CN105025891B - Hmb和atp的组合物及使用方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供包含HMB和ATP的组合物。还描述向动物给药HMB和ATP的方法。给药HMB和ATP以增加爆发力和力量。HMB和ATP一起的组合具有协同作用，这导致令人惊奇和预料不到的爆发力和力量的改善水平。还给药HMB和ATP以增加瘦体重和肌肥厚，并防止过度训练特征性行为表现的典型降低。

Description

HMB和ATP的组合物及使用方法

本申请要求2012年9月10日提交的序列号为61/698,919的美国专利申请的优先权，将其以其整体援引加入本文。

发明背景

技术领域

本发明涉及包含β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)和腺苷-5′-三磷酸(ATP)的组合物，以及使用HMB和ATP的组合以改善力量和爆发力(power)、改善肌肉量并防止或减少过度训练(overreaching)特征性行为表现的典型降低的方法。

技术背景

HMB

亮氨酸代谢的唯一产物是酮异己酸(KIC)。KIC代谢的次要产物是β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)。已经发现HMB在多种应用环境中是有用的。具体而言，在第5,360,613号美国专利(Nissen)中，HMB被记载为用于降低血液的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的水平。在第5,348,979号美国专利(Nissen等人)中，HMB被记载为用于促进人体内的氮滞留。第5,028,440号美国专利(Nissen)讨论了HMB增加动物中的无脂肪组织形成的有用性。而且，在第4,992,470号美国专利(Nissen)中记载HMB有效增强哺乳动物的免疫应答。第6,031,000号美国专利(Nissen等人)记载了HMB和至少一种氨基酸治疗与疾病相关的消瘦的用途。

HMB是亮氨酸这一氨基酸的活性代谢物。使用HMB来抑制蛋白酶解是源自亮氨酸具有蛋白质节约特性的观察结果。亮氨酸这一必需氨基酸可以被用于蛋白质合成或经诱导转氨形成α-酮酸(α-酮异己酸，KIC)。在一种途径中，KIC可被氧化成HMB。大约5％的亮氨酸氧化通过第二途径进行。HMB在提高肌肉量和力量上优于亮氨酸。HMB在3.0g/日或0.038g/kg体重/日下可实现最佳效果，而亮氨酸则需要超过30.0g/日。

一旦产生或摄入，HMB似乎有两种结果。第一种结果是简单地在尿中排泄。饲喂HMB后，尿浓度增加，导致大约20-50％的HMB损失到尿中。另一种结果涉及HMB被活化成HMB-CoA。一旦转化成HMB-CoA，可发生进一步的代谢：或者HMB-CoA脱水形成MC-CoA，或者HMB-CoA直接转化成HMG-CoA，它为细胞内胆固醇合成提供底物。数项研究已经证明，HMB参与胆固醇合成途径，并且可以是用于受损细胞膜再生的新细胞膜的来源。人体研究已经证明，在补充HMB的前48小时之内，由升高的血浆CPK(肌酸磷酸激酶)测量，剧烈运动后的肌肉损伤减少。在连续每日使用下，HMB的保护作用持续长达三周。许多研究已经表明HMB的有效剂量是以CaHMB(HMB钙)的形式3.0g/日(约38mg/kg体重/日)。该剂量增加与抗阻训练(resistance training)相关的肌肉量和力量获得，同时最小化与剧烈运动相关的肌肉损伤(34)(4，23，26)。已测试了HMB的安全性，表明对于健康的年轻人或老年人没有副作用。已经证明，向AIDS和癌症患者补充HMB与L-精氨酸和L-谷氨酰胺的组合也是安全的。

最近，已经研发了HMB的新递送形式：HMB游离酸。这种新的递送形式已被证明具有比CaHMB更快的吸收以及更好的组织清除率。新的递送形式在第20120053240号美国专利公开中描述，将其以其整体援引加入本文中。

ATP

长期以来，已知腺苷-5′-三磷酸(ATP)是包括肌肉的组织的化学能来源(19)。与细胞外浓度(10-100nM)相比，细胞内ATP浓度(1-10mM)是相当高的，因此，从诸如红细胞的细胞与肌肉释放ATP是严格受控的。最近已经得出ATP的细胞外作用：通过在大部分细胞类型中发现的嘌呤受体起作用(20)。已经记载了ATP的数种细胞外的生理功能，其包括血管舒张(21)、减少疼痛感(22)以及作为神经传递的共同递质(cotransmitter)(23，24)。重要的是，肌肉中的血管ATP的少量且短暂的增加可导致血管舒张以及向肌肉的血流量增加(25)。因此，如果ATP增加向肌肉的血流量，特别是在艰苦的抗阻训练期间，底物可用性会得到改善，并会更好地有助于移除代谢废物。Ellis等人最近综述了支持ATP通过嘌呤信号转导和神经传递来增加肌肉血流量的作用的研究(25)。

已证明ATP具有ATP对心肌的收缩能效应(inotrophic effect)(26，27)。另一项支持ATP的全身效应的研究证明，向兔口服给药ATP 14天导致外周血管阻力降低、心输出量提高、肺阻力减少并且动脉PaO₂增加(28)。

ATP降解所产生的腺苷也可以作为通过嘌呤受体的信号转导剂起作用(29)，或者可被腺苷脱氨酶降解(30)。通过嘌呤受体起作用的腺苷可基本上模拟ATP的作用(29)。向肌肉中输注腺苷导致一氧化氮的形成增加以及与ATP输注所见相似的血管效应(31)。

在体育运动中，在重复多次高强度运动中的抗疲劳性是极受追求的属性。这对于增加训练量，以及在诸如曲棍球的间歇运动中的持续的力量和功率输出都是适用的。在令人疲劳的收缩中，产生血流量的急性适应以避免力量生成能力的下降(40，45)。在骨骼肌需氧量和血流量增加之间具有紧密的结合(coupling)(45)。研究表明，是红细胞通过作为“氧传感器”起作用来调节该应答(45)。ATP被携带在红细胞中，当在工作肌肉区域中氧含量低时，红细胞变形，导致级联事件，这引起ATP释放并结合到平滑肌的内皮细胞(43)。结合导致平滑肌松弛以及随后的血流量、营养和氧输送的增加(43)。具体而言，细胞外ATP直接促进骨骼肌内一氧化氮(NO)与前列环素(PGl₂)的合成和释放的增加，并因此直接影响组织的血管舒张和血流量(31)。这得到研究的支持，所述研究表明响应于动脉内输注(47)和外源性给药ATP，血管舒张和血流量增加。这些血流量的变化可能导致由于葡萄糖和O₂摄取增加而引起的骨骼肌的底物池的增加(42)。结果是在令人疲劳的收缩下，细胞能量状态的维持(54，56)。

ATP的生理作用已使得研究者研究口服补充ATP的效力(24)。Jordan等人(32)证明：每日补充225mg肠溶包衣的ATP持续15天，导致总平卧推举量(bench press liftingvolume)(即组·重复·负荷(sets·repetitions·load))以及组内第一套重复至衰竭(within-group set-one repetitions to failure)增加。最近，Rathmacher等人(52)发现，补充ATP(400mg/日)持续15天，增加第二套的膝伸肌回合(set two of a kneeextensor bout)的最小峰值转矩。总之，所讨论的结果表明，在高度令人疲劳的条件下，补充ATP保持行为表现并增加训练量。然而，更强的疲劳增加训练阶段之间的恢复需求。

目前的证据表明，HMB通过在高强度或长时间运动后加快骨骼肌再生能力来起作用(3)。当控制训练和/或饮食时，HMB能够剂量依赖性地降低骨骼肌损伤和蛋白质分解的指数(50，3，2)。最近，研发出具有改善的生物利用度的游离酸形式的HMB(HMB-FA)(18)。初步研究表明，与目前可用的形式(HMB钙)相比，这种形式的HMB补充在给药后约四分之一的时间内使得血浆中的HMB水平大约加倍。

另外，在剧烈的大量抗阻训练回合前30分钟给予的HMB-FA能够减小肌肉损伤指数并改善抗阻训练的运动员的感知恢复(61)。此外，急性摄入2.4gHMB-FA分别使骨骼肌蛋白质合成增加±70％并使蛋白质分解减少-56％(58)。

存在对于增加力量和爆发力以及改善肌肉量的组合物和方法的需求。此外，存在对于防止或减少过度训练周期后行为表现上可见的典型衰退的组合物的需求。本发明包括使用ATP和HMB的组合的组合物和方法，其导致这些改进。

发明概述

本发明的一个目的是提供用于增加力量和爆发力的组合物。

本发明的另一目的是提供用于改善肌肉量的组合物。

本发明的另一目的是提供给药用于增加力量和爆发力的组合物的方法。

本发明的另一目的是提供给药用于改善肌肉量的组合物的方法。

本发明的另一目的是提供用于防止或减少过度训练周期后行为表现上可见的衰退的组合物。

对于本领域的技术人员，在参照以下的说明书、附图和权利要求书之后，本发明的这些和其它目的会是明显的。

本发明意图克服迄今所遇到的困难。为此目的，提供包含HMB和ATP的组合物。将所述组合物向需要其的动物给药。所有方法包括向动物给药HMB和ATP。

附图简述

图1是列出在整个研究中测量的变量和时间点的训练计划阶段的图示。

图2显示总力量(1-RM)在8、10、12周的变化。

图3a-c显示下蹲力量和卧推力量的变化。

图4a-c显示垂直跳跃爆发力和Wingate峰值功率(peak power)增加的百分比。

发明详述

已令人惊奇地且不可预料地发现与单独使用HMB或ATP相比，HMB与ATP的组合导致力量、爆发力和肌肉量的更大增加。本发明包括HMB和ATP的组合，其具有协同效应，并增加力量和爆发力。本发明还包括HMB和ATP的组合，其具有改善肌肉量的预料不到且令人惊奇的结果。本发明还包括HMB和ATP的组合，其具有防止或减少过度训练周期后行为表现上可见的典型衰退的预料不到且令人惊奇的结果。HMB和ATP的组合导致显著的增强。

该组合可以用于寻求增加力量和爆发力、增加肌肉量以及防止或减少过度训练周期后行为表现上可见的典型衰退的所有年龄组。

据此，在一个实施方案中，本发明提供包含HMB和ATP的组合物。

HMB

β-羟基-β-甲基丁酸，或β-羟基异戊酸可以其游离酸形式(CH₃)₂(OH)CCH₂COOH来表示。术语“HMB”指具有前述化学式的其游离酸和盐形式的化合物及其衍生物。虽然任何形式的HMB都可在本发明的上下文中使用，优选的HMB选自游离酸、盐、酯和内酯。HMB酯包括甲酯和乙酯。HMB内酯包括异戊内酯(isovalaryl lactone)。HMB的盐包括钠盐、钾盐、铬盐、钙盐、镁盐、碱金属盐和碱土金属盐。

制备HMB及其衍生物的方法是本领域中公知的。例如，HMB可通过双丙酮醇的氧化来合成。一种合适的方法由Coffman等人在J.Am.Chem.Soc.80：2882-2887(1958)中记载。如本文中所述，HMB由双丙酮醇的碱性次氯酸钠氧化来合成。该产物以游离酸的形式回收，可将其转化为盐。例如，HMB可以通过类似于Coffman等人(1958)的方法(其中将HMB的游离酸用氢氧化钙中和，然后通过从乙醇水溶液中结晶来回收)以其钙盐的形式制备。HMB的钙盐可商购自Metabolic Technologies，Ames，Iowa。

β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)钙的补充

二十多年以前，HMB的钙盐被开发成人的营养补剂。众多的研究已经表明，CaHMB补充与抗阻运动训练相结合，改善肌肉量和力量获得，并减轻在诸如癌症和AIDS等条件下的肌肉量损失(1-5)。Nissen和Sharp进行了与抗阻训练结合使用补充剂的荟萃分析(meta-analysis)，并发现HMB是使临床研究显示出在抗阻训练下力量和瘦体重(lean mass)显著增加的仅有的两种补剂之一(1)。研究表明，38mg/kg体重的CaHMB似乎是普通人的有效剂量(6)。

除了力量和肌肉量获得，CaHMB补充还降低肌肉损伤和蛋白质降解的指标。人体研究表明，通过HMB补充，剧烈运动后的肌肉损伤减少(由升高的血浆CPK(肌酸磷酸激酶)测量)。已证明，在持续每日使用下，HMB的保护作用表现持续至少三周(6-8)。分离的大鼠肌肉的体外研究表明，HMB是肌肉蛋白酶解的有效抑制剂(9)，特别是在应激期间中。这些研究发现已经在人体中确证，例如，HMB抑制从事抗阻训练的个体的肌肉蛋白酶解(3)。

已报道HMB减少蛋白质分解和增加蛋白质合成的分子机制(10，11)。Eley等人进行的体外研究已证明，HMB通过mTOR磷酸化刺激蛋白质合成(11，12)。其他研究已经表明，当肌肉蛋白分解代谢由蛋白酶解诱导因子(PIF)、脂多糖(LPS)以及血管紧张素II刺激时，HMB通过减弱泛素-蛋白酶体蛋白酶解途径的诱导来降低蛋白酶解(10，13，14)。还有其他的研究已经表明，HMB还减弱半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8蛋白酶的激活(15)。总之，这些研究表明，HMB补充通过降低蛋白酶解和增加蛋白质合成的结合，增加瘦体重以及伴随的力量获得。

HMB游离酸形式

在大多数情况下，临床研究中使用的以及作为爆发力增进助剂销售的HMB为钙盐的形式(3，16)。最近的进展已经将HMB制备为游离酸的形式以用作营养补剂。最近，开发了HMB的新游离酸形式，证明其比CaHMB更快地被吸收，导致更快和更高的峰值血清HMB水平和改善的清除到组织清除率(18)。

因此，HMB游离酸可以是比钙盐形式更有效的给药HMB的方法，特别是在立即进行剧烈运动之前给药。与CaHMB相比，在急性运动回合前30分钟引入HMB游离酸对于减弱肌肉损伤和改善炎症应答是更有效的。然而，本领域普通技术人员会认识到本发明涵盖任何形式的HMB。

任何形式的HMB都可被掺入到递送和/或给药形式中，所述掺入方式得到约0.5gHMB至约30g HMB的典型的剂量范围。

腺苷-5′-三磷酸(ATP)

补充腺苷-5′-三磷酸(ATP)已被用于提高细胞外的ATP水平。研究未能表明当与抗阻训练运动结合时，ATP对于改善力量或爆发力的一致的积极作用；然而，已证明全身ATP的少量和短暂增加提高肌肉组织中的血流量。

ATP的口服给药通常是以腺苷-5′-三磷酸二钠盐的形式。在本发明中，可将适于口服给药的腺苷-5′-三磷酸二钠盐或任何形式的ATP或腺苷与任何已知的适合赋予颗粒形式肠溶性的包衣结合。

可将ATP掺入到递送和/或给药形式中，所述掺入方式得到约10mg至约80g的典型的剂量范围，尽管根据应用和其他成分，或多或少可以是期望的。

将HMB和ATP的组合物以任意合适的方式向动物给药。可接受的形式包括但不限于：固体，例如片剂或胶囊剂；和液体，例如肠内或静脉内溶液剂。此外，可将所述组合物利用任意药学上可接受的载体给药。药学上可接受的载体是本领域熟知的，并且这样的载体的实例包括多种淀粉和盐水溶液。在优选实施方案中，可将所述组合物以可食用的形式给药。此外，可将有效剂量范围以分开的剂量给药，例如每天二至三次。

ATP与HMB组合

任何合适剂量的HMB均可以在本发明的上下文中使用。计算适当剂量的方法是本领域公知的。HMB的剂量可以相应的Ca-HMB的摩尔量来表示。可以口服或静脉内给药的HMB的剂量范围为每24小时每千克体重0.01-0.5gHMB(Ca-HMB)。对于成年人，假定体重为约100-200lbs.，HMB(基于Ca-HMB)的口服或静脉内剂量可为每24小时每位个体0.5-30g。

ATP以任意形式存在于所述组合物中。本发明的ATP的范围包括约10mg至约80g的量的ATP。

当将所述组合物以可食用形式口服给药时，所述组合物优选为饮食补充剂、食品或药物介质的形式，更优选为饮食补充剂或食品的形式。任何包含所述组合物的合适的饮食补充剂或食品可在本发明的上下文中使用。本领域普通技术人员会理解，无论所述组合物为何种形式(例如饮食补充剂、食品或药物介质)，其可包含氨基酸、蛋白质、肽、碳水化合物、脂肪、糖、矿物质和/或微量元素。

为了制备饮食补充剂或食品形式的组合物，通常会将所述组合物以使得所述组合物基本上均匀地分散在饮食补充剂或食品中的方式组合或混合。或者，可将所述组合物在诸如水的液体中溶解。

饮食补充剂的组合物可以是粉末、凝胶、液体，或者可被压片或装入胶囊。

虽然在本发明的上下文中可以利用包含所述组合物的任何合适的药物介质，但是优选地，将所述组合物与诸如葡萄糖或蔗糖的合适的药物载体组合。

此外，可将药物介质的组合物以任何合适的方式静脉内给药。对于通过静脉内输注的给药，所述组合物优选为水溶性的无毒形式。静脉内给药特别适合于正在进行静脉内(IV)治疗的住院患者。例如，可将所述组合物在向患者给药的IV溶液(例如盐水或葡萄糖溶液)中溶解。此外，可将所述组合物加入到营养IV溶液中，所述营养IV溶液可包含氨基酸、肽、蛋白质和/或脂质。静脉内给药的组合物的量可以与口服给药所使用的水平相似。与口服给药相比，静脉内输注可以是更受控制且更准确的。

计算组合物给药的频率的方法是本领域公知的，在本发明的上下文中，可以使用任何合适的给药频率(例如，每天一次6g剂量，或者每天两次3g剂量)并且在任何合适的时间段内(例如，单剂量可以在5分钟的时间段或1小时的时间段内给药，或者，多剂量可在延长的时间段内给药)。HMB和ATP的组合可在延长的时间段(例如数周、数月或数年)给药。

本领域普通技术人员会理解，HMB和ATP不是必须在相同的组合物中给药以实施所请求保护的方法。换言之，可向个体给药ATP和HMB的分开的胶囊剂、丸剂、合剂等，以实施所请求保护的方法。

任何合适剂量的HMB可在本发明的上下文中使用。计算适当剂量的方法是本领域熟知的。同样地，任何合适剂量的ATP可在本发明的上下文中使用。计算适当剂量的方法是本领域熟知的。

一般性地描述了足以增加力量和爆发力的HMB和ATP的量的水平。单独的HMB游离酸以及HMB游离酸加ATP补充都增加比用安慰剂补充所观察到的更高的(p＜0.001，处理*时间)力量和爆发力获得。令人惊奇地，事后分析(post hoc analysis)表明，与单独的HMB补充相比，HMB加ATP补充显著地进一步改善力量和爆发力获得(p＜0.05)。以下实验实施例表明，HMB对于力量、爆发力和肌肉量确实具有积极的作用，并减少肌肉损伤，同时帮助恢复。令人惊奇地，与单独的HMB相比，HMB加ATP的组合甚至导致力量和爆发力的更大地改善，并且这些作用是协同的。此外，HMB-ATP组合还对肌肉量以及过度训练特征性行为表现的降低表现出令人惊奇和预料不到的效果。

实验实施例

下面的实施例会更详细地说明本发明。容易理解的是，如本文中一般性描述和在实施例所说明的本发明的组合物可以多种制剂和剂型的形式合成。因此，下文中对于本发明的方法、制剂和组合物的目前优选的实施方案的更详细的描述不意图限制本发明的范围(如所请求保护的)，而其仅是本发明的目前优选的实施方案的代表。

在实施例中，过度训练是导致行为表现降低的增加的训练量和/或运动强度。从该状态恢复通常需要数天到一周，或者更长时间。许多结构化的训练程序利用过度训练阶段来诱导适应性反应。

瘦体重(LBM)和增肌(hypertrophy increase)被用作改善肌肉量的指标。

研究设计

本研究是随机、双盲、有安慰剂对照(controlled)和饮食控制(controlled)的实验，其由12周的分期抗阻训练组成。训练方案被分成3个阶段(表1、2和3)。第1阶段由Kraemer等人(36)修改得到的非线性分期抗阻训练方案(每周3次)组成(表1)。

表1.训练周期的第1阶段(周内起伏式分期(Daily UndulatingPeriodization))。

第2阶段(表2)由两周过度训练周期组成。

表2：训练周期的第2阶段(过度训练)。

最后，第3阶段由第11周和第12周的逐渐减小的训练量组成(表3)。

表3训练周期的第3阶段(逐渐减小)。

在第0、4、8、9、10和12周结束时一起检查肌肉量、身体成分、力量、爆发力、静息血浆睾酮、皮质醇浓度和肌酸激酶，以评估HMB-ATP的慢性作用；还在第9周和第10周结束时(其对应于过度训练周期第2阶段的中间点和末端点)对这些进行评估。在图1中总结该研究设计的概述。

参与者

为所述研究招募了40位年龄为23.0±0.9岁的经抗阻训练的男性，其平均蹲、卧举和硬举次数为他们体重的1.7±0.04、1.3±0.04和2.0±0.05倍。表4中示出了个体的特点。如果参与者当下正在服用消炎剂、任何其他增强行为表现的补充剂或者吸烟的话，则其不能参加。在参与研究之前，每位参与者签署经University of Tampa InstitutionalReview Board批准的知情同意书。

表4个体描述

肌肉力量、爆发力、身体成分和骨骼肌增大测试

熟悉过程后，通过1RM背蹲、卧举和硬举测试来评估肌肉力量。根据InternationalPowerlifting Federation规则(44)，进行每次推举(lift)。通过双能X射线吸光测定仪(DXA；Lunar Prodigy enCORE 2008，Madison，Wisconsin，u.S.A.)测定身体成分(瘦体重、脂肪量和总重量)。通过超声检查测定的股外侧肌(VL)和股中间肌(VI)的肌厚度的组合变化来测定骨骼肌增大。肌厚度测量值的再测信度(test-retest)的同类相关系数(ICC)为r＝0.97。

在全力骑车测试(maximal cycling，Wingate测试)和跳跃运动期间评估肌肉爆发力。在骑车测试中，指示志愿者针对预定的阻力(体重的7.5％)尽可能快地骑行10秒(36)。根据个体的高度调节车座高度，以当脚处于中央空隙的低位时，产生5-10°的屈膝。向各参与者提供标准化的口头刺激。在10秒的冲刺测试期间通过连接到标准踏车测力计(Monarkmodel 894e，Vansbro，Sweden)的计算机实时记录功率输出。使用MonarkAnaerobicWingate Software，Version1.0(Monark，Vansbro，Sweden)记录峰值功率(PP)。肌肉峰值功率的ICC为0.96。

还在多组分AMTI力台(Advanced Mechanical Technology，Inc.，Watertown，MA)(连接到个人电脑，采样率为1,000Hz)(51)上进行的纵跳(VJ)测试中进行PP测量。使用数据采集软件(LabVIEW，7.1版；National Instruments Corporation，Austin，TX)来计算PP。在平台上加速启动期间地面反作用力和峰值速度的峰值组合被计算为峰值功率。VJ功率的ICC为0.97。

补充剂、饮食控制和运动方案

在研究之前，随机分配参与者，使其接受3g/天的HMB游离酸(HMB)(与食品级橙味香精和甜味剂组合)、400mg/天的ATP(PEAK

TSI，Inc.)、每天3g HMB与400mg ATP，或者安慰剂(食品级橙味香精和甜味剂)，将上述每天等分为三份，第一份在运动前30分钟给予，并且其余两份和每天的午餐和晚餐一起给予。在非训练日，指示参与者随三餐中的每一餐服用一份。在整个训练和测试方案中每天继续所述补充。由于填充和排空变化，每份用1gHMB游离酸配制，并达到0.800g的最低有效剂量。该剂量会相当于1gCa-HMB的剂量。

在数据收集开始前至少三个月，参与者不得服用任何营养补剂。研究之前两周和整个研究中，参与者服用由专门研究运动营养的注册营养师配制的饮食，其由25％的蛋白质、50％的碳水化合物和25％的脂肪组成。参与者以组的形式会见营养师，在研究的开始给予他们个体的饮食计划。在整个研究中持续基于个体的饮食咨询。

在12周的研究期间，所有的参与者进行大量的抗阻训练方案。在图1中示出研究的阶段和所取的测量值，在表1-3中示出各研究阶段的运动方案。训练分为3个阶段，第1阶段由周内起伏式分期(第1周到第8周)组成，第2阶段由过度训练周期(第9周和第10周)组成，第3阶段由逐渐减小周期(第11周和第12周)组成。

静息抽血

整个研究中的所有抽血通过禁食12小时后由受过训练的抽血技师静脉穿刺进行。收集全血并转移至合适的管中以获得血清和血浆，并在1,500g，4℃下离心15分钟。然后将所得的血清和血浆等分成小份并储存在-80℃下，直到进行随后的分析。

生化分析

将样品解冻一次，将各分析物一式两份地进行分析。将所有的抽血安排在每天的同一时间，以避免日激素变化的混杂影响。通过从Diagnostic Systems Laboratories(Webster，TX)获得的ELISA试剂盒测定血清总睾酮和游离睾酮、皮质醇和C-反应蛋白(CRP)。在同一测定中，在同一天测量所有激素，以避免混合的测定间差异。对于所有分析物，测定间差异小于3％。使用色度法在340nm下(Diagnostics Chemicals，Oxford，CT)测量血清肌酸激酶(CK)。收集二十四小时的尿，并通过之前描述的方法(Rathmacher等人，1992和Wilson等人，2013)测定3-甲基组氨酸(3-methylhistine)。

感知的恢复状态量表

在第0、4、8、9、10和12周测量感知的恢复状态(PRS)量表，以评估训练阶段中的主观恢复。PRS量表由0-10的值组成，0-2是非常差的恢复并且有预期的行为表现降低，4-6是低到中度的恢复和预期的类似的行为表现，并且8-10代表高的感知的恢复和预期的行为表现提高。

统计

采用SAS中的Proc GLM程序(9.1版，SAS Institute，Cary，NC)¹(SAS Institute，Inc.(1985)SAS User’s Guide：Statistics，5th ed.Cary，NC：SAS Institute，Inc.)，使用单向ANOVA模型来分析基线特征数据。处理的主要作用(Trt)包括在模型中。使用SAS中的Proc Mixed程序，用2x2阶乘的重复测量ANOVA分析在12周的研究期间肌肉的力量和爆发力、身体成分、肌肉损伤、激素状态以及感知的恢复得分(PRS)的变化。在模型中，使用初始值(第0周)作为HMB、ATP和时间的主效应，以及HMB*时间、ATP*时间和HMB*ATP*时间的相互作用的协变量。还使用SAS中的Proc Mixed程序，用2x2阶乘的重复测量ANOVA评估研究的过度训练周期。然而，在第8周时间点测得的值被用作HMB、ATP和时间的主效应，以及HMB*时间、ATP*时间和HMB*ATP*时间的相互作用的协变量。然后用最小二乘法来比较各时间点的处理均值(post-hoc t-检验)。统计显著性确定为p≤0.05，并且在p＞0.05和p≤0.10之间确定为有趋势(trends)。

结果

参与者特征

在研究开始时，在处理组之间没有年龄(安慰剂＝23.0±1.2、ATP＝23.7±0.9岁、HMB＝22.3±0.6、HMB-ATP＝22.4±0.5)、身高(安慰剂＝180.6±2.3、ATP＝179.0±1.0cm、HMB＝179.3±2.1、HMB-ATP＝180.0±1.4)或体重(安慰剂＝87.4±4.3、ATP＝85.7±1.7、HMB＝83.1±1.6、HMB-ATP＝84.6±2.2)上的差异。

肌肉力量和爆发力

在研究期间的第0、4、8、9、10和12周，测量肌肉力量(1-RM蹲、卧举和硬举)和肌肉爆发力(纵跳和Wingate峰值功率，PP)；在12周的研究中，肌肉力量和爆发力两者均增加(时间，p＜0.001)。补充HMB、ATP和HMB-ATP组合增加的总力量获得分别为77.1±5.6、55.3±6.0和96.0±8.2kg，相比之下，补充安慰剂的参与者在12周的研究中总力量获得为22.4±7.1kg(t检验，p＜0.05)。图2和图3a-c示出HMB和ATP对力量的协同效应。图2示出第8-12周的总力量变化。图3a-c示出协同组合的单个指标，包括第4-8周和第4-12周的蹲力和卧举力量。

在第9周和第10周的过度训练周期期间，在补充安慰剂的参与者中从第8周至第10周总力量下降-4.5±0.9％。在补充ATP的个体中从第8周至第10周总力量下降程度较轻(-2.±0.5％)，并且在第10周，与补充安慰剂的参与者相比，补充ATP的参与者的总力量增加(t检验，p＜0.05)。在过度训练周期，补充HMB减弱了总力量的下降(-0.5±1.2％，t检验，与安慰剂相比p＜0.05)，并且补充HMB-ATP的个体出乎意料地继续增加力量(1.2±0.7％，t检验，与安慰剂相比p＜0.05)。

使用纵跳和Wingate PP测试评估肌肉爆发力，结果分别在图4a和4b中显示。在研究期间，这两种爆发力的测量指在补充HMB(HMB*时间，两者均p＜0.001)和补充ATP(ATP*时间，纵跳爆发力和Wingate PP分别为p＜0.001和p＜0.04，图4A和4B)下显著增加。在12周的训练中，在安慰剂组、补充HMB组、补充ATP组和补充HMB-ATP组，纵跳爆发力分别增加614±52、991±51、796±75和1076±40瓦特(t检验，p＜0.05)。在组合补充HMB和ATP下，对于纵跳爆发力的增加百分比是协同的(HMB*ATP*时间，p＜0.004，图4a)。在过度训练周期中，在第9周和第10周期间，相较于HMB补充组、ATP补充组和HMB-ATP补充组的纵跳爆发力的较小的降低(分别为1.4±0.4、2.2±0.4和2.2±0.5％)，在安慰剂组中纵跳爆发力降低更多(5.0±0.4％)(t检验，p＜0.05，图4A)。在2周的过度训练周期中，在安慰剂、HMB、ATP和HMB-ATP的补充组中，Wingate PP分别降低4.7±1.5、0.3±0.9、2.9±0.7和2.0±0.9％(图4B)。在增加训练的第一周后，补充HMB、ATP和HMB-ATP使得参与者维持比安慰剂补充组更高的Wingate PP功率，由基线的功率获得分别为10.2±1.6、9.0±1.6和14.5±1.2％(t检验，p＜0.05)。然而，在过度训练周期的第二周后，只有HMB-ATP补充组维持比安慰剂补充组显著更高的Wingate PP(分别为1022±21和940±66瓦特)(t检验，p＜0.05，图4B)。

身体成分及肌肥厚

在第0、4、8和12周，抗阻训练导致在训练下，瘦体重(LBM)和四头肌厚度增加(时间，p＜0.001)，而脂肪百分比下降(时间，p＜0.001)。补充HMB增加体重、LBM和四头肌厚度并降低体脂(HMB*时间，分别为p＜0.03、p＜0.001，p＜0.001和p＜0.001)，而补充ATP增加LBM和四头肌厚度(ATP*时间，分别为p＜0.01和0.04)。在补充安慰剂、HMB、ATP和HMB-ATP的参与者中，瘦体重以加和方式分别增加2.1±0.5、7.4±0.4、4.0±0.4和8.5±0.8kg(t检验，p＜0.05，表5)，并且补充HMB和HMB-ATP的参与者的脂肪百分比分别降低7.0±0.6和8.5±0.9％(t检验，p＜0.05)。只有补充HMB显示出对脂肪百分比具有显著的效果(HMB*时间，p＜0.001)。在研究期间，ATP*时间对于体重没有主效应；然而，到研究的第12周时，与安慰剂补充组相比，单独补充ATP的组的确具有较高的体重(t检验，p＜0.05)。在补充安慰剂、HMB、ATP和HMB-ATP的参与者中，12周的四头肌厚度增加分别为2.5±0.6、7.1±1.2、4.9±1.0和7.8±0.4mm，并且与安慰剂补充相比，HMB、ATP和HMB-ATP的补充导致更大的12周四头肌厚度(t检验，p＜0.05，表5)。

肌肉损伤、激素状态和行为表现恢复量表

由血液CK评估肌肉损伤，血液CK由训练增加，特别是在研究开始时训练量变化后以及在过度训练周期期间的第9周和第10周(表6；时间，p＜0.001)。在安慰剂补充组中，最初的训练导致CK水平增加342±64％，并且两周的过度训练周期导致CK水平增加159±55％。补充HMB显著减弱在训练开始(第0到1周)和过度训练周期期间(第9周和第10周)的CK增加(HMB*时间，p＜0.001)。与补充安慰剂相比，单独补充ATP不减弱CK的增加；然而，与安慰剂相比，补充HMB-ATP导致在第1周、第4周、第9周和第10周的CK增加显著减弱，其效果与单独补充HMB的效果类似(t检验，p＜0.05)。

肌肉蛋白降解的速率通过测量尿液3-MH：Cr的比率进行评价(表6)。

在研究期间，C-反应蛋白的水平没有受到任何处理的显著影响。观察到HMB效应的趋势(HMB*时间，p＜0.08)，并且在第10周，与安慰剂补充相比，HMB补充得到更高的平均CRP值(t检验，p＜0.05)。研究期间，补充ATP没有影响皮质醇水平，而补充HMB降低皮质醇水平(HMB*时间，p＜0.001，表6)。单独补充HMB导致皮质醇水平在过度训练和渐弱周期的第9、10和12周时下降(t检验，p＜0.05)，并且补充HMB-ATP导致皮质醇水平在训练开始后的第1周、过度训练的第9、10周和逐渐减小周期的第12周下降(t检验p＜0.05)。HMB或ATP对游离睾酮或总睾酮无主效应差异。

通过感知的恢复得分(PRS，表6)测量肌肉恢复以及对于下一训练期的准备状态。在12周的研究中，补充HMB和HMB-ATP导致PRS改善(HMB*时间，p＜0.001)。同时，未观察到ATP补充的主效应，与补充安慰剂的参与者相比，补充ATP的参与者在第10和12周的过度训练周期后，PRS得分改善(t检验，p＜0.05)。在第4周时，与安慰剂补充组相比，HMB/ATP补充组是唯一显著改善PRS的一组(t检验，p＜0.05)。还观察到HMB和ATP相互作用的趋势，这表明组合补充对PRS的协同效应(HMB*ATP*时间，p＜0.06)。

实验实施例表明，与仅单独的HMB或ATP补充相比，HMB-ATP补充导致增加的力量和爆发力的适应，并且这种增加是协同的。

此外，结果表明，与安慰剂组相比，HMB-ATP、HMB和ATP组在LBM和肌肉厚度方面的增加更大，并且，与仅单独补充HMB或ATP相比，给药HMB-ATP对肌肥厚和瘦体重具有更大的作用。

给药HMB-ATP导致LBM、肌肥厚、力量和爆发力增加。对于力量和爆发力，这些增加是协同的；对于瘦体重和肌肥厚，这些增加是叠加的。此外，当遇到更高的训练频率时(如用过度训练周期所证明)，HMB-ATP防止对于过度训练特征性的行为表现的典型降低。所有这些结果都是预料不到且令人惊奇的。

前文的描述和附图包括本发明的示例性实施方案。前述实施方案和本文中所述方法可基于本领域技术人员的能力、经验和偏好而变化。仅以某一顺序列出方法的步骤并不对所述方法的步骤顺序构成任何限制。前文的描述和附图仅解释和说明本发明，并且本发明不限于此，除了在权利要求如此限制的情况下。获得本公开内容的本领域技术人员能够在不偏离本发明范围的情况下对其进行修改和改变。贯穿本申请，术语个体和动物可互换使用，并不以任何方式限制于一个术语或另一个。

引用的文献

1.Nissen，S.L.&Sharp，R.L.Effect of dietary supplements on lean massand strength gains with resistance exercise：a meta-analysis.J Appl.Physiol94：651-659，2003.

2.Panton，L.B.，Rathmacher，J.A.，Baier，S.&Nissen，S.Nutritionalsupplementation of the leucine metabolite b-hydroxy b-methylbutyrate(HMB)during resistance training.Nutr.16(9)：734-739，2000.

3.Nissen，S.，Sharp，R.，Ray，M.，Rathmacher，J.A.，Rice，J.，Fuller，J.C.，Jr.，Connelly，A.S.&Abumrad，N.N.Effect of the leucine metabolite b-hydroxy b-methylbutyrate on muscle metabolism during resistance-exercisetraining.J.Appl.Physiol.81(5)：2095-2104，1996.

4.Eubanks May，P.，Barber，A.，Hourihane，A.，D′Olimpio，J.T.&Abumrad，N.N.Reversal of cancer-related wasting using oral supplementation with acombination of b-hydroxy-b-methylbutyrate，arginine，andglutamine.Am.J.Surg.183：471-479，2002.

5.Clark，R.H.，Feleke，G.，Din，M.，Yasmin，T.，Singh，G.，Khan，F.&Rathmacher，J.A.Nutritional treatment for acquired immunodeficiency virus-associatedwasting using b-hydroxy-b-methylbutyrate，glutamine and arginine：A randomized，double-blind，placebo-controlled study.JPEN J Parenter Enteral Nutr 24(3)：133-139，2000.

6.Gallagher，P.M.，Carrithers，J.A.，Godard，M.P.，Schulze，K.E.&Trappe，S.W.b-Hydroxy-b-methylbutyrate ingestion，Part I：Effects on strength and fatfree mass.Med Sci Sports Exerc 32(12)：2109-2115，2000.

7.Jówko，E.，Ostaszewski，P.，Jank，M.，Sacharuk，J.，Zieniewicz，A.，Wilczak，J.&Nissen，S.Creatine and b-hydroxy-b-methylbutyrate(HMB)additively increaseslean body mass and muscle strength during a weight training program.Nutr.17：558-566，2001.

8.Knitter，A.E.，Panton，L.，Rathmacher，J.A.，Petersen，A.&Sharp，R.Effectsof b-hydroxy-b-methylbutyrate on muscle damage following a prolongedrun.J.Appl.Physiol.89(4)：1340-1344，2000.

9.Ostaszewski，P.，Kostiuk，S.，Balasinska，B.，Jank，M.，Papet，I.&Glomot，F.The leucine metabolite 3-hydroxy-3-methylbutyrate(HMB)modifies proteinturnover in muscles of the laboratory rats and domestic chicken invitro.J.Anim.Physiol.Anim.Nutr.(Swiss)84：1-8，2000.

10.Russell，S.T.&Tisdale，M.J.Mechanism of attenuation by beta-hydroxy-beta-methylbutyrate of muscle protein degradation induced bylipopolysaccharide.Mol.Cell Biochem.330(1-2)：171-179，2009.

11.Eley，H.L.，Russell，S.T.&Tisdale，M.J.Attenuation of depression ofmuscle protein synthesis induced by lipopolysaccharide，tumor necrosis factorand angiotensin II by b-hydroxy-b-methylbutyrate.Am.J.PhysiolEndocrinol.Metab 295：E1409-E1416，2008.

12.Eley，H.L.，Russell，S.T.，Baxter，J.H.，Mukerji，P.&Tisdale，M.J.Signaling pathways initiated by b-hydroxy-b-methylbutyrate to attenuatethe depression of protein synthesis in skeletal muscle in response tocachectic stimuli.Am.J.Physiol Endocrinol.Metab 293：E923-E931，2007.

13.Smith，H.J.，Wyke，S.M.&Tisdale，M.J.Mechanism of the attenuation ofproteolysis-inducing factor stimulated protein degradation in muscle by beta-hydroxy-beta-methylbutyrate.Cancer Res.64：8731-8735，2004.

14.Smith，H.J.，Mukerji，P.&Tisdale，M.J.Attenuation of proteasome-induced proteolysis in skeletal muscle by b-hydroxy-b-methylbutyrate incancer-induced muscle loss.Cancer Res.65：277-283，2005.

15.Eley，H.L.，Russell，S.T.&Tisdale，M.J.Mechanism of Attenuation ofMuscle Protein Degradation Induced by Tumor Necrosis Factor Alpha andAngiotensin II by beta-Hydroxy-beta-methylbutyrate.Am.J.PhysiolEndocrinol.Metab 295：E1417-E1426，2008.

16.Fuller，J.C.，Jr.，Baier，S.，Flakoll，P.J.，Nissen，S.L.，Abumrad，N.N.&Rathmacher，J.A.Vitamin D status affects strength gains in older adultssupplemented with a combination of b-hydroxy-b-methylbutyrate，arginine andlysine：A cohort study.JPEN 35：757-762，2011.

17.Sousa，M.F.，Abumrad，N.N.，Martins，C.，Nissen，S.&Riella，M.C.Calcium b-hydroxy-b-methylbutyrate.Potential role as a phosphate binder in uremia：Invitro study.Nephron 72：391-394，1996.

18.Fuller，J.C.，Jr.，Sharp，R.L.，Angus，H.F.，Baier，S.M.&Rathmacher，J.A.Free acid gel form of beta-hydroxy-beta-methylbutyrate(HMB)improves HMBclearance from plasma in human subjects compared with the calcium HMBsalt.Br.J Nutr.105：367-372，2011.

19.Kushmerick，M.J.&Conley，K.E.Energetics of muscle contraction：thewhole is less than the sum of its parts.Biochem.Soc.Trans.30：227-231，2002.

20.Burnstock，G.，Knight，G.E.&Greig，A.V.Purinergic signaling in healthyand diseased skin.J Invest Dermatol.132：526-546，2012.

21.Agteresch，H.J.，Dagnelie，P.C.，van den Berg，J.W.&Wilson，J.H.Adenosine triphosphate：established and potential clinicalapplications.Drugs58：211-232，1999.

22.Sawynok，J.&Sweeney，M.I.The role of purines innociception.Neuroscience 32：557-569，1989.

23.Yajima，H.，Sato，J.，Giron，R.，Nakamura，R.&Mizumura，K.Inhibitory，facilitatory，and excitatory effects of ATP and purinergic receptor agonistson the activity of rat cutaneous nociceptors in vitro.Neurosci.Res.51：405-416，2005.

24.Khakh，B.S.&Henderson，G.ATP receptor-mediated enhancement of fastexcitatory neurotransmitter release in the brain.Mol.Pharmacol.54：372-378，1998.

25.Ellis，C.G.，Milkovich，S.&Goldman，D.What is the Efficiency of ATPSignaling from Erythrocytes to Regulate Distribution of O(2)Supply within theMicrovasculature？Microcirculation，2012.

26.Gergs，U.，Boknik，P.，Schmitz，W.，Simm，A.，Silber，R.E.&Neumann，J.Apositive inotropic effect of adenosine in cardiac preparations of right atriafrom diseased human hearts.Naunyn Schmiedebergs Arch.Pharmacol.379：533-540，2009.

27.Gergs，U.，Boknik，P.，Schmitz，W.，Simm，A.，Silber，R.E.&Neumann，J.Apositive inotropic effect of ATP in the human cardiac atrium.Am.J PhysiolHeart Circ.Physiol 294：H1716-H1723，2008.

28.Kichenin，K.，Decollogne，S.，Angignard，J.&Seman，M.Cardiovascular andpulmonary response to oral administration of ATP in rabbits.J Appl.Physiol88：1962-1968，2000.

29.Heinonen，I.，Kemppainen，J.，Kaskinoro，K.，Peltonen，J.E.，Sipila，H.T.，Nuutila，P.，Knuuti，J.，Boushel，R.&Kalliokoski，K.K.Effects of adenosine，exercise，and moderate acute hypoxia on energy substrate utilization of humanskeletal muscle.Am.J.Physiol Regul.Integr.Comp Physiol 302：R385-R390，2012.

30.Yegutkin，G.G.Nucleotide-and nucleoside-converting ectoenzymes：Important modulators of purinergic signalling cascade.Biochim.Biophys.Acta1783：673-694，2008.

31.Nyberg，M.，Mortensen，S.P.，Thaning，P.，Saltin，B.&Hellsten，Y.Interstitial and plasma adenosine stimulate nitric oxide and prostacyclinformation in human skeletal muscle.Hypertension 56：1102-1108，2010.

32.Jordan，A.N.，Jurca，R.，Abraham，E.H.，Salikhova，A.，Mann，J.K.，Morss，G.M.，Church，T.S.，Lucia，A.&Earnest，C.P.Effects of oral ATP supplementation onanaerobic power and muscular strength.Med.Sci.Sports Exerc.36：983-990，2004.

33.Arts，I.C.，Coolen，E.J.，Bours，M.J.，Huyghebaert，N.，Cohen Stuart，M.A.，Bast，A.&Dagnelie，P.C.Adenosine 5′-triphosphate(ATP)supplements are not orallybioavailable：a randomized，placebocontrolled cross-over trial in healthyhumans.J.Int.Soc.Sports Nutr.9：16，2012.

34.Coolen，E.J.，Arts，I.C.，Bekers，O.，Vervaet，C.，Bast，A.&Dagnelie，P.C.Oral bioavailability of ATP after prolonged administration.Br.J.Nutr.105：357-366，2011.

35.Synnestvedt，K.，Furuta，G.T.，Comerford，K.M.，Louis，N.，Karhausen，J.，Eltzschig，H.K.，Hansen，K.R.，Thompson，L.F.&Colgan，S.P.Ecto-5′-nucleotidase(CD73)regulation by hypoxia-inducible factor-1mediates permeability changesin intestinal epithelia.J Clin.Invest 110：993-1002，2002.

36.Kraemer，W.J.，Hatfield，D.L.，Volek，J.S.，Fragala，M.S.，Vingren，J.L.，Anderson，J.M.，Spiering，B.A.，Thomas，G.A.，Ho，J.Y.et al.Effects of Amino AcidsSupplement on Physiological Adaptations to Resistance Training.Med.Sci.SportsExerc.41：1111-1121，2009.

37.Monteiro，A.G.，Aoki，M.S.，Evangelista，A.L.，Alveno，D.A.，Monteiro，G.A.，Picarro，I.C.&Ugrinowitsch，C.Nonlinear periodization maximizes strengthgains in split resistance training routines.J Strength.Cond.Res.23：1321-1326，2009.

38.Laurent，C.M.，Green，J.M.，Bishop，P.A.，Sjokvist，J.，Schumacker，R.E.，Richardson，M.T.&Curtner-Smith，M.A practical approach to monitoring recovery：development of a perceived recovery status scale.J Strength.Cond.Res.25：620-628，2011.

39.Rathmacher，J.A.，Link，G.A.，Flakoll，P.J.&Nissen，S.L.Gaschromatographic-mass spectrometric analysis of stable isotopes of 3-methylhistidine in biological fluids：application to plasma kinetics invivo.Biol.Mass Spectrom.21：560-566，1992.

40.Barnes JN，Trombold JR，Dhindsa M，Lin HF和Tanaka H.Arterialstiffening following eccentric exercise-induced muscle damage.Journal ofapplied physiology 109：1102-1108，2010.

41.Cormie P，McGuigan MR和Newton RU.Developing maximal neuromuscularpower：Part 1--biological basis of maximal power production.Sports medicine41：17-38，2011.

42.Cormie P，McGuigan MR和Newton RU.Developing maximal neuromuscularpower：part 2-training considerations for improving maximal powerproduction.Sports medicine 41：125-146，2011.

43.Dufour SP，Patel RP，Brandon A，Teng X，Pearson J，Barker H，Ali L，YuenAH，Smolenski RT和Gonzalez-Alonso J.Erythrocyte-dependent regulation of humanskeletal muscle blood flow：role of varied oxyhemoglobin and exercise onnitrite，S-nitrosohemoglobin，and ATP.American journal of physiology Heart andcirculatory physiology 299：H 1936-1946，2010.

44.Gilbert G和Lees A.Changes in the force development characteristicsof muscle following repeated maximum force and power exercise.Ergonomics 48：1576-1584，2005.

45.Gonzalez-Alonso J.ATP as a mediator of erythrocyte-dependentregulation of skeletal muscle blood flow and oxygen delivery in humans.TheJournal of physiology 590：5001-5013，2012.

46.Gonzalez-Alonso J，Mortensen SP，Dawson EA，Secher NH和DamsgaardR.Erythrocytes and the regulation of human skeletal muscle blood flow andoxygen delivery：role of erythrocyte count and oxygenation state ofhaemoglobin.The Journal of physiology 572：295-305，2006.

47.Gonzalez-Alonso J，Mortensen SP，Jeppesen TD，Ali L，Barker H，Damsgaard R，Secher NH，Dawson EA和Dufour SP.Haemodynamic responses toexercise，ATP infusion and thigh compression in humans：insight into the roleof muscle mechanisms on cardiovascular function.The Journal of physiology586：2405-2417，2008.

48.Halson SL和Jeukendrup AE.Does overtraining exist？An analysis ofoverreaching and overtraining research.Sports medicine 34：967-981，2004.

49.Hunga W，Liub T-H，Chenc C-Y和Chang C-K.Effect of[beta]-hydroxy-[beta]-methylbutyrate Supplementation During Energy Restriction in FemaleJudo Athletes.Journal of Exercise Science and Fitness 8：50-53，2010.

50.Jowko E，Ostaszewski P，Jank M，Sacharuk J，Zieniewicz A，Wilczak J和Nissen S.Creatine and beta-hydroxy-beta-methylbutyrate(HMB)additivelyincrease lean body mass and muscle strength during a weight-trainingprogram.Nutrition 17：558-566，2001.

51.Kraemer WJ和Ratamess NA.Fundamentals of resistance training：progression and exercise prescription.Med Sci Sports Exerc 36：674-688，2004.

52.Rathmacher JA，Fuller JC，Jr.，Baier SM，Abumrad NN，Angus HF和SharpRL.Adenosine-5′-triphosphate(ATP)supplementation improves low peak muscletorque and torque fatigue during repeated high intensity exercisesets.Journal of the International Society of Sports Nutrition 9：48，2012.

53.Robbins DW和Docherty D.Effect of loading on enhancement of powerperformance over three consecutive trials.Journal of strength andconditioning research/National Strength&Conditioning Association 19：898-902，2005.

54.Sprague RS，Bowles EA，Achilleus D，Stephenson AH，Ellis CG和EllsworthML.A selective phosphodiesterase 3inhibitor rescues low PO2-induced ATPrelease from erythrocytes of humans with type 2diabetes：implication forvascular control.American journal of physiology Heart and circulatoryphysiology 301：H2466-2472，2011.

55.Thomson JS，Watson PE和Rowlands DS.Effects of nine weeks of beta-hydroxy-beta-methylbutyrate supplementation on strength and body compositionin resistance trained men.Journal of strength and conditioning research/National Strength&Conditioning Association 23：827-835，2009.

56.Trautmann A.Extracellular ATP in the immune system：more than justa″danger signal″.Science signaling 2：pe6，2009.

57.van Someren KA，Edwards AJ和Howatson G.Supplementation with beta-hydroxy-beta-methylbutyrate(HMB)and alpha-ketoisocaproic acid(KIC)reducessigns and symptoms of exercise-induced muscle damage in man.Internationaljournal of sport nutrition and exercise metabolism 15：413-424，2005.

58.Wilkinson DJ，Hossain T，Hill DS，Phillips BE，Crossland H，Williams J，Loughna P，Churchward-Venne TA，Breen L，Phillips SM，Etheridge T，Rathmacher JA，Smith K，Szewczyk NJ和Atherton PJ.Effects of Leucine and its metabolite，beta-hydroxy-beta-methylbutyrate(HMB)on human skeletal muscle proteinmetabolism.The Journal of physiology，2013.

59.Wilson G J，Wilson JM和Manninen AH.Effects of beta-hydroxy-beta-methylbutyrate(HMB)on exercise performance and body composition acrossvarying levels of age，sex，and training experience：A review.Nutr Metab(Lond)5：1，2008.

60.Wilson JM，Duncan NM，Marin P J，Brown LE，Loenneke JP，Wilson SM，Jo E，Lowery RP和Ugrinowitsch C.Meta-Analysis of Post Activation Potentiation andPower：Effects of Conditioning Activity，Volume，Gender，Rest Periods，andTraining Status.Journal of strength and conditioning research/NationalStrength&Conditioning Association，2012.

61.Wilson JM，Lowery RP，Joy JM，Walters J，Baier S，Fuller JC，Jr.，StoutJ，Norton L，Sikorski EM，Wilson SM-C，Duncan N，Zanchi N和Rathmacher J.β-Hydroxy-β-Methylbutyrate Free Acid Reduces Markers of Exercise Induced Muscle Damageand Improves Recovery in Resistance Trained Men.British Journal of NutritionIn Press.

Claims (27)

1.组合物，其包含3g的β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)以及400mg的三磷酸腺苷(ATP)的协同组合。

2.向需要其的动物提供益处的方法，所述益处选自：增加力量、增加爆发力、改善肌肉量以及减少过度训练特征性行为表现的降低，所述方法通过向所述动物每天给药包含3g的HMB和400mg的ATP的协同组合的组合物来提供所述益处，其中所述方法用于非诊断和非治疗目的。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述益处选自增加力量、增加爆发力以及减少过度训练特征性行为表现的降低。

4.如权利要求2所述的方法，其中所给药的所述HMB是HMB-酸。

5.如权利要求2所述的方法，其中所给药的所述HMB是盐。

6.如权利要求2所述的方法，其中所述给药的步骤选自口服给药和肠胃外给药。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述肠胃外给药选自舌下给药、局部给药、经皮给药、肌内给药和吸入给药。

8.如权利要求6所述的方法，其中所述口服给药包括选自下列的递送形式：片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、微粒剂、丹剂、软凝胶剂、控释剂型、液体、混悬剂、乳剂和糊剂。

9.如权利要求8所述的方法，其中所述液体递送形式选自溶液剂和糖浆剂。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述溶液剂为酏剂。

11.用于增加需要其的动物的力量的方法，其包括以下步骤：向所述动物每天给药3g的HMB和400mg的ATP的协同组合，其中在所述向所述动物给药HMB和ATP后，所述力量被增加，其中所述方法用于非诊断和非治疗目的。

12.用于增加需要其的动物的爆发力的方法，其包括以下步骤：向所述动物每天给药3g的HMB和400mg的ATP的协同组合，其中在所述向所述动物给药HMB和ATP后，所述爆发力被增加，其中所述方法用于非诊断和非治疗目的。

13.用于改善需要其的动物的肌肉量的方法，其包括以下步骤：向所述动物每天给药3g的HMB和400mg的ATP的协同组合，其中在所述向所述动物给药HMB和ATP后，所述肌肉量被改善，其中所述方法用于非诊断和非治疗目的。

14.用于减少需要其的动物的过度训练特征性行为表现的降低的方法，其包括以下步骤：向所述动物每天给药3g的HMB和400mg的ATP的协同组合，其中在所述向所述动物给药HMB和ATP后，所述行为表现的降低被减少，其中所述方法用于非诊断和非治疗目的。

15.包含3g的HMB和400mg的ATP的协同组合的组合物在制备用于向需要其的动物提供益处的药物中的用途，所述益处选自：增加力量、增加爆发力、改善肌肉量以及减少过度训练特征性行为表现的降低。

16.如权利要求15所述的用途，其中所述益处选自：增加力量、增加爆发力以及减少过度训练特征性行为表现的降低。

17.如权利要求15所述的用途，其中所述HMB是HMB-酸。

18.如权利要求15所述的用途，其中所述HMB是盐。

19.如权利要求15所述的用途，其中所述药物用于口服给药或肠胃外给药。

20.如权利要求19所述的用途，其中所述肠胃外给药选自舌下给药、局部给药、经皮给药、肌内给药和吸入给药。

21.如权利要求19所述的用途，其中所述口服给药包括选自下列的递送形式：片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、微粒剂、丹剂、软凝胶剂、控释剂型、液体、混悬剂、乳剂和糊剂。

22.如权利要求21所述的用途，其中所述液体递送形式选自溶液剂和糖浆剂。

23.如权利要求22所述的用途，其中所述溶液剂为酏剂。

24.3g的HMB和400mg的ATP的协同组合在制备用于增加需要其的动物的力量的药物中的用途。

25.3g的HMB和400mg的ATP的协同组合在制备用于增加需要其的动物的爆发力的药物中的用途。

26.3g的HMB和400mg的ATP的协同组合在制备用于改善需要其的动物的肌肉量的药物中的用途。

27.3g的HMB和400mg的ATP的协同组合在制备用于减少需要其的动物的过度训练特征性行为表现的降低的药物中的用途。

Images