CN105311035B

CN105311035B - 植物甾醇或/和植物甾醇酯在尿酸控制中的应用

Info

Publication number: CN105311035B
Application number: CN201510759517.3A
Authority: CN
Inventors: 宋立华; 张瑶; 熊瑛; 周海玥; 姜婧
Original assignee: Shanghai Jiaotong University
Current assignee: Shanghai Jiaotong University
Priority date: 2015-11-09
Filing date: 2015-11-09
Publication date: 2018-08-31
Anticipated expiration: 2035-11-09
Also published as: CN105311035A

Abstract

本发明涉及医药和保健品技术领域，公开了一种植物甾醇或/和植物甾醇酯在尿酸控制中的应用，尤其涉及植物甾醇或/和植物甾醇酯的新用途。本发明首次发现植物甾醇(酯)可以明显抑制高脂饮食诱导的代谢紊乱大鼠伴发的高尿酸血症，显著降低尿酸水平，且与现有治疗高尿酸血症和痛风的药物相比，其具有良好的食用安全性，更便于临床上长期使用，可为临床预防和治疗高尿酸血症及痛风提供新的选择，具有较好的应用前景。

Description

植物甾醇或/和植物甾醇酯在尿酸控制中的应用

技术领域

本发明涉及医药领域的药物/保健品(功能性食品)的应用，涉及一种植物甾醇或/和植物甾醇酯在尿酸控制中的应用，具体地说是涉及植物甾醇(酯)在制备预防和治疗高尿酸血症和痛风药物和保健品(功能性食品)中的应用，是植物甾醇(酯)的新用途，属于药物和保健食品领域。

背景技术

高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)是血液中尿酸(uric acid,UA)浓度高出正常范围的一种机体状态。它是以体内嘌呤代谢紊乱、尿酸增高为特征的疾病。随着医学的发展,对HUA的研究不断深入，不再把HUA单纯看作痛风的前期。现代研究显示，HUA的发生与饮食密切相关。随着经济的迅速发展和居民饮食结构的改变，加上缺乏适量的体力活动，近年来，HUA和痛风的发病率在全球范围内呈直线上升。

流行病学调查数据表明，美国2007-2008年国家保健访问调查(NHIS)结果显示，美国HUA发病率从19.1％上升到21.5％；意大利HUA患病率从2005年的8.54％上升到2009年的11.93％。近年来，中国人群中HUA的发病率也呈直线上升且年轻化趋势，从1996-2006年，我国的HUA发病率约增加了10倍，HUA已成为继高血压、高血脂、高血糖之后的临床“第四高”。据保守估计，目前我国HUA患者人数已达1.2亿，约占人口总数的9.0％。

HUA因无明显临床症状而不被人们重视。但事实上，长期HUA对人体的主要影响之一是尿酸盐结晶沉积在关节及肾脏而引起的痛风，HUA是引起痛风的重要生化基础，约5％～12％HUA患者会发展成为痛风。痛风不仅可以侵犯骨和关节，还容易累及肾脏和心血管系统。更为重要的是，国内外大量流行病学研究表明，HUA与代谢综合征的许多成分如肥胖、高血压、血脂异常、高血糖症、冠心病及胰岛素抵抗等密切相关，并已成为代谢综合征的一部分，其与肥胖、高脂血症、高血压、糖尿病、动脉粥样硬化等疾病呈显著正相关。与高血压、胰岛素抵抗，肥胖、高脂血症、糖耐量异常(IGT)等同等协同作用，加重动脉硬化，促进心脑血管疾病的发生。由此可见，HUA已成为威胁人类健康的重要疾病。

HUA管理长期来几乎完全依赖别嘌呤醇(注：治疗慢性HUA的首选药物)，但临床上有相当比例的HUA患者接受别嘌呤醇治疗不能达到血清尿酸浓度推荐控制目标。此外，尽管别嘌呤醇的安全性较好，但其在肾功能受损患者中的副反应发生率及严重程度均有提高，故须依肌酐廓清率下调用药剂量(当然，降尿酸作用也下降)。较新的降尿酸药物如非布司他(febuxostat/Adenuric，Uloric)和培格洛替酶(pegloticase/Krystexxa)，临床应用中也有一定的副反应，如肝酶水平升高、皮疹、腹泻、头痛，输注反应(发生率26％)以及恶心、挫伤/瘀斑、鼻咽炎、便秘和呕吐等。因此，从膳食成分中寻找新的安全、有效的降尿酸功能性成分具有重要的现实意义和应用价值。

植物甾醇(plant sterol，PS)又称植物固醇，是一种结构与胆固醇类似但具有多重生理活性的三萜烯。植物甾醇的种类很多，主要有谷甾醇、豆甾醇、菠菜甾醇，菜油甾醇、麦角甾醇等数种，其中分布最广、含量最多的是β－谷甾醇。植物甾醇主要以自由醇结构、脂肪酸酯、甾基糖苷及其酰化物等形式存在于自然界。植物甾醇在食用油中以游离和酯化形式为主，这些油的来源包括坚果、谷物、豆类和植物种子等。蛋黄、哺乳动物的肝脏和甲壳类动物等非植物膳食原料中也可获取少量植物甾醇。

早在19世纪50年代，人们就发现了植物甾醇的降胆固醇功效。近年来人们研究和应用最多的是植物甾醇的降胆固醇功效，大量动物和临床试验研究表明，每日摄入植物甾醇1.5～3g，可降低人体内7～11.3％的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。我国卫生部、美国FDA以及欧盟推荐的植物甾醇摄入量为1.3～3.0g/d。目前，植物甾醇以及植物甾醇酯(PSE)常作为辅助降低胆固醇的膳食补充剂或功能性食品用于预防动脉粥样硬化和心血管疾病。此外，植物甾醇还具有抗炎、退热、美容、抗癌、促进动物生长等生理功效。由于其具有良好的安全性，2010年3月我国卫生部正式批准植物甾醇和植物甾醇酯为新资源食品。

发明内容

发明的目的在于提供植物甾醇或/和植物甾醇酯的新用途，具体是一种植物甾醇或/和植物甾醇酯在尿酸控制中的应用，更具体地为植物甾醇或/和植物甾醇酯作为预防和治疗HUA和痛风的药物及保健品(功能性食品)中的主要活性成分。

本发明的目的是这样实现的：

第一方面，本发明提供一种植物甾醇或/和植物甾醇酯在抑制尿酸升高中的应用。

第二方面，本发明提供一种抑制尿酸升高的方法，包括口服含植物甾醇或/和植物甾醇酯的药物或食用含植物甾醇或/和植物甾醇酯的功能性食品。

第三方面，本发明提供一种植物甾醇或/和植物甾醇酯在制备抑制尿酸升高药物、功能性食品中的应用。

第四方面，本发明提供一种用于抑制尿酸升高的药物或功能性食品，所述药物或功能性食品中含有植物甾醇或/和植物甾醇酯。

优选地，所述药物中的活性组分为植物甾醇或植物甾醇酯中的一种单一组分或二者的组合；

进一步地，所述植物甾醇为单一种类的植物甾醇或不同种类植物甾醇的组合；所述植物甾醇酯为单一种类的植物甾醇酯或不同种类植物甾醇酯的组合；

优选地，所述药物的剂型为胶囊或粉剂，所述药物的使用方法为口服；所述功能性食品包括牛乳、饮料或焙烤类食品。

第五方面，本发明提供一种植物甾醇或/和植物甾醇酯在制备预防或治疗HUA或/和痛风药物、功能性食品中的应用

优选地，所述药物的使用方法为口服；所述药物的剂型包括胶囊或粉剂；所述功能性食品包括牛乳、饮料或焙烤类食品。

附图说明

通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显：

图1为各组大鼠肝组织HE染色病理观察结果(400×)；

其中，a是正常对照组，b是高脂饮食组，c是低剂量PSE组(0.5g/kg·BW)，d是中剂量PSE组(1g/kg·BW)，e.是高剂量PSE组(1.5g/kg·BW)；

图2是不同剂量PSE对血清尿酸(UA)含量的影响；

图3是1-12周每组大鼠摄食量记录。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。为了更好的理解本发明，下面以试验效果进一步说明。试验效果旨在进一步说明本发明的作用，而非本发明的限制。

实施例、植物甾醇或/和植物甾醇酯作为预防HUA的药物和保健品(功能性食品)的主要药效学试验

为了观察植物甾醇或/和植物甾醇酯在代谢紊乱所引起的HUA中的作用效果，本试验利用高脂饮食诱导代谢紊乱，造成尿酸升高，试验组在给予高脂饮食的同时，灌胃给予低(0.5g/kg·BW)、中(1g/kg·BW)、高(1.5g/kg·BW)剂量植物甾醇酯强化全脂牛乳(相当于人每日摄入3g，6g及9g)，连续给予12周，试验结果表明植物甾醇酯强化牛乳具有明显的降低血清尿酸的作用。至实验结束对动物生长等各方面无任何不良影响。

1、受试物的组成：试验所用植物甾醇酯(phytosterol ester，PSE)总PSE和PS含量≥98％，PSE含量≥93％，其中甾醇组成：菜油甾醇29.0％，豆甾醇22.0％，β-谷甾醇49％

2、PSE强化牛乳的制备：首先将PSE产品置于65℃水浴锅中充分液化，与纯牛奶经高压均质机均质配制成0.05g/ml、0.10g/ml、0.15g/ml的乳化液用于大鼠灌胃。

全脂乳营养成分

项目	每100ml	NRV％
			能量	284KJ	3％
蛋白质	3.0g	5％
			脂肪	3.7g	6％
碳水化合物	4.8g	2％
			钠	62mg	3％
钙	100mg	13％

3、试验动物：1月龄健康雄性SD大鼠30只，清洁级，体质量130g±10g，由上海斯莱克实验动物有限公司提供。

4、高脂饲料：繁殖鼠料55.8％，猪油18.4％，胆固醇1％，胆盐0.2％，蔗糖10％，酪蛋白10％，预混料1.9％，麦芽糊精2.7％。

5、血清尿酸测定方法：麻醉后腹主动脉取血，分离血清，日立7600-20全自动生化分析测定血清尿酸水平。

6、给药途径：口服给药

7、试验方法：SD大鼠给予基础饲料适应性喂养7d后，随机分为5组：正常对照组(NC,n＝6)，高脂模型组(HF，n＝6)，低剂量PSE组(PSEL，n＝6)，中剂量PSE组(PSEM，n＝6)及高剂量PSE组(PSEH，n＝6)；其中，正常对照组饲喂基础饲料，其余各组均饲喂高脂饲料，正常组及高脂模型组均以纯牛奶灌胃，低、中、高剂量PSE干预组分别按照0.05g/100g体质量(body weight,BW)、0.10g/100g BW、0.15g/100g BW灌胃给予PSE强化牛奶(分别相当于人每天摄入3，6，9g PSE)，每天1次，灌胃体积为1mL/100g。

8、指标测定:实验每日监测动物的摄食量，每周监控体重变化。实验于开始前及实验第12周，动物禁食12h，麻醉后腹主动脉取血，剥离肝脏，分离血清，利用全自动生化分析仪检测肝、肾功能及血尿酸；

9、肝组织病理切片的制作：取新鲜肝组织固定，石蜡包埋，利用HE染色法制作病理切片，光镜观察。

10、统计学处理实验结果以平均值±标准差(mean±SD)表示,统计分析软件为SPSS19.0(IBM,美国)，采用one-way ANOVA进行组间比较，P<0.05为差异有统计学意义。

实施例结果

1、植物甾醇或/和植物甾醇酯可显著抑制高脂饮食诱导的代谢紊乱引起的尿酸升高

图1为各组大鼠肝组织HE染色病理观察结果。从图中看出，高脂饮食组大鼠肝脏呈现出明显的肝脂肪变性，表现为肝小叶结构遭到破坏，肝窦消失，肝细胞变大，细胞之间界限模糊，细胞膜有破损，细胞质中充满脂滴将细胞核挤压到一边，并有多处脂肪滴连成一片形成脂肪空泡。与HF组相比，各PSE干预组的肝细胞中没有大的脂肪空泡出现，脂滴直径大幅减小，脂滴数量明显减少，脂肪滴覆盖面积明显减少，肝细胞间界限渐趋明显，并且已能清晰辨别出肝小叶结构。上述结果表明高脂饮食导致脂肪在肝脏中积累，造成肝脂肪变性，表明本试验利用高脂饲料成功建立代谢紊乱动物模型，而不同剂量PSE干预组的肝脂肪变性程度均有不同程度改善。

在利用高脂饮食成功构建代谢紊乱动物模型的基础上，试验检测了血清尿酸含量，结果如图2所示，本试验所使用3各剂量PSE均能显著抑制高脂饮食诱导的尿酸水平增高(P<0.05)，各PSE干预组血尿酸水平与正常对照组相近，表明植物甾醇或/和植物甾醇酯可较好地预防和纠正高脂饮食引起的代谢紊乱，包括嘌呤代谢紊乱，具有较好的降尿酸效果。

2、植物甾醇或/和植物甾醇酯具有较好的食用安全性

为观察试验所用植物甾醇或/和植物甾醇酯的安全性，本试验还在整个12周的试验周期中，对动物的摄食量、生长情况及肝、肾功能进行了检测，结果如图3及表1～3所示。

图3为各组大鼠实验期间(1～12周)的摄食量跟踪测定。分析表明，高脂模型组(HF)及PSE低、中、高剂量组(PSEL、PSEM、PSEH)摄食量间无显著性差异(P>0.05)。

表1.试验期间各组大鼠体重的变化情况

表1所示为实验期间SD大鼠体重记录结果。实验开始前(t0)，各组大鼠间体重无显著差异(P>0.05)。实验结束时(tend)，五组大鼠之间体重均无显著性差异(P>0.05)。

表2.试验各组大鼠的肝功能检测结果

^*P<0.05与正常对照组相比；^**P<0.01与正常对照组相比；

^△P<0.05与高脂饮食组相比；^△△P<0.01与高脂饮食组相比

表2为实验初始和结束时各组大鼠肝功能关键指标谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)及血白蛋白(ALB)的检测结果。数据表明，各剂量PSE干预后能在一定程度上改善高脂饮食诱导的脂肪肝对肝功能的不良影响，表现为低剂量PSE可降低谷草转氨酶活性的升高，而高剂量PSE可降低谷丙转氨酶的活性，表明PSE不但对无肝毒性，还可纠正脂肪肝引起的转氨酶活性增高。

表3.试验各组大鼠肾功能检测结果

^*p<0.05与正常对照组相比；^**p<0.01与正常对照组相比；

^△p<0.05与高脂饮食组相比；^△△p<0.01与高脂饮食组相比

表3为各组大鼠肾功能检测结果，从图中数据可看出各PSE干预组血尿素氮(Urea)和血肌酐(Crea)水平与正常对照组相近。

表1和图3数据表明试验所用植物甾醇或/和植物甾醇酯干预剂量对大鼠的生长无明显不良影响，表2及表3数据表明本试验所用PSE剂量未对大鼠肝、肾功能产生不良影响，说明服用本发明药物的安全性。

综上所述，植物甾醇或/和植物甾醇酯作为预防和治疗高尿酸血症的药物和保健品(功能性食品)的主要活性成分，可在临床上长期使用，具有良好的应用前景。

以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。

Claims

1.一种植物甾醇和植物甾醇酯在制备抑制尿酸升高药物、功能性食品中的应用，其特征在于，所述植物甾醇和植物甾醇酯的有效剂量为每日6g；所述植物甾醇和植物甾醇酯中，总植物甾醇酯和植物甾醇含量≥98％，植物甾醇酯含量≥93％，其中甾醇组成：菜油甾醇29.0％，豆甾醇22.0％，β-谷甾醇49％。

2.一种用于抑制尿酸升高的药物或功能性食品，其特征在于，所述药物或功能性食品中含有植物甾醇和植物甾醇酯；所述植物甾醇和植物甾醇酯中，总植物甾醇酯和植物甾醇含量≥98％，植物甾醇酯含量≥93％，其中甾醇组成：菜油甾醇29.0％，豆甾醇22.0％，β-谷甾醇49％。

3.根据权利要求2所述的药物或功能性食品，其特征在于，所述药物的剂型为胶囊或粉剂，所述药物的使用方法为口服。

4.根据权利要求2所述的药物或功能性食品，其特征在于，所述功能性食品包括牛乳、饮料或焙烤类食品。

5.一种植物甾醇和植物甾醇酯在制备预防或治疗高尿酸血症或/和痛风药物、功能性食品中的应用，所述植物甾醇和植物甾醇酯中，总植物甾醇酯和植物甾醇含量≥98％，植物甾醇酯含量≥93％，其中甾醇组成：菜油甾醇29.0％，豆甾醇22.0％，β-谷甾醇49％。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述药物的使用方法为口服；所述药物的剂型包括胶囊或粉剂。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述功能性食品包括牛乳、饮料或焙烤类食品。