CN104940142A - 一种麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒制备方法及其应用 - Google Patents
一种麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒制备方法及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒制备方法及其应用，有效解决麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备及苦参碱靶向性低，使用效果差的问题，麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒是在苦参碱纳米粒上通过化学键连接有麦胚凝集素，苦参碱水浴溶解成水溶液；聚乳酸-羟基乙酸共聚物丙酮水浴溶解成有机相；将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，将初乳注入聚乙烯醇水溶液，挥去丙酮，离心，沉淀干燥，成苦参碱纳米粒；苦参碱纳米粒用PBS溶液溶解，加入碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，活化，离心，上清液加入含麦胚凝集素溶液，孵化，离心，沉淀干燥，即成，本发明制备的条件容易满足，原料来源丰富，成本低，是肿瘤治疗药物上的创新。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域，特别是一种麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒制备方法及其应用。
背景技术
结肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，在欧美国家肿瘤患者的死亡原因中位居第二，在我国也逐渐呈高发趋势。如何将抗癌药物制成纳米粒并赋予它主动识别癌细胞的功能，是药剂学界普遍关注度问题。Chunxia Wang等采用麦胚凝集素修饰紫杉醇纳米粒，研究其对结肠癌细胞CaCo-2和HT-29的增值活性影响，与普通紫杉醇纳米粒进行比较，结果表明结肠癌细胞上糖蛋白对麦胚凝集素的表达水平高于正常结肠细胞。Ying Liu等用戊二醛法将麦胚凝集素(WGA)键合在蟾酥灵的脂质纳米粒上，采用体外法评价法研究其与结肠癌细胞株CaCo-2的作用，并与未经WGA修饰脂质纳米粒比较，发现前者可提高细胞对蟾酥灵的吸收，提示可通过口服WGA修饰的脂质纳米粒提高药物的生物利用度。Sakuma S报道，包载荧光探针香豆素-6的纳米粒经花生凝集素修饰后，可识别结肠癌特异抗原，用于内窥镜检查结肠癌的成像剂。Cohen S研究结果表明，将肿瘤靶向配体花生凝集素通过碳二亚胺法与生物可降解荧光剂白蛋白制成的纳米粒结合后，利用其与结肠癌细胞特异亲和的特性，采用NIR技术将其应用于结肠癌检查。大量癌变的结肠上皮细胞的细胞膜上和细胞顶端胞浆内存在与麦胚凝集素结合位点；结肠癌HT-29细胞膜和细胞内蛋白上存在WGA可识别的大量糖蛋白，而正常结肠细胞则明显缺乏这种糖蛋白。因此，凝集素对结肠癌细胞具有特异亲和作用。综上所述，凝集素具有作为抗癌药物载体，用于结肠癌靶向治疗的可能性。
苦参碱(Matrine，Mt)是从豆科植物苦参的干燥根中提取的主要生物碱之一，有α-，β-，γ-，δ-四种异构体，常见的为α-苦参碱，溶于水、氯仿、苯、乙醚等，略溶于石油醚。属于四环的喹诺里西啶生物碱。研究发现，Mt可显著抑制HT-29细胞的体外侵袭力，其机制可能与下调HT-29细胞HSPE基因表达有关。同时还发现，Mt可诱导结肠癌SW1116细胞凋亡，其机制可能与上调Fax和BaxmRNA表达有关。报道苦参碱体外可抑制人大肠癌SW480细胞环氧化酶-2的表达，抑制SW620细胞增殖，诱导凋亡。因此，苦参碱是一个非常有潜力的抗结肠癌药物。但目前关于苦参碱各类纳米粒的报道较多，如：氧化苦参碱胶束纳米粒制备及其体外抗肿瘤活性研究，《中国药业》2011年第15期；苦参碱纳米粒在小鼠体内组织分布和药动学研究，《中南药学》2010年第7期；苦参碱/羧甲基壳聚糖/磷酸化壳聚糖纳米粒子的制备及性能表征，《材料导报》2010年第6期；苦参碱聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒冻干粉针剂的制备及体外释放，《中国医药工业杂志》2009年第6期；HPLC法测定苦参碱白蛋白纳米粒的包封率，《药物分析杂志》2008年第1期；苦参碱固体脂质纳米粒的试制及物相分析，《中国医药工业杂志》CSCD 2005年第4期；苦参碱固体脂质纳米粒的制备，《中国实验方剂学杂志》2013年第19期；磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化苦参碱纳米粒的制备及其特性，《生物医学工程与临床》2012年第3期；氧化苦参碱聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的体外释药及肝脏分布研究，《中国药科大学学报》CSCD 2010年第6期，但未见麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的相关报道。
发明内容
针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明的目的就是提供一种麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒制备方法及其应用，可有效解决麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备及苦参碱靶向性低，使用效果差的问题。
本发明的技术方案为：所述的麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒是在苦参碱纳米粒上通过化学键连接有麦胚凝集素，其制备方法包括以下步骤：
(1)制备苦参碱纳米粒(Mt-NPs)：称取苦参碱(MT)0.4-0.6g，用水0.8-1.2ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)0.25-0.3g，用18-22ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46％的聚乙烯醇(PVA)水溶液120-130ml作为水相，在815r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒(Mt-NPs)；
(2)制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)：取上述制备的苦参碱纳米粒(Mt-NPs)用PBS溶液45-55ml溶解，将碳二亚胺(DEAC)0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒(Mt-NPs)的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素(WGA)浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)；
所述的PBS溶液为pH值7.2-7.4的PBS溶液。
所述的麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒在制备抗结肠癌药物中的应用。
本发明利用结肠癌细胞存在凝集素的结合位点及凝集素受体的表达，将麦胚凝集素(WGA)修饰在苦参碱制成的纳米粒(NPS)上，使之与结肠癌细胞产生特异亲和作用，选择性杀伤癌细胞并发挥长效作用，能够实现肿瘤特异性靶向，且制备的条件容易满足，原料来源丰富，成本低，是肿瘤治疗药物上的创新。
附图说明
图1为本发明不同浓度MT-NPS随时间变化对癌细胞增殖的抑制作用；
图2为本发明不同浓度WGA-MT-NPS随时间变化对癌细胞增殖的抑制作用。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的具体实施方式做详细说明。
本发明在具体实施中可由以下实施例给出。
实施例1
本发明麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备苦参碱纳米粒(Mt-NPs)：称取苦参碱(MT)0.5g，用水1.0ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)0.279g，用20ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46％的聚乙烯醇(PVA)水溶液125ml作为水相，在815r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒(Mt-NPs)；
(2)制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)：取上述制备的苦参碱纳米粒(Mt-NPs)用PBS溶液50ml溶解，将碳二亚胺(DEAC)0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒(Mt-NPs)的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素(WGA)浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)。
实施例2
麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备苦参碱纳米粒(Mt-NPs)：称取苦参碱(MT)0.4g，用水0.8ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)0.26g，用18ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46％的聚乙烯醇(PVA)水溶液122ml作为水相，在815r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒(Mt-NPs)；
(2)制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)：将上述制备的苦参碱纳米粒(Mt-NPs)用PBS溶液46ml溶解，将碳二亚胺(DEAC)0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒(Mt-NPs)的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素(WGA)浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)。
实施例3
麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备苦参碱纳米粒(Mt-NPs)：称取苦参碱(MT)0.6g，用水1.2ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)0.29g，用21ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46％的聚乙烯醇(PVA)水溶液128ml作为水相，在815r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒(Mt-NPs)；
(2)制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)：取上述制备的苦参碱纳米粒(Mt-NPs)用PBS溶液53ml溶解，将碳二亚胺(DEAC)0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒(Mt-NPs)的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素(WGA)浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)。
实施例4
麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备方法，包括以下步骤：
(1)制备苦参碱纳米粒(Mt-NPs)：称取苦参碱(MT)0.55g，用水1.2ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)0.3g，用22ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46％的聚乙烯醇(PVA)水溶液130ml作为水相，在815r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒(Mt-NPs)；
(2)制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)：取上述制备的苦参碱纳米粒(Mt-NPs)用PBS溶液55ml溶解，将碳二亚胺(DEAC)0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒(Mt-NPs)的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素(WGA)浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)。
所述的麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒在制备抗结肠癌药物中的应用。
本发明经反复多次实验，均能够显著的抑制结肠癌细胞HT-29增殖作用并促进该细胞凋亡，相关试验资料如下：
一、麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒(WGA-Mt-NPS)对结肠癌细胞细胞作用
1、WGA-MT-NPS和MT-NPS对结肠癌细胞HT-29增殖的影响
分别用含MT-NPS和WGA-MT-NPS这两种药浓度为25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml和400μg/ml的培养基作用于结肠癌HT-29细胞，连续作用72h，分别在24h，48h，72h采用MTT法利用酶标仪在波长490nm处测定每孔的光密度值(OD)，计算细胞增殖抑制率。
不同浓度MT-NPS随时间变化对癌细胞增殖的抑制率(n＝6)
不同浓度WGA-MT-NPS随时间变化对癌细胞增殖的抑制率(n＝6)
结果表明，MT-NPS和WGA-MT-NPS对结肠癌HT-29细胞的增殖均具有抑制作用，在25μg/ml～200μg/ml范围内，WGA-MT-NPS对结肠癌HT-29细胞的增殖作用显著增强，浓度为100μg/ml的WGA-MT-NPS作用24小时对癌细胞增殖的抑制作用是MT-NPS的17.1倍。
2、WGA-MT-NPs和MT-NPs对结肠癌细胞HT-29凋亡的影响
分别用含MT-NPs和WGA-MT-NPs这两种药浓度为100μg/ml、150μg/ml和200μg/ml的培养基作用于结肠癌HT-29细胞，连续作用48小时。利用流式细胞仪对细胞凋亡进行检测和分析，结果见表2。
表2 MT-NPS和WGA-MT-NPS对结肠癌细胞HT-29凋亡的影响(n＝3)
注：*表示与空白组比较差异显著，P<0.05；**表示与空白组比较差异极显著，P<0.01。
结果表明，相同浓度下WGA-MT-NPS对细胞凋亡的促进作用是MT-NPS的1.2～1.9倍。因此MT-NPS经WGA修饰后，其对结肠癌细胞HT-29的促凋亡作用更为明显。
3、WGA-MT-NPs和MT-NPs对结肠癌细胞HT-29周期的影响
分别用含MT-NPs和WGA-MT-NPs这两种药浓度为100μg/ml、150μg/ml和200μg/ml的培养基作用于结肠癌HT-29细胞，连续作用48小时。利用流式细胞仪采用凯基细胞DNA含量检测(细胞周期)试剂盒对细胞周期进行分析。结果见表3。
表3 MT-NPS和WGA-MT-NPS对结肠癌细胞HT-29细胞周期的影响(n＝3)
注：*表示与空白组比较差异显著，P<0.05；**表示与空白组比较差异极显著，P<0.01。
由上表可知，WGA-MT-NPS与MT-NPS将细胞周期阻滞在G0/G1期，阻碍了细胞DNA的合成，从而抑制细胞的增殖。WGA-MT-NPS比MT-NPS效果更为明显。
4、fWGA-MT-NPs与结肠癌HT-29细胞和人正常结肠上皮细胞NCM460的相互作用研究
将经FITC标记的WGA修饰在MT-NPS上，制备fWGA-MT-NPS。浓度为200μg/ml的fWGA-MT-NPS分别作用于结肠癌HT-29细胞和人正常结肠上皮细胞NCM46025min，用细胞膜荧光染料Dil对细胞膜进行染色，在共聚焦显微镜下药物与细胞的结合情况。结果表明，HT-29细胞对WGA-MT-NPS的摄取明显强于正常结肠细胞，说明WGA对MT-NPS修饰后具有较为明显的结肠癌细胞靶向性和选择性杀伤作用。
综上所述，WGA-MT-NPs与MT-NPs相比，具有显著的抑制HT-29细胞增值作用及促进该细胞凋亡功能，其抑制癌细胞增值是通过阻碍细胞DNA的合成发挥作用的。与人正常结肠上皮细胞NCM460比较，WGA-MT-NPs对结肠癌HT-29细胞具有特异结合作用。表明WGA-MT-NPs是有一定前景的抗结肠癌药物。
本发明利用结肠癌细胞存在凝集素的结合位点及凝集素受体的表达，将麦胚凝集素(WGA)修饰在苦参碱制成的纳米粒(MT-NPS)上，使之与结肠癌细胞产生特异亲和作用，选择性杀伤癌细胞并发挥长效作用，能够实现肿瘤特异性靶向，且制备的条件容易满足，原料来源丰富，是肿瘤治疗药物上的创新。
Claims (6)
1.一种麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备方法，其特征在于，在苦参碱纳米粒上通过化学键连接有麦胚凝集素，由以下步骤实现：
（1）制备苦参碱纳米粒：称取苦参碱0.4-0.6g，用水0.8-1.2ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物0.25-0.3g，用18-22ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46%的聚乙烯醇水溶液120-130ml作为水相，在815 r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒；
（2）制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒：取上述制备的苦参碱纳米粒用PBS溶液45-55ml溶解，将碳二亚胺0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000 r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒；
所述的PBS溶液为pH值7.2-7.4的PBS溶液。
2.根据权利要求1所述的麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）制备苦参碱纳米粒：称取苦参碱0.5g，用水1.0ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物0.279g，用20ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46%的聚乙烯醇水溶液125ml作为水相，在815 r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒；
（2）制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒：取上述制备的苦参碱纳米粒用PBS溶液50ml溶解，将碳二亚胺0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000 r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒。
3.根据权利要求1所述的麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）制备苦参碱纳米粒：称取苦参碱0.4g，用水0.8ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物0.26g，用18ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46%的聚乙烯醇水溶液122ml作为水相，在815 r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒；
（2）制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒：将上述制备的苦参碱纳米粒用PBS溶液46ml溶解，将碳二亚胺0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000 r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒。
4.根据权利要求1所述的麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）制备苦参碱纳米粒：称取苦参碱0.6g，用水1.2ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物0.29g，用21ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46%的聚乙烯醇水溶液128ml作为水相，在815 r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒；
（2）制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒：取上述制备的苦参碱纳米粒用PBS溶液53ml溶解，将碳二亚胺0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000 r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒。
5.根据权利要求1所述的麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）制备苦参碱纳米粒：称取苦参碱0.55g，用水1.2ml水浴加热溶解，成苦参碱水溶液；称取聚乳酸-羟基乙酸共聚物0.3g，用22ml丙酮水浴加热溶解，作为有机相；在1600r·min-1转速搅拌下，将苦参碱水溶液滴注入有机相中，形成初乳，以质量浓度为0.46%的聚乙烯醇水溶液130ml作为水相，在815 r·min-1转速搅拌下，将初乳注入水相中，继续搅拌2小时，挥去丙酮，在4℃、40000r·min-1下离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，干燥物研磨成粉末状，即为苦参碱纳米粒；
（2）制备麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒：取上述制备的苦参碱纳米粒用PBS溶液55ml溶解，将碳二亚胺0.7g和N-羟基琥珀酰亚胺0.03g，加入PBS溶液溶解成25ml，然后加入苦参碱纳米粒的PBS溶液中，搅拌均匀，室温下活化4h，4000 r·min-1离心10min,取上清液加入含麦胚凝集素浓度为0.12mg/ml的PBS溶液25ml，4℃下孵化14h，4℃下40000r·min-1离心1h，收集沉淀，沉淀用蒸馏水洗涤3次，于－50℃预冻10h，升温至－30℃维持6h，再升温至－20℃维持2h，最后升温至10℃维持3h，得干燥物，将干燥物研磨成粉末状，即为麦胚凝集素修饰苦参碱纳米粒。
6.权利要求1或2-5任一项所述方法制备的麦胚凝集素修饰的苦参碱纳米粒在制备抗结肠癌药物中的应用。
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