CN105061288A - 化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了化合物及其制备方法和用途,该化合物为式I所示化合物或其对映异构体、非对映异构体、外消旋体、药学上可接受的盐、结晶水合物或溶剂合物,其中,R1为任选取代的苯基;R2为对甲基苯基、甲基;X为C或N。该化合物能够用于治疗癌症相关疾病。

Description

化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及医药领域,具体的,本发明涉及化合物及其制备方法和应用,更具体的,本发明涉及式Ι所示化合物以及衍生物及其制备方法、药物组合物、式Ι所示化合物在制备药物中的用途。
背景技术
肿瘤是机体在各种致癌因素作用下,局部组织的某一个细胞在基因水平上失去对其生长的正常调控,导致其克隆性异常增生而形成的异常病变。学界一般将肿瘤分为良性和恶性两大类。
然而,现有肿瘤的治疗手段仍有待改进。
发明内容
应用最先进的计算机三维分子对接模拟技术,在第一代泛素激酶抑制剂两类化合物系列的基础上设计第二代候选化合物,通过物理化学性质、药代动力学参数和结合受体蛋白(E2/E3偶联口袋)的预测和筛选、自由能微扰和分子动力学理论,化合物和受体蛋白的二元复合物的物理结合自由能由稳定态的全体采样积分给出,由此优化选择得到化合物。此抑制剂系列可用于治疗癌症。
泛素-蛋白酶系统(ubiquitin-proteasomesystem,UPS)是真核细胞内主要的蛋白水解酶,由泛素、泛素活化酶、泛素耦联酶、泛素-蛋白连接酶、26S以及泛素再循环酶等组成。泛素分子主要通过泛素活化酶、泛素结合酶和泛素-蛋白连接酶与靶蛋白结合形成一条多泛素链,将底物蛋白泛素化,使靶蛋白被26S蛋白酶体所识别和降解。泛素-蛋白酶体系统是细胞内三磷酸腺苷依赖的非溶酶体蛋白降解机制,可高效选择性地降解细胞内蛋白质,参与细胞的多种生理活动过程,比如细胞凋亡、MHCI类抗原的递呈、细胞周期以及细胞内信号传导等,对维持细胞正常的生理功能具有十分重要的意义。
泛素蛋白激酶抑制剂具有调控细胞周期,以凋亡机制杀灭肿瘤细胞;其通过稳定1-kB蛋白来抑制转录活化因子(NP-kB),可使细胞对于化疗药或其他细胞应激更敏感,同时使肿瘤细胞对TNF诱导和药物诱导的敏感性增加。泛素蛋白激酶抑制剂能够阻断NF-kB介导的细胞黏附分子在内皮细胞的表达,从而起到抗血管生成与抗肿瘤的作用。
本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此,本发明的一个目的在于提出一种能够用于治疗癌症的药物的化合物。
在本发明的第一方面,提供了一种化合物,根据本发明的实施例,该化合物为式I所示化合物或式I所示化合物的对映异构体、非对映异构体、外消旋体、药学上可接受的盐、结晶水合物、酮-烯醇互变异构化合物或溶剂合物,
其中,
R1为任选取代的苯基;
R2为对甲基苯基、甲基;
X为C或N。
发明人惊奇地发现,根据本发明实施例的化合物具有有效地抗癌活性。尤其是,针对癌症,例如脑癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌、宫颈癌、结肠癌、乳腺癌和前列腺癌。
根据本发明的实施例,上述化合物还可以具有下列附加技术特征:
在本发明的一个实施例中,R1为苯基,至少一个卤素取代的苯基,氰基取代的苯基。
在本发明的一个实施例中,所述卤素为F、Cl或Br。
在本发明的一个实施例中,所述化合物为下列化合物或者所述下列化合物的对映异构体、非对映异构体、外消旋体、药学上可接受的盐、结晶水合物或溶剂合物:
在本发明的第二方面,本发明提供了一种制备前面所述化合物的方法,根据本发明的实施例,该方法包括:
(1)使式A1所示化合物与硝基甲烷进行接触,以便获得式A2所示化合物;
(2)使所述式A2所示化合物与式A3所示化合物进行接触,以便获得式A4所示化合物;
(3)使所述式A4所示化合物进行还原反应,以便获得式A所示化合物;
(4)使式B1所示化合物与甘氨酸乙酯盐酸盐进行接触,以便获得式B2所示化合物;
(5)使所述式B2所示化合物进行水解反应,以便获得式B所示化合物;
(6)使所述式A所示化合物与所述式B所示化合物进行接触,以便获得式Ⅰ所示化合物;
其中R1、R2、X是如前面所定义的。
根据本发明的实施例的方法,能够有效地制备前面所描述的化合物,关于该化合物的特征和优点,前面进行了详细描述,同样适用本方法,在此不再赘述。
由此,根据本发明的实施例,本发明提出了一条合成路线,可以用于制备式I所示化合物:
所述式A1所示化合物与硝基甲烷溶于醋酸中,并在醋酸胺的作用下80摄氏度搅拌4-5小时,获得式A2所示化合物;所述式A2所示化合物与式A3所示化合物溶于环己烷,并在二水乙酸锌的作用下80摄氏度搅拌8-14小时;获得式A4所示化合物;将所述式A4所示化合物溶于甲醇和水的混合液中,并在还原剂的作用下获得式A所示化合物;使式B1所示化合物与甘氨酸乙酯盐酸盐溶于乙腈,在碱的作用下50摄氏度搅拌5小时获得式B2所示化合物;将所述式B2所示化合物在碱的作用下脱去酯基,获得式B所示化合物;使所述式A所示化合物与所述式B所示化合物溶于无水DMF,在HOBT,DMAP和EDC的作用下获得式Ⅰ所示化合物;
在本发明的第三方面,本发明提供了一种药物组合物,其包括前面所描述的化合物。发明人发现,该药物组合物能够有效地用于抗肿瘤,尤其是,针对癌症,例如脑癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌、宫颈癌、结肠癌、乳腺癌和前列腺癌。
关于该化合物的特征和优点,前面进行了详细描述,同样适用于本药物组合物,在此不再赘述。
在本发明的第四方面,本发明提供了前面所述的化合物或药物组合物在制备药物中的用途,所述药物用于治疗癌症,任选地,所述癌症为癌症,例如脑癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌、宫颈癌、结肠癌、乳腺癌和前列腺癌。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的,仅用于解释本发明,而不能理解为对本发明的限制。
实施例1
化合物I-1:N-(2-(4-氟苯基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-(甲基磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取圆底烧瓶,分别加入对氟苯甲醛(15.26mmol)1.892g,MeNO2(152.6mmol)9.315g,醋酸铵(45.78mmol)3.529g,醋酸50mL,80℃反应5小时。将反应液倒入冰水中,析出固体,抽滤,得化合物A2-1,为淡黄色针状固体1.4g,产率54.9%。
取圆底烧瓶,分别加入化合物A2-1(3.59mmol)600.0mg,吲哚(3.95mmol)462.7mg,二水乙酸锌(0.359mmol)78.7mg,环己烷30mL,80℃反应14小时。TLC(PE:EA=3:1),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(PE:EA=6:1)。得产物化合物A4-1,为黄色液体1.0g,产率98.1%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.11(s,1H),7.37(d,J=8.0Hz,1H),7.28(d,J=8.1Hz,1H),7.23(dd,J=8.3,5.4Hz,2H),7.17(t,J=7.7Hz,1H),7.05(t,J=7.5Hz,1H),6.99–6.88(m,3H),5.12(t,J=8.0Hz,1H),4.98(dd,J=12.5,7.5Hz,1H),4.83(dd,J=12.4,8.6Hz,1H).
圆底烧瓶,分别加入化合物A4-1(3.5mmol)1.0g,铁粉(17.6mmol)983.0mg,氯化铵(35.2mmol)1.882g,MeOH/H2O(5/1),60℃反应5小时。过滤,浓缩,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=25:1)。得化合物A-1,为黄色油状物160.0mg,产率18.0%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.34(ddd,J=14.3,10.4,6.7Hz,4H),7.15(s,1H),7.08(t,J=7.5Hz,1H),7.00–6.88(m,3H),4.94(s,3H),4.66(t,J=7.5Hz,1H),3.62(dd,J=12.5,7.3Hz,1H),3.40(dd,J=12.5,7.8Hz,1H).
取圆底烧瓶,加入化合物B1-1(21mmol)2.405g,化合物甘氨酸乙酯盐酸盐(20mmol)2.792g,乙腈30mL,10-15℃条件下滴加三乙胺(50mmol)5.060g,50℃反应5小时。TLC(PE:EA=1:1),过滤,乙腈洗固体残留物,将滤液浓缩,柱层析分离(PE:EA=3:1)。得化合物B2-1,为黄色液体1.377g,产率38.0%。
取圆底烧瓶,加入化合物B2-1(9.08mmol)1.776g,MeOH/H2O(5/1),缓慢加入氢氧化钠(49mmol)1.960g,室温搅拌5小时。浓缩,用2mol/L盐酸调pH至4-5,用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,得化合物B-1,为淡黄色固体150.0mg,产率为10.0%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ3.89(s,2H),3.02(s,3H).
取茄形瓶,加入化合物B-1(0.623mmol)100.0mg,化合物A-1(0.556mmol)143.4mg,HOBT(1.132mmol)152.9mg,DMAP(0.1132mmol)13.8mg,EDC(1.132mmol)217.0mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-1白色固体197.0mg,产率91.0%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.39–7.29(m,4H),7.19(s,1H),7.08(dd,J=11.2,4.2Hz,1H),7.00(dd,J=12.2,5.4Hz,2H),6.96–6.89(m,1H),4.51(d,J=7.8Hz,1H),4.01–3.93(m,1H),3.84–3.76(m,1H),3.67(s,2H),2.83(s,3H).13CNMR(100MHz,Acetone-d6)δ169.28(s),163.54(s),161.14(s),140.26(s),137.76(s),130.80(d,J=8.0Hz),127.92(s),122.74(s),122.40(s),119.80(s),119.59(s),116.89(s),115.83(s),115.62(s),112.22(s),46.27(s),44.95(s),42.90(s),40.38(s).
实施例2
化合物I-2:N-(2-(2,4-二氟苯基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-(甲基磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取圆底烧瓶,分别加入2,4-二氟苯甲醛(15.26mmol)1.892g,MeNO2(152.6mmol)9.315g,醋酸铵(45.78mmol)3.529g,醋酸50mL,80℃反应5小时。将反应液倒入冰水中,析出固体,抽滤。得化合物A2-2,为黄色固体2.147g,产率76.0%。
取圆底烧瓶,分别加入化合物A2-2(3.24mmol)600.0mg,吲哚(3.57mmol)417.5mg,二水乙酸锌(0.324mmol)71.0mg,环己烷30mL,80℃反应14小时。TLC(PE:EA=3:1),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(PE:EA=6:1)。得化合物A4-2,为黄色液体900.0mg,产率91.9%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(s,1H),7.45(d,J=7.9Hz,1H),7.31(d,J=8.2Hz,1H),7.26–7.13(m,2H),7.09(s,1H),7.02(d,J=2.4Hz,1H),6.78(d,J=27.6Hz,2H),5.41(t,J=8.0Hz,1H),5.10–4.90(m,2H).
取圆底烧瓶,分别加入化合物A4-2(2.98mmol)900.0mg,铁粉(14.9mmol)832.2mg,氯化铵(29.8mmol)1.594g,MeOH/H2O(5/1),60℃反应5小时。TLC(DCM:MeOH=15:1),过滤,浓缩,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥,浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得化合物A-2,为白色固体421.7mg,产率52.0%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.33(d,J=8.0Hz,1H),7.30–7.19(m,3H),7.01(t,J=7.5Hz,1H),6.88(s,2H),6.79(s,1H),4.75(t,J=7.9Hz,1H),3.62–3.51(m,1H),3.39(dd,J=12.7,7.2Hz,1H).
取茄形瓶,加入化合物B-1(0.808mmol)123.7mg,化合物A-2(0.735mmol)200.0mg,HOBT(1.47mmol)198.6mg,DMAP(0.147mmol)17.9mg,EDC(1.47mmol)281.8mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-2,白色固体167.7mg,产率56.0%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.24(dd,J=13.6,8.1Hz,2H),7.11(dd,J=18.5,11.7Hz,2H),6.99–6.88(m,1H),6.87–6.72(m,2H),6.66(t,J=7.0Hz,1H),3.87(dd,J=12.9,7.3Hz,1H),3.67(dd,J=12.9,8.4Hz,1H),3.54(s,2H),2.70(s,3H).13CNMR(100MHz,Acetone-d6)δ169.37(s),137.64(s),131.69(d,J=15.8Hz),128.01(s),127.77(s),123.08(s),122.50(s),119.75(s),119.35(s),115.68(s),112.22(d,J=15.4Hz),111.93(s),104.52(s),104.27(s),46.23(s),43.68,40.37(s),35.83(s).
实施例3
化合物I-3,2-(甲基磺酰氨基)-N-(2-苯基-2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)乙基)乙酰胺
的制备
取圆底烧瓶,分别加入苯甲醛(30mmol)3.184g,MeNO2(300mmol)18.312g,醋酸铵(90mmol)6.937g,醋酸50mL,80℃反应5小时。将反应液倒入冰水中,析出固体,抽滤。得化合物A2-3,为黄色针状固体3.0g,产率67.1%
取圆底烧瓶,分别加入化合物A2-3(20mmol)3.343g,氮杂吲哚(26mmol)3.072g,NBS(2mmol)0.356g,THF60mL,60℃反应40小时。TLC(PE:EA=5:1),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(PE:EA=10:1)。得化合物A4-3,为黄色液体236.3mg,产率4.5%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.28(dd,J=4.7,1.3Hz,1H),7.78(ddd,J=18.1,7.9,1.3Hz,1H),7.27(dd,J=5.2,1.6Hz,2H),7.22(dd,J=5.1,2.0Hz,3H),7.18(d,J=3.7Hz,1H),6.99(dd,J=7.8,4.7Hz,1H),6.71(dd,J=9.4,6.0Hz,1H),6.42(d,J=3.6Hz,1H),5.65(dd,J=13.5,9.5Hz,1H),5.09(dd,J=13.5,6.0Hz,1H).
取圆底烧瓶,分别加入化合物A4-3(0.884mmol)236.3mg,铁粉(4.42mmol)245.4mg,氯化铵(8.84mmol)472.8mg,MeOH/H2O(5/1),加入2mol/L盐酸1mL,60℃反应5小时。TLC(DCM:MeOH=15:1),过滤,浓缩,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥,浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得化合物A-3,为黄色液体99.2mg,产率47.3%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ8.14(dd,J=4.8,1.4Hz,1H),7.89(dd,J=7.8,1.5Hz,1H),7.48(d,J=3.6Hz,1H),7.24–7.18(m,4H),7.18–7.12(m,1H),7.02(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),6.50(d,J=3.6Hz,1H),5.96(dd,J=9.6,5.5Hz,1H),3.65–3.55(m,1H),3.42(dd,J=13.6,5.5Hz,1H).
取茄形瓶,加入化合物B-1(0.63mmol)96.7mg,化合物A-3(0.42mmol)99.2mg,HOBT(0.84mmol)113.5mg,DMAP(0.084mmol)10.3mg,EDC(0.84mmol)161.0mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-3,为黄色液体90.0mg,产率57.6%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.25(dd,J=4.8,1.4Hz,1H),7.93(dd,J=7.8,1.5Hz,1H),7.63(s,1H),7.34–7.28(m,3H),7.26–7.20(m,3H),7.09(dd,J=7.8,4.8Hz,1H),6.49(d,J=3.6Hz,1H),6.20(td,J=9.8,4.4Hz,1H),5.51(t,J=5.9Hz,1H),4.42–4.23(m,1H),4.10–4.01(m,1H),3.61(dd,J=7.9,6.2Hz,2H),2.74(d,J=21.0Hz,3H).
实施例4
化合物I-4,N-(2-(1H-吲哚-3-基)-2-苯乙基)-2-(甲基磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取圆底烧瓶,分别加入化合物A2-3(8.0mmol)1.192g,吲哚(6.67mmol)0.781g,二水乙酸锌(0.667mmol)146.2mg,环己烷35mL,80℃反应14小时。TLC(PE:EA=4:1),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(PE:EA=8:1)。得化合物A4-4,为黄色油状物1.702g,产率95.9%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(s,1H),7.44(d,J=7.9Hz,1H),7.37–7.29(m,2H),7.25(s,1H),7.22–7.17(m,1H),7.10–6.99(m,1H),5.19(t,J=8.0Hz,1H),5.07(dd,J=12.5,7.6Hz,1H),4.94(dd,J=12.5,8.4Hz,1H).
取圆底烧瓶,分别加入化合物A4-4(6.40mmol)1.702g,铁粉(32.0mmol)1.787g,氯化铵(64.0mmol)3.423g,MeOH/H2O(5/1),60℃反应5小时。TLC(DCM:MeOH=15:1),过滤、浓缩,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=25:1)。得化合物A-4,为白色固体835.6mg,产率55.3%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.42(t,J=6.3Hz,2H),7.39–7.34(m,1H),7.32–7.27(m,1H),7.12(t,J=7.6Hz,1H),6.98(t,J=7.5Hz,1H),4.61(dd,J=17.2,9.0Hz,1H),3.74(dd,J=12.7,8.4Hz,1H),3.59(dd,J=12.7,7.8Hz,1H).
取茄形瓶,加入化合物B-1(0.953mmol)146.4mg,化合物A-4(0.635mmol)150.0mg,HOBT(1.27mmol)171.6mg,DMAP(0.127mmol)15.5mg,EDC(1.27mmol)243.5mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-4,为红棕色固体178.0mg,产率75.4%。
1HNMR(400MHz,Acetone-d6)δ10.05(s,1H),7.80(d,J=8.4Hz,1H),7.57(d,J=8.4Hz,1H),7.44–7.38(m,1H),7.31–7.27(m,1H),7.25(dd,J=7.7,6.2Hz,2H),7.19(s,1H),7.13(t,J=7.5Hz,1H),7.04(t,J=7.3Hz,1H),6.92(dd,J=11.1,4.0Hz,1H),6.82–6.75(m,1H),4.40(t,J=7.7Hz,1H),3.91(dd,J=13.1,7.8Hz,1H),3.74–3.66(m,1H),3.58(d,J=5.4Hz,1H),2.71(s,1H),2.43(s,1H).13CNMR(100MHz,MeOD)δ171.37(s),144.23(s),138.31(s),129.41(d,J=18.1Hz),128.31(s),127.41(s),122.95(s),122.60(s),119.96(s),119.75(s),118.47(s),117.04(s),112.35(s),111.60(s),46.37(s),45.56(s),43.85(s),40.55(s).
实施例5
化合物I-5:N-(2-(2-溴苯基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-(甲基磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取圆底烧瓶,分别加入2-溴苯甲醛(10.87mmol)2.0g,MeNO2(108.7mmol)6.635g,醋酸铵(32.61mmol)2.514g,醋酸50mL,80℃反应5小时。将反应液倒入冰水中,未析出固体,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(PE:EA=40:1)。得化合物A2-5,为黄绿色固体1.097g,产率44.5%。
取圆底烧瓶,分别加入化合物A2-5(2.20mmol)500.0mg,吲哚(1.84mmol)215.4mg,二水乙酸锌(0.184mmol)40.3mg,环己烷15mL,80℃反应14小时。TLC(PE:EA=3:1),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥,浓缩,柱层析分离(PE:EA=7:1)。得化合物A4-5,为粉色固体550.0mg,产率86.9%。
取圆底烧瓶,分别加入化合物A4-5(1.60mmol)550.0mg,铁粉(8.00mmol)446.8mg,氯化铵(16.00mmol)855.8mg,MeOH/H2O(5/1),60℃反应5小时。TLC(DCM:MeOH=15:1),过滤、浓缩,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=25:1)。得化合物A-5,为浅黄色油状物237.3mg,产率47.2%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.47(dd,J=8.0,1.1Hz,1H),7.28(d,J=8.0Hz,1H),7.23(d,J=8.2Hz,1H),7.12–7.03(m,2H),6.97–6.90(m,1H),6.83–6.78(m,1H),3.20(dt,J=3.3,1.7Hz,1H),3.19–3.14(m,1H),3.04(dd,J=12.8,6.6Hz,1H).
取茄形瓶,加入化合物B-1(0.405mmol)62.0mg,化合物A-5(0.27mmol)85.1mg,HOBT(0.54mmol)82.2mg,DMAP(0.054mmol)6.6mg,EDC(0.54mmol)103.5mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-5白色固体95.0mg,产率78.2%。
1HNMR(400MHz,Acetone-d6)δ10.21(s,1H),7.62(dd,J=8.0,1.2Hz,1H),7.43(d,J=8.0Hz,1H),7.41–7.32(m,2H),7.25(td,J=7.6,1.1Hz,1H),7.13(td,J=7.9,1.7Hz,1H),7.10–7.05(m,1H),6.98–6.91(m,1H),5.08(t,J=7.6Hz,1H),4.14–4.06(m,1H),3.82–3.76(m,1H),3.74(d,J=5.8Hz,1H),2.90(s,3H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ168.49(s),142.06(s),136.24(s),132.50(s),129.58(s),128.25(s),127.81(s),126.55(s),124.35(s),122.51(s),121.14(s),118.39(d,J=16.4Hz),114.96(s),111.46(s),45.03(s),43.14(s),40.96(s),40.25(s).
实施例6
化合物I-6:N-(2-(1H-吲哚-3-基)-2-苯基乙基)-2-((4-甲基苯基)磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取茄形瓶,加入N-对甲苯磺酰甘氨酸(购买自TCI公司(梯希爱(上海)化成工业发展有限公司))(0.953mmol)218.2mg,化合物A-4(0.635mmol)150.0mg,HOBT(1.27mmol)171.6mg,DMAP(0.127mmol)15.5mg,EDC(1.27mmol)243.5mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-6,为棕色固体121.0mg,产率42.6%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.90(s,1H),7.95(s,1H),7.73(d,J=8.3Hz,1H),7.63(d,J=8.3Hz,1H),7.34–7.30(m,1H),7.28(d,J=2.5Hz,1H),7.27–7.23(m,1H),7.23–7.15(m,1H),7.13–7.08(m,1H),6.96(dd,J=11.1,4.1Hz,1H),6.86(t,J=5.6Hz,1H),6.20(t,J=6.2Hz,1H),4.47(t,1H),3.96(m,1H),3.76(d,2H),3.71(d,J=5.3Hz,1H),3.50(d,1H),2.40(d,3H).13CNMR(100MHz,MeOD)δ170.84,145.11,144.81(s),144.19(s),138.71(s),138.37(s),138.05(s),130.79(d,J=14.6Hz),129.39(d,J=19.3Hz),128.20(s),127.58(s),122.93(s),122.57(s),120.01(s),119.69(s),116.95(s),112.32(s),45.49(s),44.89(s),43.79(s),40.42(s).
实施例7
化合物I-7:N-(2-(2-溴苯基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-((4-甲基苯基)磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取茄形瓶,加入N-对甲苯磺酰甘氨酸(0.65mmol)148.9mg,化合物A-5(0.43mmol)135.4mg,HOBT(0.86mmol)116.2mg,DMAP(0.086mmol)10.5mg,EDC(0.86mmol)164.9mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-7,为米白色粉末205.0mg,产率90.8%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(s,1H),7.62(d,J=8.3Hz,2H),7.56(dd,J=7.9,0.9Hz,1H),7.30(d,J=8.5Hz,2H),7.22(d,J=8.1Hz,2H),7.16–7.08(m,4H),7.04(dd,J=7.9,2.3Hz,1H),6.98(dd,J=11.3,4.3Hz,1H),6.52(t,J=5.7Hz,1H),5.40(t,J=6.2Hz,1H),3.92–3.82(m,1H),3.78–3.67(m,1H),3.39(d,J=6.1Hz,2H),2.38(s,3H).13CNMR(100MHz,Acetone-d6)δ168.41(s),144.23(s),143.01(s),138.05(s),137.68(s),133.63(s),130.54(d,J=6.3Hz),129.14(s),128.65(s),128.01(s),125.53(s),123.12(s),122.47(s),119.69(s),116.25(s),112.24(s),46.26(s),44.03(s),42.38(s),21.46(s).
实施例8
化合物I-8:N-(2-(4-氰基苯基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-(甲基磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取圆底烧瓶,分别加入对氰基苯甲醛(15.26mmol)2.0g,MeNO2(152.6mmol)9.315g,醋酸铵(45.78mmol)3.529g,醋酸50mL,80℃反应5小时。将反应液倒入冰水中,析出固体,抽滤。得化合物A2-8,为浅黄色固体2.5g,产率94.1%。
取圆底烧瓶,分别加入化合物A2-8(8.0mmol)1.393g,吲哚(6.67mmol)781.4mg,二水乙酸锌(0.667mmol)146.2mg,环己烷40mL,80℃反应14小时。TLC(PE:EA=3:1),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(PE:EA=6:1)。得化合物A4-8,为红棕色固体571.5mg,产率29.4%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.26(s,1H),7.61(d,J=8.3Hz,1H),7.45(d,J=8.3Hz,1H),7.37(t,J=9.0Hz,1H),7.23(dd,J=11.2,4.1Hz,1H),7.09(t,J=7.5Hz,1H),7.03(d,J=2.3Hz,1H),5.29–5.19(m,1H),5.08(dd,J=12.8,7.1Hz,1H),4.95(dd,J=12.8,8.8Hz,1H).
取圆底烧瓶,分别加入化合物A4-8(1.96mmol)571.5mg,铁粉(9.80mmol)547.3mg,氯化铵(19.60mmol)1.048g,MeOH/H2O(5/1),60℃反应5小时。TLC(DCM:MeOH=15:1),过滤、浓缩,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=25:1)。得化合物A-8,为红棕色固体195.3mg,产率38.2%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.47(d,J=8.3Hz,1H),7.36(d,J=8.2Hz,1H),7.23(dd,J=8.1,4.0Hz,1H),7.11(s,1H),6.96(dd,J=11.2,4.1Hz,1H),6.85–6.78(m,1H),4.26(t,J=7.6Hz,1H),3.28(dd,J=12.7,7.9Hz,1H),3.11(dd,J=12.7,7.4Hz,1H).
取茄形瓶,加入化合物B-1(0.63mmol)97.0mg,化合物A-8(0.42mmol)110.0mg,HOBT(0.84mmol)113.5mg,DMAP(0.084mmol)10.3mg,EDC(0.84mmol)161.0mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-8浅棕色固体133.0mg,产率80.0%。
1HNMR(400MHz,Acetone-d6)δ10.29(s,1H),7.94(d,J=8.4Hz,1H),7.72(d,J=8.4Hz,1H),7.67(d,J=8.3Hz,1H),7.58(d,J=8.2Hz,1H),7.56–7.53(m,1H),7.44(dd,J=8.3,1.0Hz,1H),7.41–7.37(m,2H),7.08(dd,J=11.2,4.2Hz,1H),6.94(dd,J=11.4,4.4Hz,1H),4.67(t,J=7.7Hz,1H),4.09–4.03(m,1H),3.94–3.86(m,1H),3.71(d,J=5.5Hz,2H),2.88(s,3H).13CNMR(100MHz,Acetone-d6)δ150.01(s),137.71(s),132.85(s),130.25–130.05(m),128.09(s),125.49(s),122.55(s),120.05–119.10(m),115.86(s),112.34(s),110.92(s),110.43(s),46.27(s),44.46(s),43.74(s),40.38(s).
实施例9
化合物I-9:N-(2-(4-氟苯基)-2-(1H吲哚-3-基)乙基)-2-((4-甲基苯基)磺酰)乙酰胺
的制备
取茄形瓶,加入化合物B-2(0.59mmol)135.7mg,化合物A-1(0.395mmol)100.0mg,HOBT(0.79mmol)106.7mg,DMAP(0.079mmol)9.7mg,EDC(0.79mmol)151.4mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-9,为固体粉末128.5mg,产率66.7%。
1HNMR(400MHz,Acetone-d6)δ10.19(s,1H),7.96(s,1H),7.72(d,J=8.3Hz,2H),7.39(d,J=2.7Hz,1H),7.37(d,J=3.2Hz,2H),7.36(s,1H),7.34(d,J=3.1Hz,1H),7.30(d,J=1.6Hz,1H),7.08(d,J=8.0Hz,1H),7.01(t,J=8.9Hz,1H),6.93(dd,J=11.4,4.4Hz,1H),6.64(s,1H),4.46(t,J=7.6Hz,1H),4.01–3.92(m,1H),3.77–3.68(m,1H),3.47(d,J=5.3Hz,2H),2.40(s,3H).13CNMR(100MHz,MeOD)δ170.76(s),164.88(s),164.20(s),161.78(s),145.12(s),140.14(s),138.38(s),138.04(s),131.25–130.77(m),128.18(d,J=7.2Hz),122.91(s),122.68(s),119.89(d,J=16.6Hz),116.82(s),116.11(s),115.90(s),112.40(s),46.42(s),45.49(s),43.06(s),36.99(s).
实施例10
化合物I-10:N-(2-(2,4-二氟苯基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-((4-甲基苯基)磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取茄形瓶,加入化合物B-2(0.55mmol)126.0mg,化合物A-2(0.37mmol)100.0mg,HOBT(0.74mmol)100.0mg,DMAP(0.074mmol)9.0mg,EDC(0.74mmol)141.8mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物土黄色固体251.3mg,产率69.7%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s,1H),7.69(d,J=8.1Hz,1H),7.58(d,J=8.1Hz,2H),7.29(d,J=7.8Hz,2H),7.23(d,J=8.0Hz,1H),7.18(d,J=8.0Hz,2H),7.15–7.08(m,2H),6.84(t,J=5.3Hz,1H),6.75(t,J=8.5Hz,1H),6.64(t,J=8.1Hz,1H),4.67(t,J=7.4Hz,1H),3.87–3.79(m,1H),3.74(dd,J=12.8,6.4Hz,1H),3.41(d,J=5.6Hz,2H),2.34(s,3H).13CNMR(100MHz,Acetone-d6)δ170.98(s),144.24(s),144.00(s),138.07(s),137.65(s),130.45(d,J=8.8Hz),127.95(d,J=5.8Hz),123.05(s),122.47(s),119.72(s),119.36(s),115.65(s),112.19(d,J=18.7Hz),111.85(s),46.24(s),44.57(s),43.59(s),36.25(s).
实施例11
化合物I-11:N-(2-(4-溴苯基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-((4-甲基苯基)磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取圆底烧瓶,分别加入对溴苯甲醛(10.87mmol)2.0g,MeNO2(108.7mmol)6.635g,醋酸铵(32.61mmol)2.514g,醋酸50mL,80℃反应5小时。将反应液倒入冰水中,析出固体,抽滤。得化合物A2-11,为黄色固体1.130g,产率44.9%。
取圆底烧瓶,分别加入化合物A2-11(1.84mmol)215.4mg,吲哚(2.20mmol)500.0mg,二水乙酸锌(0.184mmol)40.3mg,环己烷25mL,80℃反应14小时。TLC(PE:EA=5:1),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(PE:EA=10:1)。得化合物A4-11,为黄色油状物444.0mg,产率70.1%。
取圆底烧瓶,分别加入化合物A4-11(1.29mmol)444.0mg,铁粉(6.45mmol)360.2mg,氯化铵(12.90mmol)690.0mg,MeOH/H2O(5/1),60℃反应5小时。TLC(DCM:MeOH=15:2),过滤、浓缩,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=20:1)。得化合物A-11,为淡黄色固体80.0mg,产率20.0%。
1HNMR(400MHz,MeOD)δ7.28(d,J=8.4Hz,1H),7.23(dd,J=8.1,2.3Hz,1H),7.10(d,J=8.4Hz,1H),7.05(s,1H),6.96(t,J=7.5Hz,1H),6.81(t,J=7.6Hz,1H),4.14(t,J=7.6Hz,1H),3.27–3.22(m,1H),3.06(dd,J=12.6,7.6Hz,1H).
取茄形瓶,加入化合物B-2(0.306mmol)70.0mg,化合物A-11(0.255mmol)80.0mg,HOBT(0.51mmol)68.9mg,DMAP(0.051mmol)6.2mg,EDC(0.51mmol)97.8mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-11,为棕黄色油状物83.1mg,产率73.9%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.69(s,1H),7.90(s,1H),7.61(d,J=8.2Hz,2H),7.33(t,J=8.7Hz,3H),7.20(d,J=7.2Hz,1H),7.08–7.05(m,3H),6.95(t,J=7.4Hz,1H),6.87(t,J=5.6Hz,1H),6.19(t,J=6.1Hz,1H),4.33(t,J=7.5Hz,1H),3.84(dd,J=10.5,4.8Hz,1H),3.75(dd,J=13.3,6.6Hz,1H),3.42(d,J=6.1Hz,2H),2.35(s,3H).13CNMR(100MHz,Acetone-d6)δ168.48(s),144.25(s),143.64(s),138.09(s),137.75(s),132.12(s),131.23(s),130.46(d,J=10.5Hz),127.97(d,J=8.1Hz),122.78(s),122.42(s),120.49(s),119.68(d,J=14.5Hz),116.47(s),112.23(s),46.25(s),44.68(s),43.05(s),36.26(s).
实施例12
化合物I-12:N-(2-(4-溴苯基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-(甲基磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取茄形瓶,加入化合物B-1(0.61mmol)93.8mg,化合物A-11(0.407mmol)127.9mg,HOBT(0.81mmol)109.4mg,DMAP(0.081mmol)9.9mg,EDC(0.81mmol)156.0mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-12,为棕红色固体粉末64.0mg,产率36.1%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.62(s,1H),7.83–7.67(m,2H),7.48–7.37(m,2H),7.32(d,J=6.8Hz,2H),7.10(d,J=7.5Hz,2H),6.96(t,J=7.2Hz,1H),6.84(s,1H),4.36(d,J=7.2Hz,1H),4.21–4.03(m,1H),3.95–3.75(m,2H),3.67(s,1H),2.17(s,3H).13CNMR(100MHz,MeOD)δ171.38(s),143.59(s),138.33(s),132.49(s),131.35(s),128.40(s),128.10(s),127.32(s),122.98(s),122.69(s),121.18(s),119.84(s),116.43(s),112.38(s),111.50(s),46.33(s),45.29(s),43.35(s),40.49(s).
实施例13
化合物I-13:N-(2-(4-氰基苯基)-2-(1H-吲哚-3-基)乙基)-2-((4-甲基苯基)磺酰氨基)乙酰胺
的制备
取茄形瓶,加入化合物B-2(0.57mmol)131.6mg,化合物A-8(0.38mmol)100.0mg,HOBT(0.76mmol)102.3mg,DMAP(0.076mmol)9.3mg,EDC(0.76mmol)145.7mg,通入氩气,加入无水DMF,室温搅拌过夜。TLC(DCM:MeOH=15:1),用乙酸乙酯萃取(30mL×3),饱和食盐水和无水硫酸钠干燥。浓缩,柱层析分离(DCM:MeOH=30:1)。得产物I-13,为灰色固体166.2mg,产率90.5%。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.59(s,1H),7.60(d,J=8.0Hz,2H),7.44(d,J=8.0Hz,2H),7.30(t,J=7.4Hz,3H),7.20(d,J=7.9Hz,3H),7.17–7.08(m,2H),6.97(t,J=7.5Hz,1H),6.86(t,J=5.4Hz,1H),5.79(t,J=5.9Hz,1H),4.42(t,J=7.4Hz,1H),3.87–3.72(m,1H),3.41(d,J=5.9Hz,2H),2.36(s,3H).13CNMR(100MHz,CDCl3)δ168.73–168.53(m),147.72(s),144.30(s),136.57(s),135.45(s),132.38(s),129.99(s),128.88(s),127.09(s),126.41(s),122.50(s),122.23(s),119.69(s),118.94(s),114.53(s),111.64(s),110.35(s),45.69(s),43.60(s),42.60(s),21.58(s).
药理活性筛选实验
我们对所合成的化合物进行了如下的抗癌活性测试,以上化合物普遍表现出一定的抗癌活性。
抗癌活性测试采用的是MTT法(J.Med.Chem.2015,58(11),4550-4572.)。MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,是一种黄颜色的染料。MTT法可用于细胞增殖及细胞活性的测定。
MMT法的检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值,在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值),来判断活细胞数量,OD值越大,细胞活性越强(如果是测药物毒性,则表示药物毒性越小)。
MTT法实验步骤:(1)收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100uL,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充);(2)5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板,次日上午加药.一般5-7个梯度,每孔100uL,设3-5个复孔.建议设5个,否则难以反应真实情况;(3)5%CO2,37℃孵育16-48小时,倒置显微镜下观察;(4)每孔加入20uLMTT溶液(5mg/mL,即0.5%MTT),继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用PBS冲2-3遍后,再加入含MTT的培养液;(5)终止培养,小心吸去孔内培养液;(6)每孔加入150uL二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值;(7)同时设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)。
IC50(halfmaximalinhibitoryconcentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一药物或者物质(抑制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物)的半量。在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药物诱导肿瘤细胞凋亡50%,该浓度称为50%抑制浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比为50%时所对应的浓度。IC50值越小,说明药物对肿瘤的抑制活性越好。
下面主要针对DU-145和MCF-7两种细胞进行活性测试(测试单位:武汉大学药学院)。从表一化合物的活性测试结果中,我们发现苯并氮杂环为吲哚时,苯环上含2个氟原子的化合物I-2对DU-145的活性最好),其IC50为13.45uM。而苯环上含溴的化合物I-10对MCF-7的抑制活性最好,其IC50为10.96uM,活性最好。对于DU-145,磺酰胺基团上苯环含有-Me时,活性一般都比较好,例如化合物I-1、化合物I-2、化合物I-3和化合物I-5(化合物I-4、I-8和I-12例外);对于MCF-7细胞系,磺酰胺基团上苯环含有Me时,活性也一般都比较好,例如化合物I-6、I-7、I-9、I-10、I-11和I-13。化合物I-3的苯并氮杂环为氮杂吲哚时,同时对DU-145和MCF-7细胞具有较好的活性。
由于前列腺癌与乳腺癌有着极其密切的联系,该类化合物对DU-145和MCF-7细胞均具有较好的活性,因此我们可以预测出该类化合物对膀胱癌、宫颈癌、卵巢癌等也有一定的抑制活性。
表一、化合物活性测试结果
测试单位:武汉大学药学院
在本说明书的描述中,参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中,对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且,描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例,本领域的普通技术人员可以理解:在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由权利要求及其等同物限定。

Claims (8)

1.一种化合物,其特征在于,所述化合物为式I所示化合物或式I所示化合物的对映异构体、非对映异构体、外消旋体、药学上可接受的盐、结晶水合物或溶剂合物,
其中,
R1为任选取代的苯基;
R2为对甲基苯基、甲基;
X为C或N。
2.根据权利要求1所述的化合物,其特征在于,R1为苯基,至少一个卤素取代的苯基,氰基取代的苯基。
3.根据权利要求2所述的化合物,其特征在于,所述卤素为F、Cl或Br。
4.根据权利要求1所述的化合物,其特征在于,所述化合物为下列化合物或者所述下列化合物的对映异构体、非对映异构体、外消旋体、药学上可接受的盐、结晶水合物或溶剂合物:
5.一种制备权利要求1~4任一项所述化合物的方法,其特征在于,包括:
(1)使式A1所示化合物与硝基甲烷进行接触,以便获得式A2所示化合物;
(2)使所述式A2所示化合物与式A3所示化合物进行接触,以便获得式A4所示化合物;
(3)使所述式A4所示化合物进行还原反应,以便获得式A所示化合物;
(4)使式B1所示化合物与甘氨酸乙酯盐酸盐进行接触,以便获得式B2所示化合物;
(5)使所述式B2所示化合物进行水解反应,以便获得式B所示化合物;
(6)使所述式A所示化合物与所述式B所示化合物进行接触,以便获得式Ⅰ所示化合物;
其中R1、R2、X是如权利要求1~4任一项中所定义的。
6.一种药物组合物,其特征在于,包括:权利要求1~4任一项所述的化合物。
7.权利要求1~4任一项所述的化合物或权利要求6所述的药物组合物在制备药物中的用途,所述药物用于治疗癌症。
8.根据权利要求7所述的药物组合物的制备药物中的用途,所述癌症为脑癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌、宫颈癌、结肠癌、乳腺癌和前列腺癌。
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