CN105418629A - 一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用 - Google Patents
一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105418629A CN105418629A CN201510925314.7A CN201510925314A CN105418629A CN 105418629 A CN105418629 A CN 105418629A CN 201510925314 A CN201510925314 A CN 201510925314A CN 105418629 A CN105418629 A CN 105418629A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- rhodamine derivatives
- probe
- application
- buffered soln
- rhodamine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical class [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 49
- 239000000523 sample Substances 0.000 title claims abstract description 36
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 title abstract 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 title abstract 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 11
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- DFWGBTUBHOSCRE-UHFFFAOYSA-K [Na+].[Na+].[Na+].CCO.OC(CC([O-])=O)(CC([O-])=O)C([O-])=O Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].CCO.OC(CC([O-])=O)(CC([O-])=O)C([O-])=O DFWGBTUBHOSCRE-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 11
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 10
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 10
- 230000008859 change Effects 0.000 description 8
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N fluorescin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1C1C2=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C21 MURGITYSBWUQTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 2
- VVZRKVYGKNFTRR-UHFFFAOYSA-N 12h-benzo[a]xanthene Chemical compound C1=CC=CC2=C3CC4=CC=CC=C4OC3=CC=C21 VVZRKVYGKNFTRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- AGPAWPRKUNZKBU-HIXSDJFHSA-N CCN(CC)C(CC=C12)C=C1OC(/C(/CCC1)=C/c(ccc(N(CC)CC)c3)c3O)=C1C2(c1ccccc11)OC1=O Chemical compound CCN(CC)C(CC=C12)C=C1OC(/C(/CCC1)=C/c(ccc(N(CC)CC)c3)c3O)=C1C2(c1ccccc11)OC1=O AGPAWPRKUNZKBU-HIXSDJFHSA-N 0.000 description 1
- SMSNGLUBILRIMR-HIXSDJFHSA-N CCN(CC)c1ccc(/C=C(\CCC2)/C(Oc3c4ccc(N(CC)CC)c3)=C2C4(c2ccccc22)OC2=O)c(O)c1 Chemical compound CCN(CC)c1ccc(/C=C(\CCC2)/C(Oc3c4ccc(N(CC)CC)c3)=C2C4(c2ccccc22)OC2=O)c(O)c1 SMSNGLUBILRIMR-HIXSDJFHSA-N 0.000 description 1
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 150000001452 anthocyanidin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- -1 compound Rhodamine Derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003317 industrial substance Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 1
- 238000011179 visual inspection Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
- C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D493/10—Spiro-condensed systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K11/00—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials
- C09K11/06—Luminescent, e.g. electroluminescent, chemiluminescent materials containing organic luminescent materials
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6428—Measuring fluorescence of fluorescent products of reactions or of fluorochrome labelled reactive substances, e.g. measuring quenching effects, using measuring "optrodes"
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
- C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
- C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
- C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
- C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
- C09K2211/1088—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing oxygen as the only heteroatom
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
本发明提供了一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用,该罗丹明衍生物的化学结构式为:这种具有特定结构的罗丹明衍生物不但能够测定常规的pH范围,针对极酸或极碱的小分子物质也有很好的探测,拓宽了pH的检测范围,而且原料成本低、操作简单、应用方便。
Description
技术领域
本发明涉及pH探针应用领域,具体而言,涉及一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用。
背景技术
细胞内pH在生命体中扮演着重要的角色,它与细胞维持正常的功能息息相关。细胞内pH的反常变化容易诱导细胞功能、生长和分裂的突变,并可能引发癌症和阿尔兹海默综合症等疾病。尤其是在细胞内pH偏酸性的条件下,人体更容易患上如癌症、高血脂、痛风、糖尿病等各种疾病。对细胞内pH的检测能够为我们研究细胞内生理学和病理学过程提供重要的信息。荧光探针法以其灵敏度高、对pH专一性相应和无损细胞等独特的优势成为人们关注的焦点。
现有技术中,很多有机小分子,比如纳米颗粒(ChemicalSocietyReviews,2006,35(11):1028-1042),荧光蛋白都被开发用来测量细胞分子内pH值,其中苯并氧杂蒽(ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,2008,105(26):8829-8834),荧光素及其衍生物(Cytometry,1989,10(2):151-164),花青素衍生物(Biotechniques,2002,33(5):1152-1157),罗丹明衍生物(AngewandteChemieInternationalEdition,2012,51(31):7674-7679)都是众所周知的pH探针。但是现在大多数荧光传感器测量的pH值的测量范围仅仅停留在4-6或者6-8之间,很少有测定极酸性(pH<4)或极碱性(pH>10)的荧光探针物质问世,使得应用时范围比较窄,不能更广泛的应用于分子pH值的测定,在实际应用过程中也比较局限,对于酸性或者碱性极强的分子缺乏可应用的检测手段,从而导致诸多研究出现了滞后性,因此开发一种pH检测范围更宽的荧光探针是本领域中亟待解决的技术问题。
有鉴于此,特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用,所述的具有特定结构的罗丹明衍生物不但能够测定常规的pH范围,针对极酸或极碱的小分子物质也有很好的探测,拓宽了pH的检测范围,而且原料成本低、操作简单、应用方便等优点。
为了实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案:
本发明实施例提供了一种具有特定结构的罗丹明衍生物作为pH探针,其化学结构式为:
这种具有特定结构的罗丹明衍生物(Rh)是按照“Biomaterials,2013,34(37):9566-9571”该篇文献记载的方法进行合成的,属于一种已经公开的化学物质,虽然现有技术中被用来做pH探针的罗丹明衍生物有很多种,罗丹明衍生物可以用来作为pH探针大家也知晓,但是还没有人将具有这种结构的罗丹明衍生物用于当做pH探针进行应用,在本领域中这种应用尚属首创。
在本发明中,这种罗丹明衍生物的优势在于其测定的pH范围很宽,基本可以实现pH从1-14全范围的探测,当然其主要用于极酸或者极碱的环境更佳,因为一般的酸性或碱性环境其他荧光探针物质也一样能实现探测,本发明的这种探测物质并没有显示出其优势性。因此本发明的罗丹明衍生物测定pH的范围最好为pH≤6以及pH≥8,更优的测定pH的范围区间可以为2-6以及8-12之间,最优的所述罗丹明衍生物测定pH的范围为pH≤4以及pH≥10,这种最优的测定范围是现有技术中任何一种探针物质所不能达到的,也就是说利用现有技术的手段是无法实现极酸或着极碱的分子细胞探测的,本发明揭示的这种拥有特定结构的罗丹明衍生物恰恰弥补了这一点,填补了技术空白。例如这种罗丹明衍生物可以测定的pH范围还可以选择为1.4、1.5、1.6、1.8、2.4、2.5、2.6、2.8、3.4、3.6、3.8、10.5、10.6、10.8、11.5、11.6、11.8、12.5、12.6、12.8、13.5、13.6、13.8。
具体应用时,最好先将罗丹明衍生物用pH控制在2-6之间的缓冲溶液分别稀释后,观察颜色变化并通过测定紫外吸收以确定吸光度数值差异明显的波长。同样的对于碱性环境,也是先将罗丹明衍生物用pH控制在8-10之间的缓冲溶液分别稀释后,观察颜色变化并通过测定紫外吸收以确定吸光度数值差异明显的波长。在配制缓冲溶液时比如pH取2-6之间时,各个试验点最好取的尽量密一点,这样后续测定实验结果时容易看出趋势,同样的pH取8-10之间时试验点也取的密一点为好,还有就是虽然操作时缓冲溶液的pH值是取2-6或者8-10,但是并不代表不可以取其他区间,本发明只是罗列了较优的实验区间,但是本发明的罗丹明衍生物对于小于2以及大于10的pH范围同样具有很好的检测效果。
进一步的,在用缓冲溶液稀释之前先将罗丹明衍生物用乙醇最好配制成浓度为100μmol/L以下的溶液,这样在用缓冲溶液稀释时更容易形成均一的状态,显色指示更加明显,充分提高了准确性。
进一步的,酸性环境的缓冲溶液最好选择乙醇-柠檬酸钠缓冲溶液,碱性环境的缓冲溶液最好选择Tris-HCl缓冲溶液,这些缓冲溶液均为市面上常见缓冲液,应用效果好。
配制好罗丹明衍生物的缓冲溶液,测定其紫外吸收并观察其吸光度随pH增大而增大最明显的数值,发现在酸性环境下,其吸光度变化最明显的波长为636nm,碱性环境下,其吸光度变化最明显的波长为723nm,通过确定波长为日后对试样测定提供了依据。从溶液的颜色变化上也能有明确的指示作用,溶液的颜色在酸性条件下显紫色,pH增大到5-8显蓝色,碱性条件下显绿色。说明该化合物罗丹明衍生物可以作为裸眼pH指示剂用,不同的pH值其颜色变化明显,通过肉眼观察就可知晓大致的范围,方便操作,也节省了人力物力,如果想进一步确定确切的pH值,还可测定其吸光度能够得到准确的pH值,这种操作方式可谓一举两得,针对测定结果的准确性有不同的要求的人群均能得到满足,适用范围广,值得广泛推广应用。
这种罗丹明衍生物本身比较便宜易得,成本低,不用考虑原料来源以及经济性。还有操作时非常方便,不用专业人员也可进行操作,所涉及的实验仪器价格也比较平民化,人力成本以及操作成本都比较低。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
(1)本发明创造性的将具有特定结构的罗丹明衍生物(Rh)首次应用到pH探针的应用上,这种罗丹明衍生物是按照“Biomaterials,2013,34(37):9566-9571”该篇文献记载的方法进行合成的,属于一种已经公开的化学物质,但是还没有人将具有这种结构的罗丹明衍生物用于当做pH探针进行应用,在本领域中这种应用尚属首创,具有一定的开拓性;
(2)本发明的罗丹明衍生物pH探针,具有易于合成的优点,随着pH的变化,化合物的紫外吸收会有明显的变化而产生明显的颜色变化,在酸碱环境下都能够显色,能够检测更宽的pH范围,在pH探针领域具有广阔的应用前景;
(3)成本较低,操作方法简单方便,不用专业人员也可进行操作,所涉及的实验仪器价格也比较平民化,人力成本以及操作成本都比较低,整个测定过程中所涉及的试剂均为常见化工原料,量大价低,原料易得;
(4)本发明所用的各种试剂对环境友好、不含重金属和有害成分,对人体健康没有伤害,不会给操作人员带来任何身体上的危害,非常环保。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为本发明实施例一的化合物Rh(100μmol/L)采用不同pH的乙醇-柠檬酸钠(0.01mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后随着波长的增加其紫外吸收变化趋势;
图2为本发明实施例一的化合物Rh(100μmol/L)采用不同pH的乙醇-柠檬酸钠(0.01mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后在636nm紫外吸收变化趋势;
图3为本发明实施例二的化合物Rh(100μmol/L)采用不同pH的Tris-HCl(0.05mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后随着波长的增加其紫外吸收变化趋势;
图4为本发明实施例二的化合物Rh(100μmol/L)采用不同pH的Tris-HCl(0.05mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后在723nm处其紫外吸收变化趋势;
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1
pH探针探测的操作过程按如下步骤进行:
1)配制100μmol/LRh的乙醇溶液,以及pH为2到6之间不同的乙醇-柠檬酸钠(0.01mol/L)缓冲溶液;
2)按照体积比将Rh的乙醇溶液与缓冲溶液按照为1:9的比例混合均匀,并测定其紫外吸收;
3)通过测定后,具体化合物Rh(100μmol/L)采用不同pH的乙醇-柠檬酸钠(0.01mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后随着波长的增加其紫外吸收变化趋势见附图1,从图1中可以发现当波长为636nm时,其吸光度变化最为明显,吸光度随pH增大而增大,因此将该波长定为以后测定样品时需要确定的参数。
4)在确定的波长636nm下,化合物Rh(100μmol/L)采用不同pH的乙醇-柠檬酸钠(0.01mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后其紫外吸收变化趋势从图2中可以看出,其吸光度针对不同的pH变化比较明显,这样在对分子进行荧光探测时,可以非常明显的探测出其实际的pH值,准确度非常高;
5)另外发现溶液的颜色在酸性条件下呈紫色,随着pH值逐渐增加其颜色逐渐偏蓝色,颜色变化明显,可以作为裸眼pH指示剂用。
实施例2
pH探针探测的操作过程按如下步骤进行:
1)配制100μmol/LRh的乙醇溶液,以及pH为8到10之间不同的Tris-HCl(0.05mol/L)缓冲溶液;
2)按照体积比将Rh的乙醇溶液与缓冲溶液按照为1:9的比例混合均匀,并测定其紫外吸收;
3)通过测定后,具体化合物Rh(100μmol/L)采用不同pH的Tris-HCl(0.05mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后随着波长的增加其紫外吸收变化趋势见附图3,从图3中可以发现当波长为723nm时,其吸光度变化最为明显,吸光度随pH增大而增大,因此将该波长定为以后测定样品时需要确定的参数。
4)在确定的波长723nm下,化合物Rh(100μmol/L)采用不同pH的Tris-HCl(0.01mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后其紫外吸收变化趋势从图4中可以看出,其吸光度针对不同的pH变化比较明显,这样在对分子进行荧光探测时,可以非常明显的探测出其实际的pH值,准确度非常高;
5)另外发现溶液的颜色在酸性条件下呈蓝色,随着pH值逐渐增加其颜色逐渐偏绿色,颜色变化明显,可以作为裸眼pH指示剂用。
实施例3
pH探针探测的操作过程按如下步骤进行:
1)配制90μmol/LRh的乙醇溶液,以及pH为1到4之间不同的的乙醇-柠檬酸钠(0.01M)缓冲溶液;
2)按照体积比将Rh的乙醇溶液与缓冲溶液按照为1:9的比例混合均匀,并测定其紫外吸收;
3)通过测定后,具体化合物Rh(90μmol/L)采用不同pH的乙醇-柠檬酸钠(0.01mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后随着波长的增加其紫外吸收变化趋势最为明显的波长为636nm,吸光度随pH增大而增大,因此将该波长定为以后测定样品时需要确定的参数。
4)在确定的波长636nm下,化合物Rh(90μmol/L)采用不同pH的乙醇-柠檬酸钠(0.01mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后其紫外吸收变化趋势为吸光度针对不同的pH变化比较明显,这样在对分子进行荧光探测时,可以非常明显的探测出其实际的pH值,准确度非常高;
5)另外发现溶液的颜色在酸性条件下呈紫色,随着pH值逐渐增加其颜色逐渐偏蓝色,颜色变化明显,可以作为裸眼pH指示剂用。
实施例4
pH探针探测的操作过程按如下步骤进行:
1)配制90μmol/LRh的乙醇溶液,以及pH为10到14之间不同的Tris-HCl(0.05mol/L)缓冲溶液;
2)按照体积比将Rh的乙醇溶液与缓冲溶液按照为1:9的比例混合均匀,并测定其紫外吸收;
3)通过测定后,具体化合物Rh(90μmol/L)采用不同pH的Tris-HCl(0.05mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后随着波长的增加其紫外吸收变化趋势最为明显的波长为723nm,吸光度随pH增大而增大,因此将该波长定为以后测定样品时需要确定的参数。
4)在确定的波长723nm下,化合物Rh(90μmol/L)采用不同pH的Tris-HCl(0.01mol/L,v/v,1/9)缓冲溶液稀释后其紫外吸收变化趋势为吸光度针对不同的pH变化比较明显,这样在对分子进行荧光探测时,可以非常明显的探测出其实际的pH值,准确度非常高;
5)另外发现溶液的颜色在酸性条件下呈蓝色,随着pH值逐渐增加其颜色逐渐偏绿色,颜色变化明显,可以作为裸眼pH指示剂用。
需要注意的是,上述1-4实施例中的Rh即化学结构式如下的罗丹明衍生物:
本发明实施例1-2的实验结果从说明书附图1-4中可以明显的看出趋势,虽然实施例3-4没有附图但是其实验结果基本跟实施例1-2一致,说明本发明这种具有特定结构的罗丹明衍生物其基本可以实现pH全范围的检测,具有很好的应用性。打破了现有技术中的pH探针只能测量pH为4-6或者6-8之间的分子的偏见,具有开拓性的意义,为后续操作提供了可参考的依据。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明,然而应意识到,在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此,这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。
Claims (10)
1.一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,该罗丹明衍生物的化学结构式为:
2.根据权利要求1所述的罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,所述罗丹明衍生物测定pH的范围为pH≤6以及pH≥8。
3.根据权利要求1或2所述的罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,所述罗丹明衍生物测定pH的范围为2-6以及8-12之间。
4.根据权利要求1或2所述的罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,所述罗丹明衍生物测定pH的范围为pH≤4以及pH≥10。
5.根据权利要求1所述的罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,将该罗丹明衍生物用于探测的过程中先将其采用pH控制在2-6之间且不同pH的缓冲溶液分别稀释后,观察颜色变化并通过测定紫外吸收,以确定吸光度数值差异明显所对应的波长。
6.根据权利要求5所述的罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,将该罗丹明衍生物用乙醇配制成浓度为100μmol/L以下的溶液后再进行稀释。
7.根据权利要求6所述的罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,所用缓冲溶液为乙醇-柠檬酸钠缓冲溶液。
8.根据权利要求1所述的罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,将该罗丹明衍生物用于探测的过程中先将其采用pH控制在8-10之间且不同pH的缓冲溶液分别稀释后,观察颜色变化并通过测定紫外吸收,以确定吸光度数值差异明显所对应的波长。
9.根据权利要求8所述的罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,先将该罗丹明衍生物用乙醇配制成浓度为100μmol/L以下的溶液后再进行稀释。
10.根据权利要求9所述的罗丹明衍生物作为pH探针的应用,其特征在于,所用缓冲溶液为Tris-HCl缓冲溶液。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510925314.7A CN105418629B (zh) | 2015-12-10 | 2015-12-10 | 一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510925314.7A CN105418629B (zh) | 2015-12-10 | 2015-12-10 | 一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105418629A true CN105418629A (zh) | 2016-03-23 |
CN105418629B CN105418629B (zh) | 2017-08-29 |
Family
ID=55497223
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510925314.7A Active CN105418629B (zh) | 2015-12-10 | 2015-12-10 | 一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN105418629B (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109836432A (zh) * | 2019-03-05 | 2019-06-04 | 遵义医科大学 | 肿瘤靶向的诊疗联用单分子先导化合物的制备方法和应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS57144787A (en) * | 1981-03-03 | 1982-09-07 | Sumitomo Chem Co Ltd | Recording paper |
CN102093371A (zh) * | 2011-01-08 | 2011-06-15 | 青岛科技大学 | 一种硫代罗丹明b内酰胺衍生物及其制备方法 |
CN104017568A (zh) * | 2014-05-23 | 2014-09-03 | 苏州科技学院 | 一种含罗丹明的Hg2+和pH双功能荧光探针及合成方法 |
CN104017567A (zh) * | 2014-04-29 | 2014-09-03 | 苏州科技学院 | 一种含罗丹明内酰胺基团的高分子pH探针及合成方法 |
CN104893712A (zh) * | 2015-05-22 | 2015-09-09 | 济南大学 | 一种新型高选择性二价铜离子荧光探针及其制备方法与生物应用 |
-
2015
- 2015-12-10 CN CN201510925314.7A patent/CN105418629B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS57144787A (en) * | 1981-03-03 | 1982-09-07 | Sumitomo Chem Co Ltd | Recording paper |
CN102093371A (zh) * | 2011-01-08 | 2011-06-15 | 青岛科技大学 | 一种硫代罗丹明b内酰胺衍生物及其制备方法 |
CN104017567A (zh) * | 2014-04-29 | 2014-09-03 | 苏州科技学院 | 一种含罗丹明内酰胺基团的高分子pH探针及合成方法 |
CN104017568A (zh) * | 2014-05-23 | 2014-09-03 | 苏州科技学院 | 一种含罗丹明的Hg2+和pH双功能荧光探针及合成方法 |
CN104893712A (zh) * | 2015-05-22 | 2015-09-09 | 济南大学 | 一种新型高选择性二价铜离子荧光探针及其制备方法与生物应用 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
LIN YUAN等: "Analogs of Changsha near-infrared dyes with large Stokes Shifts for bioimaging", 《BIOMATERIALS》 * |
XUAN-XUAN ZHAO等: "A novel pH probe based on a rhodamine–rhodamine platform", 《RSC ADVANCES》 * |
马京: "荧光小分子pH探针的最新研究进展", 《广东化工》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN109836432A (zh) * | 2019-03-05 | 2019-06-04 | 遵义医科大学 | 肿瘤靶向的诊疗联用单分子先导化合物的制备方法和应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN105418629B (zh) | 2017-08-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Buck et al. | Optochemical nanosensor PEBBLEs: photonic explorers for bioanalysis with biologically localized embedding | |
Hou et al. | Single-cell pH imaging and detection for pH profiling and label-free rapid identification of cancer-cells | |
Kang et al. | A solvent depend on ratiometric fluorescent probe for hypochlorous acid and its application in living cells | |
Barati et al. | Carbon dots with strong excitation-dependent fluorescence changes towards pH. Application as nanosensors for a broad range of pH | |
CN105693703B (zh) | 一种用于细胞内溶酶体pH成像的新型比率型荧光探针 | |
EP1346223B1 (de) | Reagens zur lumineszenz-optischen bestimmung eines analyten | |
CN106442515B (zh) | 一种简单的银离子目视定量检测方法 | |
WO2012083064A1 (en) | Silaanthracene as a red and near infrared sensor and a method to manufacture such a sensor | |
CN113528121B (zh) | 镧系金属有机框架化合物在检测抗生素中的应用及检测方法 | |
CN109596683A (zh) | 一种测定石膏、硅石中氟含量的方法 | |
Zhu et al. | Fluorescent probes based on benzothiazole-spiropyran derivatives for pH monitoring in vitro and in vivo | |
Song et al. | A ratiometric fluorescence probe for rapid detection of mitochondrial SO 2 derivatives | |
Jin et al. | Fluorescence lifetime-based pH sensing by platinum nanoclusters | |
Li et al. | A novel 3-Hydroxychromone fluorescence sensor for intracellular Zn2+ and its application in the recognition of prostate cancer cells | |
Qiao et al. | Rapid and visual detection of heparin based on the disassembly of polyelectrolyte-induced pyrene excimers | |
Shen et al. | Construction and evaluation of ratiometric fluorescent probes based on a 7-aminocoumarin scaffold for the detection of SO2 derivatives | |
Zhen et al. | A NIR fluorescent probe for the specific detection of hypochlorite and its application in vitro and in vivo | |
EP2145925B1 (de) | Verwendung einer langwellig emittierenden Cyaninverbindung als NIR-Fluoreszenzstandard und Kit zur Kalibrierung von Photolumineszenzmesssystem | |
CN110452250A (zh) | 一种荧光素母体结构的检测肼用荧光探针 | |
Alshammari et al. | Low cost, high sensitivity detection of waterborne Al3+ cations and F− anions via the fluorescence response of a morin derivative dye | |
Gao et al. | A mitochondria-targeted and deep-red emission ratiometric fluorescent probe for real-time visualization of SO 2 in living cells, zebrafish and living mice | |
CN105418629A (zh) | 一种罗丹明衍生物作为pH探针的应用 | |
CN110483368A (zh) | 一种检测汞离子的荧光探针及其制备方法与使用方法 | |
Singh et al. | A Dihomooxacalix [4] arene-gold nanohybrid based colorimetric sensor for sensitive and selective detection of iodide | |
Huang et al. | A fluorescent probe for the detection of HOCl in lysosomes |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20201230 Address after: 233000 No.10, building 32, Zone 8, Guangcai market, bengshan District, Bengbu City, Anhui Province Patentee after: Bengbu Hongjing Technology Co.,Ltd. Address before: No.43, Zhengzhou road, North District, Qingdao, Shandong 266042 Patentee before: Qingdao University Of Science And Technology |
|
TR01 | Transfer of patent right |