CN105241832B - 一种油脂过氧化值检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种油脂过氧化值检测方法，包括如下步骤：步骤1：过量二茂铁溶液和油中过氧化氢异丙苯发生氧化络合反应，生成络合物；步骤2：使用分光光度法检测络合物的浓度。本发明的优点本发明生产的氧化络合物，比较稳定，相对于国标法(硫氰酸铁法)溶液中的氧气会影响测定结果，且应注意铁离子的污染，二氯化铁要新鲜配制，且实验过程要求避光进行，否则因为空气中氧气、光照等影响空白值，从而影响结果的准确性。本发明在反应完全后，在室温下放置一段时间，检测结果基本不变。

Description

一种油脂过氧化值检测方法

技术领域

本发明属于油脂检测技术领域，尤其是一种油脂过氧化值检测方法。

背景技术

油脂的氧化所产生的过氧化物虽然本身无色无味无毒，对油脂质量的影响不大。但是，过氧化物很不稳定，易分解为许多二级氧化产物，如醛类、酮类、醇类等，其中的一些化合物对人体会产生一定的危害。所以测定油脂的过氧化值很有必要。如果过氧化值大于800meq/kg，则表明油脂严重氧化，品质发生了改变，对人体产生毒性。油脂在食品的口感、风味以及物理性质方面起着重要的作用，油脂的品质影响着含油食品的质量与安全。

目前常用的是碘量法，碘量法准确、成本低，但由于操作繁琐，使用大量有机溶剂，且作误差较大，不适合现场实时监测。。分光光度法快速、简单、容易操作、成本低，但随着各种科技的发展，已经不能满足测定要求。仪器分析(高效液相色谱、气相色谱、红外光谱等)法虽然灵敏度高，但成本一般都比较高，而且操作相对麻烦。

专利CN 102706872 A公开了一种氧化还原法检测油脂的方法，在氧化还原反应，产生络合物以后采用比色法检测络合物，检测准确性欠缺。

发明内容

本发明将氧化络合与分光光度法结合在一起，比一般的分光光度法简单，成本低，检测快速准确，且具有较高的选择性和灵敏度，为检测油脂的过氧化值提供了一种十分可靠的方法。

过氧化氢异丙苯(CHP)是由枯烯的氧化溶液或乳浊液衍生的一种无色至淡黄色液体。溶于醇、丙酮、酯类、烃类和氯烃类，微溶于水。有研究采用过氧化氢异丙苯作为内标物，因此本实验采用过氧化氢异丙苯作为标品。

本发明提出的技术方案是：一种油脂过氧化值检测方法，包括如下步骤：

步骤1：过量二茂铁溶液和油中过氧化氢异丙苯发生氧化络合反应，生成二茂铁异丙苯醚；

步骤2：使用分光光度法检测络合物的浓度。

步骤1中发生氧化络合反应，生成的二茂铁异丙苯醚的最大吸收波长是318nm，选择318nm作为分光光度法检测吸收波长。

进一步，所述步骤1中二茂铁溶液使用异丙醇作为溶剂配制，二茂铁溶液浓度为29mmol/L。二茂铁溶液浓度的选择：精确称取0.1g过氧化氢异丙苯，置于10ml容量瓶中，用异丙醇定容到刻度，配制得到母液，再取1ml到10ml容量瓶中，用异丙醇定容至刻度，加0.5ml甲酸(在酸性条件下反应顺利进行，调节pH值)，即为A液。分别准确移取0.27g、0.54g二茂铁移至100mL的容量瓶中，然后用异丙醇定容至刻度。配制得到浓度分别为14.5mmol/L、29mmol/L的二茂铁溶液，分别是B液、C液。精确吸取1ml的A液和1ml B液/C液的于干燥的比色管中，用异丙醇定容到5mL，充分摇匀，均置于恒温水浴锅中，温度设为50℃，各做三次平行实验，完全反应60min后，以异丙醇试剂作为空白调零，测定各管在318nm处的吸光度值，观察吸光度值的变化规律。选择氧化络合反应中二茂铁溶液的最佳浓度值。

进一步，所述步骤1中发生氧化络合反应的温度是50℃。反应温度的优化：精确称取0.1g过氧化氢异丙苯，置于10ml容量瓶中，用异丙醇定容到刻度，配制得到母液，再取1ml到10ml容量瓶中，用异丙醇定容至刻度，加0.5ml甲酸(在酸性条件下反应顺利进行,调节pH值)，为A液。分别准确移取0.54g二茂铁移至100mL的容量瓶中，然后用异丙醇定容至刻度。配制得到浓度分别为29mmol/L的二茂铁标准溶液，为B液备用。分别精确吸取1ml的A液和1ml的B液于干燥的比色管中，用异丙醇定容到5mL，充分摇匀，置于恒温水浴锅，温度分别设为20℃、30℃、40℃、50℃、60℃，各做三次平行实验，完全反应60min后，以异丙醇试剂为空白调零，测定各管在318nm处的吸光度值，观察吸光度值的变化规律。选择氧化络合反应的最佳反应温度。

进一步，所述步骤1中发生氧化络合反应的时间是60min。氧化络合反应时间的选择：精确称取0.1g过氧化氢异丙苯，置于10ml容量瓶中，用异丙醇定容到刻度，配制得到母液，再取1ml到10ml容量瓶中，用异丙醇定容至刻度，加0.5ml甲酸(反应在酸性条件下进行，调节pH值)，为A液。分别准确移取0.54g二茂铁移至100mL的容量瓶中，然后用异丙醇定容至刻度。配制得到浓度分别为29mmol/L的二茂铁标准溶液，为B液备用。分别精确吸取1ml的A液和1ml的B液于干燥的比色管中，用异丙醇定容到5mL，充分摇匀，置于恒温水浴锅50℃，分别完全反应10min、20min、30min、40min、50min、60min、70min、80min，各做三个平行实验，以异丙醇试剂为空白调零，测定各管在318nm处的吸光度值，观察吸光度值的变化规律。选择氧化络合反应的最佳反应时间。

本发明的反应原理是：反应第一步：在微量氢离子存在的条件下，二茂铁与油脂中的过氧化物反应生成不稳定的二茂铁鎓离子[(η₅-C₅H₅)₂Fe³⁺]⁺，流程图如图1；反应第二步：环戊二烯的双键的α位发生去质子化反应，与过氧化氢异丙苯发生反应，生成稳定的二茂铁异丙苯醚，流程图如图2。

本发明的优点和积极效果是:

⑴二茂铁易溶于甲醇、乙醇、乙醚、汽油、苯、柴油等有机溶剂，与酸、碱、紫外线不发生反应，具有极高的热稳定性和耐辐射性。

⑵本发明生产的氧化络合物，比较稳定，相对于国标法(硫氰酸铁法)溶液中的氧气会影响测定结果，且应注意铁离子的污染，二氯化铁要新鲜配制，且实验过程要求避光进行，否则因为空气中氧气、光照等影响空白值，从而影响结果的准确性。本发明在反应完全后，在室温下放置一段时间，检测结果基本不变。

⑶二茂铁具有疏水性，低毒性，能顺利通过细胞膜，与细胞内各种酶、DNA、RNA等物质作用，因而有可能作为治疗某些疾病的药物。此外，在生物酶的作用下，二茂铁及其衍生物能参与各种新陈代谢作用；它具有一定厚度的夹心结构，能够阻止其接近某些酶的活性部位，因而具有较强选择性；基于这些特性，二茂铁具有抗肿瘤、杀菌、杀虫、治贫血、抗炎、调节植物生长、抗溃疡、酶抑制剂等生理活性，使其在生物学、医学、微生物学等领域有着广泛的应用前景。

附图说明

图1二茂铁由油脂中的过氧化物氧化生成不稳定的二茂铁鎓离子[(η₅-C₅H₅)₂Fe³⁺]⁺流程图；

图2生成稳定的二茂铁异丙苯醚流程图

图3络合物二茂铁异丙苯醚吸收曲线

图4氧化络合法的标准曲线

具体实施方式

实施例1

标准曲线制作

(1)取0.54g二茂铁定容到100ml容量瓶中定容，此溶液为A液。

(2)称取0.1g过氧化氢异丙苯于10ml容量瓶中定容，此溶液作为母液，再取1ml母液到20ml比色管中，加9ml异丙醇和0.5ml甲酸(反应在酸性条件下进行,调节pH值)，混匀后，此溶液为B液。

(3)取1ml A液和1ml B液定容到5ml后，在50℃加热1h后冷却，以异丙醇试剂为空白调零。

(4)分别取6个比色管，分别精确移入B液0.0ml，0.3ml，0.5ml，0.8ml，1.0ml，1.5ml于20ml的比色管中，各加入1ml A液后，定容至5ml，于50℃加热1h后，反应完成后，立即移入1cm比色皿中，以异丙醇试剂为空白调零，在318nm波长下测定各管的吸光度，制作标准曲线，如图3。

实施例2

样品的检测：

(1)取0.5g油样于10ml容量瓶中定容，加0.5ml甲酸(在酸性条件下反应顺利进行,调节pH值)，取1ml于20ml比色管中，再加入1ml A液，定容至5ml，每个样品做三个平行，在50℃加热1h后，反应完成后，立即移入1cm比色皿中，以异丙醇试剂为空白调零，在318nm波长下测定各管的吸光度。

(2)将测得的吸光值代入公式1，计算即可得油样的过氧化值(即油样中所含过氧化氢异丙苯的毫摩尔数)。

油脂过氧化值计算公式：

(公式1)

式中字母代表：

X,油脂的过氧化值(mmol/kg)

A＝0.1101 B＝0.2553

Y,代表油样检测到的吸光度值；

M,代表所取油样的质量(g)。

Claims (4)

1.一种油脂过氧化值检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：过量二茂铁溶液和油中过氧化氢异丙苯发生氧化络合反应，生成二茂铁异苯丙醚；

步骤2：使用分光光度法检测络合物的浓度在318nm处检测,将测得的吸光值代入公式1，计算即可得油样的过氧化值；

油脂过氧化值计算公式：

式中字母代表：

X,油脂的过氧化值mmol/kg

A＝0.1101B＝0.2553

Y,代表油样检测到的吸光度值；

M,代表所取油样的质量g。

2.根据权利要求1所述的一种油脂过氧化值检测方法，其特征在于，所述步骤1中二茂铁溶液使用异丙醇作为溶剂配制，二茂铁溶液浓度29mmol/L。

3.根据权利要求1所述的一种油脂过氧化值检测方法，其特征在于，所述步骤1中发生氧化络合反应的温度是50℃。

4.根据权利要求1所述的一种油脂过氧化值检测方法，其特征在于，所述步骤1中发生氧化络合反应的时间是60min。