CN105412014A - 一种肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体及其制备方法。该液态前体脂质体配方包含下列重量百分比的原料:肉苁蓉苯乙醇苷0.5~1.5%,磷脂3~32%,修饰剂0.5~10.5%,丙二醇60~90%,稳定剂0.3~4.5%;制备方法是按配方取各原料置于容器中,超声使其混合均匀,得红棕色澄明液体,经微孔滤膜除菌后灌封于充氮容器中。该前体脂质体用适当水合介质稀释后可迅速的组装成粒径均匀的含药脂质体制剂,可用于静脉给药、口服给药和皮肤给药系统。本发明可采用常规工艺设备,产品质量稳定;水合后形成的脂质体质量稳定,该方法工艺简单、成本低,易于工业化大生产。
Description
技术领域
本发明属于药物制剂和化妆品领域,涉及一种含有肉苁蓉苯乙醇苷的液态前体脂质体,本发明还涉及该液态前体脂质体的制备方法。
背景技术
苯乙醇苷类(phenylethanoidglycosides,PhGs)成分是一类由苯乙醇苷元与糖基结合而成的苷类化合物,其中,由于多数化合物糖上都连有咖啡酰基或阿魏酰基,国内外学者又称其为苯丙素类化合物(phenylpropanoidglycosides)。PhGs的糖链部分仅由葡萄糖和鼠李糖组成;与苷元直接相连的中心糖为葡萄糖;除单糖苷外,中心葡萄糖的3位均连有鼠李糖;在三糖苷中第2个葡萄糖连在中心葡萄糖的6位;在中心葡萄糖的4或6位常常连有咖啡酰基、阿魏酰基或香豆酰基等苯丙烯酰基类基团。苯乙醇苷类是肉苁蓉中主要活性成分,具有壮阳、抗氧化、增强记忆力、调节神经等多种功能。研究证明,肉苁蓉苯乙醇苷类可提高血清、脑组织细胞中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,降低丙二醛(MDA)含量和乙酰胆碱酯酶(ChE)的活性,防止脂质过氧化作用,清除机体自由基,抗氧化,进而提高机体的免疫力,减轻脑萎缩,保护神经元,提高记忆力。尤其是对阿尔茨海默病(AD)、帕金森病具有良好效果。此外,肉苁蓉苯乙醇苷类还可以使皮肤雀斑、黄褐斑、老年斑的色素沉着消失,使皮肤增白。因此,肉苁蓉苯乙醇苷广泛的应用于药品、食品和化妆品中。肉苁蓉苯乙醇苷溶于水、稀醇,水溶性好,渗透性差,生物利用度低,在生物药剂学分类系统(BCS)中属于III类药物。
脂质体(liposome)是单层或多层脂质双分子膜以同心圆的形式包封而成,类似细胞膜的微球体。脂质体能提高生药系统II类药物的溶解性和III类药物的渗透性。脂质体作为药物载体具有使药物靶向网状内皮系统、延长药效、降低药物毒性、提高疗效、避免耐受性、改变给药途径等优点,特别是近年来脂质体作为基因转移的有效载体,具有病毒类载体无法比拟的优点,因而受到医药界的广泛关注。但是,在国内,除了个别外用制剂的基质,脂质体研究基本处于实验室阶段。主要原因是:
(1)脂质体混悬液在贮存期间易发生聚集、融合及药物渗漏,尤其水溶性药物的渗漏更显著;同时,天然磷脂易氧化、水解,难以满足药物制剂稳定性的要求;
(2)脂质体制剂的制备工艺较复杂,不易扩大生产。对脂质体进行冷冻干燥可在一定程度上缓解贮存稳定性问题,但工艺复杂、成本高。
由于脂质体制剂的上述缺点,导致含药脂质体的商品化过程步履维艰。
为解决以上问题,1986年,英国学者Payne等提出了前体脂质体(proliposomes)这一概念,系将脂质体膜材和药物的混合溶液在减压搅拌下逐步分布到一种可溶性固体载体表面,形成可自由流动的粉体状制剂。由于尚未形成脂质双分子层结构,因此称之为前体脂质体,使用前加水或缓冲液水化即形脂质体混悬液。在制备固体型前体脂质体过程中,除去有机溶剂工艺是实现产业化的主要技术瓶颈,且固体型前体脂质体的水合过程也客观存在水合速度较慢,局部溶解不完全、分散不均匀等问题,而导致药物脂质体粒径不易控制,难以满足临床使用要求,至今尚无该类制剂上市。肉苁蓉苯乙醇苷已有上市的肉苁蓉总苷胶囊及其复方制剂,但尚未见完善的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体制剂制备技术。
发明内容
本发明的目的针对上述问题提供一种含有水溶性药物肉苁蓉苯乙醇苷的液态前体脂质体及其制备方法。制备的前体脂质体可用于注射给药、口服给药和皮肤给药,简便易行。
本发明是通过以下技术方案来实现的:
含肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其配方含有下列重量百分比的组分:
肉苁蓉苯乙醇苷0.5~1.5%,磷脂3~32%,修饰剂0.5~10.5%,丙二醇60~90%,稳定剂0.3~4.5%。
上述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其中所采用的磷脂是大豆磷脂、氢化大豆磷脂或合成磷脂,用量优选15~25%。
上述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其中修饰剂为泊洛沙姆类和卖泽类非离子型表面活性剂中的一种或多种混合物,优选泊洛沙姆188,用量优选0.5~5%。
上述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其中所选的稳定剂为胆酸钠、胆固醇、脱氧胆酸钠、吐温80、司盘20、维生素E中的一种或多种混合物,优选脱氧胆酸钠。
当脱氧胆酸钠和泊洛沙姆188混合使用时包封率相对较高,粒径小。泊洛沙姆188:脱氧胆酸钠=3~7:1。
进一步地,本发明优选如下组方:肉苁蓉苯乙醇苷0.5~1.5%,磷脂15~25%,泊洛沙姆1880.5~5%,丙二醇60~90%,脱氧胆酸钠0.3~2.0%。
上述的肉苁蓉苯乙醇苷液态脂质体的制备方法,按配方取各原料于容器中,使其混合、分散,得澄明液体,并将液体灌封于充氮容器中,得到含有肉苁蓉苯乙醇苷的液态前体脂质体。
上述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,用适量的(5倍量~100倍量(v/v))水合介质稀释而成的脂质体制剂,平均粒径<1000nm,包封率>30%。优选平均粒径400~700nm,包封率>40%。
本发明的一个实施例中,所制备的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体经稀释得到的脂质体制剂的平均粒径为443.7nm,包封率为51.97%。
上述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其中水合介质选自注射用水、纯水、磷酸盐水溶液、0.9%氯化钠水溶液或葡萄糖水溶液。
上述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体或水合后的脂质体制剂,可用于注射给药、口服给药、皮肤给药。
本发明技术方案突出的实质性特点和显著的进步主要体现在:
将水溶性的药物肉苁蓉苯乙醇苷制备成液态的前体脂质体,所述的液态前体脂质体使用前用适当水合介质稀释后可快速自组装成为粒径适宜、包封率相对较高的含药脂质体制剂。采用的前体脂质体制备方法简便易行,在水合过程中不必采用匀化技术或机械,即可快速形成脂质体,不仅解决了普通脂质体的聚集、沉降、融合、渗漏和高温灭菌等稳定性方面的问题,同时避免了固体型脂质体制备中有机溶媒的去除过程,还避免干燥过程对脂质体的损坏。前体脂质体在贮存过程中为无水的澄明液体,是动力学稳定体系,有效解决了脂质体制剂普遍存在的稳定性问题,提高了药物的生物利用度,减少毒副作用。此外,前体脂质体制备的工艺设备简单,水合后形成的脂质体质量稳定,易于工业化生产。
附图说明
下面结合附图对本发明技术方案进一步说明:
图1肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体在0.9%氯化钠溶液中自组装后形成脂质体的粒径分布图
具体实施方式
以下通过实例对本发明作进一步的阐述,这些实例并不意味着对本发明的限制。
实施例1
处方:肉苁蓉苯乙醇苷20mg,大豆磷脂300mg,泊洛沙姆188100mg,脱氧胆酸钠30mg,丙二醇3mL。
制备工艺:将处方量的大豆磷脂超声溶于丙二醇中,随后添加处方量的药物、泊洛沙姆188和脱氧胆酸钠,待药物及其他组分全部溶解至呈现红棕色澄清液体,再用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌,最后将滤液灌封于充有氮气的安瓿瓶或西林瓶中,即得肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体。
将制得的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体加入至10倍量(v/v)的0.9%氯化钠水溶液中,可快速的形成肉苁蓉苯乙醇苷脂质体溶液,平均粒径为269.3nm,包封率37.63%。
实施例2
处方见表1.
表1不同的表面活性剂对液态前体脂质体的包封率和粒径的影响
制备工艺:将处方量的大豆磷脂超声溶于丙二醇(药:丙二醇=1:80m/v)中,随后分别添加处方量的药物、泊洛沙姆188、脱氧胆酸钠和司盘20,待药物及其他组分全部溶解至呈现红棕色澄清液体,再用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌,最后将滤液灌封于充有氮气的安瓿瓶或西林瓶中,即得肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体。
将制得的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体加入至10倍量(v/v)的0.9%氯化钠水溶液中,可快速的形成肉苁蓉苯乙醇苷脂质体溶液,测定其包封率和粒径,结果见表1。
由表1可知,使用不同的表面活性剂,则前体脂质体的包封率和粒径不同,加入泊洛沙姆188的包封率最大,吐温80的包封率最小;粒径吐温80的最大,脱氧胆酸钠的最小。粒径越小,越有利于吸收。脱氧胆酸钠和泊洛沙姆188混合使用则包封率相对较高,粒径较小。
实施例3
采用Design-Expert8.0.6软件中的BBD实验设计,对磷脂用量、泊洛沙姆188和脱氧胆酸钠的用量三因素进行考察,设计见表2。
表2BBD试验因素和水平
制备工艺:将处方量的大豆磷脂超声溶于丙二醇中,随后添加处方量的药物、泊洛沙姆188和脱氧胆酸钠,待药物及其他组分全部溶解至呈现红棕色澄清液体,再用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌,最后将滤液灌封于充有氮气的安瓿瓶或西林瓶中,即得肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体。
将制得的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体加入至10倍量(v/v)的0.9%氯化钠水溶液中,可快速的形成肉苁蓉苯乙醇苷脂质体溶液,测定其包封率。经方差分析,得出最优结果:药:大豆磷脂:泊洛沙姆188:脱氧胆酸钠:丙二醇为1:20:3.52:0.84:80(m/m/m/m/v)。在此条件下处方如下:
处方:肉苁蓉苯乙醇苷50mg,大豆磷脂1g,泊洛沙姆188176mg,脱氧胆酸钠42mg,丙二醇4mL。
制备工艺:将处方量的大豆磷脂超声溶于丙二醇中,随后添加处方量的药物、泊洛沙姆188和脱氧胆酸钠,待药物及其他组分全部溶解至呈现红棕色澄清液体,再用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌,最后将滤液灌封于充有氮气的安瓿瓶或西林瓶中,即得肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体。
将制得的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体加入至10倍量(v/v)的0.9%氯化钠水溶液中,可快速的形成肉苁蓉苯乙醇苷脂质体溶液,粒径分布见图1,粒径分布均匀,平均粒径为443.7nm,包封率51.97%。
实施例4
处方:肉苁蓉苯乙醇苷50mg,大豆磷脂1.25g,泊洛沙姆188200mg,脱氧胆酸钠48mg,丙二醇2.5mL。
制备工艺:将处方量的大豆磷脂超声溶于丙二醇中,随后添加处方量的药物、泊洛沙姆188和脱氧胆酸钠,待药物及其他组分全部溶解至呈现红棕色澄清液体,再用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌,最后将滤液灌封于充有氮气的安瓿瓶或西林瓶中,即得肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体。
将制得的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体加入至10倍量(v/v)的0.9%氯化钠水溶液中,可快速的形成肉苁蓉苯乙醇苷脂质体溶液,平均粒径为899nm,包封率52.16%。
实施例5
处方:肉苁蓉苯乙醇苷35mg,氢化大豆磷脂700mg,泊洛沙姆188250mg,脱氧胆酸钠25mg,丙二醇3mL。
制备工艺:将处方量的大豆磷脂超声溶于丙二醇中,随后添加处方量的药物、泊洛沙姆188和脱氧胆酸钠,待药物及其他组分全部溶解至呈现红棕色澄清液体,再用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌,最后将滤液灌封于充有氮气的安瓿瓶或西林瓶中,即得肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体。
将制得的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体加入至10倍量(v/v)的0.9%氯化钠水溶液中,可快速的形成肉苁蓉苯乙醇苷脂质体溶液,平均粒径为560.2nm,包封率49.56%。
实施例6
处方:肉苁蓉苯乙醇苷48mg,大豆磷脂816mg,泊洛沙姆188170mg,脱氧胆酸钠52mg,丙二醇4mL。
制备工艺:将处方量的大豆磷脂超声溶于丙二醇中,随后添加处方量的药物、泊洛沙姆188和脱氧胆酸钠,待药物及其他组分全部溶解至呈现红棕色澄清液体,再用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌,最后将滤液灌封于充有氮气的安瓿瓶或西林瓶中,即得肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体。
将制得的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体加入至10倍量(v/v)的0.9%氯化钠水溶液中,可快速的形成肉苁蓉苯乙醇苷脂质体溶液,平均粒径为642.1nm,包封率45.78%。
实施例7稳定性实验
分别将3批含肉苁蓉苯乙醇苷的前体脂质体、肉苁蓉苯乙醇苷普通脂质体悬液于40℃、相对湿度75%条件下放置。放置0、30、60、90d后,用紫外检测法测定肉苁蓉苯乙醇苷的泄漏率。
表3肉苁蓉苯乙醇苷在前体脂质体和普通脂质体中稳定性比较结果
结果表明,肉苁蓉苯乙醇苷普通脂质体中药物含量随着时间的增加明显降低,而前体脂质体中药物含量变化不大,说明本发明含有肉苁蓉苯乙醇苷的前体脂质体能明显的提高其贮存稳定性。
需要理解到的是:以上所述仅是本发明的部分实施方式,对于技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以作出若干改进,这些改进也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其特征在于:包含以下重量百分比的组分:肉苁蓉苯乙醇苷0.5~1.5%,磷脂3~32%,修饰剂0.5~10.5%,丙二醇60~90%,稳定剂0.3~4.5%。
2.根据权利要求1所述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其特征在于:所述磷脂为大豆磷脂、氢化大豆磷脂或合成磷脂。
3.根据权利要求1或2所述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其特征在于:所述磷脂的用量优选15~25%。
4.根据权利要求1-3任何一项所述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其特征在于:所述修饰剂为泊洛沙姆类和卖泽类非离子型表面活性剂中的一种或多种混合物,优选泊洛沙姆。
5.根据权利要求1-4任何一项所述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其特征在于:所述稳定剂为胆酸钠、胆固醇、脱氧胆酸钠、吐温80、司盘20、维生素E中的一种或多种混合物,优选脱氧胆酸钠。
6.根据权利要求1-5任何一项所述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其特征在于:所述的泊洛沙姆优选0.5~5%。
7.根据权利要求1-6任何一项所述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体,其特征在于:包含以下重量百分比的组分:肉苁蓉苯乙醇苷0.5~1.5%,磷脂15~25%,泊洛沙姆1880.5~5%,丙二醇60~90%,脱氧胆酸钠0.3~2.0%。
8.权利要求1所述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体的制备方法,其特征在于:将肉苁蓉苯乙醇苷、磷脂、修饰剂和稳定剂加入到丙二醇溶剂中,在无水条件下混合,使混合物溶解成澄清,得到肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体制剂。
9.根据权利要求8所述的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体的制备方法,其特征在于:所制备的肉苁蓉苯乙醇苷液态前体脂质体制剂加入水合介质后自动组装成为脂质体。
10.根据权利要求9所述的含肉苁蓉苯乙醇苷的液态前体脂质体的制备方法,其特征在于:所述的水合介质为注射用水、纯水、磷酸盐水溶液、0.9%氯化钠水溶液或葡萄糖水溶液。
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