CN104977414A - 鉴定骨髓中是否存在保护白血病干细胞微环境的试剂盒及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了鉴定骨髓中是否存在保护白血病干细胞微环境的试剂盒及其应用。所述试剂盒包括下述抗Nestin、抗α-SMA、抗CCR1、抗Vimentin、抗LepR、抗CD51和抗CD29的抗体中的一个或多个。本发明首次发现保护LPCs微环境，命名为NSM-niche，并开发出鉴定白血病患者骨髓中NSM-niche是否存在的试剂盒。通过鉴定患者骨髓中是否存在NSM-niche，能准确判断疾病进展和预后。根据LPCs的保护机制，找到可干预该微环境形成和解除对LPCs保护的靶点，这些靶点的抑制剂和/或中和抗体可用于制备提高白血病化疗效果的药物，有利于清除病人体内残留的LPCs，最终治愈白血病。

Description

鉴定骨髓中是否存在保护白血病干细胞微环境的试剂盒及其应用
技术领域
本发明涉及白血病诊断和治疗试剂盒领域，更具体地讲，涉及鉴定骨髓中是否存在保护白血病干细胞微环境的试剂盒及其应用。 
背景技术
目前，白血病的治疗方法和药物，主要是针对白血病（干）细胞（leukemia propagating cells,LPCs）自身进行设计和使用，虽然能缓解疾病，但是不能清除病人体内所有的白血病细胞，因此导致复发；更准确地说，现有的治疗方法或药物，不能清除骨髓中残留的LPCs。这是由于治疗过程中，骨髓中会形成特殊的微环境（niche）对残留LPCs进行保护，使得现有的治疗方法和药物，不能清除这些细胞，导致复发。 
目前已有报道白血病细胞浸润骨髓会改造或破坏骨髓微环境，但是，因为缺乏适当的方法或技术，还没有鉴定到任何白血病干细胞特定的保护niche，也没有针对该niche的治疗药物。 
发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是，提供一种鉴定骨髓中是否存在保护白血病干细胞微环境的试剂盒。 
本发明所要解决的第二个技术问题是，通过阻断保护白血病干细胞微环境形成和干扰其保护LPCs，找到可干预该微环境形成和解除对LPCs保护的靶点，提供针对这些靶点的抑制剂和/或中和抗体在制备提高白血病化疗效果药物中的应用。 
为了解决上述第一个技术问题，本发明提供了鉴定骨髓中是否存在保护白血病干细胞微环境的试剂盒，其特征在于，所述保护白血病干细胞微环境为NSM微环境，所述NSM微环境早期为Nestin+基质干细胞，随后转变成α-SMA+基质细胞，所述Nestin+基质干细胞表达CCR1、Vimentin、LepR、CD51和CD29，所述α-SMA+基质细胞表达Vimentin，所述试剂盒包括下述抗Nestin、抗α-SMA、抗CCR1、抗Vimentin、抗LepR、抗CD51和抗CD29的抗体中的一个或多个。 
为了解决上述第二个技术问题，本发明提供了CCL3抑制剂、抗CCL3中和抗体、CCL3受体CCR1抑制剂或者抗CCR1中和抗体在制备提高白血病化疗效果药物中的应用。 
作为一个优选方案，所述受体抑制剂为BX471。 
为了解决上述第二个技术问题，本发明提供了GDF15抑制剂或抗GDF15中和抗体在制备提高白血病化疗效果药物中的应用。 
作为一个优选方案，所述GDF15抑制剂为干扰RNA iGDF15。 
为了解决上述第二个技术问题，本发明提供了蛋白酶Furin抑制剂或抗Furin中和抗体在制备提高白血病化疗效果药物中的应用。 
作为一个优选方案，所述Furin抑制剂为CMK。 
本发明的优点在于，本发明首次发现保护LPCs微环境，命名为NSM-niche，并开发出鉴定白血病患者骨髓中NSM-niche是否存在的试剂盒。通过鉴定患者骨髓中是否存在NSM-niche，能准确判断疾病进展和预后。根据LPCs的保护机制，找到可干预该微环境形成和解除对LPCs保护的靶点，这些靶点的抑制剂和/或中和抗体可用于制备提高白血病化疗效果的药物，有利于清除病人体内残留的LPCs，最终治愈白血病。 
附图说明
图1总体技术方案图。 
图2白血病细胞在骨髓中的浸润和保护微环境的形成。A,实时成像观察，GFP标记的白血病细胞在骨髓中的动态浸润和破坏。B,实时成像观察用Ara-C化疗2-4天后，白血病细胞残留在骨髓中。C,HE染色显示保护微环境（niche）形成，围绕并庇护残留白血病细胞。 
图3鉴定骨髓中形成保护niche的组成细胞。A-D,Ara-C化疗2天（A2D）时niche组成细胞的表型分析。E-F,Ara-C化疗4天(A4D)时niche组成细胞的表型分析。G,化疗2天时niche组成细胞的功能成球实验。H,A2D时niche组成细胞的诱导分化实验。注：早期A2D时niche组成细胞为Nestin+基质干细胞，稍晚A4D时转为α-SMA+，因此称该niche为NSM-niche。 
图4NSM-niche的形成机制。A-B,NSM-niche中残留白血病细胞高表达并 分泌细胞因子。C-D,细胞因子CCL3招募Nestin+的基质干细胞。E,细胞因子CCL3扩增所招募Nestin+的基质干细胞，形成NSM-niche。F,TGF-β1诱导Nestin+基质干细胞转为α-SMA+细胞。G,NSM-niche形成模式图。 
图5NSM-niche保护LPCs机制。A-B,NSM-niche所保护的白血病细胞耐药。C-D,白血病细胞分泌GDF15。E,RT-PCR检测NSM-niche细胞表达蛋白酶Furin。F-I,免疫荧光检测，NSM-niche提供蛋白酶Furin处理GDF15,使其成熟。J-L,成熟的GDF15激活白血病细胞的TGF-β信息通路。M，成熟的GDF15使白血病细胞耐药。N,NSM-niche保护LPCs的模式图。 
图6抑制或干扰CCL3可以阻断NSM-niche的形成并明显提高化疗效果。A-C,在白血病小鼠，用CCL3/CCR1抑制剂BX471。骨髓组织HE染色（A）显示niche的形成被明显抑制，虽然不影响niche细胞由Nestin+向α-SMA+转化（B）,但能明显提高化疗（A2D,和A4D）效果，清除更多白血病细胞（C）。D-F,在白血病小鼠，用抗CCL3的中和抗体，可以同样抑制NSM-niche的形成，提高化疗效果。 
图7抑制或干扰GDF15的功能可以明显提高化疗效果。A-B,慢病毒载体介导的GDF15干扰RNA(iGDF15)抑制GDF15的表达。C-E,iGDF15的使用明显提高化疗（A2D和A4D）效果，清除NSM-niche中的白血病细胞。F,为统计图。G,用iGDF15小鼠生存时间明显延长。H,用抗GDF15的中和抗体，明显提高化疗效果。 
图8使用Furin抑制剂CMK明显提高化疗效果。A,western blot检测骨髓液，CMK抑制pro-GDF15向mGDF15转化。B,HE染色骨髓组织。C,骨髓实时成像,显示CMK的使用，明显促进化疗（用Ara-C两天，A2D）清除白血病细胞。 
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常 规条件，或按照制造厂商所建议的条件。 
实施例1.发现并鉴定白血病骨髓中保护LPCs微环境 
试验总体技术方案如图1所示，包括以下步骤： 
1.人性化白血病和化疗模型的建立。将荧光蛋白GFP标记的人白血病细胞移植给免疫缺陷小鼠（NOD-SCID IL2Gnull，NOG）,建立人性化白血病模型，之后用化疗药物阿糖胞苷（Ara-C）进行治疗2-4天(A2D,A4D)。 
2.用实时成像技术检测白血病细胞在骨髓中残留和行为。从左心室注射DiI染料显示血管结构，立即处死小鼠，取头盖骨于半固体培养基中，用共聚焦显微镜进行ex vivo成像，观察白血病细胞的残留和行为。 
3.取股骨的骨髓组织，进行免疫荧光等方法原位分析各种标志分子，包括Nestin、α-SMA、Vimentin、CCR1、LepR、CD51、CD29等。 
4.分离骨髓中分白血病细胞，用RNA-microarray和定量RT-PCR检测基因表达谱，特别分析细胞因子的表达。 
5.分离骨髓中的基质细胞，用免疫荧光和流式细胞仪等方法分析了其免疫表型分子，用体外成球和分化实验检测器自我更新和分化潜能。 
通过实时成像等技术我们检测到，白血病细胞浸润骨髓，在实质性破坏骨髓正常结构的情况下，给予化疗。基质细胞在骨髓中形成新的微环境（niche）。该niche提供庇护，使白血病细胞免受化疗药物的杀灭，见图2。图2为白血病细胞在骨髓中的浸润和保护微环境的形成。A,实时成像观察，GFP标记的白血病细胞在骨髓中的动态浸润和破坏。B,实时成像观察用Ara-C化疗2-4天后，白血病细胞残留在骨髓中。C,HE染色显示保护微环境（niche）形成，围绕并庇护残留白血病细胞。 
通过免疫荧光、流式细胞仪等方法检测到，该niche的组成细胞早期为Netin阳性（Nestin+）的基质干细胞，随后转变成α-SMA+基质细胞。因此我们称此niche为NSM微环境（或NSM-niche）。该Nestin+细胞表达CCR1、Vimentin、LepR、CD51和CD29。该α-SMA+细胞表达Vimentin，见图3。图3为鉴定骨髓中形成保护niche的组成细胞。A-D,Ara-C化疗2天（A2D）时niche组成细胞的表型分析。E-F,Ara-C化疗4天(A4D)时niche组成细胞的 表型分析。G,化疗2天时niche组成细胞的功能成球实验。H,A2D时niche组成细胞的诱导分化实验。注：早期A2D时niche组成细胞为Nestin+基质干细胞，稍晚A4D时转为α-SMA+，因此称该niche为NSM-niche。 
鉴定骨髓中是否存在保护白血病干细胞微环境的试剂盒包括下述抗Nestin、抗α-SMA、抗CCR1、抗Vimentin、抗LepR、抗CD51和抗CD29的抗体中的一个或多个，通过检测骨髓组织中NSM-niche组成细胞的存在，包括分析Nestin+细胞和/或α-SMA+细胞特征性表达（RNA和/或蛋白），来鉴定骨髓中是否存在保护白血病干细胞微环境。因此，抗Nestin、α-SMA、CCR1、Vimentin、LepR、CD51和CD29的抗体或抗体组合可以用于白血病的诊断，检测NSM-niche的形成，判断白血病人的进展和预后。 
实施例2.NSM-niche的形成机制和对LPCs的保护机制 
研究NSM-niche的形成过程和庇护白血病细胞机制，利用microarray和定量PCR我们检测到白血病细胞会分泌一些生长因子（CCL3、TGF-β1、GDF15等）参与这些过程和保护作用（图4A和4B）。 
1.用流式分选仪分离Nestin+基质干细胞，在transwell的体外培养体系中，证实CCL3招募Nestin+基质干细胞（图4C和4D），用体外增殖实验证实CCL3能扩增Nestin+基质干细胞（图4E），这些Nestin+基质干细胞在骨髓中形成NSM-niche（图3A）。 
2.将流式分选仪分离Nestin+基质干细胞在体外培养，添加TGF-β1，可以诱导Nestin+细胞转为α-SMA+基质细胞（图4F）。因此证实了NSM-niche细胞的转化。 
3.分离NSM-niche中的白血病细胞，体外培养诱导凋亡实验，证明这些细胞有抗凋亡特性（图5A和5B）。用western blot分析白血病细胞和培养上清液,发现白血病细胞分泌GDF15原型蛋白（pro-GDF15,图5C和5D upper panel）。在培养中加入NSM-niche细胞，GDF15变成成熟型(mGDF15,图5D middle panel)，加入蛋白酶Furin的抑制剂chloromethylketone(CMK)后，GDF15的转化被抑制（图5D lower panel）。用RT-PCR进一步分析NSM-niche细胞证明该细胞表达Furin（图5E）。免疫荧光原位分析骨髓，证实NSM-niche提供 Furin处理GDF15Furin使GDF15成熟，mGDF15结合白血病细胞表面的受体TGF-βRII而激活TGF-β信息通路（5F-5L）。诱导凋亡培养证实mGDF15能诱导白血病细胞抗凋亡（图5M）。因此，我们揭示了NSM-niche保护LPCs的机制如图5N所示。 
实施例3.抑制NSM-niche的形成或干扰其对LPCs的保护 
1.抑制或干扰CCL3 
在白血病模型小鼠体内，在化疗（Ara-C1g/kg,2-4天)，的同时，使用CCL3的受体（CCR1）抑制剂BX471（25mg/kg）。取骨髓组织进行HE染色（图6A）和免疫荧光检测(图6B)，BX471可以抑制NSM-niche的形成。分离骨髓白血病细胞用流式检测，证实抑制剂BX471的使用明显提高化疗效果（图6C）。 
将抑制剂BX471换成抗CCL3的中和抗体，进行同样的检测，抗CCL3的中和抗体的使用(500μg/kg)可以有效抑制NSM-niche的形成（图6D和6E），并明显提高化疗效果（图6F）。 
2.抑制和干扰GDF15 
在白血病模型小鼠体内，用特异性的干扰RNA（iGDF15）抑制GDF15的表达（图7A和7B）,再给予化疗（Ara-C1g/kg,2-4天)，用实时成像技术检测证实，iGDF15可以明显提高化疗药清除白血病的治疗效果（图7C-7F），因此明显延长小鼠的生存时间（图7G）。 
在白血病模型小鼠体内，将iGDF15换成抗GDF15中和抗体(500μg/kg)，可以得到同样的效果，明显提高化疗药Ara-C清除白血病细胞（图7H）。 
3.蛋白酶Furin抑制剂的使用 
在白血病模型小鼠体内，在化疗（Ara-C1g/kg,2天)，的同时，使用Furin抑制剂CMK（5mg/kg）。取骨髓液，用western blot检测GDF15，结果显示CMK的使用明显抑制pro-GDF15向mGDF15转化(图8A)。取骨髓组织进行HE染色（图8B）和免疫荧光检测(图6C)，证实抑制剂CMK的使用明显提高化疗效果。 
抑制NSM-niche的形成或干扰其对LPCs的保护可以明显提高现有化疗药的治疗果效。因此，抑制CCL3和其受体CCR1的抑制剂或中和抗体，抑制 GDF15的抑制剂或中和抗体，抑制Furin的抑制剂或中和抗体可用于制备提高白血病化疗效果的药物，有利于清除病人体内残留的LPCs，最终治愈白血病。 
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。 

Claims (7)

1.鉴定骨髓中是否存在保护白血病干细胞微环境的试剂盒，其特征在于，所述保护白血病干细胞微环境为NSM微环境，所述NSM微环境早期为Nestin+基质干细胞，随后转变成α-SMA+基质细胞，所述Nestin+基质干细胞表达CCR1、Vimentin、LepR、CD51和CD29，所述α-SMA+基质细胞表达Vimentin，所述试剂盒包括下述抗Nestin、抗α-SMA、抗CCR1、抗Vimentin、抗LepR、抗CD51和抗CD29的抗体中的一个或多个。
2.CCL3抑制剂、抗CCL3中和抗体、CCL3受体CCR1抑制剂或者抗CCR1中和抗体在制备提高白血病化疗效果药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述受体CCR1抑制剂为BX471。
4.GDF15抑制剂或抗GDF15中和抗体在制备提高白血病化疗效果药物中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述GDF15抑制剂为干扰RNAiGDF15。
6.蛋白酶Furin抑制剂或抗Furin中和抗体在制备提高白血病化疗效果药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述Furin抑制剂为CMK。
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Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000044789A1 (en) * 1999-01-29 2000-08-03 Leukosite, Inc. Anti-ccr1 antibodies and methods of use therefor
CN1282371A (zh) * 1997-11-27 2001-01-31 株式会社绿十字 从人分离的编码C6β－趋化因子Lkn－1的cDNA
CN1590539A (zh) * 2003-09-02 2005-03-09 中国人民解放军第四军医大学口腔医学院 一种使皮肤成纤维细胞永生化的方法
CN101528210A (zh) * 2006-12-07 2009-09-09 首尔大学校产学协力财团 筛选抑制tm4sf5功能的抗癌化合物和含有查耳酮化合物的抗癌组合物的方法
CN101589137A (zh) * 2005-03-31 2009-11-25 斯丹姆涅恩有限公司 羊膜来源的细胞组合物及其制备方法和用途
CN102292434A (zh) * 2008-11-04 2011-12-21 弗雷森纽斯医疗护理德国有限责任公司 源自成人肾小球的分离的多潜能间充质干细胞(hGL-MSC)、其制备方法及其在肾脏再生医学中的用途
CN102533636A (zh) * 2011-12-27 2012-07-04 陆华 人胚皮层神经干细胞的分离培养方法
WO2013012648A1 (en) * 2011-07-15 2013-01-24 Emory University Gdf15 in diagnostic and therapeutic applications
WO2013084190A1 (en) * 2011-12-08 2013-06-13 Yeda Research And Development Co. Ltd. Mammalian fetal pulmonary cells and therapeutic use of same
CN103289955A (zh) * 2012-03-01 2013-09-11 美天旎生物技术有限公司 未触及的活神经元的分离

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1282371A (zh) * 1997-11-27 2001-01-31 株式会社绿十字 从人分离的编码C6β－趋化因子Lkn－1的cDNA
WO2000044789A1 (en) * 1999-01-29 2000-08-03 Leukosite, Inc. Anti-ccr1 antibodies and methods of use therefor
CN1590539A (zh) * 2003-09-02 2005-03-09 中国人民解放军第四军医大学口腔医学院 一种使皮肤成纤维细胞永生化的方法
CN101589137A (zh) * 2005-03-31 2009-11-25 斯丹姆涅恩有限公司 羊膜来源的细胞组合物及其制备方法和用途
CN101528210A (zh) * 2006-12-07 2009-09-09 首尔大学校产学协力财团 筛选抑制tm4sf5功能的抗癌化合物和含有查耳酮化合物的抗癌组合物的方法
CN102292434A (zh) * 2008-11-04 2011-12-21 弗雷森纽斯医疗护理德国有限责任公司 源自成人肾小球的分离的多潜能间充质干细胞(hGL-MSC)、其制备方法及其在肾脏再生医学中的用途
WO2013012648A1 (en) * 2011-07-15 2013-01-24 Emory University Gdf15 in diagnostic and therapeutic applications
WO2013084190A1 (en) * 2011-12-08 2013-06-13 Yeda Research And Development Co. Ltd. Mammalian fetal pulmonary cells and therapeutic use of same
CN102533636A (zh) * 2011-12-27 2012-07-04 陆华 人胚皮层神经干细胞的分离培养方法
CN103289955A (zh) * 2012-03-01 2013-09-11 美天旎生物技术有限公司 未触及的活神经元的分离

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FELIX NWAJEIAND MARINA KONOPLEVA: "The Bone Marrow Microenvironment as Niche Retreats for Hematopoietic and Leukemic Stem Cells", 《ADVANCES IN HEMATOLOGY》 *
刘付贞 等: "柚皮苷通过抑制瘦素通路对抗高糖引起的心肌细胞损伤", 《中国病理生理杂志》 *

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Publication number Publication date
CN104977414B (zh) 2016-09-28

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