CN105348013A - 一种茶树专用腐植酸生物菌肥的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种茶树专用腐植酸生物菌肥的制备方法，属于生物菌肥领域。本发明用茶树栽植的土壤在培养基中培养后选出菌落再进行培养得菌悬液，将菌悬液和活化风化煤混合后密封发酵，发酵后浓缩、干燥、粉碎、装袋即可得茶树专用腐植酸生物菌肥，本发明制得的茶树生物菌肥来活化土壤，供给作物所需要的各种营养，具有培肥地力、改良土壤、抗旱、促早熟的功效，不破坏土壤结构、保护生态、不污染环境，是生产绿色食品不可缺少的肥料。
Description
技术领域
本发明公开了一种茶树专用腐植酸生物菌肥的制备方法，属于生物菌肥领域。
背景技术
近年来，由于我国农业生产对肥料的需求量不断增加，而化学肥料价格上涨和大量使用化肥造成环境及农产品污染等原因，人们开始重视微生物菌肥的生产。微生物菌肥的功效已得到人们的认可，但在生产中的效果还不稳定，这是由于对一些制约微生物菌肥肥效的因素研究还不是很全面，如微生物进入土壤后同类微生物间的竞争、拮抗作用以及接种菌株在植物根际的定殖能力等，及其应用方法和产品工艺等方面，都需要进行广泛的研究，使微生物菌肥料得到广泛的应用。由于微生物肥料具有低投入、高产出且绿色无污染的特性，今后，可持续农业的发展也需要生物肥料的参与，微生物菌肥不仅可补充肥源不足，而且可用作绿色有机食品专用肥。因此，需开发新的微生物菌肥品种，提高质量，发展微生物菌肥加工工业，建立微生物肥料质量标准和管理体系，以及加强微生物菌肥的科研、技术培训及推广应用工作，从而推动我国微生物菌肥向产业化方向发展。
有益微生物有利于茶树的生长发育、品质的提高、抗性的增强，因此有益微生物制作的肥料应用于农业生产中，能够获得特定的肥料效应，而在微生物肥料制作过程中，核心材料就是微生物菌种的筛选。微生物肥料大致可以分为三类：一
类是茶园生物活性有机肥，既含有茶树必需的营养元素和多种有机物，也含有可增强土壤生物活性的有益微生物体。第二类是微生物菌肥，即有益菌类与有机质基质复合而成的生物复合肥，既可增加根际有益菌群，又可增加土壤有机质。
发明内容
本发明主要解决的技术问题：针对目前茶园施用磷肥和钾肥能提高其土壤中的各种微生物数量，但是氮肥施入过多会导致大多数微生物类群数量急剧减少，这种变化可能由于氮肥在长期施用时会导致土壤剧烈酸化，从而抑制了微生物繁殖导致茶树生长所需养分不足的问题，提供了一种茶树专用腐植酸生物菌肥的制备方法，本发明用茶树栽植的土壤在培养基中培养后选出菌落再进行培养得菌悬液，将菌悬液和活化风化煤混合后密封发酵，发酵后浓缩、干燥、粉碎、装袋即可得茶树专用腐植酸生物菌肥，本发明制得的茶树生物菌肥来活化土壤，供给作物所需要的各种营养，具有培肥地力、改良土壤、抗旱、促早熟的功效，不破坏土壤结构、保护生态、不污染环境，是生产绿色食品不可缺少的肥料。
为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：
1.（1）称取800～900g茶树栽植地中的土壤，放置在研钵中研磨5～10min后过90目标准筛，取10～20g研磨后的土壤粉末加入到80～100mL无菌水中，放置在摇床上，振荡反应30～40min，制得土壤悬浮液；
2.（2）用移液管移取2～5mL土壤悬浮液均匀涂抹在斜面培养基上，放置在恒温培养箱中，在35～45℃下培养24～36h后，选取培养基上生长速度快，直径大的菌落，移接到琼脂培养基上，继续在30～40℃下培养20～30h；
3.（3）取培养完成后的培养基，用20～30mL蒸馏水冲洗3～5次，冲洗液用带有粒径为5～10mm玻璃珠的锥形瓶中，放置在摇床机上，以200～300r/min的转速振荡混合20～30min，制得菌悬液，备用；
4.（4）称取500～600g风化煤，放入烘箱中，在105～110℃下干燥1～2h，将干燥后的风化煤倒入高速粉碎机，粉碎3～5min后，过60目标准筛，再取100～200g粉碎后的风化煤，倒入1L烧杯中，加入500～600mL蒸馏水，以300～400W的功率超声处理30～50min，得到活化风化煤；
5.（5）称取50～100g上述制得的活化风化煤装入陶瓷发酵罐中，再加入10～20mL菌悬液以及1～2g碳酸氢铵、2～3g磷酸氢二铵和60～80mL蒸馏水，用搅拌棒搅拌均匀后，再用保鲜膜密封罐口，放置恒温箱中，在35～45℃下发酵2～3周；
6.（6）发酵完成后将发酵物移入浓缩罐中，减压至1000～1200Pa浓缩处理20～30min，得泥状浓缩物，再将浓缩物进行喷气干燥，进气温度为200～220℃，出气温度为150～180℃，干燥后放入气流粉碎机粉碎并过50目标准筛，装袋后即得一种茶树专用腐植酸生物菌肥。
所述的斜面培养基组成为2～5g牛肉蛋白粉，3～5g鱼肉汁，1～2g酵母浸出汁粉，1～3g葡萄糖和0.5～1g醋酸钠以及20～30mL蒸馏水。
所述的琼脂培养基为3～5g马铃薯粉，2～4g葡萄糖，1～3g琼脂和10～15mL蒸馏水。
本发明的应用方法：将本发明制得的生物菌肥均匀播撒在成熟茶树根部，播撒量为5～7g/m2，刚开始播撒需要每隔10～15天浇水一次，浇2～4次后即可让其自然生长，生长到5～7月后再进行播撒一次，播撒量为10～14g/m2，播撒后直至生长至成熟发芽，播撒后茶树发芽密度增加了5～10%。
本发明的有益效果是：
（1）本发明制得的茶树生物菌肥来活化土壤，供给作物所需要的各种营养，具有培肥地力、改良土壤、抗旱、促早熟的功效；
（2）本发明制得的茶树生物菌肥不破坏土壤结构、保护生态、不污染环境，是生产绿色食品不可缺少的肥料。
具体实施方式
首先称取800～900g茶树栽植地中的土壤，放置在研钵中研磨5～10min后过90目标准筛，取10～20g研磨后的土壤粉末加入到80～100mL无菌水中，放置在摇床上，振荡反应30～40min，制得土壤悬浮液；用移液管移取2～5mL土壤悬浮液均匀涂抹在斜面培养基上，放置在恒温培养箱中，在35～45℃下培养24～36h后，选取培养基上生长速度快，直径大的菌落，移接到琼脂培养基上，继续在30～40℃下培养20～30h；取培养完成后的培养基，用20～30mL蒸馏水冲洗3～5次，冲洗液用带有粒径为5～10mm玻璃珠的锥形瓶中，放置在摇床机上，以200～300r/min的转速振荡混合20～30min，制得菌悬液，备用；称取500～600g风化煤，放入烘箱中，在105～110℃下干燥1～2h，将干燥后的风化煤倒入高速粉碎机，粉碎3～5min后，过60目标准筛，再取100～200g粉碎后的风化煤，倒入1L烧杯中，加入500～600mL蒸馏水，以300～400W的功率超声处理30～50min，得到活化风化煤；称取50～100g上述制得的活化风化煤装入陶瓷发酵罐中，再加入10～20mL菌悬液以及1～2g碳酸氢铵、2～3g磷酸氢二铵和60～80mL蒸馏水，用搅拌棒搅拌均匀后，再用保鲜膜密封罐口，放置恒温箱中，在35～45℃下发酵2～3周；发酵完成后将发酵物移入浓缩罐中，减压至1000～1200Pa浓缩处理20～30min，得泥状浓缩物，再将浓缩物进行喷气干燥，进气温度为200～220℃，出气温度为150～180℃，干燥后放入气流粉碎机粉碎并过50目标准筛，装袋后即得一种茶树专用腐植酸生物菌肥。
所述的斜面培养基组成为2～5g牛肉蛋白粉，3～5g鱼肉汁，1～2g酵母浸出汁粉，1～3g葡萄糖和0.5～1g醋酸钠以及20～30mL蒸馏水。
所述的琼脂培养基为3～5g马铃薯粉，2～4g葡萄糖，1～3g琼脂和10～15mL蒸馏水。
实例1
13.首先称取800g茶树栽植地中的土壤，放置在研钵中研磨5min后过90目标准筛，取10g研磨后的土壤粉末加入到80mL无菌水中，放置在摇床上，振荡反应30min，制得土壤悬浮液；用移液管移取2mL土壤悬浮液均匀涂抹在斜面培养基上，放置在恒温培养箱中，在35℃下培养24h后，选取培养基上生长速度快，直径大的菌落，移接到琼脂培养基上，继续在30℃下培养20h；取培养完成后的培养基，用20mL蒸馏水冲洗3次，冲洗液用带有粒径为5mm玻璃珠的锥形瓶中，放置在摇床机上，以200r/min的转速振荡混合20min，制得菌悬液，备用；称取500g风化煤，放入烘箱中，在105℃下干燥1h，将干燥后的风化煤倒入高速粉碎机，粉碎3min后，过60目标准筛，再取100g粉碎后的风化煤，倒入1L烧杯中，加入500mL蒸馏水，以300W的功率超声处理30min，得到活化风化煤；称取50g上述制得的活化风化煤装入陶瓷发酵罐中，再加入10mL菌悬液以及1g碳酸氢铵、2g磷酸氢二铵和60mL蒸馏水，用搅拌棒搅拌均匀后，再用保鲜膜密封罐口，放置恒温箱中，在35℃下发酵2周；发酵完成后将发酵物移入浓缩罐中，减压至1000Pa浓缩处理20min，得泥状浓缩物，再将浓缩物进行喷气干燥，进气温度为200℃，出气温度为150℃，干燥后放入气流粉碎机粉碎并过50目标准筛，装袋后即得一种茶树专用腐植酸生物菌肥。
所述的斜面培养基组成为2g牛肉蛋白粉，3g鱼肉汁，1g酵母浸出汁粉，1g葡萄糖和0.5g醋酸钠以及20mL蒸馏水。
所述的琼脂培养基为3g马铃薯粉，2g葡萄糖，1g琼脂和10mL蒸馏水。
本发明的应用方法：将本发明制得的生物菌肥均匀播撒在成熟茶树根部，播撒量为5g/m2，刚开始播撒需要每隔10天浇水一次，浇2次后即可让其自然生长，生长到5月后再进行播撒一次，播撒量为10g/m2，播撒后直至生长至成熟发芽，播撒后茶树发芽密度增加了5%。
实例2
16.首先称取850g茶树栽植地中的土壤，放置在研钵中研磨8min后过90目标准筛，取15g研磨后的土壤粉末加入到90mL无菌水中，放置在摇床上，振荡反应35min，制得土壤悬浮液；用移液管移取3mL土壤悬浮液均匀涂抹在斜面培养基上，放置在恒温培养箱中，在40℃下培养30h后，选取培养基上生长速度快，直径大的菌落，移接到琼脂培养基上，继续在35℃下培养25h；取培养完成后的培养基，用25mL蒸馏水冲洗4次，冲洗液用带有粒径为8mm玻璃珠的锥形瓶中，放置在摇床机上，以250r/min的转速振荡混合25min，制得菌悬液，备用；称取550g风化煤，放入烘箱中，在108℃下干燥1.5h，将干燥后的风化煤倒入高速粉碎机，粉碎4min后，过60目标准筛，再取150g粉碎后的风化煤，倒入1L烧杯中，加入550mL蒸馏水，以350W的功率超声处理40min，得到活化风化煤；称取75g上述制得的活化风化煤装入陶瓷发酵罐中，再加入15mL菌悬液以及1.5g碳酸氢铵、2.5g磷酸氢二铵和70mL蒸馏水，用搅拌棒搅拌均匀后，再用保鲜膜密封罐口，放置恒温箱中，在40℃下发酵2周；发酵完成后将发酵物移入浓缩罐中，减压至1100Pa浓缩处理25min，得泥状浓缩物，再将浓缩物进行喷气干燥，进气温度为210℃，出气温度为165℃，干燥后放入气流粉碎机粉碎并过50目标准筛，装袋后即得一种茶树专用腐植酸生物菌肥。
所述的斜面培养基组成为4g牛肉蛋白粉，4g鱼肉汁，1.5g酵母浸出汁粉，2g葡萄糖和0.8g醋酸钠以及25mL蒸馏水。
所述的琼脂培养基为4g马铃薯粉，3g葡萄糖，2g琼脂和13mL蒸馏水。
本发明的应用方法：将本发明制得的生物菌肥均匀播撒在成熟茶树根部，播撒量为6g/m2，刚开始播撒需要每隔13天浇水一次，浇3次后即可让其自然生长，生长到6月后再进行播撒一次，播撒量为12g/m2，播撒后直至生长至成熟发芽，播撒后茶树发芽密度增加了8%。
实例3
19.首先称取900g茶树栽植地中的土壤，放置在研钵中研磨10min后过90目标准筛，取20g研磨后的土壤粉末加入到100mL无菌水中，放置在摇床上，振荡反应40min，制得土壤悬浮液；用移液管移取5mL土壤悬浮液均匀涂抹在斜面培养基上，放置在恒温培养箱中，在45℃下培养36h后，选取培养基上生长速度快，直径大的菌落，移接到琼脂培养基上，继续在40℃下培养30h；取培养完成后的培养基，用30mL蒸馏水冲洗5次，冲洗液用带有粒径为10mm玻璃珠的锥形瓶中，放置在摇床机上，以300r/min的转速振荡混合30min，制得菌悬液，备用；称取600g风化煤，放入烘箱中，在110℃下干燥2h，将干燥后的风化煤倒入高速粉碎机，粉碎5min后，过60目标准筛，再取200g粉碎后的风化煤，倒入1L烧杯中，加入600mL蒸馏水，以400W的功率超声处理50min，得到活化风化煤；称取100g上述制得的活化风化煤装入陶瓷发酵罐中，再加入20mL菌悬液以及2g碳酸氢铵、3g磷酸氢二铵和80mL蒸馏水，用搅拌棒搅拌均匀后，再用保鲜膜密封罐口，放置恒温箱中，在45℃下发酵3周；发酵完成后将发酵物移入浓缩罐中，减压至1200Pa浓缩处理30min，得泥状浓缩物，再将浓缩物进行喷气干燥，进气温度为220℃，出气温度为180℃，干燥后放入气流粉碎机粉碎并过50目标准筛，装袋后即得一种茶树专用腐植酸生物菌肥。
所述的斜面培养基组成为5g牛肉蛋白粉，5g鱼肉汁，2g酵母浸出汁粉，3g葡萄糖和1g醋酸钠以及30mL蒸馏水。
所述的琼脂培养基为5g马铃薯粉，4g葡萄糖，3g琼脂和15mL蒸馏水。
本发明的应用方法：将本发明制得的生物菌肥均匀播撒在成熟茶树根部，播撒量为7g/m2，刚开始播撒需要每隔15天浇水一次，浇4次后即可让其自然生长，生长到7月后再进行播撒一次，播撒量为14g/m2，播撒后直至生长至成熟发芽，播撒后茶树发芽密度增加了10%。
Claims (3)
1.一种茶树专用腐植酸生物菌肥的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：
（1）称取800～900g茶树栽植地中的土壤，放置在研钵中研磨5～10min后过90目标准筛，取10～20g研磨后的土壤粉末加入到80～100mL无菌水中，放置在摇床上，振荡反应30～40min，制得土壤悬浮液；
（2）用移液管移取2～5mL土壤悬浮液均匀涂抹在斜面培养基上，放置在恒温培养箱中，在35～45℃下培养24～36h后，选取培养基上生长速度快，直径大的菌落，移接到琼脂培养基上，继续在30～40℃下培养20～30h；
（3）取培养完成后的培养基，用20～30mL蒸馏水冲洗3～5次，冲洗液用带有粒径为5～10mm玻璃珠的锥形瓶中，放置在摇床机上，以200～300r/min的转速振荡混合20～30min，制得菌悬液，备用；
（4）称取500～600g风化煤，放入烘箱中，在105～110℃下干燥1～2h，将干燥后的风化煤倒入高速粉碎机，粉碎3～5min后，过60目标准筛，再取100～200g粉碎后的风化煤，倒入1L烧杯中，加入500～600mL蒸馏水，以300～400W的功率超声处理30～50min，得到活化风化煤；
（5）称取50～100g上述制得的活化风化煤装入陶瓷发酵罐中，再加入10～20mL菌悬液以及1～2g碳酸氢铵、2～3g磷酸氢二铵和60～80mL蒸馏水，用搅拌棒搅拌均匀后，再用保鲜膜密封罐口，放置恒温箱中，在35～45℃下发酵2～3周；
（6）发酵完成后将发酵物移入浓缩罐中，减压至1000～1200Pa浓缩处理20～30min，得泥状浓缩物，再将浓缩物进行喷气干燥，进气温度为200～220℃，出气温度为150～180℃，干燥后放入气流粉碎机粉碎并过50目标准筛，装袋后即得一种茶树专用腐植酸生物菌肥。
2.根据权利要求1所述的一种茶树专用腐植酸生物菌肥的制备方法，其特征在于：所述的斜面培养基组成为2～5g牛肉蛋白粉，3～5g鱼肉汁，1～2g酵母浸出汁粉，1～3g葡萄糖和0.5～1g醋酸钠以及20～30mL蒸馏水。
3.根据权利要求1所述的一种茶树专用腐植酸生物菌肥的制备方法，其特征在于：所述的琼脂培养基为3～5g马铃薯粉，2～4g葡萄糖，1～3g琼脂和10～15mL蒸馏水。
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Application publication date: 20160224 |