CN105021816A - 一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹 - Google Patents

Abstract

一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹，包括相延续的上片和下片两部分组成，其特征在于所述载片夹由无色透明的硬塑料制成，上片和下片相对面平整，大小和形状一致，上片和下片的相对应的边中有一条边相延续，使载片夹类似于书的形状，当充分翻开上片时，能把组织切片顺利的放置于下片上，当把上片向下与下片紧紧靠拢时，上片与下片之间形成一个宽度为4μm~6μm的缝隙，能将组织切片夹在其中而不能位移。本发明提供了一种结构简单，成本低廉，能较好的保证组织切片的稳定性以及抗体与组织接触反应有效性，便于拍照。

Description

一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹

技术领域

本发明涉及医学生物实验装置，尤其涉及一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹。

背景技术

免疫染色是利用抗原与抗体特异性结合的原理，检测特定蛋白（抗原）的表达情况，是发现机体在生理或病理状态下功能变化最常用的方法之一，最常用的是免疫组织化学染色和免疫荧光染色。在实验过程中，经常需要研究至少两种抗原/蛋白在同一细胞或组织标本中的表达，以便明确它们各自的定位或共表达情况。目前最常采用的方法是采用流式细胞术，但这种技术需要的细胞量较大，且经过固定和石蜡包埋的组织用于流式细胞术检测效果不佳，不能准确显示各种抗原在组织和细胞在体内的自然分布状况。如果组织标本量极少（如细针穿刺标本）或组织内待检测细胞量极少，则很难进行流式细胞术检测。通过在组织切片上对同一标本进行多次免疫染色，研究多种抗原的表达，则能解决这个问题。例如，对组织切片进行抗原A的免疫荧光染色后，由于抗原与抗体的结合为非共价结合，并不牢固，可以把组织放入缓冲液中，适当加热，就可使已经与抗原A结合的抗体及相应的显色剂脱离下来，又可以进行抗原B的免疫荧光染色，采用同样的方法还能进行抗原C、抗原D的染色。目前已经出现针对组织切片的多重免疫染色技术，即对同一组织切片进行一次染色，研究多种抗原表达，如一种基于同种属来源第一抗体的免疫荧光双重标记方法（CN201410099873.2），这种方法的缺点是，在具体实施过程中，需要进行标记的抗原常不仅仅是两种，多数情况下是5-10种，甚至达20余种，这种多重染色方法不能满足需要，需要进行多次染色。当然，可将多重染色与多次染色方法结合起来，能提高工作效率。一个重要的问题是，即使是单次的免疫染色，组织切片脱离载玻片已是经常发生的问题，多次染色更容易导致组织切片脱离载玻片，导致实验无法进行。一种防脱玻片装置（CN201220446225.6）虽然提供了一种可行的防止组织切片脱离载玻片的措施，但并不适用于多次免疫染色。因而，提供一种能使组织切片经受多次免疫染色的装置十分必要。

另外，在多次染色过程中，需要对组织进行每次染色后拍照，将多次的染色照片进行比对，才能弄清楚同一个细胞究竟表达哪些蛋白，因而，所提供的装置还要便于在显微镜下拍照。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有载玻片在用于多次免疫染色时组织切片容易脱离载玻片的问题，提供一种用于对组织切片进行多次（5~20次）免疫染色的载片夹。

本发明解决上述技术问题采用的技术方案是：一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹，包括相延续的上片和下片两部分组成。作为优选的方案，所述上片由向上隆起的厚边和内部的筛状盖片组成，筛状盖片厚度为0.13mm~0.16mm，有细密的孔，孔径能保证让大分子蛋白质（如鼠IgG）自由通过而正常细胞不能通过，最佳孔径为3μm~5μm，孔间距与孔径相等，厚边的厚度以1mm~2mm为最佳；作为次选的方案，所述上片的内部筛状盖片的部分可以没有孔，结构与下述的下片相同，但这个方案的缺点是染色液仅能从四周的缝隙通过扩散到达组织切片，会带来染色所需时间长和染色不均匀的问题。所述下片由向下隆起的厚边和内部的载片组成，载片类似于市售组织病理学检查使用的盖玻片，能保证良好的透光性，适合在显微镜下观察和拍照，最适厚度为0.13mm~0.16mm，无孔，厚边的厚度以1mm~2mm为最佳。上片和下片相对面平整，大小和形状一致，可为长方形或正方形及其他形状，以正方形和长方形为佳，可参考现有市售盖玻片的大小制作成多种规格，如24mm×32mm、18mm×18mm。上片和下片的相对应的边中有一条边相延续，使载片夹类似于书的形状，当充分翻开上片时，能把组织切片顺利的放置于下片上，当把上片向下与下片紧紧靠拢时，上片与下片之间形成一个宽度为4μm~6μm的缝隙，能将组织切片夹在其中而不能位移。所述载片夹采用硬塑料制成，该塑料制品的硬度在100R~135R之间，无色透明，耐酸碱及有机溶剂，耐100℃的高温。该载片夹除用于免疫染色外，还可用于原位杂交及其相关的生物医学检测。

本发明提供了一种结构简单，成本低廉，能较好的保证组织切片的稳定性以及抗体与组织接触反应有效性，便于拍照。

附图说明

图1是一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹的平面视图；

图2是一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹纵切面的示意图。

具体实施方法

下面结合附图和具体实例对本发明进行详细说明。

如图1和图2所示，一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹，包括相延续的上片3和下片4两部分组成。上片3由向上隆起的厚边1和内部的筛状盖片组成，筛状盖片厚度为0.15mm，孔径为4μm，孔间距为4μm，厚边1的厚度2mm。所述下片4由向下隆起的厚边1和内部的载片组成，载片的厚度为0.15mm，厚边1的厚度为2mm。上片和下片的相对面平整，为长方形，大小均为24mm×32mm。上片3和下片4的相对应的左侧边在连接6处相延续，将上片3充分翻开，把组织切片2放置于下片4上后，把上片3向下与下片4紧紧靠拢，用橡皮筋捆缚或用夹子夹住开口5一侧，上片与下片之间形成一个宽度为4μm的缝隙，能将厚度为4μm的组织切片2夹在其间。所述载片夹采用硬塑料制成，该塑料制品的硬度在110R，无色透明，耐酸碱及有机溶剂，耐100℃的高温。在进行免疫染色时，可取石蜡切片或冰冻切片，将组织切片平整的放置在下片4的上面中央，将上片3靠拢下片4，用橡皮筋捆缚或用夹子夹住开口5一侧，即可按照说明书操作，直接将染色相关试剂依次滴加在上片3的上方，试剂自由扩散至组织切片进行染色，在需要洗去已滴加的试剂时，直接将该载片夹放入清洗液中。在完成对一种抗原的染色后，将载片夹的下片4一侧对着显微镜物镜，聚焦于组织切片，即可通过连接显微镜的照相机采集到组织切片染色后的照片。在将上一次染色的抗体及相关显色试剂洗去后，可继续进行另一种抗原的染色。

Claims (4)

1.一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹，其特征在于包括相延续的上片和下片两部分组成，由无色透明的硬塑料制成，上片和下片相对面平整，大小和形状一致，上片和下片的相对应的边中有一条边相延续，使载片夹类似于书的形状，当充分翻开上片时，能把组织切片顺利的放置于下片上，当把上片向下与下片紧紧靠拢时，上片与下片之间形成一个宽度为4μm~6μm的缝隙，能将组织切片夹在其中而不能位移。

2.根据权利要求1所述的上片，其特征在于由向上隆起的厚边和内部的筛状盖片组成，筛状盖片有细密的孔，能保证让大分子蛋白质自由通过而正常细胞不能通过。

3.根据权利要求1所述的下片，其特征在于由向下隆起的厚边和内部无孔的载片组成，具有良好的透光性。

4.根据权利要求1所述的一种用于对组织切片进行多次免疫染色的载片夹，其特征在于上片和下片向对面平整，大小和形状一致，上片和下片的相对应的边中有一条边相延续，使载片夹类似于书的形状，当充分翻开上片时，能把组织切片顺利的放置于下片上，当把上片向下与下片紧紧靠拢时，上片与下片之间形成一个宽度为4μm~6μm的缝隙，能将组织切片夹在其中而不能位移。