CN105194157A - 复方千年健的中药组合物、制备方法、制剂及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种复方千年健的中药组合物、制备方法、制剂及其应用，复方千年健的中药组合物的原料包括：千年健1-40重量份、肿节风1-50重量份和牛大力20-70重量份。本发明提供新的祛风湿止痛强筋骨的复方中药口服制剂，按传统中医药理论指导，结合现代科学研究先进成果和技术方法制成片剂等多种剂型等。本发明精选该3味特色中药民族药配伍组方，提炼精华，祛风湿痛疗效明显，毒副作用较小，且同时产生显著的镇痛抗炎、提高免疫力和增强骨质等药理作用，使本发明具有祛风湿、活血止痛、强筋骨等功效，兼润肺、保肝、补肾，是一种治疗风湿痛且标本兼治的良药。

Description

复方千年健的中药组合物、制备方法、制剂及其应用

技术领域

本发明涉及中药领域。更具体地说，本发明涉及一种复方千年健的中药组合物、制备方法及其制剂。

背景技术

千年健为天南星科植物千年健Homalomenaocculta(Lout.)Schott的干燥根茎，《本草 纲目拾遗》、《中药材手册》等有收载，别名一包针、千年见、千颗针，性味苦、辛、性温、小毒，归肝、肾经。千年健主要化学成分：(1)挥发油成分：α-蒎烯、β-蒎烯、橙花醇、香叶醇、芳樟醇、广藿香醇、β-松油醇等，其中含量最高为芳樟醇；(2)倍半萜类化合物：homalomenolA，homalomenolB等；(3)从广西产千年健植物中分离出一对顺反异构的吲哚类生物碱混合物(Z/E)-N-(p-coumaroyl)-serotonine和两个季铵盐1-Olinoleyl-2-O-palmitoylphophatidyLcho-lin和1-O-palmitoyl-2-O-linoleylphosphatidylcholine。有祛风湿、强筋骨、消肿、止痛等功效，临床治疗风湿疼痛、类风湿、痛风、关节炎、腰膝冷痛、下肢拘挛麻木，手脚麻痹及各种由人体气血不畅、经脉不通引起的疼痛、麻木等症。

肿节风为金粟兰科植物草珊瑚Sarcandraglabra(Thunb.)Nakai的干燥枝叶，别名观音茶、接骨木、九节茶、骨风消、接骨茶等，《广西壮药质量标准》、《中国药典》等有收载，性味辛、平，归肺、肾经。主要化学成分：黄酮类、萜类、香豆素类、酚酸类、有机酸和微量金属元素等物质。如：异嗪皮啶、槲皮素、琥珀酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、对羟基苯甲酸、芦丁、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸、异嗪皮啶-7-O-α-D-吡喃葡萄糖苷、邻苯二甲酸、3，4-二羟基苯甲酸，还含0.15％-0.20％挥发油。有清热解毒凉血，活血消斑散瘀，祛风除湿通络功效，用于血热紫斑、紫癜、风湿痹痛、跌打损伤、肢体麻木、骨折、肺炎、急性胃肠炎、脓肿、风湿痹痛。肿节风还用于治疗消化道癌、胰腺癌、肝癌等。

牛大力为豆科(Leguminosae)崖豆藤属(Millettia)植物美丽崖豆藤(MillettiaspeciosaChamp)的根，《广西壮药质量标准》、《中国民族药志》等有收载，别名猪脚笠、山莲藕、金钟根、倒吊金钟、大力薯等，性味甘，平，归肺、肾经。化学成分包括:牛大力多糖、8个酚甙、13个黄酮类化合物、4个紫檀烷类化合物以及圆齿火棘酸、(–)-丁香脂素、2，5-二羟基苯甲酸及钙、锰、镁、铜、铁等矿质元素等。有舒筋活络、润肺滋肾、清热止咳等功效。牛大力黄酮类成分和多糖具有祛痰、镇咳、平喘、抗炎、保肝、增强免疫力、抗肿瘤和抗疲劳等药理作用，临床用于多种慢性疾病、腰痛、肾虚带下、风湿性关节炎、腰肌劳损、慢性肝炎、病后体虚等。

民间有千年健九节茶代茶饮用，《中医良药良方》也有收载，千年健九节茶茶饮可祛风除湿，活血止痛，主治跌打损伤所致的慢性腰痛，如慢性腰肌劳损，老年人肢节酸疼，筋骨无力，手足发麻。牛大力在两广地区被广泛用作煲汤原料，制作药膳、药酒等，提高免疫力、补腰肾、强筋骨功效显著。我国尚缺乏该类复方千年健中药制剂研究和应用，在众多中草药中复配出合适的中草药，既要保证复方中药的结合能增强药效，同时降低毒副作用。

风湿痛、关节炎、肩周炎、手脚麻痹等为常见多发病，发病人群多为中老年人，病程缠绵、反复发作、难以治愈。目前，这些疾病治疗药物有西药和中药，而西药抗生素类产生耐药性和毒副作用，如：伤肝伤肾伤骨等；有的西药包含激素药物、壮阳药等，长期服用，有很大的毒副作用，如：免疫低下、内分泌失调、代谢紊乱等。治疗上述疾病的中药也较多，但都存在效果不好，或剂量过大，或毒副作用较大的缺陷，如：心、肝、肾、神经系统损害，给患者带来较大负担。人参、鹿茸、虎骨、淫羊藿、巴戟天等中药不易长期使用，也不适用社会广大工薪或普通人群。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是提供一种复方千年健的中药组合物、制备方法及其制剂。该中药组合物由千年健、肿节风、牛大力等3种中药制成，口服后产生显著的镇痛抗炎、提高免疫力、增强骨质等药理作用，使本发明具有祛风湿、活血止痛和强筋骨等功效，兼润肺、保肝、补肾，是一种治疗风湿痛且标本兼治的良药，疗效明显，毒副作用很小。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种复方千年健的中药组合物，所述复方千年健的中药组合物的原料包括：千年健1-40重量份、肿节风1-50重量份和牛大力20-70重量份。

优选的是，由如下重量份数的原料制成：千年健10-20重量份、肿节风15-30重量份和牛大力30-60重量份。

本发明还提供了一种复方千年健的中药组合物的制备方法，原料包括：千年健1-40重量份、肿节风1-50重量份和牛大力20-70重量份；

a.将千年健、肿节风和牛大力混合经体积分数为70％-95％的乙醇回流提取，得第一药渣和第一滤液，将所述第一滤液减压浓缩得第一稠膏；所述第一稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30；

b.将所述第一药渣经体积分数为40％-60％的乙醇回流提取，得第二药渣和第二滤液，将所述第二滤液减压浓缩得第二稠膏；所述第二稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30；

c.将所述第二药渣经水回流提取，得第三滤液，将所述第三滤液减压浓缩得第三稠膏；所述第三稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30；

d.将所述第一稠膏、所述第二稠膏和所述第三稠膏混合，即得所述复方千年健的中药组合物。

优选的是，所述a、b、c中，回流提取具体为回流提取1-2次，每次1-2h。

优选的是，所述a中，体积分数为70％-95％的乙醇与所述原料的质量比为10-20：1。

优选的是，所述b中，体积分数为40％-60％的乙醇与所述第一药渣的质量比为10-20：1。

优选的是，所述a、b中，回流提取的温度为70-80℃。

本发明还提供了一种复方千年健的中药制剂，由上述中药组合物及药学上可接受的辅料制成。

优选的是，其为胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液、丸剂或缓释长效剂。

本发明还提供了一种上述复方千年健的中药组合物的用途，其用途在于，所述复方千年健的中药组合物用于镇痛、消炎、提高免疫力和增强骨质的药物中的应用。

功效：祛风湿、活血止痛、强筋骨等。

临床应用：可用于治疗风湿疼痛，关节炎，手脚拘挛，筋骨屈伸不利；筋骨无力，手足麻木；骨质疏松；跌打损伤等。

使用方法：口服：片剂：一次1～2片，每日1～2次；胶囊剂：一次1～2粒，每日1～2次；口服液：一次30～60ml，每日1～2次。或遵医嘱。

注意事项：阴虚火旺及孕妇慎服。

有效期：2年。

本发明至少包括以下有益效果：本发明提供新的祛风湿痛的复方中药口服制剂，按传统中医药理论指导，精选千年健、肿节风、牛大力3味中药民族药特色药材配伍，结合现代科学研究先进成果和技术方法制成片剂等多种剂型等，适应广大患者用药需求。本发明将3味特色中药民族药提炼精华和优势结合，祛风湿痛疗效明显，毒副作用小，且同时产生显著的镇痛抗炎、提高免疫力和增强骨质等药理作用，使本发明具有祛风湿、活血止痛、强筋骨等功效，兼润肺、保肝、补肾，成为一种治疗风湿痛且标本兼治的良药。临床用于风湿疼痛，手脚拘挛，筋骨屈伸不利；筋骨无力，手足麻木；骨质疏松；跌打损伤等。同时还可能发挥抗股骨头坏死、抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化等作用，有治疗股骨头坏死；肺部、呼吸道、肠道、创外伤口等感染及炎症；多种恶性肿瘤及化疗辅助等诸多潜在应用价值。本发明的经济效益和社会效益前景可观。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

附图说明

图1为异嗪皮啶对照品溶液的高效液相色谱图；

图2为供试品溶液(来自本实施例1复方千年健片)的高效液相色谱图。

具体实施方式

本发明公开了一种复方千年健的中药组合物、制备方法及其制剂，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合来实现和应用本发明技术。

本发明提供了一种复方千年健的中药组合物，其原料包括：千年健1-40重量份、肿节风1-50重量份和牛大力20-70重量份。

其中，本发明对所有原料的来源没有特殊限制，为市售即可。

所述千年健的含量优选为10-20重量份、肿节风的含量优选为15-30重量份、牛大力的含量优选为30-60重量份。

在本发明提供的一些实施例中，所述复方千年健的中药组合物由如下重量份数的原料制成：千年健10重量份、肿节风15重量份、牛大力30重量份。

在本发明提供的一些实施例中，所述复方千年健的中药组合物由如下重量份数的原料制成：千年健20重量份、肿节风30重量份、牛大力60重量份。

在本发明提供的一些实施例中，所述复方千年健的中药组合物由如下重量份数的原料制成：千年健12重量份、肿节风22重量份、牛大力37重量份。

在本发明提供的一些实施例中，所述复方千年健的中药组合物由如下重量份数的原料制成：千年健15重量份、肿节风28重量份、牛大力44重量份。

在本发明提供的一些实施例中，所述复方千年健的中药组合物由如下重量份数的原料制成：千年健17重量份、肿节风17重量份、牛大力55重量份。

本发明精选千年健、肿节风、牛大力3味药材，按照传统中医药理论君臣佐使进行组方，千年健为治疗风湿痛的君药，肿节风为臣药、牛大力为一药任多职，承担佐使药，千年健善活血止痛、肿节风善解毒止痛、牛大力善补体虚劳损止痛，三者协力加强治疗风湿痛效果，降低毒副作用，且同时产生显著的镇痛抗炎、提高免疫力和增强骨质等药理作用，使本发明具有祛风湿、活血止痛、强筋骨等功效，兼润肺、保肝、补肾，成为一种治疗风湿痹痛且标本兼治的良药。

本发明还提供了一种复方千年健的中药组合物的制备方法，原料包括：千年健1-40重量份、肿节风1-50重量份和牛大力20-70重量份；

a.将千年健、肿节风和牛大力混合经体积分数为70％-95％的乙醇回流提取，回流提取的温度为70-80℃，得第一药渣和第一滤液，将所述第一滤液减压浓缩得第一稠膏；所述第一稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30。回流提取具体为回流提取1-2次，每次1-2h。体积分数为70％-95％的乙醇与所述原料的质量比为10-20：1

b.将所述第一药渣经体积分数为40％-60％的乙醇回流提取，回流提取的温度为70-80℃，得第二药渣和第二滤液，将所述第二滤液减压浓缩得第二稠膏；所述第二稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30。回流提取具体为回流提取1-2次，每次1-2h。体积分数为40％-60％的乙醇与所述第一药渣的质量比为10-20：1。

c.将所述第二药渣经水回流提取，得第三滤液，将所述第三滤液减压浓缩得第三稠膏；所述第三稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30。回流提取具体为回流提取1-2次，每次1-2h。

d.将所述第一稠膏、所述第二稠膏和所述第三稠膏混合，即得所述复方千年健的中药组合物。

本发明还提供了一种复方千年健的中药制剂，由中药组合物及药学上可接受的辅料制成。所述辅料优选为：稀释剂为聚维酮、十八醇、十六醇、硬脂酸、枸橼酸、微晶纤维素、淀粉、乳糖、甘露醇和碳酸氢钠等中的一种或几种；崩解剂为羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基甲基纤维素(L-HPC)、交联聚乙烯吡咯烷酮等中的一种或几种；润滑剂为硬脂酸镁、滑石粉或微粉硅胶；包薄膜衣材料为羟丙基甲基纤维素、丙烯酸树脂系列、羧甲基纤维素和乙基纤维素等中的一种或几种；包薄膜衣材料为羟丙基甲基纤维素、丙烯酸树脂系列、羧甲基纤维素和乙基纤维素中的一种或几种；缓释制剂为干膏粉、骨架材料、崩解剂、稀释剂、润滑剂中的一种或几种。所述复方千年健的中药制剂可制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液、丸剂或缓释长效剂。

本发明还提供了一种上述复方千年健的中药组合物用于镇痛消炎和提高免疫力的药物中的应用。

本发明将千年健、牛大力和肿节风配伍，产生显著的镇痛、消炎、提高机体免疫力、增强骨质等药理作用，使本发明具有祛风湿、活血止痛、强筋骨等明显功效，兼润肺、保肝、补肾，主治风湿疼痛，关节炎，手脚拘挛，筋骨屈伸不利；筋骨无力，手足麻木；骨质疏松；跌打损伤等。还有一定的抗恶性肿瘤功效。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1

a.千年健10重量份、肿节风15重量份、牛大力30重量份混合，粉碎成粗粉，加入粗粉重量10倍的95％乙醇，70℃加热回流2次，每次1小时，得第一药渣和第一滤液，将所述第一滤液减压浓缩得第一稠膏；所述第一稠膏在55℃下相对密度为1.20。

b.将所述第一药渣经体积分数为40％的乙醇回流提取，得第二药渣和第二滤液，将所述第二滤液减压浓缩得第二稠膏；所述第二稠膏在55℃下相对密度为1.20。

c.将所述第二药渣经水回流提取，得第三滤液，将所述第三滤液减压浓缩得第三稠膏；所述第三稠膏在55℃下相对密度为1.20。

d.将所述第一稠膏、所述第二稠膏、所述第三稠膏和适量淀粉混匀，淀粉用量是第一稠膏、第二稠膏、第三稠膏的质量总和，以95％乙醇或淀粉浆为粘合剂，制成软材，用14目制粒，12目整粒，制成颗粒，低温50～60℃干燥，控制颗粒含水分不过2％。再加入羧甲基淀粉钠(一般用量为颗粒重量的0.5～5％)，适量硬脂酸镁(一般用量为颗粒重量的0.1～1％)，混匀。计算正确片重(一般0.1～0.4g)，调整压片机上下冲压力，控制片硬度和片重差异范围，压制成片，包薄膜衣，经质量检验合格即得复方千年健片(无糖型)。

实施例2

千年健20重量份、肿节风30重量份、牛大力60重量份，先粗粉，经体积分数为70％-95％的乙醇回流提取，回流提取的温度为80℃，得第一药渣和第一滤液，将所述第一滤液减压浓缩得第一稠膏；所述第一稠膏在60℃下相对密度为1.30。回流提取具体为回流提取2次，每次2h。体积分数为95％的乙醇与所述原料的质量比为20：1

b.将所述第一药渣经体积分数为60％的乙醇回流提取，回流提取的温度为70-80℃，得第二药渣和第二滤液，将所述第二滤液减压浓缩得第二稠膏；所述第二稠膏在55-60℃下相对密度为1.30。回流提取具体为回流提取2次，每次2h。体积分数为60％的乙醇与所述第一药渣的质量比为20：1。

c.将所述第二药渣经水回流提取，得第三滤液，将所述第三滤液减压浓缩得第三稠膏；所述第三稠膏在60℃下相对密度为1.30。回流提取具体为回流提取2次，每次2h。

d.将所述第一稠膏、所述第二稠膏和所述第三稠膏混合，干燥，得干膏粉，再加入适量的稀释剂(用量为0.2～3％)、崩解剂(用量为0.5～5％)、润滑剂(用量为0.1～1％)等药用辅料，混和均匀，干法制粒，压片，包糖衣或薄膜衣，经质量检验合格，即得复方千年健片。

上述稀释剂为聚维酮、十八醇、十六醇、硬脂酸、枸橼酸、微晶纤维素、淀粉、乳糖、甘露醇或碳酸氢钠中的一种或几种。崩解剂为羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基甲基纤维素(L-HPC)、交联聚乙烯吡咯烷酮中的一种或几种。润滑剂为硬脂酸镁、滑石粉或微粉硅胶等。包薄膜衣材料为羟丙基甲基纤维素、丙烯酸树脂系列、羧甲基纤维素和乙基纤维素等中的一种或几种。

在实施例1和实施例2中，复方千年健片的片芯呈黄棕色至褐棕色，气香味微苦。用法和用量每日1～3次，每次1～2片。注意事项阴虚火旺及孕妇慎用，有效期2年，保存条件：密封阴凉干燥处。

实施例3

千年健12重量份、肿节风22重量份、牛大力37重量份粗粉，经体积分数为80％的乙醇回流提取，回流提取的温度为77℃，得第一药渣和第一滤液，将所述第一滤液减压浓缩得第一稠膏；所述第一稠膏在57℃下相对密度为1.22。回流提取具体为回流提取2次，每次1h。体积分数为80％的乙醇与所述原料的质量比为15：1。

b.将所述第一药渣经体积分数为50％的乙醇回流提取，回流提取的温度为75℃，得第二药渣和第二滤液，将所述第二滤液减压浓缩得第二稠膏；所述第二稠膏在58℃下相对密度为1.22。回流提取具体为回流提取2次，每次1h。体积分数为50％的乙醇与所述第一药渣的质量比为14：1。

c.将所述第二药渣经水回流提取，得第三滤液，将所述第三滤液减压浓缩得第三稠膏；所述第三稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30。回流提取具体为回流提取1-2次，每次1-2h。

d.将所述第一稠膏、所述第二稠膏和所述第三稠膏混合，得干膏粉，将干膏粉与环糊精按质量比1：1的比例进行包合：先制成环糊精水饱和溶液，再把剩余干膏粉加入，充分研磨至成糊状物，低温干燥，即得环糊精包合物。采用羟丙基甲基纤维素以及丙烯酸树脂作为骨架材料，加入聚乙烯吡咯烷酮作粘合剂，与环糊精包合物混匀后制成软材。将软材低温干燥，粉碎得细粉，再取细粉加入乳糖作为稀释剂，以95％乙醇为润湿剂制粒，低温干燥，整粒，最后加入硬脂酸镁作为润滑剂，调整片重和压力，压片，经质量检验合格，即得复方千年健缓释长效片。其作用时间延长至普通片剂的3～5倍。

上述骨架材料为羟丙基甲基纤维素、丙烯酸树脂系列、羧甲基纤维素和乙基纤维素等中的一种或几种。缓释制剂的组分及重量百分比含量为：

干膏粉10～50％，

骨架材料10～60％，

稀释剂15～70％，

润滑剂0.1～1％，

各组分的重量百分比含量总和为100％。

实施例4

千年健15重量份、肿节风28重量份、牛大力44重量份混合，粗粉，经体积分数为95％的乙醇回流提取，回流提取的温度为72℃，得第一药渣和第一滤液，将所述第一滤液减压浓缩得第一稠膏；所述第一稠膏在59℃下相对密度为1.28。回流提取具体为回流提取2次，每次1h。体积分数为88％的乙醇与所述原料的质量比为12：1

b.将所述第一药渣经体积分数为55％的乙醇回流提取，回流提取的温度为72℃，得第二药渣和第二滤液，将所述第二滤液减压浓缩得第二稠膏；所述第二稠膏在55-60℃下相对密度为1.25。回流提取具体为回流提取2次，每次1h。体积分数为55％的乙醇与所述第一药渣的质量比为12：1。

c.将所述第二药渣经水回流提取，得第三滤液，将所述第三滤液减压浓缩得第三稠膏；所述第三稠膏在58℃下相对密度为1.25。回流提取具体为回流提取2次，每次1h。

d.将所述第一稠膏、所述第二稠膏和所述第三稠膏混合，干燥得干膏粉，再加入适量淀粉等稀释剂，选用1～2号硬质空心明胶胶囊，通过胶囊填充机填充，控制装量在(0.1～0.4g)的范围，经质量检验合格，即得复方千年健胶囊。

实施例5

千年健12重量份、肿节风22重量份、牛大力37重量份粗粉，经体积分数为80％的乙醇回流提取，回流提取的温度为77℃，得第一药渣和第一滤液，将所述第一滤液减压浓缩得第一稠膏；所述第一稠膏在57℃下相对密度为1.22。回流提取具体为回流提取2次，每次1h。体积分数为80％的乙醇与所述原料的质量比为15：1。

b.将所述第一药渣经体积分数为50％的乙醇回流提取，回流提取的温度为75℃，得第二药渣和第二滤液，将所述第二滤液减压浓缩得第二稠膏；所述第二稠膏在58℃下相对密度为1.22。回流提取具体为回流提取2次，每次1h。体积分数为50％的乙醇与所述第一药渣的质量比为14：1。

c.将所述第二药渣经水回流提取，得第三滤液，将所述第三滤液减压浓缩得第三稠膏；所述第三稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30。回流提取具体为回流提取1-2次，每次1-2h。

d.将所述第一稠膏、所述第二稠膏和所述第三稠膏混合，备用。另取药用矫味剂、防腐剂、助悬剂或增溶剂等，加入上述备用膏中，混匀，加水调整总量至3000ml，摇匀，灌装，经检验合格即得复方千年健口服液。其中，矫味剂为蛋白糖(用量1～4g/1000ml，加水溶解)，防腐剂为苯甲酸钠(用量1～2g/1000ml)、尼泊金乙酯等，助悬剂为甘油、糖浆、山梨醇、阿拉伯胶(用量5～15％)、西黄蓍胶(用量5～15％)、桃胶(用量0.5～1％)、海藻酸钠、琼脂、淀粉浆、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基纤维素、卡波普、聚维酮、葡聚糖、硅皂土、硅藻土胶体、硅酸镁铝胶体、二氧化硅膨润土、单硬脂酸铝、触变胶等中的一种或几种。增溶剂采用吐温系列、丙二醇、MePEG(聚乙二醇单甲氧基醚)：PDLLA(聚D，L-丙交酯)(60：40)、环糊精包合体、胆酸、核酸、不同O/W型微乳、脂质体、固体分散体、等中的一种或几种。增溶方法采用纳米技术、表面活性剂技术、微粒或微晶技术、靶向技术(还可提高生物利用度、选择性在体内器官富集等)。

实施例6

上述实施例1-5中的第一稠膏、所述第二稠膏和所述第三稠膏也可通过下述方式获得，取上述实施例中千年健、肿节风和牛大力的配比，加10～20倍水，超声提取或加热提取1～3次，提取液趁热过滤，滤液经过盐析法或酸碱法或超滤法技术或吸附材料处理，再用水和梯度乙醇溶液依次洗脱，收集所需处理液或洗脱液，干燥得干膏粉，这里的干膏粉即为第一稠膏、所述第二稠膏和所述第三稠膏混合干燥后的物质。吸附材料为大孔树脂系列、聚酰胺树脂、葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶等中的1～2种。

药效学实验研究

复方千年健片镇痛抗炎药效学试验

1.仪器和材料

1.1仪器

超纯水制造系统：成都越纯科技有限公司；机械秒表：上海星钻秒表有限公司；JM系列电子计数天平：浙江省余姚纪铭称重校验设备有限公司；ME215S电子分析天平：北京赛多丽斯仪器系统有限公司；小鼠固定器：济南益延科技发展有限公司等。

1.2材料

复方千年健片：本实施例1的片状制剂；阿司匹林片：批号130301，湖南新汇制药有限公司；冰乙酸：AR，成都市科龙化工试剂厂；二甲苯：西陇化工股份有限公司。

1.3动物

SPF级昆明种小鼠，18～22g，雌雄各半，由广西医科大学实验动物中心提供，动物生产许可证号：桂SCXK2009-0002，动物使用许可证号：桂SCXK2009-0004。

2.方法

2.1统计学处理方法

采用SPSS1115统计软件进行分析。用单因素方差分析进行统计学显著性分析。组间差异显著性采用单因素方差分析中的LSD方法进行多重比较检验。

2.2对乙酸致小鼠扭体的抑制作用实验

小鼠50只，雌性雄性各半，体重18～22g，随机分成5组(空白组、阳性组、高剂量组、中剂量组、低剂量组)，每组10只。每天灌胃1次，连续5d。最后一次给药1h后，腹腔注射0.7％乙酸，观察给药后20min内各小鼠扭体(腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行)次数，并计算抑制率。阳性组给小鼠灌胃阿司匹林片。

抑制率(％)＝(空白组平均扭体次数-给药组平均扭体次数)/空白组平均扭体次数×100。

阳性组、低剂量组、中剂量组、高剂量组均有抑制作用，和空白组比较差异显著(P<0.01或P<0.05)；低剂量组、高剂量组和阳性组相比，差异有统计学意义(P<0.01)。复方千年健片减少小鼠扭体反应次数，强度与剂量呈量效相关性，见表1。

表1复方千年健片对乙酸诱发小鼠扭体反应的影响(n＝10)

注：与空白组比较，**P<0.01，*P<0.05；与阳性组比较，^##P<0.01，^#P>0.05。

由表1可知，复方千年健片对乙酸诱发小鼠扭体反应具有抑制作用，可减少小鼠疼痛，随着复方千年健片的加入量的增加，小鼠扭体的抑制率逐渐提高。

2.3对二甲苯致小鼠耳肿胀的抑制作用实验

小鼠50只，雌性各半，体重18～22g，随机分成5组(空白组、阳性组、高剂量组、中剂量组、低剂量组)，每组10只。每天灌胃1次，连续7d。末次给药45min后将100％二甲苯0.02mL滴于右耳，左耳对照。15min后将小鼠颈椎脱臼处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径9mm打孔器分别在左、右耳同一部位打下圆耳片，用电子天平称重，以左右耳片重之差为肿胀度，计算各组肿胀度，求出肿胀抑制率(％)。阳性组给小鼠灌胃阿司匹林片。

肿胀抑制率(％)＝(空白组耳重-给药组耳重)/空白组耳重×100。

阳性组、低剂量组、中剂量组、高剂量组均能使小鼠耳廓肿胀度降低，和空白组相比，差异有统计学意义(P<0.01，P<0.05)。低剂量组、高剂量组和阳性组相比，差异有统计学意义(P<0.01)。复方千年健片抑制小鼠耳肿胀，作用随剂量增加而增强，见表2。

表2复方千年健片对二甲苯诱发小鼠炎症反应的影响(n＝10)

注：与空白组比较，**P<0.01，^*P<0.05；与阳性组比较，^##P<0.01，^#P>0.05。

由表2可知，复方千年健片有一定的镇痛抗炎药理作用。另外其组成千年健的水提取物、乙醇提取物、甲醇提取物均有明显的抗炎、镇痛作用，醇提液有抗组胺作用。复方千年健片中的肿节风中的有效物质具有抑制炎症因子IL-1等过度释放。

3复方千年健片提高免疫力的药效学试验

3.1仪器和材料

仪器：双光束紫外分光光度计：UV-2100，北京瑞利分析仪器公司；电子天平：AE200，梅托仪器上海公司；离心机等。

复方千年健片：本实施例1的片状制剂；醋酸泼尼松片：广东华南药业有限公司。

动物：SPF级昆明种小白鼠，雌雄兼用，体重18～22g，广西医科大学实验动物中心提供。动物生产许可证号：桂SCXK2009-0002，动物使用许可证号：桂SCXK2009-0004。3.2复方千年健片对免疫低下小鼠免疫器官质量的影响

方法：取小鼠50只，随机分为5组：空白组，模型组，高、中、低剂量组(20、10、5g/kg/d)，除空白组外，其它组小鼠上午灌胃40mg/kg/d醋酸泼尼松，空白组等容积水，下午高、中、低剂量组小鼠灌胃相应药物，空白组和模型组灌服等容积水，连续12d。末次灌胃给药1h后，处死小鼠，用滤纸吸干残血，称体质量，取脾脏和胸腺，用电子天平称质量，计算脾脏和胸腺指数(I)：I脾＝m_脾/m_体；I_胸腺＝m_胸腺/m_体。

3.2.1结果

与空白组比较，模型组小鼠脾脏指数、胸腺指数均显著降低(P<0.01)，表明醋酸泼尼松致免疫低下模型成功。低、中、高剂量组均提高免疫低下小鼠脾脏指数，与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01)。低、中、高剂量组均提高免疫低下小鼠胸腺指数，与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05)，见表3。

表3复方千年健片对免疫低下小鼠脾脏指数、胸腺指数的影响(X±s，n＝10)

注：与空白组比较，①P<0.01：与模型组比较，②P<0.05，③P<0.01。

3.3复方千年健片对免疫低下小鼠单核巨噬细胞吞噬功能的影响

3.3.1方法

取小鼠50只，随机分为5组：空白组，模型组，高、中、低剂量组(20、10、5g/kg/d)，末次给药1h后，鼠尾静脉注射北京碳素墨水汁(10ml/kg)后2min及12min，用毛细玻璃管从小鼠眼眶后静脉丛取血2～3滴，吸取20uL溶于3ml0.1％碳酸钠溶液中，摇匀，于分光光度计675nm处测吸光度(A)，计算廓清指数(I_K)。

(I_K)＝(logD₂-logD₁₂)/(t₁₂-t₂)(D₂、D₁₂分别为2min、12min时吸光度，t₁₂、t₂分别为时间12min、2min)。

3.3.2结果

表4复方千年健片对免疫低下小鼠廓清指数的影响(n＝10)

注：与空白组比较，①P<0.01；与模型组比较，②P<0.05。

由表4可知，低、中、高剂量组均显著提高模型组小鼠廓清指数(P<0.05)。I_k值越大，吞噬细胞识别毒物或异常细胞的能力越强。

3.4复方千年健片对鸡红细胞致小鼠血清抗体(溶血素)形成影响

3.4.1方法

取鼠60只，随机分为6组：空白组，模型组，醋酸泼尼松组(剂量为40mg/kg/d)，低、中、高剂量组(5、10、20g/kg/d)。除空白组外，各组鼠先腹腔注射鸡红细胞混悬液和生理盐水按(100：5)稀释液0.2mL免疫反应，每d灌胃1次，连续12d。末次给药后1h，摘取眼球取血，离心分离血清，取30uL血清用生理盐水稀释100倍，取稀释血清1mL，按溶血素测定法测定鸡红细胞抗体(溶血素)，在分光光度计波长540nm处测吸收度A值，以不加血清溶液上清液作为空白参比溶液。

3.4.2结果

小鼠经鸡红细胞免疫后，血清抗体(溶血素)增多，即模型组血清A值显著高于空白组(P<0.01)，与模型组比较，低、中、高剂量组均增加血清溶血素含量。见表5。

表5复方千年健片对鸡红细胞所致小鼠血清溶血素形成的影响

注：与空白组比较，^①P<0.01；与模型组比较，^②P<0.05，^③P<0.01。

3.5小结

机体免疫功能状态对很多疾病有重要影响。由上述实验可知复方千年健片在免疫低下时，增加了小鼠胸腺和脾脏指数；廓清指数也显著增加，单核吞噬细胞功能明显增强，增强机体非特异性免疫功能；增加血清溶血素含量，增强机体特异性免疫功能。复方千年健片具有良好的提高免疫力作用，且相较于单一中药的药效，复方千年健片的药效显著增强。

复方千年健片其它作用分析

1.复方千年健片可补充人体所需钙等多种矿质元素以及抗骨质疏松

对复方千年健片中原料牛大力进行火焰原子吸收光谱法测定其中5种矿质元素含量，结果见表6。

表6牛大力中6种矿质元素的含量

由表6可知，牛大力中含有丰富的人体所需的矿质元素，钙含量较高，这些矿质元素或微量元素是人体生命活动不可缺少。现代医学研究证明，钙是人体含量较高元素之一。99％的钙积存于骨骼、牙齿中，骨以外1％的钙在体内也有重要作用，体内许多酶系统均需要钙激活，钙还参与凝血过程，是促进肌肉收缩、维持神经肌肉应激性所必需。钙降低毛细血管和细胞膜通透性，防止渗出，控制炎症和水肿。这与复方千年健制剂具有消炎止痛消肿功效相一致，为其滋阴补肾、强身健骨功效提供科学依据。

对复方千年健片中原料千年健研究发现，千年健不仅增加MSCOPG蛋白及其mRNA表达，还抑制RANKL蛋白及其mRNA表达。MSCOPG、RANKL是重要的破骨细胞分化调节信号因子。OPG对破骨细胞的作用是多方面的，它抑制破骨细胞分化、融合、激活，促进破骨细胞凋亡。RANKL是直接刺激破骨细胞发育和使之激活的细胞因子，它与破骨细胞表面受体RANK结合，促进破骨细胞形成、分化、成熟，并抑制破骨细胞凋亡，延长其存活，从而达到治疗骨质疏松症目的。这也与复方千年健制剂具有祛风湿痛且强筋骨功效相一致，为其强骨健身提供科学依据。

2.复方千年健片具有抗骨头坏死作用的潜在价值

芒柄花素是复方千年健片组成中牛大力主要黄酮类成分。在芒柄花素对体外培养成骨细胞缺氧损伤的保护实验中，在芒柄花素干预下，成骨细胞ALP酶活性较完全缺氧时提高，形成钙化结节面积明显增多，保持较高成骨性分化能力，而成骨细胞成骨性分化能力是影响股骨头坏死修复重要因素。这提示复方千年健片可用于治疗股骨头坏死。这也与复方千年健制剂具有祛风湿痛且强筋骨功效相一致，为其强骨健身提供科学依据。

3复方千年健片抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗氧化作用

在复方千年健片组成之一肿节风对恶性肿瘤和免疫功能的影响实验中，肿节风对小鼠S180肉瘤有明显抑制作用，并明显延长HepA腹水瘤小鼠存活期，在体外还直接灭活HepA和S180瘤细胞，说明肿节风有明显抗恶性肿瘤作用。另通过对肿节风注射液体外抗肿瘤作用实验研究，显示肿节风注射液对人肺癌细胞A-549、结肠癌细胞HCT-29和胃癌细胞BGC-8233种人瘤细胞都有明显抑制作用。与阿霉素联合应用对HCT-8细胞可产生相加或增强的协同抑制效果，尤其高浓度肿节风注射液与阿霉素协同作用更显著。通过大剂量5-氟尿嘧啶腹腔注射复制血小板减少的动物模型，用肿节风连续干预，大剂量化疗后，两个实验组小鼠血小板没有出现大幅度下降现象，病理骨髓检查也证实小鼠骨髓增生明显活跃，巨核细胞数量增加。这提示复方千年健片可用于治疗多种恶性肿瘤，也可用于肿瘤化疗辅助治疗，提高化疗效果，保护骨髓系统，减少不良反应和毒副作用。

肿节风在抑制金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌等实验中表现较好抗菌效果，对牙跟叶琳单胞菌和转糖链球菌也具有抑制作用。在肿节风对脂多糖诱导的血管内皮细胞表达IL一1的干预作用及细胞存活度影响实验，肿节风可能通过稳定内皮细胞代谢活性，调节由于尿酸盐引起的血管内皮细胞分泌功能紊乱，抑制炎症因子IL-1过度释放，阻断炎症级联反应。千年健所含挥发油对布氏杆菌、Ⅰ型单纯疱疹病毒有抑制作用。这提示复方千年健制剂有抗病毒和抗菌作用。

在体外采用H₂O₂/Fe²⁺体系通过Fenton反应产生HO·来检测肿节风浸膏清除HO·能力，实验显示肿节风浸膏溶液在体外有明显清除HO·的作用，量效关系明显。在牛大力水提物、醇沉物和粗多糖体外抗氧化活性实验中，三者的抗脂质过氧化作用和对·OH自由基和DPPH·自由基清除能力：VC＞牛大力水提物＞牛大力醇沉物＞牛大力粗多糖，并呈量效关系。这提示复方千年健制剂可用于机体抗氧化。

总之，复方千年健片口服后可产生镇痛、抗炎、抗菌、抗病毒、增强免疫、增强骨质、抗氧化、抗恶性肿瘤等药理作用，从而发挥显著的祛风湿、活血止痛、强筋骨等功效。

复方千年健片的临床应用观察

1资料与方法

1.1临床资料

随机选取60例风湿痛患者，年龄20～65岁，男性38例，女性22例，门诊病人42例，住院病人18例。同时排除年龄在18岁以下或65岁以上，关节严重畸形，关节功能Ⅳ级，合并有心脑血管疾病、慢性呼吸系统疾病、造血系统疾病、慢性失血性疾病、慢性肾炎、过敏性疾病及其他免疫性疾病，并正在服用激素、1个月内服用非甾体类抗炎剂或免疫抑制剂以及妊娠期或哺乳期妇女、精神病患者等。

患者经诊断，均符合风湿病诊断依据，患者均有关节疼痛、肿胀等症状，并伴有不同程度血沉增加。

1.2方法

随机分为治疗组(30例)、对照组(30例)。治疗组：口服本实施例1复方千年健片，每次2片，每日3次，1个月为一疗程，连续治疗2个疗程。对照组：口服消炎痛片，初始量25mg，每日1～2次，如无不良反应，每3日增加25mg，直至明显止痛，最大用量150mg/d，病性稳定后渐减至维持量，1个月为一疗程，连续治疗2个疗程。

1.3疗效标准

显效：主要症状改善率≥75％，血沉正常或明显改善或接近正常。进步：主要症状改善率≥50％。血沉有改善。有效：主要症状改善率≥30％，血沉有改善或无改善。无效：主要症状改善率<30％，血沉无改善。

1.4两组患者疗效观察比较

两组患者病情均有不同程度改善，治疗组显效率10.0％，总有效率90.0％；对照组分别为6.7％和93.3％，两组疗效无显著性差异(P>0.05)，说明复方千年健片疗效和消炎痛片相当，但复方千年健片毒副作用小，相较于西药片，长期服用不会造成身体的负担。见表7。

表7两组临床疗效比较例(％)

1.5两组患者用药不良反应情况

两组患者治疗期间均未出现明显不良反应。

1.6复方千年健片临床应用特点

镇痛：对局部疼痛有一定的镇痛效果，如：对风湿性关节炎病变关节疼痛；颈椎炎颈肩及放射到上臂、前臂、手指部疼痛，腰椎炎引起的腰痛及坐骨神经痛；腰肌老损引起的腰腿痛等均有一定缓解或止痛作用。

消炎：对局部病变的红肿热有消退作用。

舒筋活络：对病变引起的神经压迫所致的麻木无力软弱及血管压迫引起的头晕眩晕恶心等有改善作用。

强筋骨：慢性风湿性关节炎虽然不会造成关节严重的变形，但长期的疼痛会造成患者身体和心理的不适，后期可能会使受累关节骨质疏松。复方千年健片不仅治疗风湿痛，还有补虚强骨作用。

该药组方功能优于祛风湿痛，散寒，活血通络，兼润肺、保肝、补肾、强健筋骨，属标本兼治之剂。

1.7病案实例1

李某，女性，56岁，有急性风湿性关节炎或不典型的风湿热病史。常低热，双腿膝关节酸痛，轻度肿痛，关节功能因疼痛轻度受限。累及膝关节则行走、上下楼及蹲站时困难，呈反复发作，遇天气变化(刮风、下雨、阴天)时加重，反复发作1年，复发加重10天后就医，确诊为慢性风湿性关节炎。同时患者常有咽部不适感，或疼、或痒、或干燥感、灼热感、异物感等；常出现刺激性咳嗽，晨起用力咳出分泌物。病程一般在12个月以上，常因受凉、感冒、疲劳、多言等原因导致该病发作。咽部检查可发现慢性充血，呈暗红色，树枝状充血；咽后壁有淋巴滤泡增生，咽侧索肿大；咽黏膜增生肥厚，黏膜表面有白色假膜或脓性分泌物附着。就诊患者给予作咽喉部检查，血常规、血沉、抗“O”、C反应蛋白化验，确诊伴有慢性咽喉炎。给予复方千年健片口服每次2片，每日3次，1个月为一疗程，连续治疗2个疗程，治疗期间预防感冒，注意保暖，避免长时间(超过1小时)低温潮湿的环境下停留。经治疗后受累关节晨僵、肿胀、疼痛消失，关节功能改善或恢复正常，且停药后可维持3个月以上。同时该患者咽肿痛明显减轻。结论：复方千年健片对慢性风湿性关节炎有效，对其并发症慢性咽喉炎也有一定疗效。

复方千年健片的鉴别

1.运用理化法和薄层色谱法鉴别复方千年健片

1.1取本实施例1的药片片芯粉末1g，加乙醚5mL冷浸，滤过，取滤液1mL，置蒸发皿中，待乙醚挥散后，加5％香草醛浓硫酸溶液1滴，显紫红色。则复方千年健片中含有生物碱。

1.2取实施例1的药片片芯粉末50～100g，于挥发油提取器内提取其挥发油。吸取挥发油加等量的乙酸乙酯稀释后作供试品溶液，另取芳樟醇制成对照品溶液。分别吸取供试品和对照品溶液各5ul，点于同一硅胶G薄层板上，用己烷-乙酸乙酯(85：15)展开，展距15cm。用5％香草醛浓硫酸试液，显色，供试品溶液色谱和对照品溶液色谱在相应位置上显相同颜色斑点。则复方千年健片中含有芳樟醇挥发油物质。

1.3称取实施例1的药片片芯粉末2g，加水50mL，超声处理30min，滤过，滤液用乙酸乙酯振摇提取2次，每次25mL，合并提取液，水浴蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解，摇匀，静置，取上清液作为供试品溶液。另取异嗪皮啶对照品，加甲醇制成1mg/mL溶液，作为对照品溶液。吸取供试品和对照品溶液各5uL，分别点样于同一羧甲基纤维钠的硅胶G薄层板上，以环己烷：乙酸乙酯：甲酸(8：5：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷10％硫酸乙醇溶液，显色，置紫外灯光365nm下检视。供试品溶液色谱和对照品溶液色谱在相应位置上应显相同颜色荧光斑点。经氨蒸气熏约10min，斑点转变为黄绿色。则复方千年健片中含有异嗪皮啶。

1.4取本品片芯粉末2.5g，加氯仿50mL超声提取30min，过滤，蒸干，加氯仿1mL溶解，作为供试品溶液。取芒柄花素对照品，加甲醇使成1mg/mL的溶液，作为对照品溶液。吸取上述供试品溶液10uL、对照品溶液2uL分别点于同一羧甲基纤维钠的硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(15：1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)检视，供试品溶液色谱在与对照品溶液色谱相应位置显相同颜色荧光斑点。则复方千年健片中含有芒柄花素。

2.运用高效液相色谱法鉴别复方千年健片

2.1色谱条件与系统适用性试验色谱柱采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈:0.5％磷酸＝25：75；流速：1mL/min；柱温：25℃，检测波长：344nm；理论塔板数按异嗪皮啶峰值不低于3000。

2.2对照品溶液制备取异嗪皮啶对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含10μg异嗪皮啶的溶液，即得。

2.3供试品溶液制备取本品10片，研细，称取1g，精密称定，加水100mL，超声处理30min，滤过，滤液置分液漏斗中，用乙酸乙酯萃取3次以上，每次100mL，合并乙酸乙酯萃取液，蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。2.4测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪，测定，即得。色谱图见图1和图2，图1为异嗪皮啶对照品溶液的高效液相色谱图，图2为供试品溶液的高效液相色谱图。由图1和图2可知，供试品溶液色谱在与对照品溶液色谱中异嗪皮啶色谱峰相同的保留时间位置出现一个色谱峰，表明该复方千年健片中含有异嗪皮啶。

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (10)

1.一种复方千年健的中药组合物，其特征在于，所述复方千年健的中药组合物的原料包括：千年健1-40重量份、肿节风1-50重量份和牛大力20-70重量份。

2.如权利要求1所述的复方千年健的中药组合物，其特征在于，由如下重量份数的原料制成：千年健10-20重量份、肿节风15-30重量份和牛大力30-60重量份。

3.一种复方千年健的中药组合物的制备方法，其特征在于，原料包括：千年健1-40重量份、肿节风1-50重量份和牛大力20-70重量份；

a.将千年健、肿节风和牛大力混合经体积分数为70％-95％的乙醇回流提取，得第一药渣和第一滤液，将所述第一滤液减压浓缩得第一稠膏；所述第一稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30；

b.将所述第一药渣经体积分数为40％-60％的乙醇回流提取，得第二药渣和第二滤液，将所述第二滤液减压浓缩得第二稠膏；所述第二稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30；

c.将所述第二药渣经水回流提取，得第三滤液，将所述第三滤液减压浓缩得第三稠膏；所述第三稠膏在55-60℃下相对密度为1.20-1.30；

d.将所述第一稠膏、所述第二稠膏和所述第三稠膏混合，即得所述复方千年健的中药组合物。

4.如权利要求3所述的复方千年健的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述a、b、c中，回流提取具体为回流提取1-2次，每次1-2h。

5.如权利要求3所述的复方千年健的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述a中，体积分数为70％-95％的乙醇与所述原料的质量比为10-20：1。

6.如权利要求3所述的复方千年健的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述b中，体积分数为40％-60％的乙醇与所述第一药渣的质量比为10-20：1。

7.如权利要求3所述的复方千年健的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述a、b中，回流提取的温度为70-80℃。

8.一种复方千年健的中药制剂，其特征在于，由权利要求1或2所述的中药组合物及药学上可接受的辅料制成。

9.如权利要求8所述的复方千年健的中药制剂，其特征在于，其为胶囊剂、片剂、颗粒剂、口服液、丸剂或缓释长效剂。

10.一种如权利要求1或2所述的复方千年健的中药组合物的用途，其用途在于，所述复方千年健的中药组合物用于镇痛、消炎、提高免疫力和增强骨质的药物中的应用。