30～-40V，优选-35V；紫杉醇，-22～-32V，优选-27V；
雾化气压力：40～70psi，优选60psi；
气帘气：15～25psi，优选20psi。
所述检测方法为串联质谱检测，具体为：采用ESI/APCI源负离子检测模式，优化仪器喷雾电压(Ionspray voltage)、雾化气(Ion gas 1)、辅助气体(Iongas 2)、去簇电压(Declustering potential)、碰撞能量(Collision energy)等质谱工作参数得到多西他赛或紫杉醇的最佳离子化响应。优选地，在MRM模式下，检测多西他赛的m/z为852→206(ESI-)或852→280(APCI-)离子对，及紫杉醇的898→525离子对。
更优选地，在ESI(-)电离模式下多西他赛和紫杉醇分析的质谱工作参数如下表1所示：
表1：ESI(-)电离模式下多西他赛和紫杉醇分析的质谱工作参数
以及，在APCI(-)电离模式下多西他赛分析的质谱工作参数如下表2所示：
表2：在APCI(-)电离模式下多西他赛分析的质谱工作参数：
本领域技术人员可以理解，对于多西他赛和紫杉醇含量的测定，可以采用不同条件下的分离或检测方法进行，只要这些方法适合多西他赛和紫杉醇。
当然，为了方便，优选使用相同条件下的分离或检测方法，这样可以达到快速测定的目的。
进一步优选地，所述待测样品是由人或动物的生物样品经过预处理得到的，优选地，所述预处理包括如下步骤：
1)向人或动物的生物样品100μL中加入叔丁基甲醚1mL，经振摇3min和14000rpm离心5min后取上清液，用35℃氮气吹干，用甲醇–H2O溶液(75:25，v/v)100μL复溶，14000rpm离心5min后得到作为待测样品的上清液。
本领域技术人员可以理解，除非另有具体说明，在本发明申请文件中所列举的数值都是大约的数值，所述相同为大体上相同，两者都可以具有误差，所述误差例如可以为0至±10％，优选0至±5％。
附图说明
图1不同电离模式下多西他赛(A)和紫杉醇(B)的质谱离子化形式。
图2多西他赛(A)及紫杉醇(B)在负离子电离模式下的二级质谱图。
图3显示ESI(-)模式下液相流动相中甲酸铵浓度与质谱响应的关系，(A)多西他赛；(B)紫杉醇。
图4显示APCI(-)模式下液相流动相中甲酸铵浓度与质谱响应的关系，(A)多西他赛；(B)紫杉醇。
图5为多西他赛胶束给药后大鼠全血中多西他赛的药-时曲线图。
具体实施方式
液-质联用系统：液相-质谱联用分析系统(LC–MS/MS)由日本岛津prominence LC-20系列高效液相色谱系统以及AB Sciex公司生产的API3200Qtrap线性离子阱-串联四级杆杂交质谱分析仪组成，系统工作软件为Analyst 1.5。
HPLC级甲醇(CH3OH)、乙腈(CH3CN)，叔丁基甲醚(C5H12O)为美国Merck公司生产的试剂；甲酸(HCOOH)、乙酸(CH3COOH)和乙酸铵(CH3COONH4)为美国Tedia公司生产；甲酸铵(HCOONH4)为德国CNW公司生产。实验用水由Pall Cascada纯水仪制备。其它有机试剂由中国医药(集团)上海化学试剂公司提供，分析纯。
实施例1不同电离模式下多西他赛和紫杉醇的质谱离子化形式
实验方法：
1、紫杉醇或多西他赛对照品溶液浓度：50μg/mL，以针泵推注的方式通过T型三通与液相流动相混合后进入质谱检测器。
2、液相流动相：溶剂A：水溶液；溶剂B：乙腈。溶剂A中的电解质及浓度分别为：(1)1‰甲酸；(2)1‰乙酸；(3)10mM甲酸铵；(4)10mM乙酸铵。
3、液-质联用分析条件：色谱柱：Agilent Eclipse plus C18柱(2.1×50mm,5μm)；柱温：40℃；洗脱条件：以46.5％溶剂B等梯度洗脱；流速：0.40mL/min；质谱检测采用ESI(+)或ESI(-)电离模式。
4、针泵速度：10μL/min。
5、结果表示：采集20个扫描时间点的累积质谱响应值(MCA)，计算质谱响应(％)，计算方法如下：
质谱响应(％)＝(单个离子峰响应/所有离子峰响应的总和)×100％
结果：采用ESI(+)电离模式进行一级质谱检测时，紫杉醇和多西他赛在所添加的四种电解质条件下，均有多个碱金属加合离子的产生。质谱图中可见[M+H]+、[M+Na]+、[M+K]+或[M+NH4]+峰(参见图1)，其中[M+H]+和[M+Na]+峰的响应相对较强。仅在流动相中添加乙酸时(DP值为70V)可观察到较为单一、集中的紫杉醇[M+H]+峰(质谱响应约占所有离子峰响应总和的90％)。实验还发现，质谱参数中的去簇电压(DP)值对紫杉烷类化合物加合离子的形成有一定的影响。低DP值有利于其[M+H]+峰的形成(70V为最佳条件)，而高DP值有利于其[M+Na]+峰的形成(200V为最佳条件)。此外，多西他赛或紫杉醇的[M+NH4]+峰较易在低DP值下形成，而加大DP值后(200V)均未观察到[M+NH4]+峰。
采用ESI(-)电离模式进行一级质谱检测时，当液相流动相中含有甲酸或甲酸铵时，紫杉醇和多西他赛的[M-H]-峰信号非常弱，仅在质谱图上观察到很强的[M+HCOO]-峰信号；而当液相流动相中含有乙酸或乙酸铵时，紫杉醇和多西他赛除可在所采集的质谱图中见[M+CH3COO]-峰外，另有[M-H]-及[M+HCOO]-峰的产生(图1)。
结论：ESI(+)电离模式下进行一级质谱检测时，紫杉醇和多西他赛可产生多样的离子化形式，不利于质谱检测。而当采用ESI(-)电离模式时，多西他赛和紫杉醇虽不易形成[M-H]-峰，但均可产生较强的、唯一的[M+HCOO]-峰，比ESI(+)电离模式更适合于液-质联用检测。且[M+HCOO]-峰比[M-H]-峰具有更高的特异性。目前为止，文献中未见采用ESI(-)或APCI(-)电离模式对紫衫烷类化合物进行定量分析的方法，这可能与该类化合物在负离子检测模式下不易形成去质子化的[M-H]-峰有关。本发明采用的[M+HCOO]-峰可大大提高紫杉烷类化合物在负离子检测模式下的质谱响应，同时又避免了正离子检测模式造成的多种离子化形式及环境中钠离子对质谱检测的影响等，大大提高了定量分析的准确性和特异性。
实施例2ESI(-)电离模式下，液相流动相中甲酸铵浓度的优化
实验方法：
1、液-质联用分析条件：色谱柱：Agilent Eclipse plus C18柱(2.1×50mm,5μm)；柱温：40℃。液相流动相：溶剂A：H2O或甲酸铵水溶液；溶剂B：乙腈。洗脱条件：以46.5％溶剂B等梯度洗脱。流速：0.40mL/min。进样量：10μL。质谱检测采用ESI(-)电离模式，在MRM检测模式-51V的碰撞能量下，检测多西他赛的m/z 852→206离子对；在-24V的碰撞能量下，检测紫杉醇的m/z 898→525离子对，质谱工作参数见表3，多西他赛和紫杉醇在ESI(-)电离模式下的二级质谱图见图2。
表3：ESI(-)电离模式下定量分析多西他赛和紫杉醇的质谱工作参数
2、流动相中甲酸铵的浓度
流动相溶剂A中甲酸铵的浓度分别为0,10,20,50,100,200,500和1000μM。
结果：在流动相中未添加甲酸铵时，对多西他赛和紫杉醇均未检测到相应的质谱信号。随着流动相中添加的甲酸铵的浓度的升高，化合物的质谱响应也不断升高，当甲酸铵的添加浓度为100μM时，质谱响应达到最高。随着甲酸铵浓度的继续升高，化合物的响应出现下降趋势(图3)。
结论：本实验中添加的甲酸铵为液-质联用检测中常用的流动相电解质，方法简单、易行，且酸碱度适中、挥发性好，不会造成色谱柱的劣化和质谱仪的污染。实验中观察到流动相中甲酸铵的浓度与紫杉烷类化合物的质谱响应有关。通过进一步对流动相中添加的甲酸铵浓度进行优化，结果表明：当采用ESI(-)电离模式进行多西他赛或紫杉醇的定量分析时，甲酸铵的浓度优选为20～1000μM，进一步优选为40～800μM；最优选为100μM。
实施例3APCI(-)电离模式下，液相流动相中甲酸铵浓度的优化
实验方法：
1、液-质联用分析条件：色谱柱：Agilent Eclipse plus C18柱(2.1×50mmID,5μm)；柱温：45℃；流动相：溶剂A：H2O或甲酸铵水溶液；溶剂B：甲醇。梯度洗脱条件：0～0.1min以20％溶剂B洗脱，0.1～0.5min溶剂B从20％匀速增加至60％，0.51～0.8min溶剂B从60％匀速增加至90％，0.81～1.5min以90％溶剂B洗脱，1.51～1.6min溶剂B从90％匀速下降至20％，1.61～3.5min以20％溶剂B进行柱平衡；流速：0.80mL/min；进样量：10μL。质谱检测采用APCI(-)离子源，在MRM检测模式-35V的碰撞能量下，检测多西他赛的m/z 853→280离子对；在-27V的碰撞能量下，检测紫杉醇的m/z 898→525离子对，质谱工作参数见表4。
表4：APCI(-)电离模式下多西他赛定量分析的质谱工作参数
2、流动相中甲酸铵的浓度
流动相溶剂A中甲酸铵的浓度分别为0,500,2000,5000,10000,20000和50000μM。
结果：在流动相中未添加甲酸铵时，均未检测到相应的质谱信号。随着流动相中添加的甲酸铵浓度的升高，化合物的质谱响应也不断升高，在甲酸铵浓度达到5000μM及以上时，多西他赛和紫杉醇的质谱响应升高趋缓(图4)。
结论：紫杉烷类化合物在APCI(-)电离模式下形成[M+HCOO]-加合离子同样也需要在液相流动相中添加一定量的电解质。经过实验优化，同时为避免过高的电解质浓度造成对质谱离子源的污染，由图4可以看出，甲酸铵的浓度优选为500μM～50000μM，进一步优选为2000μM～50000μM，最优选5000μM。
实施例4大鼠全血中多西他赛定量分析方法的建立
以多西他赛为待测化合物，以紫杉醇为内标，建立大鼠全血中多西他赛定量分析方法，并应用于静脉或灌胃给药多西他赛制剂后大鼠全血中的多西他赛浓度定量分析。
1、液-质联用分析条件：溶剂A：浓度为5000μM的甲酸铵水溶液；溶剂B：甲醇；其余条件同实施例3。
2、大鼠全血样品前处理：将-70℃冷冻保存的大鼠全血样品(100μL)室温解冻，分别加入10μL紫杉醇(内标)溶液(浓度为500ng/mL),涡旋混合后加入1mL叔丁基甲醚，振摇2min，离心(12000rpm，10min)后取上清液，氮气吹干后以50％乙腈溶液复溶(100μL)，离心(12000rpm，5min)后取上清液用于液-质联用分析。
3、结果：采用内标法建立了定量分析大鼠全血样品中多西他赛的液-质联用方法。多西他赛在2.00～4000ng/mL的浓度范围内线性良好，相关系数(r)为0.998，定量下限为2.00ng/mL。分析批质控样品中多西他赛浓度的准确度和精密度结果(表5)表明分析的准确度和精密度能够满足生物样品定量分析所需的要求。大鼠静脉和灌胃给药多西他赛制剂后不同时间点全血中多西他赛浓度结果见图5。
表5：测定小鼠全血样品中多西他赛浓度的准确度和精密度(n＝10)
4、结论：采用APCI(-)离子源，多西他赛和紫杉醇的离子化形式与ESI(-)电离模式下的结果一致，也可以产生唯一的[M+HCOO]-峰。APCI(-)为气态的离子化过程，较ESI(-)电离模式具有更强的抗基质效应的能力，可显著缩短样品分析时间，大大提高样品分析的通量性。

Claims (5)

1.一种基于高效液相色谱-三重四级杆质谱联用技术测定多西他赛或紫杉醇的方法，所述方法包括：
1)制备待测样品，其中，待测样品中的多西他赛或紫杉醇的浓度为2.00～4000ng/mL；
2)采用高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪对所述待测样品进行分离和检测多西他赛或紫杉醇，其中使用包含甲酸铵或甲酸的流动相，以及在ESI(-)或APCI(-)电离模式下采用MRM模式测定多西他赛或紫杉醇的加甲酸根准分子离子峰和子离子峰，
所述流动相为：溶剂A：甲酸或甲酸铵的水溶液；
溶剂B：乙腈(ESI-)/甲醇(APCI-)，
其中，在ESI(-)电离模式下，所述甲酸或甲酸铵的水溶液的浓度为20～1000μM；
以及，在APCI(-)电离模式下，所述甲酸或甲酸铵的水溶液浓度为500～50000μM；
其中，检测多西他赛的m/z为852→206(ESI-)或852→280(APCI-)离子对，及紫杉醇的m/z为898→525(ESI-/APCI-)离子对。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，在ESI(-)电离模式下，所述甲酸或甲酸铵的水溶液的浓度为40～800μM；
以及，在APCI(-)电离模式下，所述甲酸或甲酸铵的水溶液浓度为2000～50000μM。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，在ESI(-)电离模式下，所述甲酸或甲酸铵的水溶液的浓度为100μM；
以及，在APCI(-)电离模式下，所述甲酸或甲酸铵的水溶液的浓度为5000μM。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述高效液相色谱系统的条件为：
色谱柱：Agilent Eclipse plus C18柱，2.1×50mm ID,5μm；
柱温：35～45℃；
流动相：
溶剂A：甲酸或甲酸铵的水溶液；
溶剂B：乙腈(ESI-)/甲醇(APCI-)；
梯度洗脱条件：0min以20％溶剂B洗脱，0～0.50min溶剂B从20％匀速增加至60％，0.51～0.80min溶剂B从60％匀速增加至90％，0.81～1.50min以90％溶剂B洗脱，1.51～1.60min溶剂B从90％匀速下降至20％，1.61～3.50min以20％溶剂B进行柱平衡；
流速：0.40(ESI-)/0.80(APCI-)mL/min；
进样量：10μL；
质谱条件：采用ESI/APCI源负离子检测模式；
当在ESI(-)电离模式下时：
电离模式：ESI(-)电离模式；
检测模式：MRM模式；
喷雾电压：-4000～-5000V；
雾化温度：400～600℃；
去簇电压：-30～-50V；
碰撞能量：多西他赛，-45～-55V；紫杉醇，-20～-30V；
雾化气压力：40～60psi；
辅助气压力：50～65psi；
气帘气：20～40psi；
以及在APCI(-)电离模式下时：
电离模式：APCI(-)电离模式；
检测模式：MRM模式；
喷雾电压：-4500～-5500V；
雾化温度：350～450℃；
去簇电压：多西他赛，-42～-52V；紫杉醇，-38～-48V；
碰撞能量：多西他赛，-30～-40V；紫杉醇，-22～-32V；
雾化气压力：40～70psi；
气帘气：15～25psi。
5.根据权利要求4所述的方法，其中，
所述柱温为40℃；
当在ESI(-)电离模式下时：
喷雾电压：-4500V；
雾化温度：550℃；
去簇电压：-42V；
碰撞能量：多西他赛，-51V；紫杉醇，-24V；
雾化气压力：50psi；
辅助气压力：60psi；
气帘气：30psi；
以及在APCI(-)电离模式下时：
喷雾电压：-5000V；
雾化温度：400℃；
去簇电压：多西他赛，-47V；紫杉醇，-43V；
碰撞能量：多西他赛，-35V；紫杉醇，-27V；
雾化气压力：60psi；
气帘气：20psi。
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