CN105284407A - 一种喜树嫩枝扦插生根方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种喜树嫩枝扦插生根方法：剪取大树上枝条作为插穗，用湿布包起来，保持新鲜状态；将插穗上切口平剪，下切口斜剪，上部保留1~2片叶并将叶片剪去1/2~2/3；采用0.1%的多菌灵溶液消毒2h，然后采用激素溶液处理20s~2h；在基质上以株行距8~10cm，插穗深度为长度的1/2左右，第一个叶片露出基质之上，进行嫩枝扦插，扦插完立即浇透水；之后进行人工管理并每2周进行中耕除草以及喷洒0.1%的多菌灵溶液进行消毒；待喜树根系木质化后及时进行移栽。本发明的喜树嫩枝扦插生根方法，建立出喜树无性系育苗体系，能获得优质的喜树种苗。且本方法操作简便易行，具有成本低、技术要求简单，易推广应用等优点。
Description
技术领域
本发明涉及植物无性繁殖技术领域，尤其涉及一种喜树嫩枝扦插生根方法。
背景技术
喜树为蓝果树科，喜树属，此属仅喜树1种植物，是我国特有种。其小枝髓心片状分隔，叶纸质，长圆状卵形或椭圆形、长椭圆形，长12～28cm，宽6～12cm，全缘，叶柄长1.5～3cm。头状花序顶生或腋生，径约1.5cm，常数个组成总状式的复花序，顶生的花序具雌花，腋生的花序具雄花；花具苞片3，花萼5浅裂，边缘睫毛状；花瓣5，长2mm；花药4室。翅果，长2～2.5cm，顶端具宿存的花盘，两侧的翅较窄。花期5～7月；果期9～11月。产于长江流域以南各地，南至华南；生于海拔1000m以下的林缘或溪边。喜温暖湿润气候；宜湿润冲积土、平地砂壤土、河滩沙土，在江湖堤岸及水渠埂道生长快；喜光，萌芽性强。
喜树全身是宝。它的果实、根、树皮、枝、叶主要含有抗肿瘤作用的生物碱——喜树碱。喜树碱是DNA合成的抑制剂，对DNA合成期的肿瘤细胞有较强的杀伤作用。主要用于治疗消化道癌，包括食癌、结肠癌、直肠癌、胃癌、肝癌，其中对胃癌的疗效最好。对肺癌、膀胱癌、急性白血病、慢性粒细胞白血病也有一定疗效。喜树干形端直，木材轻软，易加工，供制包装箱、火柴杆、乐器等；宜四旁和行道树种植。
扦插繁殖方法与嫁接等无性繁殖方法相比，具有繁殖系数高、操作简便和成本低等优点；与播种等有性繁殖方法相比，具有保持母本品种优良特性等优点。且扦插是一种较易操作的繁殖技术，而关于喜树扦插的研究少见报道，缺乏系统性研究。目前对喜树的无性繁殖的研究主要是采用植物组织培养技术，为推动喜树优良无性系的选育和大规模的育苗生产，有必要对喜树扦插繁育技术进行发明创造。
发明内容
发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种喜树嫩枝扦插生根方法，建立喜树的繁殖体系，获得优质的喜树种苗。
技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
一种喜树嫩枝扦插生根方法：剪取大树上带叶片、半木质化的绿色枝条作为插穗，所采回的枝条用湿布包起来，保持新鲜状态，防止失水；将插穗上切口平剪，下切口斜剪，穗条长度控制在10～15cm，将下部叶片去除，上部保留1～2片叶并将叶片剪去1/2～2/3；采用0.1％的多菌灵溶液浸泡穗条基部进行消毒，然后采用激素溶液处理20s～2h；在基质上以株行距8～10cm，插穗深度为长度的1/2左右，第一个叶片露出基质之上，进行嫩枝扦插，扦插完立即浇透水；之后进行人工管理并每2周进行中耕除草以及喷洒0.1％的多菌灵溶液进行消毒；待喜树根系木质化后及时进行移栽；其中，激素溶液为500～2500mg·L-1NAA、或500～2500mg·L-1GGR、或500～2500mg·L-1IAA。
所述的喜树嫩枝扦插生根方法，插穗来自于30年生的喜树上1年生半木质化绿色枝条。
所述的喜树嫩枝扦插生根方法，嫩枝插条选取直径5～8mm生长健壮、整齐一致、无病虫害的带叶片枝条的中上部。
所述的喜树嫩枝扦插生根方法，上切口距离第一个芽点约1～2cm。
所述的喜树嫩枝扦插生根方法，下切口位于叶背面，节下方0.5cm。
所述的喜树嫩枝扦插生根方法，0.1％的多菌灵溶液浸泡穗条基部进行消毒2h。
所述的喜树嫩枝扦插生根方法，基质为珍珠岩、泥炭、黄沙和V珍珠岩︰V泥炭＝1:1，采用新基质，夏季扦插前3天采用0.1％的高锰酸钾对基质进行消毒。优选为珍珠岩或黄沙。
所述的喜树嫩枝扦插生根方法，扦插后8～24d形成愈伤组织，24～32d出现不定根，32～40d涌现大量不定根。
所述的喜树嫩枝扦插生根方法，激素溶液优选为1500mg·L-1NAA处理20s、或1500mg·L-1GGR处理20s、或2500mg·L-1IAA处理20s。
有益效果：与现有的技术相比，本发明的喜树嫩枝扦插生根方法，喜树嫩枝扦插属于皮层生根类型为易生根树种，在扦插后18d左右愈伤组织基本形成，扦插后24d左右是愈伤组织分化生根的高峰期。采用GGR对促进喜树插穗生根及根长的作用最大，而NAA1500mg/L促进喜树嫩枝插穗生根的作用最好，成活率最高，在不同基质处理中珍珠岩的成活率最高，黄沙次之。该方法建立出喜树无性系育苗体系，能获得优质的喜树种苗，具有很好的实用性。且本方法操作简便易行，具有成本低、技术要求简单，易推广应用等优点。
附图说明
图1是喜树嫩枝插穗愈伤组织正在形成图；
图2是喜树扦插后根系已木质化图。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步的阐述。实施例是为说明而非限制本发明，旨在便于本领域中任何普通技术人员能够理解这些实施例，不以任何方式限制本发明，可做适当的修改而不违背本发明的实质和偏离本发明的范围。
实施例1
一种喜树嫩枝扦插生根方法，包括以下步骤：
1)试验地位于南京林业大学白马教学科研基地，地处南京市溧水区白马镇，四季分明、气候温和湿润、雨量充沛、光照充足、无霜期长、水热同季。年平均气温15.4℃，平均日照量2240h，无霜期237d，多年平均降雨量1087.4mm，属典型的苏南低丘陵山区。
2)在南京林业大学校园内喜树大树上(30年生)采集1年生半木质化绿色枝条作为试验材料，选取直径5～8mm生长健壮、整齐一致、无病虫害的带叶片枝条的中上部。
3)嫩枝插条采于2015年7月8日下午，扦插时间为7月9日上午。试验采用单因素试验，3个重复，每个重复50株。额外在旁边扦插10枝，以便后期破坏性试验。对南京林业大学校园内喜树大树上当年生枝条，在不同基质、激素种类和激素浓度进行生根对比。
4)在白马基地全光照间歇式扦插池内进行。选用4种不同的基质进行喜树嫩枝扦插，分别为珍珠岩、泥炭、黄沙和V珍珠岩︰V泥炭＝1:1，采用新基质，夏季扦插前3天采用0.1％的高锰酸钾对基质进行消毒。
剪取大树上带叶片的一年生枝条的中上部作为插穗，将所采回的枝条用湿布包起来，保持新鲜状态，防止失水。将穗条上切口平剪(距离第一个芽点约1～2cm)，下切口斜剪(叶背面，节下方0.5cm)，穗条长度控制在10～15cm，将下部叶片去除，上部保留1/3～1/2片(1～2个叶)。
5)采用0.1％的多菌灵溶液浸泡穗条基部进行消毒2h，然后采用不同浓度激素处理，以清水为对照CK。株行距8～10cm，深度为插穗长度的1/2左右，第一个叶片露出基质之上，扦插完立即浇透水。根据天气状况及时调整设定喷雾时间和间隔时间。每2周进行中耕除草以及喷洒0.1％的多菌灵溶液进行消毒。待喜树根系木质化后及时进行移栽。
6)扦插期间定期观察并记录生根类型，统计愈伤组织产生和形成的时间(d)、插穗生根时间(d)、腐烂率(％)、成活率(％)、生根长度(cm)、生根插穗的平均生根数(条)和生根指数等。
7)采用Excel和SPSS软件对试验数据进行处理和统计分析，用Duncan法进行差异显著性检验，用Excel软件作图。
8)结果
扦插后，8～24d形成愈伤组织，8～16d是愈伤组织形成的高峰，在24d左右不定根开始出现，24～32d各个处理出现不定根，32～40d涌现大量不定根。
采用外源激素浓度1500mg/L的NAA，选用4种不同的基质进行喜树嫩枝扦插，分别为V珍珠岩︰V泥炭＝1:1、珍珠岩、泥炭和黄沙，采用新基质，夏季扦插前3天采用0.1％的高锰酸钾进对基质进行消毒。对喜树嫩枝也进行了不同激素种类和浓度的试验，见表1。
表1外源生长素水剂处理嫩枝扦插试验设计
| 编号 | 生长素种类 | 生长素浓度(mg·L-1) | 处理时间 |
| 1 | 清水对照(CK) | 0 | 0s |
| 2 | NAA | 500 | 2h |
| 3 | NAA | 1500 | 20s |
| 4 | NAA | 2500 | 20s |
| 5 | GGR | 500 | 2h |
| 6 | GGR | 1500 | 20s |
| 7 | GGR | 2500 | 20s |
| 8 | IAA | 500 | 2h |
| 9 | IAA | 1500 | 20s |
| 10 | IAA | 2500 | 20s |
在不同基质中进行嫩枝扦插对其插穗成活率影响较大，结果见表2。成活率是衡量扦插育苗成功与否的最重要的指标。采用浓度1500mg/L的NAA时，以泥炭为基质的喜树生根率最低，不足60％，而珍珠岩和黄沙的生根率相对较高。当其它因素相同时，采用珍珠岩作为扦插基质愈伤率最高，为96％；成活率最高，达92％；生根数最多4.67条；根长较长为9cm；根系指数最高，为5.75；根系效果指数最高，达5.29。但是使用珍珠岩为扦插基质时，基质内的营养物质较少，需后期给基质中加入适当肥料。使用黄沙作为扦插基质时，腐烂率也较低，生根长度较长，成活率为87.33％，仅次于珍珠岩，显著高于混合基质和泥炭。比较不同基质处理的插穗生根指标，可初步判断生根效果最理想的基质是珍珠岩，其次为黄沙。
表2喜树嫩枝扦插不同基质的扦插结果
| 基质类型 | 珍珠岩：泥炭 | 珍珠岩 | 泥炭 | 黄沙 |
| 腐烂率(％) | 16.00±2.00b | 3.33±1.15c | 41.33±1.15a | 5.33±4.16c |
| 愈伤率(％) | 83.33±3.06b | 96.00±2.00a | 57.33±2.31c | 94.67±4.16a |
| 成活率(％) | 78.67±4.16b | 92.00±2.00a | 49.33±2.31c | 87.33±3.06a |
| 根数(条) | 2.67±0.58b | 4.67±0.58a | 2.33±0.58b | 2.00±1.00b |
| 根长(cm) | 7.27±0.57b | 9.00±1.01ab | 5.37±0.97c | 10.1±1.05a |
| 根系指数 | 3.82±0.49b | 5.75±0.46a | 3.09±0.54b | 4.03±0.89b |
| 根系效果指数 | 2.73±0.49b | 5.29±0.48a | 1.53±0.34c | 3.53±0.89b |
注:不同字母表示处理间差异显著(p<0.05)，下同。
NAA不同浓度处理对插穗生根的影响见表3。随着NAA质量浓度的增加，喜树嫩枝插穗成活率也在不断上升，当NAA质量浓度达到1500mg/L时，其效果最好为78.67％，然后随着质量浓度的增加，喜树嫩枝扦插的成活率反而下降。对试验结果进行多重比较，发现各激素浓度之间对喜树插穗成活率的影响均极显著。当NAA为1500mg/L时，愈伤率显著高于其它处理(p<0.0001)。在生根数方面，1500mg/L>2500mg/L>500mg/L>CK。1500mg/L根系指数最高为5.43，显著高于CK，且根系效果指数最好，是对照的11倍。其次是2500mg/L，成活率为72.67％，生根数2.33条，生根长度为6cm左右，根系指数为3.25，根系效果指数为2.36。CK(清水对照)，成活率仅25.33％，生根数最少，为1.33根，生根长度显著低于激素处理(p<0.0001)，根系指数为1.50，根系效果指数仅0.37。
表3NAA不同浓度处理喜树插穗的生根情况
| 浓度(mg/L) | CK | 500 | 1500 | 2500 |
| 愈伤率(％) | 59.33±3.06c | 82.67±3.06b | 91.33±4.16a | 78.67±2.31b |
| 成活率(％) | 25.33±4.16c | 71.33±1.15b | 78.67±1.15a | 72.67±2.31b |
| 根数(条) | 1.33±0.58b | 1.67±0.58b | 4.67±0.58a | 2.33±0.58b |
| 根长(cm) | 2.00±0.75c | 5.77±0.81b | 7.70±0.44a | 6.00±0.85b |
| 根系指数 | 1.50±0.61c | 2.69±0.45b | 5.43±0.51a | 3.25±0.25b |
| 根系效果指数 | 0.37±0.11c | 1.92±0.35b | 4.27±0.42a | 2.36±0.25b |
GGR不同浓度处理对插穗生根的影响见表4。在成活率方面，随着GGR浓度的增加，成活率也在逐渐升高，当GGR浓度为1500mg/L时，成活率可达74％，但是当GGR质量浓度增加到2500mg/L时，插穗生根率反而降低。在平均根长方面，随着GGR浓度的增加，其呈现先增高后下降的趋势，平均根长最长为8.13cm，试验结果进行方差分析和多重比较发现，各激素浓度之间对喜树插穗根系指数的影响均显著(p<0.0001)。GGR1500mg/L根系效果指数为3.53最高，与CK和GGR500mg/L差异显著(p<0.0001)，CK的根系效果指数最差，仅0.37。当采用激素为GGR时，成活率1500mg/L>2500mg/L>500mg/L>CK，与NAA激素浓度的结果相似。
表4GGR不同浓度处理喜树插穗的生根情况
| 浓度(mg/L) | CK | 500 | 1500 | 2500 |
| 愈伤率(％) | 59.33±3.06c | 84.67±1.15a | 80.00±3.46b | 78.67±1.15b |
| 成活率(％) | 25.33±4.16b | 71.33±1.15a | 74.00±2.00a | 72.00±2.00a |
| 根数(条) | 1.33±0.58c | 2.33±0.58bc | 3.36±0.58a | 3.33±0.58ab |
| 根长(cm) | 2.00±0.75c | 6.57±0.68b | 8.13±0.60a | 6.67±0.49b |
| 根系指数 | 1.50±0.61c | 3.39±0.51b | 4.78±0.57a | 4.17±0.50ab |
| 根系效果指数 | 0.37±0.11c | 2.42±0.38b | 3.53±0.36a | 3.00±0.35ab |
IAA不同浓度处理对喜树嫩枝插穗生根的影响较大(表5)。采用IAA外源激素和清水处理成活率差异显著(p<0.0001)。插穗的成活率随着IAA质量浓度的增加，插穗成活率，生根数，根长，根系指数和根系效果指数均不断上升，当IAA浓度为2500mg/L时，生根率可高达72.00％，生根数为3条，平均根长为5.57cm，根系指数为3.64，根系效果指数达2.62。使用激素浓度为500mg/L和1500mg/L，成活率仅次于2500mg/L，都显著高于CK。由此可见，使用IAA作为外源激素后，成活率显著高于CK。
表5IAA不同浓度处理喜树插穗的生根情况
| 浓度(mg/L) | CK | 500 | 1500 | 2500 |
| 愈伤率(％) | 59.33±3.06b | 75.33±3.06a | 74.00±3.46a | 79.33±1.15a |
| 成活率(％) | 25.33±4.16b | 66.67±6.11a | 66.00±2.00a | 72.00±3.46a |
| 根数(条) | 1.33±0.58c | 2.00±0.00bc | 2.33±0.58ab | 3.00±0.00a |
| 根长(cm) | 2.00±0.75c | 3.80±0..61b | 4.33±1.17ab | 5.57±0.76a |
| 根系指数 | 1.50±0.67c | 2.45±0.15bc | 2.83±0.15b | 3.64±0.19a |
| 根系效果指数 | 0.37±0.11c | 1.64±0.24b | 1.87±0.15b | 2.62±0.02a |
可见，喜树嫩枝扦插属于皮层生根类型，在扦插后8～24d形成愈伤组织(图1)，24d左右不定根开始出现，24～32d各个处理出现不定根，32～40d涌现大量不定根(图2)。采用GGR对促进喜树插穗生根及根长的作用最大，而NAA1500mg/L促进喜树嫩枝插穗生根的作用最好，成活率最高，在不同基质处理中珍珠岩的成活率最高，黄沙次之。
Claims (10)
1.一种喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：剪取大树上带叶片、半木质化的绿色枝条作为插穗，所采回的枝条用湿布包起来，保持新鲜状态，防止失水；将插穗上切口平剪，下切口斜剪，穗条长度控制在10~15cm，将下部叶片去除，上部保留1~2片叶并将叶片剪去1/2~2/3；采用0.1%的多菌灵溶液浸泡穗条基部进行消毒，然后采用激素溶液处理20s~2h；在基质上以株行距8~10cm，插穗深度为长度的1/2左右，第一个叶片露出基质之上，进行嫩枝扦插，扦插完立即浇透水；之后进行人工管理并每2周进行中耕除草以及喷洒0.1%的多菌灵溶液进行消毒；待喜树根系木质化后及时进行移栽；其中，激素溶液为500~2500mg·L-1NAA、或500~2500mg·L-1GGR、或500~2500mg·L-1IAA。
2.根据权利要求1所述的喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：插穗来自于30年生的喜树上1年生半木质化绿色枝条。
3.根据权利要求1所述的喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：嫩枝插条选取直径5~8mm生长健壮、整齐一致、无病虫害的带叶片枝条的中上部。
4.根据权利要求1所述的喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：上切口距离第一个芽点约1~2cm。
5.根据权利要求1所述的喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：下切口位于叶背面，节下方0.5cm。
6.根据权利要求1所述的喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：0.1%的多菌灵溶液浸泡穗条基部进行消毒2h。
7.根据权利要求1所述的喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：基质为珍珠岩、泥炭、黄沙和V 珍珠岩︰V 泥炭=1:1，采用新基质，夏季扦插前3天采用0.1%的高锰酸钾对基质进行消毒。
8.根据权利要求1所述的喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：扦插后8~24d形成愈伤组织，24~32d出现不定根，32~40d涌现大量不定根。
9.根据权利要求1所述的喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：基质为珍珠岩或黄沙。
10.根据权利要求1所述的喜树嫩枝扦插生根方法，其特征在于：激素溶液为1500mg·L-1NAA处理20s、或1500mg·L-1GGR处理20s、或2500mg·L-1IAA处理20s。
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