CN105165694B - 一种雪龙鱼f1代人工繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，该方法经亲鱼选择、亲鱼培育、人工授精准备、人工催产、人工授精，将受精卵平均分散黏在无节网布上，静置10—15min，受精卵粘附在网布上，再将粘附有受精卵的网布树立平展放置于孵化池中，于温度28℃—30℃、溶解氧为5‑12.5mg/L的孵化水中进行孵化30—48小时。本发明能实现该鱼的全人工孵化，不仅可杜绝亲鱼吞食小苗的现象，运用此方法还可建立该鱼的家系，便于今后进行家系选育，还能清楚的知道后代和亲本之间的亲缘关系，从而可以控制近亲交配，避免近交产生的后代种质退化。
Description
技术领域
本发明涉及一种雪龙鱼F1代(Pangasius bocourti Sauvage)人工繁殖方法，属水产育种技术领域。
背景技术
雪龙鱼又名三块脂肪鱼，越南称之为CABASA，肉质白嫩，味道鲜美，营养丰富，是淡水鱼类中一种名贵高档经济鱼类。该鱼是越南湄公河热带野生鱼类，属洄游产卵型中大型淡水鱼类，每年3月在湄公河朔河而上，在湄公河上游激流险滩发情产卵，半沉性黏性卵黏在江边树叶、树枝、礁石上，孵化出苗后，小苗随江水流漂流而下数月，直至湄公河出海口觅食生长至大规格苗种，然后朔河进入湄公河各支流觅食生长。
放在中国内陆静水池塘的水环境下繁殖孵化，容易出现以下几个问题：1)由于雪龙鱼授精卵自身沉性及黏性原因，沉性黏性卵将会沉入水底，相互黏在一起，受精卵很快将缺氧死亡，2)孵化用水杂质多，或者水浑浊，水中的杂质极容易黏在黏性卵卵膜上，导致受精卵缺氧死亡；3)每组亲鱼的受精卵放置一起，苗种遗传背景不清楚，无法控制近亲交配，出现近交产生的后代种质退化，今后也无法进行家系选育。4)雪龙鱼为U形胃，杂食性，人工繁殖出苗后，如果亲鱼和鱼苗待在一起，就会出现亲鱼吞吃小苗的现象。
迄今为止，未见有关于雪龙鱼(雪龙鱼)F1代人工繁殖方法相关方面的报道。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法。本发明的人工繁殖方法提高了雪龙鱼F1代的孵化率，有效控制近亲交配，避免近交产生的后代种质退化，便于今后进行家系选育，并能避免亲鱼吞吃小苗。
本发明是通过如下技术方案实现的：
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，包括如下步骤：
1)亲鱼选择：挑选出个体健壮，无病害、无伤残、体表无寄生生物、营养状况良好，以6-7龄，规格为6-10kg的雌性雪龙鱼作为母本，以5-6龄，规格为4-6kg的雌性雪龙鱼作为父本，
2)亲鱼培育：将亲鱼按雌雄2:3的比例，分别放入培育池中培育，培育密度:按鱼体总重量300-350kg/亩放养培育，培育期间雄雌鱼水温控制在28-30℃，保持溶解氧在5-12.5mg/L，培育水深保持在1.0-3米，白天光照控制在100-200LUX，每日换水1～2次，每日换水量占培育池中总水量的10—20％；亲本培育期投喂蛋白质含量为28或30个蛋白的浮性膨化配合饲料，饲料颗粒度为1-2.5mm，每日上午投喂一次，日投喂量为鱼体重的1—1.5％，不补喂其他食物，保持统一饲料口感，亲鱼缺氧浮头停止发育；
3)人工授精准备雌鱼挑选：腹部膨大、下坠，手感松软有弹性，生殖突前段饱满，使用掏卵器掏卵，取少量卵子使用放大镜观察卵子成熟情况，卵径达到0.6mm时，卵粒发育在4期末再进行催产；雄鱼挑选：挑选性腺成熟的雄鱼，通过腹部挤压法收集精巢内的精液，并用显微镜检查精子活力；
4)人工催产：
取步骤(3)挑选出的雌性亲鱼从上腹部轻轻按压挤卵于消毒后干燥的盆内，
取步骤(3)挑选出的雄性亲鱼从上腹部轻轻按压挤精，将精液挤入盛有卵粒的装置中，鱼卵和雄鱼精液的雌雄比为1:2，挤精过程不能有水或尿液掺入；
5)人工授精：将盛有精液和卵子的装置立即轻轻轻晃动20-30秒，让精液和卵粒之间流动，精液和卵粒充分混合，完成人工授精，获得受精卵；人工授精过程中不能混入清水，避免卵胚孔遇水封闭，影响受精率；
6)受精卵孵化：取60-80目的无节网布展平，将受精卵平均分散黏在无节网布上，使受精卵在无结网布上的黏结密度为5千—7千枚受精卵/每平方米，静置10—15min，受精卵粘附在网布上，再将粘附有受精卵的网布树立平展放置于孵化池中，于温度26℃—30℃、溶解氧为5-12.5mg/L的孵化水中进行孵化30—48小时。
本发明的浮性膨化配合饲料为现有技术，可市场购得，本发明购自北京通威饲料有限公司，型号：28蛋白或30蛋白的通威牌浮性膨化配合饲料。
本发明优选的，所述的培育池面积100～500m2，培育水深保持在1.8-2.8米，培育时每500m2配置一台1.5kw的增氧机。
本发明亲鱼培育过程中，保持统一的口感，不要投喂其它饲料，避免因口感不同，亲鱼拒食，安置增氧机，每500m2配置1.5kw增氧机，亲鱼缺氧浮头停止发育。
本发明优选的，步骤4)中，亲鱼挤卵前采用催产素或绒毛膜促性腺激素(HCG)进行催产；使用催产素进行催产为地欧酮(DOM)与促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)联合使用，地欧酮(DOM)与促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)雌鱼亲鱼的用量为5mg/kg的地欧酮(DOM)和5～6ug/kg的促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)，雄鱼亲鱼的用量为雌鱼的一半；使用绒毛膜促性腺激素(HCG)进行催产时，绒毛膜促性腺激素(HCG)的雌鱼亲鱼用量为3000IU/kg～4000IU/kg，雄鱼亲鱼用量为雌鱼的一半。
进一步优选的，具体催产方法如下：将步骤3)挑选的亲鱼，按≤1尾/5m2放养密度移入催产池中进行催产，催产水温为25℃～30℃，采用胸腔注射催产素或绒毛膜促性腺激素(HCG)，雌鱼分二次注射，第一针剂量为总剂量的30％，隔6h～8h后注射第二针，同时对雄鱼注射，持续冲水刺激，效应时间为8h～12h。
本发明优选的，步骤4)中，每条雌性亲鱼挤卵次数2—3次，每次挤卵后，立刻将亲鱼放入池中充氧休息片刻，保持培育池内水溶解氧保持溶解氧在5-12.5mg/L。
本发明优选的，步骤4)中，每次挤卵在20min内完成，挤卵时间间隔10—20分钟。
本发明优选的，步骤4)中，每条雄性亲鱼挤精次数1次，挤精时间控制在10min内。
本发明的人工催产，每次挤卵必须从上腹部按压挤卵，不可用力过大，否则雌性亲鱼内脏极易受压受伤死亡，每次挤卵应在20min内完成，将卵挤入消毒干燥的盆中，再挤精，精液只能挤1次，挤精必须从上腹部位置按压，将精液挤入盛有卵粒的盆中，挤精液切不可用力过大，不可多次挤精液，否则雄性亲鱼极易劳累死亡。
本发明的人工授精，目测是无法发现受精卵是否全部完成人工授精的，人工授精需要有实践经验的熟练技术工完成。
本发明优选的，所述的无节网布为60-80目的涤纶无结网布。
本发明优选的，受精卵在无结网布上的黏结密度为6千—7千枚受精卵/每平方米。
本发明优选的，受精卵平均分散黏在无节网布上按如下方法进行，使用狼毫毛笔蘸上受精卵，将黏在毛笔上的受精卵轻轻均匀甩在网布上，蘸受精卵的过程时间控制在2min内。以避免受精卵黏在毛笔上，
本发明优选的，孵化水的升温速率小于1.5℃/小时，孵化用水盐度小于0.1％，pH值控制在6.82—8.2之间，电解率μs值在400以下，孵化期间受精卵光照度控制在150LUX以下。
本发明优选的，不同亲鱼组的黏有受精卵的网布分别放置于不同的有标记的网箱内。
本发明优选的，孵化池面积5～25m2,水深0.3～0.5m。
本发明受精卵孵化过程中保持水质硬度、PH、水温稳定，避免换水，当受精卵发育到神经长出期时，对水质硬度、PH、水温及其敏感，一旦水质硬度、PH、水温发生变化将导致孵化失败。
本发明的有益效果：
1、雪龙鱼F1代在中国的静水小池塘养殖的条件下，离开了激流涌动、高落差、大水深的湄公河没有洄游条件，不能自然产卵受精，本发明的人工孵化方法能使该鱼在全人工条件下完成催产、受精、出苗；
2、本发明的孵化方法能挑选出发育性成熟的可以产卵的雌性亲鱼，能挑选出精液成熟的雄性亲鱼，避免了错误的无效的亲鱼选择；控制黏性卵在网布上的密度，避免黏性卵相互黏在一起，而增加充气沙头，充气增氧可杜绝缺氧造成的受精卵缺氧死亡；孵化盐度、电解率控制是对无鳞鱼黏性受精卵孵化重要的技术指标，控制水温及升温速率，能控制受精卵孵化进度，保证了卵黄囊吸收速度，保证了受精卵出苗的成活率；
3、本发明的孵化方法将亲鱼和受精卵分开，当受精卵破膜出苗后，杜绝大鱼吃小苗的情况出现，保证了苗种成活率；
4、本发明的孵化方法将每组亲鱼的受精卵放置在不同标记的网箱内，苗种遗传背景清楚，可有效控制近亲交配，杜绝近交产生的后代种质退化问题，今后可以进行家系选育。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步说明，但本发明所保护范围不限于此。
实施例1
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，包括如下步骤：
1)亲鱼选择：挑选出个体健壮，无病害、无伤残、体表无寄生生物、营养状况良好，以6龄，规格为8kg的雌性雪龙鱼作为母本，以5龄，规格为5kg的雌性雪龙鱼作为父本，
2)亲鱼培育：将亲鱼按雌雄2:3的比例，分别放入培育池中培育，培育池面积500m2，水深1.5m，培育密度:按鱼体总重量300kg/亩放养培育，培育期间雄雌鱼水温控制在28℃，保持溶解氧在5mg/L，白天光照控制在100lux，每5日换水1—2次，换水量占培育池中总水量的10％；亲本培育期投喂蛋白质含量为28个蛋白的通威牌浮性膨化配合饲料，饲料颗粒度为2.0mm，每日上午投喂一次，日投喂量为鱼体重的1％，不补喂其他的食物，保持统一饲料口感。每500m2配置1.5kw增氧机一台，亲鱼缺氧浮头停止发育；
3)人工授精准备雌鱼挑选：腹部膨大，手感松软有弹性，生殖突前段饱满，使用掏卵器掏卵，取少量卵子使用放大镜观察卵子成熟情况，卵径达到0.6mm时，卵粒发育在4期末再进行催产；雄鱼挑选：挑选性腺成熟的雄鱼，通过腹部挤压法收集精巢内的精液，并用显微镜检查精子活力；
4)人工催产：
采用催产素进行催产；使用催产素进行催产为地欧酮(DOM)与促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)联合使用，地欧酮(DOM)与促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)雌鱼亲鱼的用量为5mg/kg的地欧酮(DOM)和5ug/kg的促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)，雄鱼亲鱼的用量为雌鱼的一半；具体催产方法如下：将步骤3)挑选的亲鱼，按≤1尾/5m2放养密度移入催产池中进行催产，催产水温为26℃，采用胸腔注射，雌鱼分二次注射，第一针剂量为总剂量的30％，隔6h后注射第二针，同时对雄鱼注射，持续冲水刺激，效应时间为8h。
催产后的雌性亲鱼从上腹部轻轻按压挤卵于消毒后干燥的盆内，每条雌性亲鱼挤卵次数2次，每次挤卵后，立刻将亲鱼放入池中充氧休息片刻，保持培育池内水溶解氧保持溶解氧在5mg/L。每次挤卵在20min内完成，挤卵时间间隔20分钟。
催产后的雄性亲鱼从上腹部轻轻按压挤精，将精液挤入盛有卵粒的装置中，鱼卵和雄鱼精液的雌雄比为1:2，挤精过程不能有水或尿液掺入，每条雄性亲鱼挤精次数1次，每次挤精时间控制在10min内。
5)人工授精：将盛有精液和卵子的装置立即轻摇25s，使得精液和卵粒充分混合，完成人工授精，获得受精卵；人工授精过程中不能混入清水，避免卵胚孔遇水封闭，影响受精率；
6)受精卵孵化：取60目的涤纶无节网布展平，使用狼毫毛笔蘸上受精卵，将黏在毛笔上的受精卵轻轻均匀甩在网布上，蘸受精卵的过程时间控制在2min内，使受精卵在无结网布上的黏结密度为7千枚受精卵/每平方米，静置15min，受精卵粘附在网布上，再将粘附有受精卵的网布树立平展放置于孵化池中进行孵化48小时，孵化池面积8m2,水深0.4m，孵化水温度28℃、溶解氧为5mg/L，孵化水的升温速率1.0℃/小时，孵化用水盐度小于0.1％，pH值控制在7.22，电解率μs值在400，孵化期间受精卵光照度控制在100LUX。不同亲鱼组的黏有受精卵的网布分别放置于不同的有标记的网箱内。
实施例2
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，包括如下步骤：
1)亲鱼选择：挑选出个体健壮，无病害、无伤残、体表无寄生生物、营养状况良好，以6龄，规格为8kg的雌性雪龙鱼作为母本，以5龄，规格为5kg的雌性雪龙鱼作为父本，
2)亲鱼培育：将亲鱼按雌雄2:3的比例，分别放入培育池中培育，培育池面积500m2，水深2m，培育密度:按鱼体总重量320kg/亩放养培育，培育期间雄雌鱼水温控制在29℃，保持溶解氧在10mg/L，白天光照控制在150LUX，每5日换水1——2次，换水量占培育池中总水量的15％；亲本培育期投喂蛋白质含量为30个蛋白的通威牌浮性膨化配合饲料，饲料颗粒度为1.0mm，每日上午投喂一次，日投喂量为鱼体重的1.2％，不补喂其他的食物，保持统一饲料口感。每500m2配置1.5kw增氧机一台，亲鱼缺氧浮头停止发育；
3)人工授精准备雌鱼挑选：腹部膨大，手感松软有弹性，生殖突前段饱满，使用掏卵器掏卵，取少量卵子使用放大镜观察卵子成熟情况，卵径达到0.6mm时，卵粒发育在4期末再进行催产；雄鱼挑选：挑选性腺成熟的雄鱼，通过腹部挤压法收集精巢内的精液，并用显微镜检查精子活力；
4)人工催产：
采用催产素进行催产；使用催产素进行催产为地欧酮(DOM)与促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)联合使用，地欧酮(DOM)与促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)雌鱼亲鱼的用量为5mg/kg的地欧酮(DOM)和6ug/kg的促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)，雄鱼亲鱼的用量为雌鱼的一半；具体催产方法如下：将步骤3)挑选的亲鱼，按≤1尾/5m2放养密度移入催产池中进行催产，催产水温为28℃，采用胸腔注射，雌鱼分二次注射，第一针剂量为总剂量的30％，隔6h后注射第二针，同时对雄鱼注射，持续冲水刺激，效应时间为10h。
催产后的雌性亲鱼从上腹部轻轻按压挤卵于消毒后干燥的盆内，每条雌性亲鱼挤卵次数2次，每次挤卵后，立刻将亲鱼放入池中充氧休息片刻，保持培育池内水溶解氧保持溶解氧在10mg/L。每次挤卵在20min内完成，挤卵时间间隔20分钟。
催产后的雄性亲鱼从上腹部轻轻按压挤精，将精液挤入盛有卵粒的装置中，鱼卵和雄鱼精液的雌雄比为1:2，挤精过程不能有水或尿液掺入，每条雄性亲鱼挤精次数1次，每次挤精时间控制在10min内。
5)人工授精：将盛有精液和卵子的装置立即轻摇25s，使得精液和卵粒充分混合，完成人工授精，获得受精卵；人工授精过程中不能混入清水，避免卵胚孔遇水封闭，影响受精率；
6)受精卵孵化：取70目的涤纶无节网布展平，使用狼毫毛笔蘸上受精卵，将黏在毛笔上的受精卵轻轻均匀甩在网布上，蘸受精卵的过程时间控制在2min内，使受精卵在无结网布上的黏结密度为6千枚受精卵/每平方米，静置15min，受精卵粘附在网布上，再将粘附有受精卵的网布树立平展放置于孵化池中进行孵化40小时，孵化池面积8m2,水深0.4m。孵化水温度29℃、溶解氧为10mg/L，孵化水的升温速率1.2℃/小时，孵化用水盐度小于0.1％，pH值控制在7.10，电解率μs值在350，孵化期间受精卵光照度控制在120LUX。不同亲鱼组的黏有受精卵的网布分别放置于不同的有标记的网箱内。
实施例3
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，包括如下步骤：
1)亲鱼选择：挑选出个体健壮，无病害、无伤残、体表无寄生生物、营养状况良好，以6龄，规格为8kg的雌性雪龙鱼作为母本，以5龄，规格为5kg的雌性雪龙鱼作为父本，
2)亲鱼培育：将亲鱼按雌雄2:3的比例，分别放入培育池中培育，培育池面积200m2，水深3m，培育密度:按鱼体总重量350kg/亩放养培育，培育期间雄雌鱼水温控制在30℃，保持溶解氧在12.5mg/L，白天光照控制在150LUX，每5日换水1——2次，换水量占培育池中总水量的20％；亲本培育期投喂蛋白质含量为30个蛋白的通威牌浮性膨化配合饲料，饲料颗粒度为1.0mm，每日上午投喂一次，日投喂量为鱼体重的1.5％，不补喂其他的食物，保持统一饲料口感。每500m2配置1.5kw增氧机一台，亲鱼缺氧浮头停止发育；
3)人工授精准备雌鱼挑选：腹部膨大，手感松软有弹性，生殖突前段饱满，使用掏卵器掏卵，取少量卵子使用放大镜观察卵子成熟情况，卵径达到0.6mm时，卵粒发育在4期末再进行催产；雄鱼挑选：挑选性腺成熟的雄鱼，通过腹部挤压法收集精巢内的精液，并用显微镜检查精子活力；
4)人工催产：采用催产素进行催产；使用绒毛膜促性腺激素(HCG)进行催产，绒毛膜促性腺激素(HCG)的雌鱼亲鱼用量为3500IU/kg，雄鱼亲鱼用量为雌鱼的一半。具体催产方法如下：将步骤3)挑选的亲鱼，按≤1尾/5m2放养密度移入催产池中进行催产，催产水温为28℃，采用胸腔注射，雌鱼分二次注射，第一针剂量为总剂量的30％，隔6h后注射第二针，同时对雄鱼注射，持续冲水刺激，效应时间为11h。
催产后的雌性亲鱼从上腹部轻轻按压挤卵于消毒后干燥的盆内，每条雌性亲鱼挤卵次数2次，每次挤卵后，立刻将亲鱼放入池中充氧休息片刻，保持培育池内水溶解氧保持溶解氧在12.5mg/L。每次挤卵在20min内完成，挤卵时间间隔15分钟。
催产后的雄性亲鱼从上腹部轻轻按压挤精，将精液挤入盛有卵粒的装置中，鱼卵和雄鱼精液的雌雄比为1:2，挤精过程不能有水或尿液掺入，每条雄性亲鱼挤精次数1次，每次挤精时间控制在10min内。
5)人工授精：将盛有精液和卵子的装置立即轻摇30s，使得精液和卵粒充分混合，完成人工授精，获得受精卵；人工授精过程中不能混入清水，避免卵胚孔遇水封闭，影响受精率；
6)受精卵孵化：取80目的无节网布展平，使用狼毫毛笔蘸上受精卵，将黏在毛笔上的受精卵轻轻均匀甩在网布上，蘸受精卵的过程时间控制在2min内，使受精卵在无结网布上的黏结密度为6千枚受精卵/每平方米，静置12min，受精卵粘附在网布上，再将粘附有受精卵的网布树立平展放置于孵化池中进行孵化40小时，孵化池面积8m2,水深0.4m。孵化水温度30℃、溶解氧为12.5mg/L，孵化水的升温速率0.8℃/小时，孵化用水盐度小于0.1％，pH值控制在6.82，电解率μs值在332，孵化期间受精卵光照度控制在80LUX。不同亲鱼组的黏有受精卵的网布分别放置于不同的有标记的网箱内。
对比例1
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，方法同实施例1，不同之处在于：
步骤2)中，培育期间雄雌鱼水温控制在24℃，保持溶解氧在3.5mg/L，白天光照控制在250LUX，每5日换水2次，换水量占培育池中总水量的10％；亲本培育期每日上午投喂一次直径3mm的全价膨化浮性配合饲料。
对比例2
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，方法同实施例1，不同之处在于：
步骤2)中，培育期间雄雌鱼水温控制在22℃，保持溶解氧在3.5mg/L，白天光照控制在250LUX，每5日换水2次，换水量占培育池中总水量的10％；亲本培育期每日上午投喂一次直径3mm的全价膨化浮性配合饲料。
对比例3
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，方法同实施例1，不同之处在于：
步骤2)中，培育期间雄雌鱼水温控制在26℃，保持溶解氧在3.5mg/L，白天光照控制在300LUX，每5日换水2次，换水量占培育池中总水量的10％；亲本培育期每日上午投喂一次直径3mm的全价膨化浮性配合饲料。
实验例
亲鱼培育期间，不同培育温度、溶解氧、光照度及饲料颗粒大小对亲鱼产卵量的影响见下表1所示。
表1
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对比例1 | 对比例2 | 对比例3 |
| 亲鱼培育温度 | 28℃ | 29℃ | 30℃ | 24℃ | 22℃ | 26℃ |
| 溶解氧(毫克) | 5 | 10 | 12.5 | 3.5 | 3.5 | 3.5 |
| 光照度lux | 100 | 150 | 150 | 250 | 250 | 300 |
| 饲料颗粒度 | 2.0 | 1.0 | 1.0 | 3.0 | 3.0 | 3.0 |
| 亲鱼产卵量 | 7.55万粒 | 8.22万粒 | 8.5万粒 | 6.25万粒 | 4.52万粒 | 3.35万粒 |
对比例4
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，方法同实施例1，不同之处在于：
步骤6)中，涤纶无节网布的网眼为100目，孵化水温度24℃。
对比例5
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，方法同实施例1，不同之处在于：
步骤6)中，无节网布的网眼为120目，孵化水温度26℃。
对比例6
一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，方法同实施例1，不同之处在于：
步骤6)中，无节网布的网眼为40目，孵化水温度22℃。
实验例
受精卵孵化期间，不同网布、孵化温度对出苗率的影响见下表2所示。
表2
受精卵孵化期间，改变孵化水的pH对出苗率的影响见下表3所示。
表3
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对照例 | 对照例 | 对照例 | |
| pH | 7.22 | 7.10 | 6.82 | 8.0 | 8.2 | 8.6 |
| 出苗率 | 95％ | 96％ | 98％ | 20％以下 | 20％以下 | 无 |
| 苗种5日成活率 | 78％ | 80％ | 82％ | 22％ | 14％ | 无 |
由上表可以看出，孵化水的pH数值越高，孵化率越低，PH值超过8后，孵化率显著降低。受精卵孵化期间，改变孵化水的电解率μs值对出苗率的影响见下表4所示。
表4
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 对照例 | 对照例 | 对照例 | |
| 电解率μs | 400 | 350 | 332 | 760 | 800 | 900 |
| 出苗率 | 95％ | 96％ | 98％ | 20％以下 | 20％以下 | 无 |
| 苗种5日成活率 | 78％ | 80％ | 82％ | 22％ | 14％ | 无 |
由上表可以看出，孵化水的电解率μs越高，孵化率越低，电解率μs超过760后孵化出苗率显著降低。
Claims (9)
1.一种雪龙鱼F1代人工繁殖方法，包括如下步骤：
1)亲鱼选择：挑选出个体健壮，无病害、无伤残、体表无寄生生物、营养状况良好，以6-7龄，规格为6-10kg的雌性雪龙鱼作为母本，以5-6龄，规格为4-6kg的雄性雪龙鱼作为父本，
2)亲鱼培育：将亲鱼按雌雄2:3的比例，分别放入培育池中培育，培育密度:按鱼体总重量300-350kg/亩放养培育，培育期间雄雌鱼水温控制在28-30℃，保持溶解氧在5-12.5mg/L，培育水深保持在1.0-3米，白天光照控制在100-200lux，每日换水1～2次，每日换水量占培育池中总水量的10-20％；亲本培育期投喂蛋白质含量为28或30个蛋白的浮性膨化配合饲料，饲料颗粒度为1-2.5mm，每日上午投喂一次，日投喂量为鱼体重的1-1.5％，不补喂其他食物，保持统一饲料口感，亲鱼缺氧浮头停止发育；
3)人工授精准备：雌鱼挑选；腹部膨大、下坠，手感松软有弹性，生殖突前段饱满，使用掏卵器掏卵，取少量卵子使用放大镜观察卵子成熟情况，卵径达到0.6mm时，卵粒发育在4期末再进行催产；雄鱼挑选：挑选性腺成熟的雄鱼，通过腹部挤压法收集精巢内的精液，并用显微镜检查精子活力；
4)人工催产：取步骤3)挑选出的雌性亲鱼从上腹部轻轻按压挤卵于消毒后干燥的盆内，取步骤3)挑选出的雄性亲鱼从上腹部轻轻按压挤精，将精液挤入盛有卵粒的装置中，鱼卵和雄鱼精液的雌雄比为1:2，挤精过程不能有水或尿液掺入；亲鱼挤卵前采用催产素或绒毛膜促性腺激素(HCG)进行催产；使用催产素进行催产为地欧酮(DOM)与促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)联合使用，地欧酮(DOM)与促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)雌鱼亲鱼的用量为5mg/kg的地欧酮(DOM)和5～6ug/kg的促黄体生成素释放激素类似物(LRH-A)，雄鱼亲鱼的用量为雌鱼的一半；使用绒毛膜促性腺激素(HCG)进行催产时，绒毛膜促性腺激素(HCG)的雌鱼亲鱼用量为3000IU/kg～4000IU/kg，雄鱼亲鱼用量为雌鱼的一半，具体催产方法如下：将步骤3)挑选的亲鱼，按≤1尾/5m2放养密度移入催产池中进行催产，催产水温为25℃～30℃，采用胸腔注射催产素或绒毛膜促性腺激素(HCG)，雌鱼分二次注射，第一针剂量为总剂量的30％，隔6h～8h后注射第二针，同时对雄鱼注射，持续冲水刺激，效应时间为8h～12h；
5)人工授精：将盛有精液和卵子的装置立即轻轻晃动20-30秒，让精液和卵粒之间流动，精液和卵粒充分混合，完成人工授精，获得受精卵；人工授精过程中不能混入清水，避免卵胚孔遇水封闭，影响受精率；
6)受精卵孵化：取60-80目的无结网布展平，将受精卵平均分散黏在无结网布上，使受精卵在无结网布上的黏结密度为5千-7千枚受精卵/每平方米，静置10-15min，受精卵粘附在网布上，再将粘附有受精卵的网布树立平展放置于孵化池中，于温度26℃-30℃、溶解氧为5-12.5mg/L的孵化水中进行孵化30-48小时。
2.根据权利要求1所述的雪龙鱼F1代人工繁殖方法，其特征在于，所述的培育池面积100～500m2，培育水深保持在1.8-2.8米，培育时每500m2配置一台1.5kw的增氧机。
3.根据权利要求1所述的雪龙鱼F1代人工繁殖方法，其特征在于，步骤4)中，每条雌性亲鱼挤卵次数2-3次，每次挤卵后，立刻将亲鱼放入池中充氧休息片刻，培育池内水溶解氧保持在5-12.5mg/L。
4.根据权利要求1所述的雪龙鱼F1代人工繁殖方法，其特征在于，步骤4)中，每次挤卵在20min内完成，挤卵时间间隔10-20分钟。
5.根据权利要求1所述的雪龙鱼F1代人工繁殖方法，其特征在于，步骤4)中，每条雄性亲鱼挤精次数1次，挤精时间控制在10min内。
6.根据权利要求1所述的雪龙鱼F1代人工繁殖方法，其特征在于，所述的无结网布为60-80目的涤纶无结网布。
7.根据权利要求1所述的雪龙鱼F1代人工繁殖方法，其特征在于，受精卵在无结网布上的黏结密度为6千-7千枚受精卵/每平方米。
8.根据权利要求1所述的雪龙鱼F1代人工繁殖方法，其特征在于，孵化水的升温速率小于1.5℃/小时，孵化用水盐度小于0.1％，pH值控制在6.82-8.2之间，电解率μs值在400以下，孵化期间受精卵光照度控制在150lux以下。
9.根据权利要求1所述的雪龙鱼F1代人工繁殖方法，其特征在于，不同亲鱼组的黏有受精卵的网布分别放置于不同的有标记的网箱内，孵化池面积5～25m2,水深0.3～0.5m。
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