CN1049560A - 结核抗体测定胶乳试剂 - Google Patents
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Abstract
一种结核抗体测定胶乳试剂,属于医学检验试剂
的领域,由结核菌素致敏胶乳和作为中和抑制剂的结
核菌素溶液组成。用本试剂对病人体液样品作胶乳
凝集试验或胶乳凝集鉴别抑制试验,可有效地检出结
核抗体,有助于相应部位结核病的诊断。本发明试剂
具有准确、简便、省时和经济的特点,适合于各级医院
对胸水、腹水、脑脊液、尿液和血清等多种体液样品的
快速检测。
Description
所属技术领域:本发明属于医学检验试剂的领域,特殊地说属于结核病免疫学诊断试剂的领域。
技术背景:病人的血清、脑脊液、尿液、胸水、腹水和心包积液等体液样品中结核抗体的检出有助于相应部位结核病的诊断。该领域内的已有技术如下:(1)固相酶联免疫吸附试验(中国公共卫生,《中国公共卫生》杂志社出版,胡忠义等著。1988年,第7卷,165页),该法抗干扰能力较强,适用于多种体液样品包括胸水、腹水的检测,但此法要求使用单位添置一种较贵重的专用仪器,自配数种缓冲液,较贵的酶标试剂启封后不宜久储,测定需时一天,中、小型医院因样品数少、工作人员紧缺等原因不宜采用此法;(2)反相间接血凝抑制试验(中华结核病呼吸系疾病杂志,中华医学会出版,王荣福等著,1987年,第10卷,105页)此法有快速、简便的特点,但能否用于非特异凝集滴度较高的胸水、腹水等样品还有待于证明。
发明目的:本发明的任务是研制一种具有快速、准确、简便、经济、稳定特点的结核抗体测定胶乳试剂及其辅助试剂,使其适合于大、中、小各级医院对血清、胸水、腹水、脑脊液、尿液等多种体液样品的检测。
发明内容:1、经物理吸附法制备结核菌素(如结核菌素纯蛋白衍化物或旧结核菌素)致敏的高分子聚合物胶乳(如聚苯乙烯胶乳),加于适当稀释的病人体液样品,与其中结核抗体发生凝集反应。(简称胶乳凝集试验);2、配制结核菌素溶液作为结核抗体的中和抑制剂,预先加于病人体液样品中和结核抗体,使随后的结核菌素致敏胶乳的凝集较对照样品延迟发生(简称鉴别抑制试验)。
以下对本发明作详细描述。
试剂制造:按公知技术(快速检验资料汇编,人民卫生出版社出版,上海第六人民医院检验组编著,1973年,1-10页)制备10%聚苯乙烯胶乳和10%水解明胶。结核菌素纯蛋白衍化物系中国药品生物制品检定所产品,旧结核菌素系卫生部上海生物制品研究所产品。
配制中和抑制剂:用0.1mol/l甘氨酸缓冲液(含lg/L迭氮纳、8g/L氯化钠)pH8.2-8.4配制结核菌素纯蛋白衍化物溶液,浓度0.1-1000ug/L,最好是5-50ug/l;配制旧结核菌素溶液,稀释度1∶100-1∶10000,最好是1∶400-1∶800。
制备结核菌素致敏胶乳:10%聚苯乙烯胶乳1份,加甘氨酸缓冲液4份、甘氨酸缓冲液配制的结核菌素纯蛋白衍化物(浓度0.1-1000mg/l,最好是50-100mg/l)5份或旧结核菌素(稀释度1∶100-1∶200)5份,于20-37℃室温或水浴中间断搅拌4小时,加10%水解明胶1/10份,搅拌混匀,移置4℃过夜,10000r.p.m.离心10分钟(或用微孔滤膜过滤代替离心)分离胶乳粒子,后者重悬于相当原容积的甘氨酸缓冲液,4℃储存备用。
上述水解明胶和结核菌素溶液的添加顺序可以颠倒,即1份10%聚苯乙烯胶乳、4份甘氨酸缓冲液先加1/10份10%水解明胶,搅拌30分钟后加5份结核菌素溶液,间断搅拌4小时,余同上。
上述甘氨酸缓冲液可用0.1mol/l硼酸盐缓冲液pH8.2-8.4代替。上述水解明胶可用小牛血清白蛋白代替(终浓度为0.5-1g/L)。
试剂使用:以下结合实施例对本发明试剂的使用方法作详细描述。
实施例一:
病人血清以生理盐水稀释5倍、10倍,各吸25ul双份,加于玻板上四个方格内,用二支连接12号注射针头的乳头滴管分别加一滴(25ul)中和抑制剂(结核菌素纯蛋白衍化物溶液)或一滴甘氨酸缓冲液作对照,摇玻板3分钟使混匀,静置12分钟。每格加一滴(25ul)结核菌素纯蛋白衍化物致敏胶乳,用牙签迅速搅匀,计时,摇玻板混匀并于亮处观察至20分钟,含抑制剂样品出现凝集时间较对照样品延迟60秒钟以上者判为结核抗体阳性,反之为阴性。
用本法检查了31例肺结核病人血清,其中20例阳性;23例非结核的信院病人血清中仅1例阳性。
实施例二:
其他体液的胶乳凝集试验:体液样品经3000r.p.m.离心10分钟,取上清液以生理盐水稀释。脑脊液、尿液稀释2.5、5、10、20倍;胸水、心包积液稀释80、160、320倍,腹水稀释40、80、160倍,取每个稀释样品25ul,加于玻板方格内,每格加一滴甘氨酸缓冲液,摇匀3分钟,静置12分钟,每格加一滴结核菌素纯蛋白衍化物致敏胶乳,用牙签迅速搅匀,计时,摇动玻板并间断观察至20分钟,胸水1∶160以上凝集为阳性,反之为阴性。其他体液的阳性判定界限待积累资料后再确定。21例胸水的测定结果见表1。
表1 胸水结核抗体胶乳凝集试验结果
胸水性质 例数 阴性 阳性(滴度) 阳性率
不凝 1∶80凝集 160 320 (%)
结核性 8 0 1 5 2 87.5
非结核性 13 8 4 0 1 7.7
癌瘤 7 3 3 0 1
其他 6 5 1 0 0
实施例三:
其他体液的鉴别抑制试验:从实施例二的稀释样品中选出现凝集的最高或次高稀释度样品,吸25ul四复份,加于四个方格内。其中二格各加一滴中和抑制剂(结核菌素纯蛋白衍化物溶液),另二格各加一滴甘氨酸缓冲液作对照,其后的操作和结果判断同实施例一。
对胸水样品的测定结果如表2所示。实施例二中一例凝集滴度为320的支气管腺癌病人胸水在鉴别抑制试验中结果阴性。另一例凝集滴度为80的结核性胸水其鉴别抑制试验结果阳性。
表2 胸水结核抗体鉴别抑制试验结果
胸水性质 例数 1∶80 鉴别抑制试验时差(分钟) 阳性率
不凝 0 1 2 3 >4 (%)
结核性 8 0 0 1 3 1 4 100
非结核性 13 8 4 0 0 0 1 7.7
癌瘤 7 3 3 0 0 0 1
其他 6 5 1 0 0 0 0
发明效果:本发明有较好的抗干扰能力,适用于胸水、腹水、血清、脑脊液、尿液等多种体液样品的结核抗体测定,由于其使用简便、省时、经济,故对各级医院均适用。本发明与该领域已有技术相比具有显著特点(表3)。
表3 本发明与已有技术的对比
对比项目 固相酶联免疫 反向血凝 本发明
吸附试验 抑制试验
主要试剂启封
后稳定时间(月) 1 ? 6
测定时间 1天 2小时 1-2小时
测定设备投资(元) 1500 150 60
对中小型医院 ? 适用 适用
对胸水、腹水样品 适用 未见报道 适用
Claims (3)
1、一种结核抗体测定胶乳试剂,其特征在于:所述胶乳试剂是由表面结合了结核菌素的高分子聚合物胶乳所组成,与病人体液中结核抗体相遇可发生凝集。
2、一种结核抗体胶乳试剂的辅助试剂,其特征在于:所述辅助试剂由结核菌素溶液组成,预加于病人体液样品可中和结核抗体、延迟如权力要求1所述那样的凝集反应。
3、如权力要求1所述的结核抗体测定胶乳试剂,其特征在于:所述的高分子聚合物胶乳可以是聚苯乙烯胶乳。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 89106543 CN1049560A (zh) | 1989-08-15 | 1989-08-15 | 结核抗体测定胶乳试剂 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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CN 89106543 CN1049560A (zh) | 1989-08-15 | 1989-08-15 | 结核抗体测定胶乳试剂 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN1049560A true CN1049560A (zh) | 1991-02-27 |
Family
ID=4856777
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 89106543 Pending CN1049560A (zh) | 1989-08-15 | 1989-08-15 | 结核抗体测定胶乳试剂 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN1049560A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102565397A (zh) * | 2005-12-07 | 2012-07-11 | 积水医疗株式会社 | 防止血清干扰及提高抗磷脂抗体测定剂保存稳定性的方法 |
CN101341408B (zh) * | 2005-12-07 | 2012-08-22 | 积水医疗株式会社 | 抗磷脂抗体测定试剂以及抗梅毒螺旋体抗体测定试剂 |
-
1989
- 1989-08-15 CN CN 89106543 patent/CN1049560A/zh active Pending
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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CN102565397A (zh) * | 2005-12-07 | 2012-07-11 | 积水医疗株式会社 | 防止血清干扰及提高抗磷脂抗体测定剂保存稳定性的方法 |
CN101341408B (zh) * | 2005-12-07 | 2012-08-22 | 积水医疗株式会社 | 抗磷脂抗体测定试剂以及抗梅毒螺旋体抗体测定试剂 |
CN102565397B (zh) * | 2005-12-07 | 2015-07-08 | 积水医疗株式会社 | 防止血清干扰及提高抗磷脂抗体测定剂保存稳定性的方法 |
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C01 | Deemed withdrawal of patent application (patent law 1993) | ||
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