CN105214104A - 一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体及其制备方法 - Google Patents
一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105214104A CN105214104A CN201510688577.0A CN201510688577A CN105214104A CN 105214104 A CN105214104 A CN 105214104A CN 201510688577 A CN201510688577 A CN 201510688577A CN 105214104 A CN105214104 A CN 105214104A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liposome
- magnetic particle
- hydrophobic nano
- preparation
- nano magnetic
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
本发明涉及一种负载疏水性纳米磁性粒子的脂质体及其制备方法,脂质体的双分子层中含有疏水性磁性粒子。制备方法包括:将卵磷脂和稳定剂按质量比为2~6:1溶解于氯仿-甲醇溶液中,超声;将磁性粒子溶解到氯仿中,得到磁流体溶液,然后卵磷脂-胆固醇溶液以摩尔比为1:100-1:25混合,30~50℃旋转蒸发,得到透明薄膜,然后在氮气保护下,旋转蒸发0.5~2.0h,真空中置放12~24h,得到脂质体薄膜;将磷酸盐缓冲液加入到脂质体薄膜中,氮气保护下,搅拌,分散,离心,即得。本发明方法简单,成本较低。本发明的脂质体具有稳定性好、便于储存、生物相容性好、颗粒分布均匀等优点。
Description
技术领域
本发明属纳米脂质体及其制备领域,特别涉及一种负载负载疏水性纳米磁性粒子脂质体及其制备方法。
背景技术
肿瘤是严重威胁人类生命健康的常见病、多发病。肿瘤一旦发展到后期便很难再被治愈,因袭肿瘤的早期诊断对于病变的控制和治疗具有非常重要的意义。其中核磁共振成像技术相比于x射线成像、超声波成像等临床诊断手段具有分辨率高、特异性强、成像参数多、无电离辐射等优点,在医学诊断方面有着巨大的应用潜力,尤其是对于肿瘤的早期发现和诊断有着突出的优势。其中核磁共振成像过程中需要使用造影剂来提高MRI诊断的特异性和灵敏性。目前来说,己经被研究出来或正在研究中的MRI造影剂的种类有很多,除了一些金属元素与配体形成的鳌合物如Gd-DTPA为代表的T1造影剂,还有以表面包覆有生物相容性聚合物的磁性纳米四氧化三铁为代表的T2类造影剂。然而Gd为重金属元素,小分子Gd试剂在体内停留时间过短,且Gd试剂具有很强的肾毒性,限制了其应用前景,而超顺磁性纳米四氧化三铁穿透力强且弛豫率高,使用剂量低等优势,使其成为核磁共振成像的良好造影剂(参见《中华放射学杂志》,2011年6月第45卷第6期,杨蕊梦等人,新型MR对比剂长循环超顺磁氧化铁脂质体纳米微粒的体内外实验研究)。四氧化三铁作为磁共振造影剂来说,其必须具备好的生物相容性,高的稳定性,和较长的血液循环时间等条件。目前已经许可上市和正在临床实验的超顺磁性造影剂大多都是用壳聚糖、葡聚糖等高分子聚合物作为修饰材料,然而这类造影剂粒径较大,容易被体内的网状内皮细胞所吞噬,纳米颗粒偶尔会引发过敏反应等缺点。
有研究表明脂质体作为磁性材料的包覆剂可以弥补上述造影剂的不足和缺点,而目前大多数的研究都是倾向于脂质体作为亲水性纳米磁性粒子的修饰剂,对于包载疏水性纳米磁性粒子鲜少涉及。对于包载亲水性磁性纳米粒子的脂质体而言,存在一些缺点和不足。例如磁含量不高,磁响应性低。由于脂质体,尤其是小单室脂质体的内部空间有限,导致仅有少量的磁性粒子可以被包入脂质体的内部,饱和磁化强度小、MRI成像效果差;磁性粒子的密度较大、易沉降、易引发一些对生物体的毒性效应,并且在脂质体通过自组装形成囊泡的结构时,难以均匀包覆。另外由于脂质体的内部空间有限,当磁性粒子占据其中时,导致药物的包封率下降。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体及其制备方法,该发明的磁性脂质体可以避免磁性粒子直接接触人体组织而产生一些毒副作用,同时也可以提高磁性粒子在脂质体中的负载量,增加磁饱和度从而达到增强肿瘤的MRI图像对比度的目的。该制备方法简单,成本低。
本发明的一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体,所述脂质体的双分子层中含有疏水性磁性粒子。
所述疏水性纳米磁性粒子为油水界面法制备;所述疏水性纳米磁性粒子为Fe3O4。
所述脂质体的水相负载水溶性药物。
所述水溶性药物为硫酸奎宁。
本发明的一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体的制备方法,包括:
(1)将卵磷脂和稳定剂按质量比为2~6:1溶解于氯仿-甲醇溶液中,超声,得到卵磷脂-胆固醇溶液;
(2)将磁性粒子溶解到氯仿中,得到磁流体溶液,然后与步骤(1)中卵磷脂-胆固醇溶液以摩尔比为1:100-1:25混合,30~50℃旋转蒸发,得到透明薄膜;
(3)将步骤(2)中的透明薄膜在氮气保护下,旋转蒸发0.5~2.0h,真空中放置12~24h,得到脂质体薄膜;
(4)将磷酸盐缓冲液加入到步骤(3)中的脂质体薄膜中,氮气保护下,搅拌,分散,离心,得到负载疏水性磁性粒子的纳米脂质体;其中,磷酸缓冲液的pH为7.0~7.4。
所述步骤(1)中所使用的稳定剂为胆固醇。
所述步骤(1)中氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比为2:1。
所述步骤(1)中卵磷脂为大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。
所述步骤(2)中磁性粒子用油酸和油酸钠修饰。
所述步骤(2)中磁流体的浓度为0.25~1.0mg/ml。
所述步骤(4)中搅拌的时间为2.0~6.0h;分散为高速分散均质机分散30~45min;离心速率1000rpm离心10min。
所述步骤(4)中制备的脂质体用100~220nm的滤膜过滤除菌。
有益效果
(1)本发明制备的磁性脂质体,磁性粒子由于其疏水性,被包埋在脂质体的磷脂双分子层内,避免了磁性粒子直接接触人体组织所造成的损害;
(2)本发明制备的磁性脂质体粒径分布均匀,重复性好,粒径大小为120~150nm;
(3)本发明制备的磁性脂质体的磁性粒子包封率高于69%,并且具有好的MRI成像效果;
(4)本发明制备的磁性脂质体的全部水相可以用来包覆其他水溶性药物,为其他生物医学应用提供了可能,同时还提高了磁性粒子的负载量;
(5)本发明的磁性脂质体以有效的降低核磁共振成像时的背景噪声,提高图像的对比度,且具有稳定性好、便于储存、生物相容性好、颗粒分布均匀等优点;
(6)本发明的制备方法简单,成本低。
附图说明
图1是本发明制备的磁性脂质体的结构示意图;
图2是本发明的工艺流程图;
图3是实施例1中磁性脂质体的TEM图片;
图4是实施例2中磁性脂质体的弛豫率测量图(a)和磁性吸引效果图(b);
图5是实施例3中磁性脂质体的体外肿瘤MRI成像效果图(a)和信号强度图(b)。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解,在阅读了本发明讲授的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
(1)分别将取100mg蛋黄卵磷脂和25mg胆固醇充分溶解于20ml氯仿与甲醇的体积比为2:1的溶剂中。
(2)取油酸修饰的磁性粒子溶解到20ml的氯仿中,得到浓度为0.25mg/ml的磁流体溶液。接着将磁流体溶液和(1)中的卵磷脂-胆固醇溶液在茄形瓶中以1:50的摩尔比进行混合,在温度为45℃时旋转蒸发成膜。
(3)取25mlpH为7.2的磷酸盐缓冲溶液加入到已形成干燥的脂质体薄膜的茄形瓶中,在氮气保护下,使用磁力搅拌4h,使用高速分散均质机分散30min-45min。
(4)通过离心(1000rpm离心10min)、KSCN比色法测定磁性粒子的包封率为91%。
本实施例中得到的磁性脂质体的TEM图片如图3所述,从图中可以看出此条件下制备的磁性脂质体大小分布均匀,并且几乎都呈球形,具有良好的形貌特征。
实施例2
(1)分别将取100mg蛋黄卵磷脂和25mg胆固醇充分溶解于20ml氯仿与甲醇的体积比为2:1的溶剂中。
(2)取油酸修饰的磁性粒子溶解到20ml的氯仿中,得到浓度为3.0mg/ml的磁流体溶液。接着将磁流体溶液和(1)中的卵磷脂-胆固醇溶液在茄形瓶中以1:50的摩尔比进行混合,在温度为45℃时旋转蒸发成膜。
(3)取25mlpH为7.2的磷酸盐缓冲溶液加入到已形成干燥的脂质体薄膜的茄形瓶中,在氮气保护下,使用磁力搅拌4h,使用高速分散均质机分散30-45min。
(4)通过离心(1000rpm离心10min)、KSCN比色法测定磁性粒子的包封率为69%。
本实施例中磁性脂质体的弛豫率测量图(a)和磁性吸引效果图(b),如图4所示,从图4a中可以得到制备的磁性脂质体具有一个较高的弛豫率,能够满足作为MRI造影剂所需要的特质。另外在4b中也可以看出当磁性粒子被包覆在脂质体的双分子层后,它的磁敏感性几乎不受影响,所制备的磁性脂质体仍然具有良好的磁响应性。
实施例3
(1)分别将取100mg蛋黄卵磷脂和25mg胆固醇充分溶解于20ml氯仿与甲醇的体积比为2:1的溶剂中。
(2)取10mg的油酸修饰的磁性粒子溶解到20ml氯仿中,得到浓度为0.5mg/ml的磁流体溶液。接着将磁流体溶液和(1)中的卵磷脂-胆固醇溶液在茄形瓶中以1:50的摩尔比进行混合,在温度为45℃时旋转蒸发成膜。
(3)取25mlpH为7.2的磷酸盐缓冲溶液加入到已形成干燥的脂质体薄膜的茄形瓶中,在氮气保护下,使用磁力搅拌4h,使用高速分散均质机分散30min,1000rpm离心10min。
(4)用激光粒度仪测得其平均粒径为638.6nm。
本实施例中的磁性脂质体的体外肿瘤MRI成像效果图(a)和信号强度图(b)如图5所示。通过图5肿瘤细胞的体外MRI成像可以看出所制备的磁性脂质体与对照组相比,很大程度的减弱了MRI图像的信号,增强了肿瘤区域和正常组织之间的对比度,从而有利于分辨出肿瘤病变区域。这一结果也证明了所制备的磁性脂质体能够作为一种良好的MRI对比剂。
实施例4
(1)分别将取100mg蛋黄卵磷脂和25mg胆固醇充分溶解于20ml氯仿与甲醇的体积比为2:1的溶剂中。
(2)取4mg的油酸修饰的磁性粒子溶解到氯仿中,得到浓度为0.5mg/ml的磁流体溶液。接着将磁流体溶液和(1)中的卵磷脂-胆固醇溶液在茄形瓶中以1:50的摩尔比进行混合,在温度为45℃时旋转蒸发成膜。
(3)取25mlpH为7.2的磷酸盐缓冲溶液加入到已形成干燥的脂质体薄膜的茄形瓶中,在氮气保护下,使用磁力搅拌4h,使用高速分散均质机分散45min,1000rpm离心10min。
(4)用激光粒度仪测得其平均粒径为110.9nm。
Claims (9)
1.一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体,其特征在于,所述脂质体的双分子层中含有疏水性磁性粒子。
2.根据权利要求1所述的一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体,其特征在于,所述疏水性纳米磁性粒子为油水界面法制备;所述疏水性纳米磁性粒子为Fe3O4。
3.根据权利要求1所述的一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体,其特征在于,所述脂质体的水相负载水溶性药物。
4.一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体的制备方法,包括:
(1)将卵磷脂和稳定剂按质量比为2~6:1溶解于氯仿-甲醇溶液中,超声,得到卵磷脂-胆固醇溶液;
(2)将磁性粒子溶解到氯仿中,得到磁流体溶液,然后与步骤(1)中卵磷脂-胆固醇溶液以摩尔比为1:100-1:25混合,30~50℃旋转蒸发,得到透明薄膜;
(3)将步骤(2)中的透明薄膜在氮气保护下,旋转蒸发0.5~2.0h,真空中放置12~24h,得到脂质体薄膜;
(4)将磷酸盐缓冲液加入到步骤(3)中的脂质体薄膜中,氮气保护下,搅拌,分散,离心,得到负载疏水性磁性粒子的纳米脂质体;其中,磷酸缓冲液的pH为7.0~7.4。
5.根据权利要求4所述的一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中所使用的稳定剂为胆固醇。
6.根据权利要求4所述的一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比为2:1。
7.根据权利要求4所述的一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中卵磷脂为大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。
8.根据权利要求4所述的一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中磁流体溶液的浓度为0.5mg/ml。
9.根据权利要求4所述的一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体的制备方法,其特征在于,所述步骤(4)中搅拌的时间为2.0~6.0h;分散为高速分散均质机分散30-45min;离心速率1000rpm离心10min。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510688577.0A CN105214104A (zh) | 2015-10-21 | 2015-10-21 | 一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201510688577.0A CN105214104A (zh) | 2015-10-21 | 2015-10-21 | 一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体及其制备方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN105214104A true CN105214104A (zh) | 2016-01-06 |
Family
ID=54983609
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201510688577.0A Pending CN105214104A (zh) | 2015-10-21 | 2015-10-21 | 一种负载疏水性纳米磁性粒子脂质体及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN105214104A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106074343A (zh) * | 2016-07-12 | 2016-11-09 | 安徽启威生物科技有限公司 | 一种百里酚纳米粒子免洗洗手液及其制备方法 |
CN109592718A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-04-09 | 佛山科学技术学院 | 一种基于还原沉淀法的纳米Fe3O4磁珠合成制备方法 |
-
2015
- 2015-10-21 CN CN201510688577.0A patent/CN105214104A/zh active Pending
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
ALICE FLORIS等: ""Characterization and cytotoxicity studies on liposome–hydrophobic magnetite hybrid colloids"", 《JOURNAL OF COLLOID AND INTERFACE SCIENCE》 * |
ANDY WIJAYA等: ""High-Density Encapsulation of Fe3O4 Nanoparticles in Lipid Vesicles"", 《LANGMUIR》 * |
陈卫卫,李海涛等: "《药剂学》", 31 January 2014, 西安:西安交通大学出版社 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106074343A (zh) * | 2016-07-12 | 2016-11-09 | 安徽启威生物科技有限公司 | 一种百里酚纳米粒子免洗洗手液及其制备方法 |
CN106074343B (zh) * | 2016-07-12 | 2019-06-04 | 安徽启威生物科技有限公司 | 一种百里酚纳米粒子免洗洗手液及其制备方法 |
CN109592718A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-04-09 | 佛山科学技术学院 | 一种基于还原沉淀法的纳米Fe3O4磁珠合成制备方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Dadfar et al. | Iron oxide nanoparticles: Diagnostic, therapeutic and theranostic applications | |
Mao et al. | Functional nanoparticles for magnetic resonance imaging | |
Chen et al. | Manganese oxide-based multifunctionalized mesoporous silica nanoparticles for pH-responsive MRI, ultrasonography and circumvention of MDR in cancer cells | |
Li et al. | Mesoporous manganese silicate coated silica nanoparticles as multi-stimuli-responsive T1-MRI contrast agents and drug delivery carriers | |
Xue et al. | Iodinated oil-loaded, fluorescent mesoporous silica-coated iron oxide nanoparticles for magnetic resonance imaging/computed tomography/fluorescence trimodal imaging | |
Estelrich et al. | Nanoparticles in magnetic resonance imaging: from simple to dual contrast agents | |
Barick et al. | Novel and efficient MR active aqueous colloidal Fe 3 O 4 nanoassemblies | |
Fan et al. | SPIO-conjugated, doxorubicin-loaded microbubbles for concurrent MRI and focused-ultrasound enhanced brain-tumor drug delivery | |
DE69920425T2 (de) | Verwendung von teilchenförmigen kontrastmitteln in der diagnostischen bilderzeugung zur untersuchung physiologischer parameter | |
DK171526B1 (da) | Anvendelse af ferromagnetiske partikler til fremstilling af et partikkelformigt diagnostisk kontrastmiddel til NMR-billeddannelse | |
Marasini et al. | Integration of gadolinium in nanostructure for contrast enhanced‐magnetic resonance imaging | |
Kinsella et al. | Enhanced magnetic resonance contrast of Fe3O4 nanoparticles trapped in a porous silicon nanoparticle host | |
Hsu et al. | Relaxivity and toxicological properties of manganese oxide nanoparticles for MRI applications | |
Bu et al. | Assessment and comparison of magnetic nanoparticles as MRI contrast agents in a rodent model of human hepatocellular carcinoma | |
Yang et al. | Biodegradable yolk-shell microspheres for ultrasound/MR dual-modality imaging and controlled drug delivery | |
Antonelli et al. | Red blood cells as carriers of iron oxide-based contrast agents for diagnostic applications | |
Carenza et al. | Encapsulation of VEGF 165 into magnetic PLGA nanocapsules for potential local delivery and bioactivity in human brain endothelial cells | |
CN105582554A (zh) | 核壳结构纳米材料、其制备方法及应用 | |
Wei et al. | Biocompatible low-retention superparamagnetic iron oxide nanoclusters as contrast agents for magnetic resonance imaging of liver tumor | |
US20150165070A1 (en) | Magnetic nanoparticles dispersion, its preparation and diagnostic and therapeutic use | |
US20100158817A1 (en) | T1 mri trackable drug delivery particles, uses and methods thereof | |
US20100061938A1 (en) | Mri trackable drug delivery particles, uses and methods thereof | |
Chen et al. | Modified core–shell magnetic mesoporous zirconia nanoparticles formed through a facile “outside-to-inside” way for CT/MRI dual-modal imaging and magnetic targeting cancer chemotherapy | |
Yin et al. | Magnetic PEGylated Pt 3 Co nanoparticles as a novel MR contrast agent: in vivo MR imaging and long-term toxicity study | |
Khalilnejad et al. | Application of Manganese Oxide (MnO) nanoparticles in multimodal molecular imaging and cancer therapy: a review |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20160106 |
|
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |