CN1052225C

CN1052225C - 石杉碱甲衍生物,其制备方法和用途

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Publication number: CN1052225C
Application number: CN95196884A
Authority: CN
Inventors: 朱大元; 唐希灿; 林金来; 朱诚; 沈竞康; 吴关松; 将山好; 山口琢儿; 田中和宏; 若松武; 西村浩昭
Original assignee: Jincun Co ltd; Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Current assignee: Jincun Co ltd; Shanghai Institute of Materia Medica of CAS
Priority date: 1994-12-28
Filing date: 1995-12-26
Publication date: 2000-05-10
Anticipated expiration: 2015-12-26

Abstract

本发明涉及新的式(Ⅱ)石杉碱甲衍生物，其中Y表示－C－，或R″与Y一起表示＝CH；R表示(C₁-C₅)烷基，

，

，

，其中n=0，1，X表示氢，(C₁-C₅)烷基，(C₁-C₅)烷氧基，硝基，卤素，羧基，酯基，羟甲基，羟基，二-(C₁-C₅)烷基取代的氨基;-(CH₂)_mCOOZ，其中Z表示氢或(C₁-C₅)烷基;-CH=CH-G，其中G表示苯基，呋喃基，羧基，酯基;及氮上被(C₁-C₅)烷基取代的二氢或四氢吡啶基;R′表示氢，(C₁-C₅)烷基，吡啶酰基，(C₁-C₅)烷氧基取代的苯甲酰基;R″表示氢或(C₁-C₅)烷基;本发明也涉及所述化合物的制备方法以及其作为乙酰胆碱酶抑制剂的用途。

Description

石杉碱甲衍生物，其制备方法和用途

本发明涉及天然产物半合成，更具体地说涉及石杉碱甲及它的类似物。

近10年来国外应用胆碱酯酶抑制剂提高脑内胆碱能系统功能措施治疗早老性痴呆症进行大量研究，虽然取得了可喜的研究结果，但还存在不少缺点，在出现治疗作用的同时，有较严重的毒付反应，且作用持续时间较短。

近年来中国从中草药千层塔中分离得到新的生物碱石杉碱甲(5R，9R，11E)-5-氨基-11-亚乙基-5，6，9，10-四氢-7-甲基-5，9-甲撑环辛烯并[b]吡啶-2(1H)-酮化合物(I)

经药理研究证明它有强效的可逆的抗胆碱酯酶活性，对脑内乙酰胆碱酯酶有选择性抑制作用[美国专利5177082]，国外对石杉碱甲进行结构改造及合成石杉碱甲类似物，希望从中发现具有抗胆碱酯酶活性的化合物[J.Org Chem 56 1991(4636-4645)]和寻找全合成石杉碱甲的方法[美国专利4929731]但尚未发现良好的方法，也未找到更佳效果的类似物。

本发明利用中国中草药的资源优势设计了从石杉碱甲出发进行半合成，希望从诸多的石杉碱甲衍生物中寻找出比现有石杉碱甲治疗效果更佳且毒性较低的化合物。

本发明通过下列步骤实施：

1.从千层塔植物中经乙醇等醇类作为提取溶剂，浓缩所得残渣经无机酸(如盐酸)处理，水层用碱中和，碱化(如氨水，NaOH)后用有机溶剂(如氯仿)提取总生物碱，经处理、层析分离得到化合物(I)。

2.化合物(I)经与相应取代醛或与相应取代酰氯或酸酐在无水溶剂中进行缩合得通式(II)

Y为

或-R″，Y为＝CH

R为C₁-C₅的低烷基；，n＝0，1，X为氢，C₁-C₅的低烷基，C₁-C₅的低烷氧基，硝基，卤素，羧基，酯基，羟甲基，羟基，二-C₁-C₅低烷基取代的氨基；-(CH₂)_mCOOZ基，m＝0-5，Z为氢或C₁-C₅低烷基；-CH＝CH-G基，G为苯基，呋喃基，羧基，酯基；及氮上C₁-C₅低烷基取代的二氢或四氢吡啶基；

R′为氢、C₁-C₅的低烷基，吡啶酰基，C₁-C₅低烷氧基取代的苯甲酰基；

R″为氢及C₁-C₅低烷基。

当Y为C＝0时，R为C₁-C₅的低烷基，

基，n＝0，1，X为氢，C₁-C₅的低烷氧基，羧基，酯基，吡啶基，氮上C₁-C₅低烷基取代的二氢或四氢吡啶基，-(CH₂)_mCOOZ基，m＝0-5，Z为氢或C₁-C₅的低烷基；-CH＝CH-G基，G为苯基，呋喃基，羧基，酯基；

R′为氢，C₁-C₅的低烷基，吡啶酰基，C₁-C₅低烷基取代的苯甲酰基；

R″为氢及C₁-C₅低烷基。当R″，Y为＝CH时，R为

基，n＝0，X为氢，C₁-C₅的低烷基，C₁-C₅的低烷氧基，硝基，卤素，羟基，羟甲基，二-C₁-C₅低烷基取代的氨基；-CH＝CH-G基，G为苯基，呋喃基；

R′为氢及C₁-C₅低烷基。

石杉碱甲衍生物：No Y R″ R′ RNo.1 C＝O H H HOOC-CH₂CH₂-No.2 C＝O H H C₆H₅CH₂-No.3 C＝O CH₃ CH₃

No.4 C＝O H H

No.5 C＝O H

No.6 C＝O H H

No.7 C＝O H H 4-CH₃OC₆H₄-No.8 C＝O H H 2，3，4-(CH₃O)₃C₆H₂-No.9 C＝O H

2，3，4-(CH₃O)₃C₆H₂-No.10 C＝O H H (CH₃)₂CH-No.11 C＝O H H C₆H₅-No.12 C＝O H H 2-pyNo.13 C＝O H 3-py-CO- 3-pyNo.14 C＝O H H 4-pyNo.15 C＝O H H 2-HOOC-C₆H₄-No.15 C＝O H H trans-HOOCCH₂CH＝CH-No.17 ＝CH H

No.18 ＝CH H

No.19 ＝CH H

No.20 ＝CH H No.21 ＝CH H No.22 ＝CH H No.23 ＝CH H No.24 ＝CH H

No.25 ＝CH H

No.26 ＝CH H

No.27 ＝CH H

No.28 ＝CH H No.29 ＝CH H

No.30 ＝CH H No.31 ＝CH H

No.32 ＝CH H

No.33 ＝CH H

No.34 ＝CH H No.35 ＝CH H No.36 ＝CH H

No.37 ＝CH H

No.38 ＝CH H No.39 ＝CH H No.40 ＝CH H

No.41 ＝CH H No.42 ＝CH H

No.43 ＝CH H

No.44 ＝CH H

No.45 ＝CH H

No.46 ＝CH H

石杉碱甲衍生物的药理作用：

本发明应用Ellman报道的比色法测定药物对酶活力的抑制作用。酶活力反应液总容量为4ml，内含碘化硫代乙酰胆碱0.3mmol/L(乙酰胆碱酯酶底物)，或碘化硫代丁酰胆碱0.4mmol/L(丁酰胆碱酯酶底物)pH7.4磷酸盐25mmol/L的缓冲液1ml，最后加水补足到4ml(包括后加酶液量及测试药液)，37℃保温5分钟后，加入酶液(大鼠红细胞膜或大鼠血清)0.1-0.2ml或同时加测试药液0.1-0.3ml，再保温8分钟加入1ml，3％十二烷基硫酸钠终止反应，最后加1ml0.2％，5，5′-联硫-2，2′-硝基-苯甲酸溶液显色，用“721”分光光度计于440nm测定光密度。以不加抑制药物的酶活力(为100％)对照，以剩余酶活力的百分数对药物克分子浓度作图，求得抑制酶活力50％时的药物剂量即IC₅₀。试验结果表明：所有衍生物均有乙酰胆碱酯酶抑制作用，衍生物No1，No17，No18，No19对乙酰胆碱酯酶有明显的抑制作用，稍弱于石杉碱甲，但明显强于毒扁豆碱及加兰他敏。它们对丁酰胆碱酯酶(假性酶)的抑制作用弱于石杉碱甲，衍生物No1及No17对乙酰胆碱酯酶的选择性抑制大于石杉碱甲(见表1、2、6)酶动力学研究表明，衍生物No17，No18及No19与乙酰胆碱酯酶的结合是可逆的。

用小鼠被动逃避操作(跳台法)及大鼠八臂迷宫空间辨别操作二种记忆模型测试表明，衍生物No18，No19均有很强的改善记忆障碍作用(见表3，4)，它们的作用强度与化合物(I)相似。

小鼠的急性每性试验表明，衍生物No.18及No.19的LD₅₀小于化合物(I)，仅为后者的1/3(见表5)表1，石杉碱甲衍生物的体外抗胆碱酯酶作用(比色法测定)

抑制50％酶活力浓度(IC₅₀，μM) IC₅₀比率化合物 ———————————————— BuChE/AChE

乙酰胆碱酯酶丁酰胆碱酯酶No (ACHE) (BUCHE)1 0.348 380.19 1092.52 9.05 ＞346.73 3.63 ＞331.14 ＞12.88 58.95 ＞10.96 ＞275.46 ＞12.3 ＞309.117 0.172 199.5 1159.918 0.151 107.2 709.919 0.145 104.7 722.110 ＞15.85 109.611 ＞14.45 363化合物(I) 0.06309 63.09 1000毒扁豆碱 0.251 1.259 5.02加兰他敏 1.995 12.59 6.3AChE取自大鼠红细胞膜。BuChE取自大鼠血清。

表2，石杉碱甲衍生物的体外抗胆碱酯酶作用

IC₅₀(μM) IC₅₀比率化合物分子量No. 乙酰胆碱酯酶丁酰胆碱酯酶 BuChE/AChE

(ACHE) (BUCHE)石杉碱甲 242 0.0977 100.0 1023.31 342 0.3475 380.2 1094.112 376 0.1259 251.2 1995.215 390 0.6310 502.0 795.617 428 0.1718 199.5 1161.218 376 0.1514 107.2 708.219 406 0.1445 104.7 724.620 346 0.1778 125.9 708.121 420 0.1413 158.5 1121.322 406 0.1259 125.9 1000.023 362 0.2512 199.5 794.224 362 0.1000 158.5 1585.025 378 0.1585 251.2 1584.927 356 0.1259 100.0 794.3AChE取自大鼠皮层匀浆BuChE取自大鼠血清。

表3，石杉碱甲衍生物改善东茛菪碱所致被动逃避操作的记忆损害

组别剂量小鼠数下台潜伏期△

(mg/kg ip+po) (只) (秒±SEM)生理盐水+生理盐水 -+- 20 71.9±12.9东茛菪碱+生理盐水 2+- 20 29.5±2.7东茛菪碱+衍生物No.18 2+0.2 20 67.7±11.7**

2+0.3 20 64.0±9.8*

2+0.4 20 48.7±6.9生理盐水+生理盐水 -+- 18 81.7±19.0东茛菪碱+生理盐水 2+- 23 32.3±8.2东茛菪碱+衍生物No.19 2+0.1 11 48.9±12.6

2+0.2 16 71.6±14.5

2+0.3 21 99.8±16.4**

2+0.4 18 92.2±15.5*

△：小鼠先经训练后立即给药，24小时后测验。

与生理盐水组比较P＜0.01

**与东茛菪组比较*P＜0.05，**P＜0.01

表4，石杉碱衍生物改善东茛菪碱所致空间辨别操作记忆损害

达标前操作错误次数△

组别剂量小鼠数

(mg/kg) (只) 参考记忆工作记忆

ip+po (X+SEM)生理盐水+生理盐水 -+- 24 0.42±0.1 0.08±0.01东茛菪碱+生理盐水 0.2+- 6 1.67±0.21 2.33±0.42东茛菪碱+衍生物No19 0.2+0.1 6 1.33±0.21 1.33±0.49^**

0.2±0.3 6 0.33±0.21^**0.17±0.17^**生理盐水+生理盐水 -+- 24 0.33±0.13 0.08±0.06东茛菪碱+生理盐水 0.125+- 6 2.0±0.45 2.0±0.52东茛菪碱+衍生物No18 0.125+0.2 6 0.67±0.33^**0.33±0.13^**生理盐水+生理盐水 -+- 14 0.21±0.11 0.07±0.07东茛菪碱+生理盐水 0.15+- 7 2.14±0.14 2.57±0.29东茛菪碱+石杉碱甲 0.15+0.25 10 0.57±0.30^**0.86±0.14^**

△：八臂迷宫测试。大鼠经训练达标(每天错误次数1次以下，连续3天)后，用于测验。大鼠第一次进入未置放食料的臂为参考记忆错误。大鼠重复进入置放食料的臂为工作记忆错误。

与生理盐水组比较P＜0.01

**与东茛菪组比较P＜0.01。

表5，石杉碱甲衍生物对小鼠的急性毒性(Bliss法)

mg/kg p.o. (95％可信限)*化合物

LD₅ LD₅₀化合物(I) 3.1(3.5-3.8) 4.6(4.2-5.1)衍生物No18 9.6(7.3-12.5) 14.4(12.8-16.4)衍生物No19 11.1(9.6-12.9) 14.1(15.5-20.5)*小鼠10只一组，♀♂各半。各药测试用4-5剂量组。观察7天内的死亡率。

表6，石杉碱甲衍生物的体外抗胆碱酯酶作用

抑制活性化合物 AChE BuChE BuChE/AChENo.

1(μM) IC₅₀(M) 10(μM)(18) 90.2 8.4×10^-8 0 ＞500(20) 83.7 9.4×10^-8 0 ＞500(21) 84.9 1.0×10^-7 0 ＞500(22) 68.7 0(23) 34.4 0(15) 60.8 0(24) 78.3 2.8×10^-7 0 ＞100(25) 62.0 0(27) 84.0 1.1×10^-7 3.3 ＞500(26) 79.7 1.8×10^-7 1.1 ＞300(16) 80.7 2.1×10^-7 1.8 ＞200(14) 76.4 3.6×10^-7 2.5 ＞100(44) 85.6 1.1×10^-7 1.8 ＞500(45) 87.0 1.0×10^-7 1.8 ＞500(46) 78.7 2.9×10^-7 1.2 ＞100E-2020 86.2 6.6×10^-8 2.9 ＞500石杉碱甲 88.3 1.2×10^-7 0 ＞500

上述药理研究结果表明衍生物No17，No18，No19是强效乙酰胆碱酯酶选择性抑制剂，其急性毒性低于化合物(I)，因此，推论它们具有临床应用开发前景。用于治疗缓解重症肌无力症及中枢胆碱能系统功能衰竭导致的记忆功能障碍。

实施例1，衍生物No.2的制备

称取化合物(I)(0.50mmole)于50ml三颈瓶中，加入20ml无水吡啶，使(I)化合物溶解，冰浴冷却下，滴入苯乙酰氯(0.55mmole)，滴加毕后，室温搅拌过夜(25℃)薄板层析表明原料基本消失，停止反应，水泵减压蒸去吡啶，用硅胶层析分离以二氯甲烷∶丙酮∶甲醇＝50∶45∶5洗脱得粗产品，丙酮、石油醚混合溶剂重结晶得产品，收率75％。UV λ_max＝229nm(ε＝17360)

λ_max＝316nm(ε＝9320)[α]_D ²⁵℃＝29.43°¹HNMR：[CDCl₃]

3H 6.31(1H，d，J＝9.9Hz)

4H 7.20(1H，d，J＝9.9Hz)

10H 2.89(2H m)

9H 3.52(1H，m)

8H 5.38(1H，d，J＝5.0Hz)

14-H 1.62(3H d，J＝6.7Hz)

13-H 5.08(1H q，J＝6.7Hz)

6-H 2.15，2.45(2H，m)

12-H 1.50(3H，s)

2′，4′-H 7.36(2H，m)

3′，5′-H 7.29(2H，m)

6′-H 7.24(1H，m)

7′-H 3.59(s)MS(m/z) 360(M⁺)345 269 252 227 224 210(100％)91mp： 171-173℃IR：υ^max3280，1660(s)，1620(s)，1550，1450，1350，1300，

1175，1130，840，620cm^-1

同法可制得衍生物，No.3，No.5，No.6，No.7，No.8，No.9，No.10，No.11，No.13。

实施例2，衍生物No4的制备

称取化合物(I)(0.5mmole)于50ml三颈瓶中，加入20ml无水吡啶，使其溶解，在冰浴冷却下，先加入DBU(0.6mmole)，再加入0.55mmole的盐酸吡啶-2-甲酰氯，室温放置过夜，用薄板层析测定表明反应已基本完全，用水泵减压蒸去吡啶，用硅胶层析分离，展开剂为二氯甲烷∶丙酮∶甲醇＝50∶45∶5洗脱，得粗产品，用丙酮、石油醚混合溶剂重结晶得产品，收率74％。UV λ_max＝226nm(ε＝1.35×10⁴)

λ_max＝264nm(ε＝5.4×10³)

λ_max＝315nm(ε＝5730)[α]_D＝77.85°¹HNMR：[CDCl₃]

3-H 6.36(1H，J＝9.2Hz)

4-H 7.44(1H，J＝9.2Hz)

10-H 3.05(2H，m)

9-H 3.74(1H，m)

8-H 5.42(1H，d，J＝4.7Hz)

14-H 1.65(3H，d，J＝6.6Hz)

13-H 5.35(1H，q＝6.6HZ)

6-H 2.42(2H，s)

12-H 1.55(3H，s)

2′-H 8.58(1H，m)

4′-H 7.85(1H，m)

5′-H 7.48(1H，m)

6′-H′8.15(1H，m)MS(m/z) 347(M⁺)241(100％)169，149，106，95，79，71，55mp： 170-171℃IR：υ_max 3450，2900，1660(s)，1615(s)，1530(s)，1460，

1300，1180，1140，1000，830，750，cm^-1

同法可制衍生物No.12，14。

实施例3，衍生物No.19的制备

称取化合物(I)(0.5mmole)放于50ml三颈烧瓶中，加入无水乙醇，加入4，6-二甲氧基2-羟基苯甲醛(0.51mmole)微微加热回流，经分水器不断蒸出部分乙醇，并随时补充反应中的溶剂，反应数小时并随时用薄板层析测定其反应状况，待完全后，减压除去乙醇，得固体，粗产品丙酮、石油醚混合溶剂重结晶，得产品，产率92％。

同法可制衍生物No17，18，20，21，22，23，24，25，26，27，28，29，30，31，32，33，34，35，36，37，38，39，40，41，42，43。衍生物No.19m.p.207～210℃MS：m/z 406(M⁺)

391(M⁺-CH₃)，351(M⁺-C₄H₇)¹H NMR(CDCl₃)

1-H 13.12(1H，br.s)

3-H 6.41(1H，d，J＝9.1HZ)

4-H 7.25(1H，d J＝9.1HZ)

6-H 2.85(2H，s)

8-H 3.45(1H，d，J＝4.7HZ)

9-H 3.61(1H，m)

10-H 2.85(2H，m)

12-H₃ 1.60(3H，s)

13-H 5.22(1H，q，J＝7.7Hz)

14-H₃ 1.25(3H，d，J＝7.7Hz)

2′-OH 14.58(1H，br.s)

3′-H 5.57(1H，s)

4′-OCH₃ 3.79(3H，s)

5′-H 5.85(1H，s)

6′-OCH₃ 3.70(3H，s)

7′-H 8.15(1H，s)IR：υ_max 3480(m)，2960(s)，2930(s)，2870(s)，1670(s)，1620(s)，1540(s)，1450(s)，1330(s)，1300(s)，1218(sh)，1186(m)，1155(s)，1110(s)，1080(m)，1050(m)，1000(m)，930(m)，840(s)，730(m)，670(m)，610(m)，520(s)cm^-1。衍生物No.20¹H NMR(CDCl₃)：

1-H 12.72(1H，br，s)

3-H 6.34(1H，d J＝9.4Hz)

4-H 7.11(1H，d，J＝9.4Hz)

6_a-H 2.79(1H，d，J＝16.0Hz)

6_b-H 2.75(1H，d，J＝16.0Hz)

8-H 5.41(1H，d，J＝5.0Hz)

9-H 3.63(1H，m)

10_a-H 2.95(1H，dd，J＝16.6，4.9Hz)

10_b-H 2.27(1H，d，J＝16.6Hz)

12-H 1.57(3H，s)

13-H 5.07(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.55(3H，d，J＝6.8Hz)

2′-OH 13.77(1H，br.s)

3′-H 6.94(1H，d，J＝8.4Hz)

4′-H 7.30(1H，t with small splitts，J＝8.4Hz)

5′-H 6.85(1H，t with small splitts，J＝7.4Hz)

6′-H 7.22(1H，dd，J＝7.4，1.6Hz)

7′-H 8.31(1H，s)MS：346(M⁺)，331，317，303，291，253，239，226，210，197，184，167，128，121，97。IR：υ_max3420，2900，1660，1620，1580，1560，1500，1460，1420，1380，1350，1280，1205，1150，1120，1080，1010，970，910，840，790，755(s)，650，630，610，520cm^-1。衍生物No.21¹H NMR(CDCl₃)：

1-H 12.87(1H，br.s)

3-H 6.32(1H，d，J＝9.4Hz)

4-H 7.07(1H，d，J＝9.4Hz)

6_a-H 2.79(1H，d，J＝16.0Hz)

6_b-H 2.75(1H，d，J＝16.0Hz)

8-H 5.43(1H，d，J＝5.0Hz)

9-H 3.63(1H，m)

10_a-H 2.97(1H，dd，J＝16.0，4.0Hz)

10_b-H 2.18(1H，d，J＝16.0Hz)

12-H 1.58(3H，s)

13-H 5.14(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.57(3H，d，J＝6.8Hz)

2′6′-2H 7.04(2H，s)

7′-H 8.25(1H，s)

3′5′-2(OCH₃)3.87(6H，s)

4′-OCH₃ 3.84(3H，s)MS：420(M⁺)，405(M⁺-CH₃)，391，365，351，313，284，239，226，210，196，181，140，124。IR：υ_max 2940，1660(s)，1590，1560，1500，1565，1420，1370，1330，1300，1230，1190，1130(s)，1005，960，930，840，770，735，725，660，605，540，530cm^-1。衍生物No.22¹H NMR(CDCl₃)：

1-H 13.03(1H，br.s)

3-H 6.34(1H，d，J＝9.4Hz)

4-H 7.14(1H，d，J＝9.4Hz)

6-H₂ 2.73(2H，s)

8-H 5.39(1H，d，J＝4.7Hz)

9-H 3.61(1H，m)

10_a-H 2.94(1H，dd，J＝16.8，4.9Hz)

10_b-H 2.27(1H，d，J＝16.8Hz)

12-H 1.55(3H，s)

13-H 5.09(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.54(3H，d，J＝6.8Hz)

2′-OH 14.39(1H，br.s)

3′-OCH₃ 3.87(3H，s)

4′-OCH₃ 3.85(3H，s)

5′-H 6.43(1H，d，J＝8.7Hz)

6′-H 6.91(1H，d，J＝8.7Hz)

7′-H 8.14(1H，s)MS：406(M⁺)，391(M⁺-CH₃)，373，351，239，226，197，182，167，139，101IR：υ^max 3450-3350(br)2940(m)，1660(s)，1620(s)，1555，1510，1455，1415，1290，1270(s)，1210，1110(s)，1060，970，930，835，785，695，675，640，625cm^-1。衍生物No.23¹H NMR(d₆-DMSO)：

1-H 11.48(1H，br，s)

3-H 6.13(1H，d，J＝9.4Hz)

4-H 7.07(1H，d，J＝9.4Hz)

6_a-H 2.68(1H，d，J＝16.7Hz)

6_b-H 2.59(1H，d，J＝16.7Hz)

8-H 5.48(1H，d，J＝4.7Hz)

9-H 3.65(1H，m)

10_a-H 2.77(1H，dd，J＝16.3，4.0Hz)

10_b-H 2.28(1H，d，J＝16.3Hz)

12-H 1.59(3H，s)

13-H 5.05(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.60(3H，d，J＝6.8Hz)

2′-OH 14.40(1H，br.s)

3′-H 6.18(1H，s)

4′-OH 10.09(1H，br.s)

5′-H 6.30(1H，d，with small splitts，J＝8.4Hz)

6′-H 7.31(1H，d，J＝8.4Hz)

7′-H 8.47(1H，s)MS：362(M⁺)，347，319，307，242，226，210，197，167，137。IR：υ_max 3500-2800(br)，1665(s)，1625(s)，1605(s)，1550，1540，1450，1345，1300，1230，1180，1120，1080，975cm^-1。衍生物No.24¹H-NMR(CDCl₃)：

1-H 13.09(1H，br，s)

3-H 6.37(1H，d J＝9.4Hz)

4-H 7.15(1H，d，J＝9.4Hz)

6-H₂ 2.76(2H，s)

8-H 5.42(1H，d，J＝5.0Hz)

9-H 3.60(1H，m)

10_a-H 2.96(1H，dd，J＝16.5，4.9Hz)

10_b-H 2.32(1H，d，J＝16.5Hz)

12-H 1.56(3H，s)

13-H 5.11(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.58(3H，d，J＝6.8Hz)

2′-OH13.09(1H，br.s)

3′-OH9.83(1H，br.s)

4′-H 6.68(1H，dd，J＝8.1，1.5Hz)

5′-H 6.57(1H，t，J＝7.8Hz)

6′-H 6.91(1H，dd，J＝7.6，1.5Hz)

7′-H 8.08(1H，s)MS：362(M⁺)，347(M⁺-CH₃)，307，253，239，226，197，167，149，138，137，109，92，81。IR：υ_max 3500-2850(br)，1660(s)，1625(s)，1545，1460，1370，1275，12401120，1080，1060，1020，835，775，740(s)，640，630，525cm^-1。衍生物No.26¹HNMR(CDCl₃)：

1-H 13.10(1H，br.s)

3-H 6.33(1H，d J＝9.4Hz)

4-H 7.12(1H，d，J＝9.4Hz)

6-H2 2.75(2H，s)

8-H 5.41(1H，d，J＝4.8Hz)

9-H 3.62(1H，m)

10_a-H 2.95(1H，dd，J＝16.5，4.9Hz)

10_b-H 2.27(1H，d，J＝16.5Hz)

12-H₃ 1.57(3H，s)

13-H 5.08(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.54(3H，d，J＝6.8Hz)

2′-OH 14.36(1H，br.s)

3′-OCH₃3.86(3H，s)

4′-H 6.83(1H，dd，J＝7.9，1.5Hz)

5′-H 6.76(1H，t，J＝7.9Hz)

6′-H 6.89(1H，dd，J＝7.9，1.5Hz)

7′-H 8.27(1H，s)MS：376(M⁺)，361，346，331，306，270，253，239，226，210，197，167，152，109，106，82。IR：υ^max 3450-3360，2940-2890，1660(s)，1620(s)，1555，1465(s)，1255(s)，1190，1170，1115，1085，970，930，840，780，740，680，640，630，520cm^-1。衍生物No.27¹HNMR(CDCl₃)：

1-H 12.80(1H，br.s)

3-H 6.34(1H，d J＝9.4Hz)

4-H 7.07(1H，d，J＝9.4Hz)

6-H₂ 2.72(2H，s)

8-H 5.40(1H，d，J＝5.0Hz)

9-H 3.61(1H，m)

10_a-H 2.94(1H，dd，J＝16.2，3.6Hz)

10_b-H 2.17(1H，d，J＝16.2Hz)

12-H 1.56(3H，s)

13-H 5.08(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.57(3H，d，J＝6.8Hz)

2′，6′-2H 7.45(2H，dd，J＝6.8，1.4Hz)

3′，5′，8′-3H 7.30(3H，m)

4′-H 7.06(1H，m)

7′-H 6.99(1H，d，J＝15.9Hz)

9′-H 8.06(1H，d，J＝8.1Hz)MS：356(M⁺)，341(M⁺-CH₃)，327，301，265，237，226，210，197，167，131，115，91，77。IR：υ_max：3600～3400(br)，2950～2850(br)，1660(s)，1632，1620，1550，1465，1445，1300(m)，1175，1115，975，825，750(s)，690(s)，630，620，520cm^-1。衍生物No.28¹HNMR(CDCl₃)：

1-H 12.76(1H，br，s)

3-H 6.38(1H，d J＝9.3Hz)

4-H 7.12(1H，d，J＝9.3Hz)

6_a-H 2.81(1H，d，J＝16.0Hz)

6_b-H 2.78(1H，d，J＝16.0Hz)

8-H 5.46(1H，br，s)

9-H 3.67(1H，m)

10_a-H 3.00(1H，dd，J＝16.4，4.5Hz)

10_b-H 2.31(1H，d，J＝16.4Hz)

12-H 1.62(3H，s)

13-H 5.07(1H，q，J＝6.6Hz)

14-H 1.60(3H，d，J＝6.6Hz)

2′-OH 13.76(1H，br，s)

3′-H 6.94(1H，d，J＝8.7Hz)

4′-H 7.29(1H，dd，J＝8.7，2.3Hz)

5′，6′，7′，8′-4H 7.25(4H，m)

11′-H 8.30(1H，s)MS(m/z)：396(M⁺，3％)，381(M⁺-CH₃，1)，226(2)，172(4)，144(2)，127(1)，115(5)，85(13)，71(22)，57(100)。IR(KBr)：3408，1660，1626，1479，1280cm^-1衍生物No.30¹HNMR(CDCl₃)：

1-H 10.92(1H，br，s)

3-H 6.42(1H，d J＝9.3Hz)

4-H 7.15(1H，d，J＝9.3Hz)

6_a-H 2.82(1H，d，J＝17.2Hz)

6_b-H 2.76(1H，d，J＝17.2Hz)

8-H 5.47(1H，br，s)

9-H 3.69(1H，m)

10_a-H 2.99(1H，dd，J＝16.0，3.7Hz)

10_b-H 2.30(1H，d，J＝16.0Hz)

12-H 1.63(3H，s)

13-H 5.07(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.61(3H，d，J＝6.8Hz)

3′-H 6.89(1H，d，J＝6.8Hz)

4′，6′-2H 7.42(2H，m)

7′-H 8.30(1H，s)MS(m/z)：426(M⁺+2，43％)，424(M⁺，43)，411[(M⁺+2)-CH₃，42]，409(M⁺-CH₃，45)，369(11)，289(5)，253(18)，239(33)，226(100)，210(54)，197(47)，167(31)，128(31)，115(46)，91(32)，77(59)，57(81)。IR(KBr)：3400，1660，1630，1475，1280，823cm^-1衍生物No.32¹HNMR(CDCl₃)：

1-H 12.70(1H，br，s)

3-H 6.39(1H，d J＝9.4Hz)

4-H 7.11(1H，d，J＝9.4Hz)

6_a-H 2.81(1H，d，J＝16.2Hz)

6_b-H 2.77(1H，d，J＝16.2Hz)

8-H 5.45(1H，br，s)

9-H 3.67(1H，m)

10_a-H 2.99(1H，dd，J＝16.7，4.9Hz)

10_b-H 2.31(1H，d，J＝16.7Hz)

12-H 1.62(3H，s)

13-H 5.06(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.60(3H，d，J＝6.8Hz)

2′-OH 13.80(1H，br，s)

3′-H 6.89(1H，d，J＝8.7Hz)

4′-H 7.42(1H，dd，J＝8.7，2.4Hz)

6′-H 7.39(1H，d，J＝2.4Hz)

7′-H 8.29(1H，s)MS(m/z)：392(M⁺+1，11％)，391(M⁺，45)，376(M⁺-CH₃，60)，242(18)，226(53)，101(28)，83(53)，59(100)。IR(KBr)：3419，1660，1616，1549，1336，833cm^-1衍生物No.33¹HNMR(CDCl₃)：

1-H 12.40(1H，br，s)

3-H 6.42(1H，d J＝9.5Hz)

4-H 7.15(1H，d，J＝9.5Hz)

6_a-H 2.84(1H，d，J＝16.3Hz)

6_b-H 2.77(1H，d，J＝16.3Hz)

8-H 5.47(1H，br，s)

9-H 3.70(1H，m)

10_a-H 3.00(1H，dd，J＝16.0，4.9Hz)

10_b-H 2.39(1H，d，J＝16.0Hz)

12-H 1.58(3H，s)

13-H 5.12(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.63(3H，d，J＝6.8Hz)

2′-OH 15.59(1H，br，s)

4′-H 8.16(1H，d，J＝7.8Hz)

5′-H 6.77(1H，t，J＝7.8Hz)

6′-H 7.46(1H，d，J＝7.8Hz)

7′-H 8.24(1H，s)MS(m/z)：391(M⁺，66％)，376(M⁺-CH₃，41)，356(45)，328(18)，288(14)，239(15)，226(100)，210(25)，197(22)，83(61)。IR(KBr)：3431，1662，1633，1529，1352，1242，754cm^-1衍生物No.34¹HNMR(CDCl₃)：

1-H 12.87(1H，br，s)

3-H 6.38(1H，d J＝9.6Hz)

4-H 7.13(1H，d，J＝9.6Hz)

6-H₂ 2.78(2H，s)

8-H 5.46(1H，br，s)

9-H 3.67(1H，m)

10_a-H 3.00(1H，dd，J＝16.5，4.9Hz)

10_b-H 2.32(1H，d，J＝16.5Hz)

12-H 1.62(3H，s)

13-H 5.09(1H，q，J＝6.7Hz)

14-H 1.59(3H，d，J＝6.7Hz)

2′-OH 14.42(1H，br，s)

3′-OCH₃3.90(3H，s)

4′，6′-2H 6.86(2H，m)

7′-H 8.22(1H，s)MS(m/z)：412(M⁺+2，0.3％)，410(M⁺，1.2)，395(M⁺-CH₃，0.5)，239(1.4)，216(2)，83(100)。IR(KBr)：3421，2933，1660，1618，1471，1253，839cm^-1衍生物No.35¹HNMR(CDCl₃)：

1-H 12.80(1H，br，s)

3-H 6.38(1H，d J＝9.3Hz)

4-H 7.13(1H，d，J＝9.3Hz)

6-H₂ 2.78(2H，s)

8-H 5.46(1H，br，s)

9-H 3.67(1H，m)

10_a-H 3.00(1H，dd，J＝16.7，5.1Hz)

10_b-H 2.32(1H，d，J＝16.7Hz)

12-H 1.62(3H，s)

13-H 5.08(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H 1.59(3H，d，J＝6.8Hz)

2′-OH 14.45(1H，br，s)

3′-OCH₃3.89(3H，s)

4′，6′-2H 7.00(2H，m)

7′-H 8.21(1H，s)MS(m/z)：456(M⁺2，79)，454(M⁺，7a)，441[(M⁺+2)-CH₃，40]，439(M⁺-CH₃，42)，401(7)，399(8)，285(14)，239(24)，226(100)，210(33)，197(37)，83(84)。IR(KBr)：3431，1660，1624，1471，1252cm^-1

实施例4衍生物No.15制备

称取化合物(I)(0.5mmole)于50μl三颈瓶中，加入20ml无水吡啶，使其溶解，在冰浴冷却下，加入邻苯二甲酸酐，室温搅拌过夜。用薄板层析测定表明反应基本完全后，用水泵减压蒸去吡啶，硅胶层析分离，展开剂为二氯甲烷∶甲醇＝3∶1得粗品，丙醇重结晶后得No.15白色粉末，收率78％。

同法可制衍生物No.1.16¹H NMR(d₆-DMSO)：

3-H 6.09(1H，d，J＝9.4Hz)

6-H₂ 2.51(2H，s)

8-H 5.44(1H，d，J＝4.8Hz

9-H 3.56(1H，m)

10_a-H 2.66(1H，dd，J＝16.8，4.6Hz)

10_b-H 2.09(1H，d，J＝16.8Hz)

12-H₃ 1.51(3H，s)

13-H 5.60(1H，q，J＝6.8Hz)

14-H₃ 1.62(3H，d，J＝6.8Hz)

3′4′5′and4-H 7.51(4H，m)

6′-H 7.73(1H，d，J＝7.5Hz)

N-H(酰胺)7.90(1H，br.s)

COO-H 8.46(1H，br.s)IR：υ_max 3650-2400，1710，1655，1605，1546，1450，1300cm^-1MS m/z：372(M⁺)，357，343，329，242，227，187，147，104(100)。

实施例5衍生物No.44的制备

氩气流下石杉碱甲150mg(0.620mmole)，4A分子筛200mg，混悬于4ml苯中，加入吡啶-3-甲醛76μl(0.86mmol)对甲苯磺酸单水化合物20mg，回流3小时，放冷后用三乙胺中和，反应液celite，过滤，浓缩后，残渣经硅胶柱层析(甲醇∶二氯甲烷＝1∶20)精制，得衍生物No.44，无色固体(183mg，收率89％)。

同法可制备衍生物No.45，46，收率分别为(84％，82％)

衍生物No.44

NMR(CDCL₃)1.64(3H，d，J＝7.0Hz)，1.65(3H，s)

2.25(1H，d，J＝16.0Hz)，2.82(1H，d，J＝17.0Hz)

2.86(1H，d，J＝16.0Hz)，

3.07(1H，dd，J＝5.0，17.0Hz)，8.65-3.75(1H，m)

5.14(1H，q，J＝7.0Hz)，5.50(1H，d，J＝5.0Hz)

6.34(1H，d，J＝8.5Hz)，7.09(1H，d，J＝9.5Hz)

7.40(1H，dd，J＝5.0，8.0Hz)，

8.28(1H，dt，J＝2.0，8.0Hz)，8.47(1H，s)

8.70-8.72(1H，m)，8.94-8.96(1H，m)，

MS：331(M⁺)，316(base)，226HRMS计算值：分子式C₂₂H₂₁N₂O(M⁺)：331.16846

实验值：331.16888

衍生物No.45

NMR(CDCL₃)1.64(3H，d，J＝7.0Hz)，1.65(3H，s)

2.25(1H，d，J＝16.0Hz)，2.82(1H，d，J＝16.5Hz)

2.86(1H，d，J＝16.0Hz)，

3.07(1H，dd，J＝5.0，16.5Hz)，3.61-3.70(1H，m)

5.10(1H，q，J＝7.0Hz)，5.50(1H，d，J＝4.0Hz)

6.39(1H，d，J＝9.5Hz)，7.05(1H，d，J＝9.5Hz)

7.11-7.73(2H，m)，8.41(1H，s)，

8.73-8.79(2H，m)，

MS： 331(M⁺)，316(base)，226HRMS计算值：分子式C₂₂H₂₁N₃O(M⁺)：331.16846

实验值：331.18836

衍生物No.46

NMR(CDCL₃)1.64(3H，d，J＝6.5Hz)，1.65(3H，s)

2.24(1H，d，J＝16.0Hz)，2.82(1H，d，J＝16.5Hz)

2.85(1H，d，J＝16.0Hz)，

3.07(1H，dd，J＝5.0，16.5Hz)，3.67-3.70(1H，m)

3.96(6H，s)，5.22(1H，q，J＝6.5HZ)，5.30(1H，s)

5.47-5.49(1H，m)，6.39(1H，d，J＝9.5Hz)，

7.12(1H，s)，7.15(1H，d，J＝9.5Hz)，8.29(1H，s)

MS：406(M^-，base)，391，228，167HRMS计算值：分子式C₂₄H₂₆N₂O₄(M⁺)：406.18926

实验值：406.18949

Claims

1.一种结构式如下的石杉碱甲衍生物其中Y为

或-R″，Y＝CH

R为C₁-C₅的低烷基；

n＝0，1，X为氢，C₁-C₅的低烷基，C₁-C₅的低烷氧基，硝基，卤素，羧基，酯基，羟甲基，羟基，二-C₁-C₅低烷基取代的氨基；-(CH₂)_mCOOZ基，m＝0-5，Z为氢或C₁-C₅低烷基；-CH＝CH-G基，G为苯基，呋喃基，羧基，酯基；或氮上C₁-C₅低烷基取代的二氢或四氢吡啶基；

R″为氢或C₁-C₅低烷基。

2、根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，当Y为C＝0时，R为C₁-C₅的低烷基，

R″为氢或C₁-C₅低烷基。

3、根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，当R″，Y为＝CH时，R为

基，n＝0，X为氢，C₁-C₅的低烷基，C₁-C₅的低烷氧基，硝基，卤素，羟基，羟甲基，二-C₁-C₅低烷基取代的氨基，-CH＝CH-G基，G为苯基，呋喃基；

R′为氢或C₁-C₅低烷基。

4、根据权利要求1所述的化合物，其特征在于它的制备方法为：

(1)当Y为

时，石杉碱甲与相应取代酰氯或酸酐在无水溶剂中进行缩合，

(2)当R″，Y为＝CH时，则石杉碱甲与相应取代的醛在无水溶剂中进行缩合。

5.根据权利要求1所述的化合物在制备胆碱脂酶抑制剂方面的应用。