CN105409831A - 一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法及应用，其中方法具体是通过在受精蛋开始孵化的第五天至第十五天之间向卵白内注射至少一次ghrelin溶液。本发明实施方法简单，能显著降低新生雏鸡皮下脂肪细胞的分化、减少脂肪细胞的沉积，降低新生雏鸡脂肪的含量，为后期肉鸡饲养中防止脂肪过度沉积，减少鸡体内脂肪含量奠定良好的基础。从而降低中的脂肪含量和胆固醇含量。通过减少鸡肉中脂肪细胞的分化，减少脂肪细胞的沉积，进一步减少了鸡肉中脂肪和胆固醇的含量，降低了鸡肉中脂肪和胆固醇对人们身体健康的危害。
Description
技术领域
本发明涉及减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法,具体涉及一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法及应用。
背景技术
研究表明，内脏脂肪会破坏人体内部的信息传导系统，被脂肪包裹的内脏器官会向身体输出错误化学信号，致使器官内部也继续囤积脂肪。人体器官内部一旦形成脂肪堆积，就会增加患糖尿病、高血压、动脉硬化、心脏病等各种代谢性疾病的机会，进而增加中风、心肌梗死等心脑血管疾病的发生率。同时，内脏脂肪不断挤压肠胃，严重影响消化功能，导致便秘。鸡油(鸡的皮下脂肪和腹部脂肪)中甘油三酯和胆固醇的含量较高，随着社会的进步和人们健康意识的提高，人们对鸡油也越来越嫌弃，因而在对肉鸡进行加工和烹饪前，常常被扔掉，这不但造成了大量的资源浪费，而且还严重损害了消费者的利益。
随着社会的快速发展和生活水平的提高，我们的食物结构也发生了较大改变，现在每天的肉类占的比重越来越大，而其中的肉鸡(鸡肉)更甚。随之而来的是脂肪摄入过高，以及脂肪带来的高胆固醇。研究表明，内脏脂肪会破坏人体内部的信息传导系统，被脂肪包裹的内脏器官会向身体输出错误化学信号，致使器官内部也继续囤积脂肪。人体器官内部一旦形成脂肪堆积，就会增加患糖尿病、高血压、动脉硬化、心脏病等各种代谢性疾病的机会，进而增加中风、心肌梗死等心脑血管疾病的发生率。同时，内脏脂肪不断挤压肠胃，严重影响消化功能，导致便秘。
发明内容
为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法及应用。
本发明的技术方案是：一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法，具体是通过在受精蛋开始孵化的第五天至第十五天之间向卵白内注射至少一次ghrelin溶液。
本发明的进一步改进包括：
所述ghrelin溶液的浓度为100-150ng/ul，每次每蛋注射量为0.1ml。
在受精蛋开始孵化的第五天和第十五天时，分别向卵白内注射一次ghrelin溶液。
在受精蛋开始孵化的第五天时，每枚蛋注射浓度为100ng/ul的ghrelin溶液0.1ml。
在受精蛋开始孵化的第五天时，每枚蛋注射浓度为150ng/ul的ghrelin溶液0.1ml。
在受精蛋开始孵化的第十五天时，每枚蛋注射浓度为100ng/ul的ghrelin溶液0.1ml。
在受精蛋开始孵化的第十五天时，每枚蛋注射浓度为150ng/ul的ghrelin溶液0.1ml。
所述的ghrelin来源是优选鼠。
本发明的另一目的在于，ghrelin在减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积中的应用。
本发明实施方法简单，能显著降低新生雏鸡皮下脂肪细胞的分化、减少脂肪细胞的沉积，降低新生雏鸡脂肪的含量，为后期肉鸡饲养中防止脂肪过度沉积，减少鸡体内脂肪含量奠定良好的基础。从而降低中的脂肪含量和胆固醇含量。通过减少鸡肉中脂肪细胞的分化，减少脂肪细胞的沉积，进一步减少了鸡肉中脂肪和胆固醇的含量，降低了鸡肉中脂肪和胆固醇对人们身体健康的危害。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做详细说明。
实验材料与方法
1试验材料
1.1实验动物
选用Ross肉鸡受精种蛋(新乡大用有限公司)称重，挑取重量在65-70g的蛋140枚，随机分成7组，每组20枚，分别为Control组(正常孵化倍，不做任何处理)、E5-100组、E5-150组、E5-醋酸组、E15-100组、E15-150组、E15-醋酸组。对各组蛋进行编号，记录。孵化条件：37.5±0.2℃，相对湿度55±2％。
1.2动物处理：卵内喂食ghrelin
Control组在整个孵化的过程中不做任何处理；
E5-100组在E5胚龄时每枚蛋注射浓度为100ng/ul的ghrelin溶液0.1ml；
E5-150组在E5胚龄时每枚蛋注射浓度为150ng/ul的ghrelin溶液0.1ml，
E5-醋酸组在E5胚龄时每枚蛋注射醋酸0.1ml；
E15-100组在E15胚龄时每枚蛋注射浓度为100ng/ulghrelin溶液0.1ml，
E15-150组在E15胚龄时每枚蛋注射浓度为150ng/ulghrelin溶液0.1ml。
E15-醋酸组在E5胚龄时每枚蛋注射醋酸0.1ml；
ghrelin溶液的配方：鼠ghrelin粉末，用浓度为0.1％的醋酸稀释。
卵内喂食的具体步骤：E5(开始孵化的第五天)胚龄时，通过照蛋器照蛋发现卵白的位置在气室的正下方，E15胚龄时，通过照蛋器照蛋，发现卵白的位置在气室的斜下方，标出注射位点。采用22G针头卵白注射ghrelin(ghrelin也称为生长激素促分泌素的内源性配基，或饥饿素，或脑肠肽)溶液，注射后，玻璃纸蜡封注射口，继续孵化，此时，孵化器摇蛋按钮关闭，24小时后，蜡封的口凝固后，重新打开摇蛋按钮，继续孵化。
1.3组织取材
雏鸡出壳后新生雏鸡称重，记录。按100㎎/100g体质量乌拉坦麻醉，然后颈椎脱臼处死，其中每组10只鸡取肝脏、腋下脂肪用0.75％的生理盐水冲洗干净，用滤纸吸去多余的水分，再用万分之一的分析天平称重后置于4％的多聚甲醛磷酸缓冲液(PH7.4)中固定。每组另外10只鸡取肝脏、腋下脂肪液氮冷冻后，移入低温冰箱，用于提取RNA。
2试验方法
2.1固定组织冰冻切片的制作
多聚甲醛固定好的组织放入10％的葡萄糖溶液中过夜，等其沉底后再放入20％的葡萄糖溶液过夜沉底，第三天再放入30％的蔗糖溶液沉底，最后将组织放入包埋剂中进行冰冻切片，切片厚度为0.5μm，展贴在载玻片上，-20℃冰箱中储存备用。
2.2脂肪细胞油红O染色
1、从‐20℃冰箱中取出切片放在70％的酒精中30s—1min
2、然后放入油红O染液中13—18min
3、用蒸馏水洗去染液
4、苏木精复染5min
5、自来水蓝化15min
6、蒸馏水水洗1min
7、甘油封固剂封片
染色结果：脂肪呈红色，胞核呈蓝色。
2.3肝脏中ATGL和FAS的表达以及腋下脂肪ATGL、PPAR-γ、SCD等基因的表达
2.3.1引物设计(引物由上海英骏生物技术有限公司提供)
2.3.2不同基因的实时定量PCR
将不同处理组的肝脏、皮下脂肪、腹部脂肪分别在液氮中研磨成粉末，按照TRIzol法(LifeTechnologies,15596018,Carlsbad,USA)提取组织总RNA，根据PrimeScriptTM反转录试剂盒(Takara,RR047A,Dalian,China)去除总RNA中的DNA并反转录为cDNA，反应中止后-20℃保存备用，所有操作按试剂盒说明完成。实时定量PCR(qTR-PCR)按照SYBRpremixExTaqⅡ(Takara,RR820A,Dalian,China)试剂盒指导说明配制，反应在ABI7300(AppliedBiosystems,Marsiling,Singapore)仪器上完成。反应体系如下：总体积20μL，其中2×SYBRmix10.0μL，正反引物各0.5μL(20μM)，dyeII0.4μL，cDNA2μL(标准曲线确定稀释浓度为1:10)，补充灭菌双蒸水至总体积为20μL；每个样品3个重复。反应程序如下：95℃30s；95℃5s，58℃20s，72℃34s，40个循环；在第二阶段第三步收集荧光数据(72℃34s)。同时，运用熔解曲线分析确认引物扩增的特异性。实验重复3次。反应结束后，根据ABI7300仪器数据包运用2–ΔΔCT法对相关实验数据进行分析。
1.3数据处理
数据应用SAS软件(version8.01；SASInstitute,Cary,NC)统计分析，结果用平均数±标准差表示，P<0.05为差异显著。
二、实验结果
表1.卵内喂食ghrelin对新生雏鸡肝脏指数、腋下脂肪指数的影响
| 肝脏(％；mg/g) | 腋下脂肪(％；mg/g) | |
| Control | 2.35±0.03a, | 1.17±0.04a |
| E5-100 | 1.98±0.03b | 0.98±0.05b |
| E5-150 | 2.01±0.04b | 1.00±0.01b |
| E5-醋酸 | 2.32±0.03a | 1.18±0.04a |
| E15-100 | 2.08±0.02b | 1.09±0.02b |
| E15-150 | 2.28±0.01a | 1.07±0.04a |
| E15-醋酸 | 2.30±0.02a | 1.27±0.05a |
表1表明，与对照组相比，鸡胚E5胚龄分别注射100和150ng/ul0.1ml以及E15胚龄注射100ng/ul0.1mlghrelin均能显著降低鸡胚出壳时肝脏指数和腋下脂肪指数，而且E5胚龄100ng/ul的浓度，降低的最多；E5胚龄和E15胚龄注射相同浓度的醋酸以及E15胚龄注射150ng/ul0.1mlghrelin对鸡胚出壳时肝脏指数和腋下脂肪指数的影响略小，与对照组相比，差异不显著。
2.卵内喂食ghrelin对新生雏鸡腋下脂肪脂肪细胞密度和大小的影响
表2表明，与对照组相比，鸡胚E5胚龄分别注射100和150ng/ul0.1ml以及E15胚龄注射100ng/ul0.1mlghrelin均能显著降低脂肪细胞的密度和脂肪细胞的大小，而且E5胚龄100ng/ul的浓度，降低的最多；E5胚龄和E15胚龄注射相同浓度的醋酸对鸡胚出壳时脂肪细胞的密度和脂肪细胞的大小影响略小，而E15胚龄注射150ng/ul0.1mlghrelin对鸡胚出壳时脂肪细胞的密度和脂肪细胞的大小与对照组相比，差异不显著。
3.卵内喂食ghrelin对新生雏鸡肝脏中FAS和ATGL基因表达的影响
| FAS | ATGL | |
| Control | 1.000±0.03a | 1.000±0.021c |
| E5-100 | 0.509±0.06c | 1.271±0.021a |
| E5-150 | 0.601±0.04c | 1.282±0.042a |
| E5-醋酸 | 0.824±0.07b | 1.191±0.022b |
| E15-100 | 0.613±0.02c | 1.239±0.023a |
| E15-150 | 0.951±0.03a | 0.953±0.051c |
| E15-醋酸 | 0.792±0.05b | 1.174±0.032b |
表3表明，与对照组相比，鸡胚E5胚龄分别注射100和150ng/ul0.1ml以及E15胚龄注射100ng/ul0.1mlghrelin均能显著降低肝脏FAS的表达、提高ATGL的表达，而且E5胚龄100ng/ul的浓度影响最大；E5胚龄和E15胚龄注射相同浓度的醋酸对鸡胚出壳时肝脏FAS、ATGL的表达影响较小，而E15胚龄注射150ng/ul0.1mlghrelin对鸡胚出壳时肝脏FAS的表达、提高ATGL的表达的影响与对照组相比，差异不显著。
4.卵内喂食ghrelin对新生雏鸡雏鸡腋下脂肪中PPAR-γ、ATGL和SCD基因表达的影响
| PPAR-γ | ATGL | SCD | |
| Control | 0.67±0.05c | 1.00±0.03c | 1.00±0.01a |
| E5-100 | 0.98±0.05a | 1.79±0.18a | 0.51±0.14c |
| E5-150 | 1.00±0.06a | 1.58±0.18a | 0.63±0.07c |
| E5-醋酸 | 0.66±0.04c | 1.20±0.04b | 0.84±0.05b |
| E15-100 | 0.95±0.06a | 1.54±0.13a | 0.67±0.04a |
| E15-150 | 0.77±0.03b | 1.03±0.12c | 0.97±0.04a |
| E15-醋酸 | 0.57±0.08c | 1.19±0.05b | 0.86±0.04b |
表4表明，与对照组相比，鸡胚E5胚龄分别注射100和150ng/ul0.1ml以及E15胚龄注射100ng/ul0.1mlghrelin均能显著降低脂肪组织中PPAR-γ和SCD的表达、提高ATGL的表达，而且E5胚龄100ng/ul的浓度影响最大；E5胚龄和E15胚龄注射相同浓度的醋酸对鸡胚出壳时脂肪组织PPAR-γ、SCD、ATGL的表达影响较小，而E15胚龄注射150ng/ul0.1mlghrelin对鸡胚出壳时脂肪组织PPAR-γ、SCD、ATGL的影响与对照组相比，差异不显著。
结论：鸡胚E5胚龄注射浓度为100ng/ul的ghrelin能显著降低新生雏鸡脂肪细胞的分化、减少脂肪细胞的沉积。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (9)
1.一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法，其特征在于，在受精蛋开始孵化的第五天至第十五天之间向卵白内注射至少一次ghrelin溶液。
2.根据权利要求1所述的一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法，其特征在于，所述ghrelin溶液的浓度为100-150ng/ul，每次每蛋注射量为0.1ml。
3.根据权利要求1或2所述的一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法，其特征在于，在受精蛋开始孵化的第五天和第十五天时，分别向卵白内注射一次ghrelin溶液。
4.根据权利要求1或2所述的一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法，其特征在于，在受精蛋开始孵化的第五天时，每枚蛋注射浓度为100ng/ul的ghrelin溶液0.1ml。
5.根据权利要求1或2所述的一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法，其特征在于，在受精蛋开始孵化的第五天时，每枚蛋注射浓度为150ng/ul的ghrelin溶液0.1ml。
6.根据权利要求1或2所述的一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法，其特征在于，在受精蛋开始孵化的第十五天时，每枚蛋注射浓度为100ng/ul的ghrelin溶液0.1ml。
7.根据权利要求1或2所述的一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法，其特征在于，在受精蛋开始孵化的第十五天时，每枚蛋注射浓度为150ng/ul的ghrelin溶液0.1ml。
8.根据权利要求1或2所述的一种利用ghrelin减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积的方法，其特征在于，所述的ghrelin来源是鼠。
9.ghrelin在减少新生雏鸡脂肪细胞分化和降低脂肪沉积中的应用。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1989802A (zh) * | 2002-01-09 | 2007-07-04 | 恩布里克斯公司 | 卵类注射方法和在禽蛋壳上形成开口的方法 |
| CN101213954A (zh) * | 2008-01-18 | 2008-07-09 | 中国农业大学 | 一种用于获得免疫耐受禽类的方法 |
| CN101507422A (zh) * | 2009-03-18 | 2009-08-19 | 南京农业大学 | 一种蛋清内注射leptin的方法 |
| WO2009109428A2 (en) * | 2008-02-01 | 2009-09-11 | Alpha-O Peptides Ag | Self-assembling peptide nanoparticles useful as vaccines |
| CN103719018A (zh) * | 2014-01-03 | 2014-04-16 | 江苏省家禽科学研究所 | 一种提高胚胎期鸭生长速度的方法 |
-
2015
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1989802A (zh) * | 2002-01-09 | 2007-07-04 | 恩布里克斯公司 | 卵类注射方法和在禽蛋壳上形成开口的方法 |
| CN101213954A (zh) * | 2008-01-18 | 2008-07-09 | 中国农业大学 | 一种用于获得免疫耐受禽类的方法 |
| WO2009109428A2 (en) * | 2008-02-01 | 2009-09-11 | Alpha-O Peptides Ag | Self-assembling peptide nanoparticles useful as vaccines |
| CN101507422A (zh) * | 2009-03-18 | 2009-08-19 | 南京农业大学 | 一种蛋清内注射leptin的方法 |
| CN103719018A (zh) * | 2014-01-03 | 2014-04-16 | 江苏省家禽科学研究所 | 一种提高胚胎期鸭生长速度的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 陈文明等: "禽类Ghrelin研究进展", 《动物医学进展》 * |
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