CN105237146A - 一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥及其制备方法，剑麻渣发酵生产哈茨木霉菌肥的原料主要为：鲜剑麻渣，玉米皮，秸秆，哈茨木霉种子，硫酸镁，硫酸铵，磷酸氢钙，磷酸氢二钾等组成；由本发明生产的哈茨木霉菌肥，具有菌含量高，生产成本低，环境友好，能耗低的特点，产品能明显改善土壤环境质量，提高作物产量，而且能够防治多种植病害。同时高效利用了剑麻生产厂的废弃物—剑麻渣，对当地的经济与环保具有重要意义。

Description

一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥及其制备方法

技术领域

本发明属于微生物肥料领域，具体是本发明涉及一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥及其制备方法。

背景技术

剑麻是广东广西生产硬质纤维的主要经济作物。由于剑麻叶片中纤维的含量仅占其本身的３％～５％，因此在剑麻纤维的加工过程中将产生大量的废弃物，如抽取纤维后产生的麻渣、麻汁；剑麻纤维加工过程中产生的麻糠、麻头等。这些废弃物中含有丰富的多糖、果胶、叶绿素和纤维素等有机质，若将其直接排放或堆放，不仅会导致大量资源的浪费，而且还会对环境造成严重污染。传统的剑麻产业只利用剑麻纤维，加工过程产生的大量麻渣则用作有机肥料，这种处理可利用程度低、副加值低，效益差和浪费资源。

哈茨木霉归属于半知菌亚门，丛梗孢目，木霉属，菌落开始时为白色，圆形，致密，随生长向四周扩展，中央产生绿色孢子，逐渐变成绿色。分生孢子梗有隔膜，呈垂直对生分枝状，产孢瓶体稍弯，尖端产生分生孢子团，含孢子4-12个，分生孢子球形至卵形，无色，2.5~4.5×2~4μm。木霉是一类普遍存在的真菌，常存在于土壤中，是土壤微生物的重要组成群落，是一种较好的根际微生物，也可存活于植物残体和动物粪便中，可从植物根际、叶片、种子和球茎表面分离到，可拮抗多种土传植物病原真菌。对一些土传植物病原菌，如丝核菌属(Rhizoctonia)、疫霉属（Phytophthora）、镰刀菌属(Fuasruim)、小核菌属(Scelortium)和腐霉属(Pyhtuim)等病原菌都具有很好的拮抗效果。

文献报道的木霉菌的生产方法所采用的培养基以粮食及其副产品为主要营养物质来源。如中国专利CN1554242A中公开了一种木霉菌的生产方法，其培养基主要是颗粒直径在1-5毫米之间的小米，稻米、玉米、大麦、小麦或高梁。中国专利CN1422946A中公开了一种木霉菌的生产方法，其生产原料主要是大麦、麸皮、莜麦等。也有利用废水生产木霉菌制剂的，如公开号为CN102050645A中公开了一种利用甘薯淀粉废水和废弃生物质如秸秆，蔗渣，甜菜渣，稻壳等生产木霉微生物肥料的制备方法。但以剑麻渣生产木霉菌的方法还未见报道。木霉菌可以代谢多种纤维素和半纤维素酶，能有效利用各种生物质，如秸秆、蔗渣，甜菜渣等，剑麻渣中含有约2%左右的还原性糖，以及丰富的纤维素，蛋白质等有机质，可以为木霉菌生长提供多种营养，利用剑麻渣发酵哈茨木霉不仅可以降低生产成本，而且可以有效的减少剑麻渣任意堆放的污染，提升剑麻渣的副加值，提高其经济价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥。

本发明的另一目的是提供一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥的制备方法。

本发明利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥的原料按重量份为：鲜剑麻渣800份-900份，玉米皮50-100份，秸秆50-100份，哈茨木霉种子5-10份，硫酸镁1-2份，硫酸铵2-4份，磷酸氢钙2-5份，磷酸氢二钾1-2份，组成。

为了达到上述目的，本发明一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥的制备方法，包括如下步骤：

、哈茨木霉种子制备

将哈茨木霉菌种接种于PDA固体培养基划平板进行复苏，26-30℃培养4-6天,在平板下挑取单个菌落划线接种装有150毫升PDA固体培养基的茄子瓶中，在培养箱中26-30℃培养4-6天，待菌苔长满茄子瓶，产生大量孢子即可用500毫升的无菌生理盐水洗脱，调节孢子浓度为0.5亿cfu/ml的孢子液备用，将配制好的固体种子发酵培养基加水搅拌均匀后装入罐头瓶，用四层纱布封口,把罐头瓶放在灭菌锅内，在121℃下灭菌30min，冷却后每瓶接种lmL孢子液,26-30℃恒温培养4-7天，待罐头瓶中长满哈茨木霉孢子，哈茨木霉孢子含量不低于60亿CFU/克，即可做为哈茨木霉种子。

、向混料罐中依次加入800-900份长度低于4cm的鲜剑麻渣，加入玉米皮50-100份，长度低于4cm的秸秆50-100份，硫酸镁1-2份，硫酸铵2-4份，磷酸氢钙2-5份，磷酸氢二钾1-2份，哈茨木霉种子5-10份，搅拌均匀，即为接好种的固体发酵培养基。

、将步骤接好种的固体发酵培养基摊在发酵槽上，物料高度为10-20cm，控温26-30℃，湿度保持为60%-75%，在发酵的第三天翻一次料，以保证料层中心菌丝生长旺兴，总共发酵5-8天，检测其总孢子含量不低于100亿CFU/g，即可低温风干，粉碎，即得到哈茨木霉菌肥。

其中，所述的PDA固体培养基：土豆200g，蔗糖20g，水1000mL，琼脂20g。

其中，所述的固体种子发酵培养基：鲜剑麻渣85%，麦麸10%，玉米秸秆8%，硫酸镁0.1%，硫酸铵0.2%份，磷酸氢钙0.3%份，磷酸氢二钾0.2%。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。

本发明中的鲜剑麻渣含水量高达80%左右，加入玉米皮与秸秆的目的之一是将其物料水份调低至65%至70%，比较粗的（长短为4cm以下）的的剑麻渣有益于哈茨木霉的发酵，增加发酵物料的空隙，有助于物料溶氧的提高，特别是发酵到第三天时，物料完全由菌丝所覆盖，易形成“荚心”，粗的物料就能较好的解决发酵“荚心”的问题；鲜剑麻渣中含有约2%的还原糖，则可以促进哈茨木霉发酵前期的孢子的萌发，减少发酵时间。整个固体发酵培养基与发酵条件是本发明人经过多次单因素与正交试验得到的。

由本发明技术方案生产的哈茨木霉菌肥，具有生产成本低，环境友好，能耗低的特点，产品能明显改善土壤环境质量，提高作物产量，而且能够防治多种植病害。同时高效利用了剑麻生产厂的废弃物—剑麻渣，对当地的经济与环保具有重要意义。

下面结合试验说明本发明的哈茨木霉菌肥在黄瓜上的应用效果

1．试验地点：辽宁省绶中县某种植大棚

2．试验方法：试验组：0.5亩，在定植期前，将哈茨木霉菌肥0.5kg与20kg左右的菜园土混合（即以1kg/亩的量），在试验田进行全田施肥，并浅耕一次，三天之后，将苗栽好，对照组：在同一大棚中的0.5亩，将相同的有机肥与菜园土混合后全田施肥，浅耕一次，对照组中后期有枯萎病利用敌克松进行防治两次；其他施肥与田间管理两组相同；

3．试验结果：移植后，发现利用哈茨木霉菌肥的植株叶片比较新鲜，而且生长势好，没有打蔫的了，植株比对照组提前5天现花。在大部分的都开过花后观察发现，发现试验组的花开的比对照组鲜艳的多，而且花的质量很好，色艳，花大，花看上去就比较“壮”，而且从整个植株的生长来看，生长势明显好于对照组的，期间用过的黄瓜表现为叶色翠绿、植株整齐且土壤表现为疏松，从口感上黄瓜要清脆、香甜。而末用过的则叶色黄绿、植株参差不齐；施用哈茨木霉菌肥的土壤明显地面上长有一层菌丝，土壤透气性明显提高，测得其放线菌比对照组高150%。试验组的黄瓜没有明显的枯萎病，而对照组有超过10%的枯萎病株，后经过利用敌克松进行防治才有所好转，实际测产时，试验组比对照组的增产22.4%，而且所产出的黄瓜口感好。

具体实施方式

本发明实质性特点可以从下述实施例中得以体现，但这些实施例仅作为说明，而不是对本发明进行限制。

实施例1

一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥的原料按重量份为：鲜剑麻渣850份，玉米皮80份，秸秆60份，哈茨木霉种子8份，硫酸镁1份，硫酸铵2份，磷酸氢钙3份，磷酸氢二钾2份，组成。

根据权要求1所述的一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

、哈茨木霉种子制备

将哈茨木霉菌种接种于PDA固体培养基划平板进行复苏，30℃培养4天,在平板下挑取单个菌落划线接种装有150毫升PDA固体培养基的茄子瓶中，在培养箱中30℃培养4天，待菌苔长满茄子瓶，产生大量孢子即可用500毫升的无菌生理盐水洗脱，调节孢子浓度为0.5亿cfu/ml的孢子液备用，将配制好的固体种子发酵培养基加水搅拌均匀后装入罐头瓶,用四层纱布封口，把罐头瓶放在灭菌锅内，在121℃下灭菌30min，冷却后每瓶接种lmL孢子液，30℃恒温培养5天，待罐头瓶中长满哈茨木霉孢子，检测哈茨木霉孢子含量为62亿CFU/克，即可做为哈茨木霉种子。

、向混料罐中依次加入850份长度低于4cm的鲜剑麻渣，加入玉米皮80份，长度低于4cm的秸秆60份，硫酸镁1份，硫酸铵2份，磷酸氢钙3份，磷酸氢二钾2份，哈茨木霉种子8份，搅拌均匀，即为接好种的固体发酵培养基。

、将步骤接好种的固体发酵培养基摊在发酵槽上，物料高度为15cm，控温28℃，湿度保持为60%-75%，在发酵的第三天翻一次料，以保证料层中心菌丝生长旺兴，总共发酵7天，检测其总孢子含量为112亿CFU/g，即可低温风干，粉碎，即得到哈茨木霉菌肥。

其中，所述的PDA固体培养基：土豆200g，蔗糖20g，水1000mL，琼脂20g。

其中，所述的固体种子发酵培养基：鲜剑麻渣85%，麦麸10%，玉米秸秆8%，硫酸镁0.1%，硫酸铵0.2%份，磷酸氢钙0.3%份，磷酸氢二钾0.2%。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。

实施例2

一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥，其特征在于，剑麻渣发酵生产哈茨木霉菌肥的原料按重量份为：鲜剑麻渣900份，玉米皮80份，秸秆100份，哈茨木霉种子10份，硫酸镁2份，硫酸铵3份，磷酸氢钙3份，磷酸氢二钾2份，组成。

根据权要求1所述的一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

、哈茨木霉种子制备

将哈茨木霉菌种接种于PDA固体培养基划平板进行复苏，30℃培养5天,在平板下挑取单个菌落划线接种装有150毫升PDA固体培养基的茄子瓶中，在培养箱中30℃培养5天，待菌苔长满茄子瓶，产生大量孢子即可用500毫升的无菌生理盐水洗脱，调节孢子浓度为0.5亿cfu/ml的孢子液备用，将配制好的固体种子发酵培养基加水搅拌均匀后装入罐头瓶,用四层纱布封口,把罐头瓶放在灭菌锅内，在121℃下灭菌30min，冷却后每瓶接种lmL孢子液，30℃恒温培养4-7天，待罐头瓶中长满哈茨木霉孢子，哈茨木霉孢子含量为65亿CFU/克，即可做为哈茨木霉种子。

、向混料罐中依次加入900份长度低于4cm的鲜剑麻渣，加入玉米皮80份，长度低于4cm的秸秆50-100份，硫酸镁1-2份，硫酸铵2-4份，磷酸氢钙2-5份，磷酸氢二钾1-2份，哈茨木霉种子5-10份，搅拌均匀，即为接好种的固体发酵培养基。

、将步骤接好种的固体发酵培养基摊在发酵槽上，物料高度为18cm，控温28-30℃，湿度保持为60%-75%，在发酵的第三天翻一次料，以保证料层中心菌丝生长旺兴，总共发酵8天，检测其总孢子含量为122亿CFU/g，即可低温风干，粉碎，即得到哈茨木霉菌肥。

其中，所述的PDA固体培养基：土豆200g，蔗糖20g，水1000mL，琼脂20g。

其中，所述的固体种子发酵培养基：鲜剑麻渣85%，麦麸10%，玉米秸秆8%，硫酸镁0.1%，硫酸铵0.2%份，磷酸氢钙0.3%份，磷酸氢二钾0.2%。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。

Claims (2)

1.一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥，其特征在于，剑麻渣发酵生产哈茨木霉菌肥的原料按重量份为：鲜剑麻渣800份-900份，玉米皮50-100份，秸秆50-100份，哈茨木霉种子5-10份，硫酸镁1-2份，硫酸铵2-4份，磷酸氢钙2-5份，磷酸氢二钾1-2份组成。

2.根据权要求1所述的一种利用剑麻渣生产哈茨木霉菌肥的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

、哈茨木霉种子制备

将哈茨木霉菌种接种于PDA固体培养基划平板进行复苏，26-30℃培养4-6天，在平板下挑取单个菌落划线接种装有150毫升PDA固体培养基的茄子瓶中，在培养箱中26-30℃培养4-6天，待菌苔长满茄子瓶，产生大量孢子即可用500毫升的无菌生理盐水洗脱，调节孢子浓度为0.5亿cfu/ml的孢子液备用，将配制好的固体种子发酵培养基加水搅拌均匀后装入罐头瓶，用四层纱布封口，把罐头瓶放在灭菌锅内，在121℃下灭菌30min，冷却后每瓶接种lmL孢子液,26-30℃恒温培养4-7天，待罐头瓶中长满哈茨木霉孢子，哈茨木霉孢子含量不低于60亿CFU/克，即可作为哈茨木霉种子；

、向混料罐中依次加入800-900份长度低于4cm的鲜剑麻渣，加入玉米皮50-100份，长度低于4cm的秸秆50-100份，硫酸镁1-2份，硫酸铵2-4份，磷酸氢钙2-5份，磷酸氢二钾1-2份，哈茨木霉种子5-10份，搅拌均匀，即为接好种的固体发酵培养基；

、将步骤接好种的固体发酵培养基摊在发酵槽上，物料高度为10-20cm，控温26-30℃，湿度保持为60%-75%，在发酵的第三天翻一次料，以保证料层中心菌丝生长旺兴，总共发酵5-8天，检测其总孢子含量不低于100亿CFU/g，即可低温风干，粉碎，即得到哈茨木霉菌肥；

其中，所述的PDA固体培养基：土豆200g，蔗糖20g，水1000mL，琼脂20g；

其中，所述的固体种子发酵培养基：鲜剑麻渣85%，麦麸10%，玉米秸秆8%，硫酸镁0.1%，硫酸铵0.2%份，磷酸氢钙0.3%份，磷酸氢二钾0.2%；各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。