CN104955441B - 一种用于认知和美容目的的组合物 - Google Patents

一种用于认知和美容目的的组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN104955441B
CN104955441B CN201380056212.5A CN201380056212A CN104955441B CN 104955441 B CN104955441 B CN 104955441B CN 201380056212 A CN201380056212 A CN 201380056212A CN 104955441 B CN104955441 B CN 104955441B
Authority
CN
China
Prior art keywords
knotweed
small
extract
composition
hyoscine
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201380056212.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104955441A (zh
Inventor
安妮·乔治·V.K.乔治
伊嘉明
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BIOTROPICS MALAYSIA BERHAD
Original Assignee
BIOTROPICS MALAYSIA BERHAD
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by BIOTROPICS MALAYSIA BERHAD filed Critical BIOTROPICS MALAYSIA BERHAD
Publication of CN104955441A publication Critical patent/CN104955441A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104955441B publication Critical patent/CN104955441B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/70—Polygonaceae (Buckwheat family), e.g. spineflower or dock
    • A61K36/704—Polygonum, e.g. knotweed
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
    • A61K8/498—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom having 6-membered rings or their condensed derivatives, e.g. coumarin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
    • A61K8/602—Glycosides, e.g. rutin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/18—Antioxidants, e.g. antiradicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52—Stabilizers
    • A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/84—Products or compounds obtained by lyophilisation, freeze-drying

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

本发明涉及用于认知和美容目的的组合物，所述组合物含有来自小蓼的提取物。还公开了从小蓼中获得所述提取物的方法。在另一优选实施方式中，该认知和美容组合物含有小蓼提取物，所述小蓼提取物含有特征在于存在有槲皮素‑3‑葡萄糖醛酸苷和槲皮苷的化合物的组合。在另一优选实施方式中，其中，所述小蓼提取物的量基于其具有防止氧化损伤的效力来选择，所述防止氧化损伤的效力通过高的抗氧化值和在红细胞模型中的基于细胞的抗氧化保护(CAP‑e分析)得以证明。在另一优选实施方式中，提供了用于从小蓼中分离活性提取物的方法，所述方法包括以下步骤：a)在70℃‑105℃的温度范围下、优选80℃下通过渗滤使所述小蓼(包括植物的地上部分，包括茎和/或叶)经受溶剂提取，优选材料溶剂比为1:10‑20；b)过滤从上述步骤(a)中获得的提取物，然后浓缩并干燥，从而从中获得干燥的提取物粉末，所述干燥包括冷冻干燥、喷雾干燥或真空带式干燥。

Description

一种用于认知和美容目的的组合物
技术领域
本发明涉及含有小蓼(Polygonum minus)提取物的组合物。
背景技术
来自蓼科的小蓼在马来西亚当地被称为kesum或叻沙叶(laksa leaf)。小蓼是当 地的药用植物，通常作为杂生菜(ulam)被食用以用于预防保健。该植物叶是芳香的，被广泛 用作多种马来西亚美食(如laksa(辣味面食)、kerabu(草本植物炒米饭)、tom yam(辣味扑 鼻的汤)和asam pedas(辣味咖喱罗望子))的配料。通常将小蓼叶切碎并撒入以利用其强烈 的香气调味。在马来西亚传统医学体系中，kesum鲜叶的水煎剂被用于治疗消化不良、便秘 和胃功能紊乱及疼痛(Vimala S.，Ilham,M.A.，Rashih A.A.和Rohana S.(2003)，Nature’s Choice to Wellness:Antioxidant Vegetables/Ulam.Siri Alam and Rimba 7，Forest Research Institute Malaysia(FRIM)，第131页)。
皮肤经受许多外在(环境)因素以及内在因素的伤害。随着皮肤老化，氧化应激增加、炎症增加、胶原蛋白水平减少、酶MMP(肽酶，基质金属蛋白酶-1(MatrixMetalloproteinase-1))过表达、蛋白糖基化增加、线粒体衰变(mitochondrial decay)以及由此而来的氧化损伤增加。
目前在市场上存在很多用于此类预防和/或治疗的组合物。化妆品中存在有不同成分(例如，抗氧化剂、酶、植物雌激素(phytoestrogens)、软化剂(emollients)、和保湿剂(humectants)等)的多种组合。化妆品保护皮肤的能力随着组合及其成分的变化而变化，因此仍需要来自可利用的天然可再生植物材料、且对于局部和/或全身使用均有效的非处方制剂，来治疗氧化作用及其它皮肤损伤。
此外，在本领域中还期望探索所分离的天然可再生材料的其它特征属性，这是因为相比于临床试验和测试(从而对于人类健康和环境造成强烈担忧)的合成分子，天然可再生材料对人的副作用极小或没有副作用而容易得以应用。
值得一提的是，提供包含抗氧化活性(通过活性氧清除(ROS)性能)与抗胶原酶活性(抑制负责分解胶原蛋白的酶)二者的结合的有效皮肤护理剂通常非常困难。在相关领域中存在上述挑战的背景下，通过本发明令人惊奇地发现，小蓼(又称Persicaria minor)提取物通过双重的抗氧化活性和具有防止胶原蛋白分解潜能的抗胶原酶活性，满足了优质皮肤护理化妆品和/或药剂和/或具有皮肤有益属性的来源于小蓼提取物的组合物的多项期望标准，由此有利于抗皱/抗老化，同时因其抗氧化特性而有利于保护活细胞免受氧化损伤。
发明内容
本发明涉及用于认知和美容目的的组合物，所述组合物含有来自小蓼的提取物。同时公开了从小蓼中获得所述提取物的方法。
在另一优选实施方式中，含有小蓼提取物的组合物包含选自于槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷(quercetin-3-glucuronide)和槲皮苷(quercitrin)的活性物质。
在另一优选实施方式中，所述组合物选择性地含有占小蓼提取物的0.2wt％-1.0wt％的量的槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷，以及占小蓼提取物的0.1wt％-0.5wt％的量的槲皮苷。
在另一优选实施方式中，其中，所述小蓼提取物的量基于以下因素来选择：小蓼提取物具有相当于55倍没食子酸的防止氧化损伤的效力，所述防止氧化损伤的效力在红细胞模型中的基于细胞的抗氧化保护(CAP-e分析)中得以证明。
在另一优选实施方式中，提供了从小蓼中分离活性提取物的方法，所述方法包括以下步骤：a)在70℃-105℃的温度范围下、优选80℃下通过渗滤(percolation)使所述小蓼(包括植物的地上部分，包括茎和/或叶)经受溶剂提取以获得提取物，优选材料溶剂比为1:10-20；b)过滤从上述步骤(a)中获得的提取物，然后浓缩并干燥，从而从中获得干燥的提取物粉末，所述干燥包括冷冻干燥、喷雾干燥或真空带式干燥。
附图说明
图1示出了提供小蓼提取物的流程图。
图2(a)示出了HPLC图谱的结果，图2(b)示出了槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷和槲皮苷UV光谱的比较，以及在提取物中的相应峰。
图3示出了所述提取物与已知抗氧化剂没食子酸的IC50剂量比较。
图4示出了标准品1,10-邻菲咯啉一水合物(对照)的胶原酶抑制％。
图5示出了小蓼提取物的胶原酶抑制％。
图6示出了Barnes迷宫测试(Barnes Maze test)探测试验期间各扇区的图解视图。
图7(a)示出了东莨菪碱处理并同时接受银杏(ginkgo)、小蓼处理的小鼠的速度，图7(b)示出了东莨菪碱处理的、东莨菪碱和多奈哌齐(donepezil)处理的、以及东莨菪碱和载体处理的小鼠的速度。
图8(a)示出了采用东莨菪碱和银杏、东莨菪碱和小蓼(100mg/kg)、东莨菪碱和小蓼(50mg/kg)、以及东莨菪碱和载体进行的初次路径长度(primary path length)研究；图8(b)示出了参比对照的初次路径长度研究；图8(c)示出了采用东莨菪碱和银杏、东莨菪碱和小蓼(100mg/kg)、东莨菪碱和小蓼(50mg/kg)、以及东莨菪碱和载体进行的总路径长度研究；图8(d)示出了参比对照的总路径长度研究。
图9(a)示出了采用东莨菪碱和银杏、东莨菪碱和小蓼(100mg/kg)、东莨菪碱和小蓼(50mg/kg)、东莨菪碱和载体进行的初次错误(primary error)研究；图9(b)示出了参比对照的初次错误研究；图9(c)示出了采用东莨菪碱和银杏、东莨菪碱和小蓼(100mg/kg)、东莨菪碱和小蓼(50mg/kg)、以及东莨菪碱和载体进行的总错误研究；图9(d)示出了参比对照的总错误研究。
图10(a)示出了采用东莨菪碱和银杏、东莨菪碱和小蓼(100mg/kg)、东莨菪碱和小蓼(50mg/kg)、以及东莨菪碱和载体进行的初次潜伏期(primary latency)研究；图10(b)示出了参比对照的初次潜伏期研究；图10(c)示出了采用东莨菪碱和银杏、东莨菪碱和小蓼(100mg/kg)、东莨菪碱和小蓼(50mg/kg)、东莨菪碱和载体进行的总潜伏期研究；图10(d)示出了参比对照的总潜伏期研究。
图11示出了东莨菪碱处理组、以及50mg/kg和100mg/kg的小蓼处理组在各扇区中花费的时间。
具体实施方式
本发明涉及用于认知和美容目的的组合物，所述组合物含有来自小蓼的提取物。同时公开了从小蓼中获得所述提取物的方法。在下文中涉及以下非限制性实施例和附图来对本发明的细节、其优势予以更详细地阐明。本说明书在下文中将根据本发明的优选实施方式对本发明进行说明。然而，可以理解的是下面的实施例仅限于描述本发明的优选实施方式，以便于本发明的讨论；并且可以想到的是，本领域技术人员可在不脱离所附权利要求的范围的情况下设计出各种修改和等同方式。
将植物的地上部分(包括茎和叶)用水进行提取，并以约1:10的提取率(extraction ratio)通过烘箱干燥来进行干燥。所用的原料是干燥的叶，其特性在于：尺寸为2-5cm；干燥损失不超过10％；灰分含量不超过10％；异质物质不超过2％；总好氧微生物计数不超过107；总酵母和霉菌计数不超过105。然后，使干燥的叶经历用纯净水进行渗滤的步骤，并在70℃-105℃、优选80℃的温度下进行提取，从而获得提取物，进一步对该提取物进行过滤、浓缩、和干燥(干燥使用例如冷冻干燥、喷雾干燥或真空带式干燥的方法)，从而提供干燥的提取物粉末，对所述干燥的提取物粉末进行包装和储存。按照图1的流程图，在干燥步骤后将干燥的提取物粉末包装并在室温下储存。
对提取物中活性物质的鉴定和定量以及对小蓼的含水量分析进行了研究，并将结果在下文中予以提供：
按照以下分析，发现所获得的提取物含有活性物质槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷和槲皮苷：
HPLC分析：用于HPLC分析的样品溶液的制备
1.在5.0mL容量瓶中精确称量100.0mg样品提取物，并添加DMSO至定容。
2.然后在约60℃下将溶液超声10分钟，用0.20m RC膜过滤器过滤，用作HPLC分析的测试溶液。
流动相制备
1.通道A-向1000mL去离子水中加入1.0mL FA。将溶液过滤并脱气。
2.通道B-向1000mL乙腈中加入1.0mL FA。
色谱系统(Agilent 1290Infinity)
柱： PhenomenexKinetex(2.1×150mm，1.7微米)
温度： 60.0℃
流动相： 溶剂A-处于水中的0.1％FA
溶剂B-处于CAN中的0.1％FA
流速： 0.400mL/min(梯度)
梯度系统
波长： UV在360nm处，参比在450nm处
运行时间： 25分钟(含5.0min的后运行)
进样体积： 2.0μL
数据采集： 25分钟
参考图2(a)，从左边开始的高亮区域分别描绘出了槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷和槲皮苷在HPLC图谱中的存在。此外，在下表1中对由小蓼获得的所述最终提取物中的槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷和槲皮苷进行定量分析，以％计。
含水量分析
样品提取物的含水量通过使用水分分析仪进行测定，其中，将约0.5-0.6g的粉末样品转移至铝盘并在105℃下加热，直到获得恒定重量。干燥失重(LOD)由加热期间的重量损失占初始重量的百分比来确定。
表1：以％计的槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷和槲皮苷HPLC定量分析以及提取物的含水量分析。
分析(w/w)％
槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷 0.590818
槲皮苷 0.269141
含水量(％) 5.76
参考图2(b)，槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷和槲皮苷的保留时间和UV光谱与小蓼的样品提取物的保留时间和UV光谱对比表明，在所述样品中存在这两种化合物。因此，根据上述HPLC研究，在小蓼的样品提取物中明确鉴定出槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷和槲皮苷二者。对小蓼提取物进行研究，根据下文的结果揭示出了美容增强特征：
小蓼提取物的抗氧化活性
使用氧自由基吸收能力(ORAC方法)测试小蓼提取物的抗氧化活性，其显示出非常高的ORAC值(参见下表)。基于所进行的测试，小蓼提取物具有每克11,000微摩尔TE至每克36,000微摩尔TE的优选氧自由基吸收能力(ORAC)值，优选ORAC值为至少每克16000微摩尔TE。进一步对小蓼所产生的高ORAC值的保护活细胞免受氧化损伤的能力进行测试，使用e-CAP分析进行测试。
表2：从试验性(pilot)冻干的小蓼得到的氧自由基吸收能力(ORAC)。
单位(μmole TE每克)
抗过氧自由基的抗氧化能力 2591
抗羟基自由基的抗氧化能力 8973
抗过氧亚硝基阴离子的抗氧化能力 222
抗超氧阴离子的抗氧化能力 4039
抗单线态氧的抗氧化能力 1139
总ORACFN(以上的总和) 16964
表3：从市售的冻干小蓼得到的氧自由基吸收能力(ORAC)。
单位(μmole TE每克)
抗过氧自由基的抗氧化能力 1979
抗羟基自由基的抗氧化能力 16060
抗过氧亚硝基阴离子的抗氧化能力 200
抗超氧阴离子的抗氧化能力 6995
抗单线态氧的抗氧化能力 1572
总ORACFN(以上的总和) 26806
表4：从试验性喷雾干燥的小蓼得到的氧自由基吸收能力(ORAC)。
单位(μmole TE每克)
抗过氧自由基的抗氧化能力 2393
抗羟基自由基的抗氧化能力 23020
抗过氧亚硝基阴离子的抗氧化能力 228
抗超氧阴离子的抗氧化能力 8272
抗单线态氧的抗氧化能力 1611
总ORACFN(以上的总和) 35524
表5：从试验性冻干的小蓼得到的氧自由基吸收能力(ORAC)。
单位(μmole TE每克)
抗过氧自由基的抗氧化能力 2013
抗羟基自由基的抗氧化能力 19700
抗过氧亚硝基阴离子的抗氧化能力 236
抗超氧阴离子的抗氧化能力 10244
抗单线态氧的抗氧化能力 1925
总ORACFN(以上的总和) 34118
表6：从具有麦芽糊精作为载体的试验性真空带式干燥的小蓼得到的氧自由基吸收能力(ORAC)。
单位(μmole TE每克)
抗过氧自由基的抗氧化能力 784
抗羟基自由基的抗氧化能力 6380
抗过氧亚硝基阴离子的抗氧化能力 98
抗超氧阴离子的抗氧化能力 3770
抗单线态氧的抗氧化能力 576
总ORACFN(以上的总和) 11608
红细胞模型中基于细胞的抗氧化保护(CAP-e分析)
作为使用红细胞进行的基于细胞的抗氧化保护分析，CAP-e分析(21)被开发用来解决以下问题：复杂天然产物中的抗氧化剂是否进入胞浆以及是否有助于细胞内氧化损伤下降。该分析仅测量在胞浆中的效果，因为在测试中使用的报告染料只有在渗透进细胞内空间(即，胞浆)后才有功能，所述报告染料在胞浆中经历化学修饰，致使其保留在细胞内。该分析允许特别地对能够渗透进入活细胞的抗氧化剂进行半定量(Honzel等，2008，Comparison of Chemical and Cell-Based AntioxidantMethods for Evaluation ofFoods and NaturalProducts:Generating Multifaceted Data by ParallelTestingUsing Erythrocytes and PolymorphonuclearCells，Journal of Agricultural andFood Chemistry)。
将0.5g的测试产品与处于生理pH下的5mL 0.9％的盐水混合。将测试产品依次通过翻转和涡旋进行混合。通过2400rpm离心10分钟来除去固体。移出产品的上清液，然后过滤以用于CAP-e分析。由处于生理pH下0.9％盐水中的各份经过滤的上清液来制备系列稀释液。
用测试产品的系列稀释液处理红血细胞，一式两份。制备未经处理的红血细胞样品(阴性对照)和用氧化剂但未用含抗氧化剂的测试产品处理的红血细胞样品(阳性对照)，一式六份。通过离心并抽吸掉细胞沉淀上的上清液来将未能进入细胞的抗氧化剂除去。
通过添加过氧自由基生成剂AAPH使细胞暴露于氧化损伤。使用指示染料DCF-DA(由于氧化损伤能够变成发出荧光的物质)，通过测量各试验样品的荧光强度来记录抗氧化损伤的程度。根据与仅用氧化剂处理的细胞相比用产品处理的细胞的荧光强度的减少，来计算对氧化损伤的抑制。CAP-e值反映了测试产品的IC50剂量，即提供50％氧化损伤抑制的剂量。然后与已知抗氧化剂没食子酸的IC50剂量进行比较。
参考图3，其中红色IC50线与曲线相交的图表上的点反映了测试产品的IC50剂量，即提供50％氧化损伤抑制的剂量。将这一IC50剂量与已知抗氧化剂没食子酸(其在分析中用作对照)的IC50剂量进行比较，从而得到以没食子酸当量单位报告的CAP-e值。对提取物在红血细胞中预防自由基的抗氧化效果进行测试。已证明小蓼提取物的细胞保护作用相当于没食子酸的55倍(或者可能大于55倍)，由此证明没食子酸的比较物质(comparator)具有活性氧清除(ROS)活性。
小蓼提取物的抗皱效果
使用抗胶原酶测试和MMP-1和MMP-13在体外对该提取物的抗皱效果进行测试。
体外胶原酶抑制生物分析
胶原蛋白是脊椎动物中最丰富的蛋白，存在于几乎所有组织中。胶原原纤维(fibrils)是血管和皮肤的细胞外基质、牙齿、骨软骨、结缔组织的支持组织的主要组分。在所有年龄段的男性中，皮肤厚度与胶原蛋白的含量之间都存在一定的关系。类似的关系存在于年龄超过60岁的女性中，但在年轻女性中没有那么明显。在成人皮肤中，老化特征与总胶原蛋白含量密切相关，所述总胶原蛋白含量在两种性别中均随着年龄的增加而降低。胶原蛋白被胶原酶降解，从而导致皮肤中低的胶原蛋白含量。因此，皮肤中高的胶原酶活性可造成皮肤的皱纹。胶原蛋白的抑制剂应该能够有助于控制皮肤皱纹形成。特别感兴趣的是活性胶原酶与类风湿关节炎的病理学之间的关系。有证据显示，在关节结构中自然抑制的胶原酶可被激活，由此导致关节中特征组织的破坏。
溶剂和试剂：EnzChekTM明胶酶/胶原酶分析试剂盒(E12055，分子探针，Invitrogen，USA，-20℃储存)含有：来自猪皮的DQ明胶、荧光素缀合物，10×反应缓冲液、1,10-邻菲咯啉一水合物、来自溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)的胶原酶。
通过将其溶在200μl DMSO中并用1×反应缓冲液补足至10mL来制备2.5mg样品。根据需求制成进一步的稀释液。DQ明胶、荧光素缀合物的酶促裂解使荧光肽释放。荧光的增加与蛋白水解(proteolytic)活性成比例。用490nm的光激发DQ明胶、荧光素缀合物的消化产物，并在荧光酶标仪(fluorometric plate reader)中检测在520nm处的激发光。
胶原酶抑制分析按照EnzChekTM明胶酶/胶原酶分析试剂盒(E12055，分子探针，Invitrogen，USA)的试剂盒插页(insert)来进行。简要地说，加入80μl的1×反应缓冲液/载体缓冲液/测试溶液/各种浓度的阳性对照、100μl酶溶液(0.1单位/ml)和20μl底物溶液(1mg/ml)，混合15sec，在25℃下孵育2小时，并在荧光酶标仪[Fluostar Optima，BMGLabtech,Germany]中用以下参数进行读取：其中，将其在490nm激发，并通过Costar 96荧光酶标仪记录520nm处的出射光。
进行不含测试样品的对照反应，分别做了样品空白、对照空白和载体空白(除了酶以外，含有所有试剂)。抑制百分比计算如下：
其中，AFU＝任意荧光单位，使用log-probit分析计算出IC50。
上表7揭示出，21.13μg/ml的小蓼提取物浓度为50％抑制胶原酶活性的抑制浓度。此外，图4和图5示出了由标准品1,10-邻菲咯啉一水合物和小蓼提取物得到的抑制％。
上表8清楚地揭示出，小蓼提取物在5mg/mL的水平有效，当其浓度增加至50mg/mL的水平时并未明显地改变抑制％，因此，认为5mg/mL的水平对于最大抑制而言是最佳水平。
上表9清楚地揭示出，小蓼提取物在5mg/mL的水平有效，当其浓度增加至30mg/mL的水平时并未明显地改变抑制％，因此认为，关于对MMP-13的100％最大抑制，5mg/mL的水平是最佳水平。需要着重注意的是，由于基质金属蛋白酶(MMP)家族的MMP蛋白参与了正常生理过程中胶原蛋白的分解，因此通过小蓼提取物防止胶原蛋白分解减缓了老化作用，这是因为起皱纹是由胶原蛋白的分解引起的。
此外，对小蓼提取物进行了研究，从而揭示出认知增强的特性。
小蓼提取物对乙酰胆碱酯酶和单胺氧化酶-A的体外抑制作用
乙酰胆碱酯酶(AChE)是动物神经系统中的关键酶，被认为是认知功能调节中涉及到的最重要的神经递质。AChE抑制剂包括在FDA批准的用于阿尔茨海默氏病(AD)管理的关键药物之中。存在降低的脑胆碱酯酶活性和记忆改善关联的很多研究。在体外对该提取物对于乙酰胆碱酯酶的抑制进行了测试。
单胺氧化酶(MAO)也参与了神经递质的失活，MAO功能障碍(过多或过少的MAO活性)对很多精神疾患和神经疾患负有责任。例如，体内异常高水平或低水平的MAO与抑郁症、精神分裂症、物质滥用、注意力缺失紊乱、偏头痛和不规则性成熟有关。单胺氧化酶抑制剂是治疗抑郁症的主要处方药种类之一，虽然单胺氧化酶抑制剂由于该药物与饮食或其它药物相互作用的风险而经常被用作最后一道治疗，但MAO-A抑制剂事实上起到抗抑郁剂和抗焦虑剂的作用。
部分溶于体外测试溶剂中。
*给出了平均值的标准误差，结果基于多个独立的测定。hum＝人
因此，上表10清楚地揭示了小蓼提取物抑制乙酰胆碱酯酶和MAO-A的作用，其中，发现对所述两种酶的抑制效果相当，同时未发现所述提取物在抑制单胺氧化酶MAO-B和腺苷中不起显著的作用。
用小蓼提取物治疗东莨菪碱诱发的学习和记忆缺陷
将动物放置在升高的开放圆形平台上。使动物暴露于强光或吵闹的噪音。为响应这一强烈的刺激，动物寻找掩蔽，并进入平台周围的洞之一当中。虽然该设备最初设计为使用大鼠，但为了也能使用小鼠很快就对该设备进行了修改。事实上，该设备已被认为适用于小鼠这一物种，因为小鼠具有寻找并通过小洞逃避的能力。
已知东莨菪碱(毒蕈碱胆碱能拮抗剂)造成在Barnes迷宫试验中的损害(impairments)。这些损害可以通过给予胆碱酯酶抑制剂(如多奈哌齐)增加胆碱能紧张性(tone)来逆转。在本研究中，东莨菪碱处理在Barnes迷宫的获得(学习)阶段早期期间诱发缺陷，并进行探测试验。
东莨菪碱诱发的学习缺陷由总错误和初次错误、总潜伏期和初次潜伏期、以及总路径长度和初次路径长度均增加而得以证实。Barnes迷宫试验涉及如下所述的参数。
初次路径长度(cm)：在第一次与逃避洞接触之前，对象所移动过的距离。第一次接触被定义为鼻子碰触逃避洞的点。
总路径长度(cm)：在完成任务之前对象移动过的距离。完成任务被定义为对象进入逃避箱。试验结束。
初次错误：在第一次与逃避洞接触之前，由对象所做出的错误次数的计数。鼻点与非逃避洞的任何接触均被认为是错误。在这一背景下，同一非逃避洞的多次接触计作多次错误。
总错误：在整个实验中由对象做出的错误次数的计数。鼻点与非逃避洞的任何接触均被认为是错误。在这一背景下，同一非逃避洞的多次接触计作多次错误。
初次潜伏期(sec)：对象的鼻点与逃避洞第一次接触的潜伏期。
总潜伏期(sec)：对象完成任务的潜伏期。完成任务被定义为对象进入逃避箱，试验结束。
(i)试验制品
在本研究使用试验制品，即适当的小蓼提取物和可商购的银杏提取物(比较提取物)。以供应商的说明来制备和储存用于本项目的这些提取物。选择用于该研究的提取物的剂量由供应商确定。每星期为每种制品制备30×贮存悬浮液。将其批量分装，然后在4℃下储存整个一周。在给药前将贮存悬浮液用超纯水稀释至工作浓度，并在给药后将其弃去。用所需量的悬浮物填充口服灌胃针。在制备成单管注射剂之前通过涡旋混合悬浮液、并通过注射器混合稀释的试验制品，以小心地确保颗粒的均匀分布。此前已公开了使啮齿动物在空间导航任务中产生缺陷的东莨菪碱的给药剂量和给药时间。剂量从最初报道的0.3mg/kg增加至0.5mg/kg，这是因为较高的剂量会产生更可靠的缺陷。
(ii)对照制品
按照下表11和表12中的方案使用载体对照。
(iii)动物
2-6个月龄的雄性C57BL/6小鼠(20-25g)(n＝12～14)由BioLASCO(台湾)提供。将小鼠养在IVC系统(Allentown，USA)中的以下条件下：12/12小时光照/黑暗(200-300Lux)的周期(在07:00时开始光照)，自由获取食物(Labdiet，配方实验室食物)和水，湿度保持在50％-70％。用于每个处理的动物总数在下表13中示出(用于实验中每个分支的对象)。
用根据上表12和表12的测试化合物(测试剂量1和测试剂量2)以及对照制品(载体和银杏)连续进行19天的p.o.长期处理。每日在18:00时给药。化合物用灌胃针(20G)口服给予。在Barnes迷宫测试期间，用对照制品(载体、东莨菪碱和多奈哌齐)进行连续5天的i.p.长期处理。每天在测试前30min对每个对象给予处理。化合物使用27G针i.p.给予。
(iv)过程
Barnes迷宫评价每个对象花费5天，每天4次试验共4天(获得期)，以及最后一个获得试验后花费24小时的探测试验。在试验开始前的第1天和第2天给予预试验(适应期)。用27G针向测试对象i.p.给予测试化合物，并返回它们的饲养笼中30分钟。Barnes迷宫测试由三个阶段构成：适应期、获得期和探测试验。详细的步骤在以下部分中进行描述。
实验时间线
适应期：移去室，并使对象探索迷宫30秒，然后温柔地将其引导至逃避洞。如果对象随后并不进入逃避洞，则将其放入。然后，将洞覆盖并使对象在其中停留3分钟。然后，使对象返回它的饲养笼中，并用70％乙醇清洗平台。
获得期(第1-4天)：在此期间，移去室，并使对象探索迷宫5分钟，然后温柔地将其引导至逃避洞。如果对象随后并不进入逃避洞，则将其放入。然后，将洞覆盖并使对象在其中停留1分钟。然后，使对象返回它的饲养笼中，并用70％乙醇清洗平台。在两分钟的试间间隔后，进行接下来的试验。
在此期间，通过摄像机捕捉实验对象的行为，并记录在台式PC的硬盘上。使用用于自动跟踪和分析动物运动的Etho跟踪系统对这些记录进行分析。在测试期间测量上述所讨论的参数，并进行处理。
对于每个参数，将每天的试验进行平均(在本研究中每个对象4次试验)，并获得每个对象在特定天中的平均表现值。取一个对象在任何一天中进行的四次试验的平均作为一个测量结果，所以数据点中的n仅基于对象数量。在对数据进行正态分布测试后，使用双向重复测量ANOVA对数据进行进一步分析，以天(Day)作为对象内的重复测量因素，以组(Group)作为对象间的因素。同时考察因素的相互作用。如果发现显著效果，使用Tukey HSD测试进行组间的事后两两比较。除非另有说明，所有图表按平均值±SE绘制，α水平设置在0.05。使用Sigma Plot统计软件进行数据分析。
探测试验(第5天)：在与获得试验相同的环境条件下进行探测试验。
在各扇区中的持续时间(sec)：在探测试验期间，通过在迷宫上放置相同的白色盘将洞关闭。给予对象90sec来探索迷宫。将活动场所(arena)分成8个公平相等的扇区(如图6中所示)，在探测试验期间使用Ethovision视频跟踪软件测量对象在每个扇区中的持续时间。在Barnes测试中记录参数，并在下文中进行讨论。
获得期(第1-4天)
速度：参考图7(a)和图7(b)，双向重复测量ANOVA分析揭示了处理对速度无显著效果，所以对学习和记忆测量结果的解释不会被测试化合物的刺激或镇静作用所混淆。
初次路径长度和总路径长度：参考图8(a)、图8(b)、图8(c)和图8(d)中，各图显示当与载体对照处理组相比时，东莨菪碱处理仅在第2天(对于初次路径长度)以及第1、2和3天(对于总路径长度)中使表现下降。在总路径长度方面的表现的降低证实，东莨菪碱导致在Barnes迷宫中的学习缺陷。东莨菪碱诱发的缺陷主要出现在50mg/kg小蓼处理的小鼠中；当与第2天和第3天的载体+载体处理的小鼠相比，这些小鼠在表现方面显示出显著的降低。这表明，这一剂量的小蓼处理并未逆转东莨菪碱诱发的在Barnes迷宫中的缺陷。然而，多奈哌齐、银杏和100mg/kg的小蓼处理的小鼠均未出现东莨菪碱诱发的缺陷。小鼠的表现并未显著不同于载体+载体处理的小鼠。
初次错误和总错误：结果表明，当与载体处理的对照小鼠相比时，东莨菪碱处理仅在第2天(对于初次错误)以及第1和2天(对于总错误)中诱发学习缺陷。用100mg/kg小蓼、银杏和多奈哌齐处理后在第1天和第2天(其中，存在东莨菪碱诱发的缺陷)并未出现总错误的缺陷。这些数据表明，根据通过总错误进行的评估，高剂量的小蓼可逆转东莨菪碱诱发的学习缺陷。根据通过图9(a)、图9(b)、图9(c)和图9(d)中初次错误进行的评估，较低剂量的小蓼表现出在第2天逆转东莨菪碱缺陷。
初次潜伏期和总潜伏期：这些数据表明，当与载体对照相比时，东莨菪碱诱发学习缺陷。换言之，东莨菪碱处理的小鼠花费更长的时间来找到洞并从迷宫中逃脱。用高剂量小蓼处理的小鼠行为与用载体处理的小鼠相同，并未显示出东莨菪碱的学习缺陷。如图10(a)、图10(b)、图10(c)和图10(d)所示，用多奈哌齐处理以及用银杏处理得到类似的结果。
在探测试验(第5天)中，在东莨菪碱处理组和50mg/kg小蓼处理组在各扇区中所花费的时间上没有发现显著差异。图10(图11)表明，探测试验期间小鼠执行任务，但是不存在逃避洞。允许小鼠探索迷宫，并记录小鼠在迷宫上各区域所待的时间。这种“探测”试验用来评估记忆。用东莨菪碱处理的小鼠没有表现出偏爱迷宫的“目标”扇区——在先前的试验中逃避洞位于此处。这表明，东莨菪碱已诱发记忆缺陷。该种记忆缺陷无法被低剂量的小蓼逆转，因为这些小鼠也没有表现出对目标扇区的偏爱。银杏处理和多奈哌齐的处理均使东莨菪碱缺陷得以逆转——这是已被多个实验室报道过的效果。高剂量的小蓼也逆转了东莨菪碱诱发的记忆缺陷，这是因为用100mg/kg小蓼提取物处理的小鼠在目标扇区花费了显著量的时间。
在本研究中，在Barnes迷宫的获得(学习)阶段早期，东莨菪碱处理诱发缺陷。东莨菪碱在学习方面诱发的缺陷被总错误和初次错误、总潜伏期和初次潜伏期、以及总路径长度和初次路径长度的增加而证实。关于学习曲线，东莨菪碱处理的动物的伤害在训练早期似乎最为明显，在此之后处理组之间达成某种恒定，这由东莨菪碱处理的小鼠在第1天、第2天和第3天总路径长度增加(不包括第4天)得到了最好的说明。这些缺陷被阳性对照——多奈哌齐和银杏提取物减弱。此外，100mg/kg的小蓼在Barnes迷宫的获得阶段使得东莨菪碱诱发的缺陷减弱。在任务的保留(探测试验)方面中，测试化合物逆转了东莨菪碱诱发的缺陷。在探测试验中，除了50mg/kg的低剂量小蓼外，所有处理均使得东莨菪碱诱发的缺陷减弱。这些缺陷通过小鼠在目标扇区未花费显著的时间来描述。低剂量缺乏效果和高剂量的显著效果能够表明，该提取物存在剂量依赖作用。
东莨菪碱的学习缺陷存在于实验早期，并且结果表明，小蓼提取物可在小鼠中减弱东莨菪碱诱发的这些学习和记忆缺陷。本研究使用Barnes迷宫，该Barnes迷宫提供对空间记忆的评估。
因此，使得能够通过本发明的技术优势来提供具有保护细胞防止氧化损伤潜能的小蓼(又称为Persicaria minor)提取物，所述提取物具有至少每克16000微摩尔TE的高ORAC值，所述小蓼提取物通过对MMP-1(肽酶，基质金属蛋白酶-1)和MMP-13(肽酶，基质金属蛋白酶-13)具有强抑制作用从而防止胶原蛋白分解，显示出抗皱和抗老化的保护作用；并且通过提取物的抗胆碱酯酶作用改善记忆和学习，从而显示出对认知有益。
因此，不同寻常地发现小蓼的水提取物(其特征在于，存在标志物槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷和槲皮苷)作为认知增强剂有效，并通过分别作为潜在的乙酰胆碱酯酶抑制剂和单胺氧化酶-A抑制剂而成为针对治疗抑郁和焦虑的潜在活性物质。

Claims (9)

1.一种含有有效量的小蓼提取物的组合物，其中，所述提取物含有槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷和槲皮苷；其中，所述槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷的量占小蓼提取物的0.2wt％-1.0wt％，并且所述槲皮苷的量占小蓼提取物的0.1wt％-0.5wt％。
2.如权利要求1所述的组合物，其中，所述小蓼提取物具有每克11,000微摩尔TE至每克36,000微摩尔TE的氧自由基吸收能力(ORAC)值。
3.如权利要求2所述的组合物，其中，所述小蓼提取物具有至少每克16000微摩尔TE的氧自由基吸收能力(ORAC)值。
4.如权利要求1所述的组合物，其中，所述槲皮素-3-葡萄糖醛酸苷的优选量占小蓼提取物的0.5wt％。
5.如权利要求1所述的组合物，其中，所述槲皮苷的优选量占小蓼提取物的0.2wt％。
6.权利要求1-5中任一项所述的组合物在制备用于认知增强的试剂中的用途。
7.权利要求1-5中任一项所述的组合物在制备用于皮肤护理目的试剂中的用途。
8.如权利要求7所述的用途，其中，将所述组合物用来制备用于抗皱作用的试剂。
9.权利要求1-5中任一项所述的组合物在制备用于防止氧化性细胞损伤的试剂中的用途。
CN201380056212.5A 2012-08-29 2013-02-26 一种用于认知和美容目的的组合物 Active CN104955441B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
MYPI2012003882A MY172154A (en) 2012-08-29 2012-08-29 Composition for cognition and cosmetic purposes and use of said composition for preparing an agent
MYPI2012003882 2012-08-29
PCT/MY2013/000033 WO2014035233A1 (en) 2012-08-29 2013-02-26 A composition for cognition and cosmestic purposes

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104955441A CN104955441A (zh) 2015-09-30
CN104955441B true CN104955441B (zh) 2017-11-10

Family

ID=50183949

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201380056212.5A Active CN104955441B (zh) 2012-08-29 2013-02-26 一种用于认知和美容目的的组合物

Country Status (7)

Country Link
US (1) US9877993B2 (zh)
EP (1) EP2895143B1 (zh)
JP (1) JP6228211B2 (zh)
CN (1) CN104955441B (zh)
ES (1) ES2873368T3 (zh)
MY (1) MY172154A (zh)
WO (1) WO2014035233A1 (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021020961A1 (en) * 2019-07-31 2021-02-04 Biotropics Malaysia Berhad Extract of persicaria minor and use for treating or alleviating symptoms and/or conditions associated with hyperuricemia
FR3099701B1 (fr) 2019-08-08 2022-03-25 BASF Beauty Care Solutions FR Nouvelle utilisation cosmétique d’une combinaison d’oenothéine-B et de quercétine-3-O-glucuronide

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4339486A1 (de) * 1993-11-19 1995-05-24 Erwin Backhaus Mittel zur Verzögerung des Alterungsprozesses der Haut
JP3584489B2 (ja) * 1994-03-23 2004-11-04 株式会社コーセー 皮膚外用剤
CA2281944C (en) * 1997-02-25 2007-05-15 The Regents Of The University Of Michigan Methods and compositions for preventing and treating chronological aging in human skin
DK1658879T3 (da) * 2003-08-28 2013-05-13 Tasly Pharmaceutical Group Co Radix Salviae Miltiorrhizae, ekstrakt og sammensætning deraf til behandling af aspirinresistente sygdomme
US20080025930A1 (en) * 2006-07-31 2008-01-31 Hugo Corstjens Anti-aging Compositions Comprising Menyanthes Trifoliata Leaf Extracts and Methods of Use Thereof
EP2259768B1 (en) * 2008-04-08 2019-05-22 Merck Patent GmbH Compositions containing cyclic peptides and methods of use
GR1006881B (el) * 2009-04-27 2010-07-13 Κορρες Α.Ε. Φυσικα Προϊοντα, Αντιγηραντικες ιδιοτητες της κερκετινης, του 18(α) - γλυκυρετινικου οξεος της χεδεραγενινης και των παραγωγων τους
CN102625693B (zh) * 2009-08-26 2015-06-03 玫琳凯有限公司 包含植物提取物的局部皮肤护理配方

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Antioxidant flavonoids from leaves of Polygonum hydropiper L.;Zhao Feng Peng et al;《Phytochemistry》;20031231(第62期);第219-228页 *
Pharmacological Mechanisms Underlying Gastroprotective Activities of the Fractions Obtained from Polygonum minus in Sprague Dawley Rats;Suhailah Wasman Qader et al;《International Journal of Molecular Sciences》;20120201(第13期);第1481-1496页 *
VIMALA S. et al.Antioxidant evaluation in malaysian medicinal plant: Persicaria minor (huds.) leaf.《SCIENCE JOURNAL OF MEDICINE AND CLINICAL TRIALS》.2012,(第2012期),第9-16页. *

Also Published As

Publication number Publication date
JP6228211B2 (ja) 2017-11-08
EP2895143A1 (en) 2015-07-22
CN104955441A (zh) 2015-09-30
JP2015526511A (ja) 2015-09-10
EP2895143B1 (en) 2021-04-07
MY172154A (en) 2019-11-14
WO2014035233A1 (en) 2014-03-06
US9877993B2 (en) 2018-01-30
ES2873368T3 (es) 2021-11-03
US20150320821A1 (en) 2015-11-12
EP2895143A4 (en) 2016-07-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Lamport et al. The effects of flavonoid and other polyphenol consumption on cognitive performance: a systematic research review of human experimental and epidemiological studies
Benchagra et al. Antioxidant effect of moroccan pomegranate (Punica granatum L. sefri variety) extracts rich in punicalagin against the oxidative stress process
Naczk et al. Protein-binding and antioxidant potential of phenolics of mangosteen fruit (Garcinia mangostana)
Debnath et al. Antioxidant and anti-inflammatory activity of Polygonatum sibiricum rhizome extracts
Lewoyehu et al. Comparative evaluation of analytical methods for determining the antioxidant activities of honey: A review
Zhang et al. Molecular mechanisms of malignant transformation of oral submucous fibrosis by different betel quid constituents—does fibroblast senescence play a role?
Zhang et al. Protective effects of zinc and N-acetyl-L-cysteine supplementation against cadmium induced erythrocyte cytotoxicity in Arbor Acres broiler chickens (Gallus gallus domesticus)
CN104955441B (zh) 一种用于认知和美容目的的组合物
Cordier et al. Effects of selected South African plant extracts on haemolysis and coagulation
Hoskin et al. Novel spray dried algae-rosemary particles attenuate pollution-induced skin damage
Arsa et al. Properties of different varieties of durian
CN1345225A (zh) 抗皮肤老化的护肤品
Song et al. [Retracted] Protective Effects and Molecular Mechanism of Total Flavonoids from Lycium Barbarum Leaves on Photoaged Human Dermal Fibroblasts
Kalpanadevi et al. In vitro antioxidant studies of Begonia malabarica Lam. and Begonia floccifera Bedd
Selfayan et al. Inhibitory effect of Capparis spinosa extract on pancreatic alpha-amylase activity
Emsen The antioxidant and antigenotoxic potential of Peltigera canina and Umbilicaria nylanderiana based on their phenolic profile
Husein‐ElAhmed et al. Relationship between food intake and cutaneous solar elastosis adjacent to basal cell carcinoma
García-Villegas et al. The potential of Mangifera indica L. Peel extract to be revalued in cosmetic applications
Obeagu Evaluation of effect of Crude Methanol Tetrapleura Tetraptera (TTE) on Hematological Parameters of Albino Rats
Thrikawala et al. In Vitro α‐Amylase and Protein Glycation Inhibitory Activity of the Aqueous Extract of Flueggea leucopyrus Willd
Zhao et al. Volatile compounds analysis and biomarkers identification of four native apricot (Prunus armeniaca L.) cultivars grown in Xinjiang region of China
JPWO2011152006A1 (ja) 皮膚温度上昇剤、並びにそれを含有する化粧料、食品、及び雑貨
Culas et al. Development of Liquid‐Based Tea and Its Antidiabetic Effect
Rybak et al. Inhibition of α-Amylase, α-Glucosidase, Pancreatic Lipase, 15-Lipooxygenase and Acetylcholinesterase Modulated by Polyphenolic Compounds, Organic Acids, and Carbohydrates of Prunus domestica Fruit
Jeng et al. Particle size and temperature effects on antioxidant by‐product isolated from leaf gum extract of Mesona procumbens Hemsl

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant