CN104938418B - 一种提高多胎动物产仔数的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种通过口服褪黑素来提高多胎动物产仔数的方法，所述方法通过在妊娠期多胎动物的饲料或饮水中添加褪黑素，从而提高多胎动物的产仔数，以达到提高动物繁殖力的目的。本发明所述方法能使哺乳动物如小鼠的平均窝产仔数提高0.48～1.38只，这为提高哺乳类动物繁殖力的研究提供有益参考。
Description
技术领域
本发明属于农业类畜牧兽医领域，具体地涉及一种通过在妊娠期口服褪黑素提高多胎动物产仔数的方法。
背景技术
最大限度提高多胎动物繁殖率是畜牧生产追求的目标之一，是提高畜牧业经济效益的重要途径。然而实际生产中仍然存在诸多问题。我国商品猪主要品种为杜长大，瘦肉率高，生长速度快，然而窝产仔数较低。我国年生猪出栏量大约为6亿头，而母猪存量最低在4100万头，平均一头母猪年出栏数15头。其中，在尝试提高多胎动物繁殖率的试验中，大鼠、小鼠是最重要且最常用的实验动物，全世界实验鼠总数难以计数，要满足科学实验的需求，必须维持庞大数量的种鼠，但是其饲养环境要求高，维持成本昂贵。因此，如果能够提高多胎动物如大鼠、小鼠的窝产仔数和成活率，则可减少亲本存栏量，不仅能缩减饲养成本，而且有利于提高选种强度，加快遗传育种步伐。
褪黑素是一种主要由动物的松果体分泌的胺类激素，化学结构为N-乙酰基-5-甲氧基色胺。褪黑素通过多条途径调控动物的繁殖功能，主要包括：G蛋白偶联受体途径；作为神经内分泌激素对动物繁殖进行调控；与其核受体结合在转录水平上调控动物繁殖；通过抗氧化作用调控卵泡发育(参见何珲、姜冬梅与康波,褪黑素调控动物繁殖功能的途径，中国生物化学与分子生物学报，2014(02):第144-149页)。
现有技术已公开了多种方法以在动物体内添加外源性褪黑素，例如埋植、注射、延长黑暗等。埋植方式能够长期起作用，然而对于剂量需要较大的动物则不太适合，而且由于埋植后很难取出埋植剂，在不需要额外褪黑素的时期埋植剂反而会有副作用，而在剂量需要较大的时期则剂量不够。注射方式不适合长期施用和大范围使用。延长黑暗的方式需要成本较高的环境控制设施，而且此条件下不宜进行开灯作业。
鉴于现有技术中存在的问题，本发明人惊奇地发现，使多胎动物在妊娠期口服褪黑素能够明显地提高多胎动物的产仔数，例如通过在多胎动物的饲料或饮水中添加褪黑素，这种方式不仅能够做到方便地按需添加，及时更改剂量，而且在自动喂料喂水系统下能够实现大范围使用。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种通过在妊娠期口服褪黑素来提高多胎动物产仔数的方法。
为了实现上述目的，本发明提供的技术方案如下：
一种提高多胎动物产仔数的方法，所述方法为：将褪黑素添加在妊娠期多胎动物的饲料或饮水中。
在多胎动物的饲料或饮水中添加褪黑素，这种方式不仅能够做到方便地按需添加，及时更改剂量，而且在自动喂料喂水系统下能够实现大范围使用。
在一个实施方案中，所述多胎动物服用褪黑素的日剂量为0.00035g/kg至0.035g/kg，每日服用1-3次。
褪黑素的日剂量会对多胎动物的繁殖功能产生影响，剂量不能过高也不能过低，如超过0.035g/kg，则可能会导致窝产仔数降低，如低于0.00035g/kg，则会没有效果。
在另一个实施方案中，服用褪黑素的日剂量为0.00048g/kg至0.020g/kg，每日服用3次，每次服用间隔8小时，效果较佳。每日服用的次数和间隔时间亦会影响褪黑素的吸收，本发明人发现按照该方案服用更有利于多胎动物对褪黑素的吸收。
本发明中，所述多胎动物为小鼠、大鼠、猪、狐狸、水貂，优选为小鼠，更优选为昆明白小鼠。
进一步地，所述小鼠服用褪黑素的时间为妊娠期的前1至19天，服用褪黑素的日剂量为0.00072g/kg至0.010g/kg。
随着妊娠期的延长，褪黑素在妊娠期不同阶段对多胎动物的影响也不同，严格控制妊娠期不同时间段服用褪黑素的剂量，有利于多胎动物如小鼠最大程度地吸收褪黑素，从而最大程度地提高其产仔数。
因此，在进一步的实施方案中，所述小鼠服用所述褪黑素的日剂量为每6天递增，递增量为0.0015g/kg，具体而言，所述小鼠妊娠期第1至6天服用所述褪黑素的日剂量为0.0035g/kg，妊娠期第7至12天服用所述褪黑素的剂量为0.0050g/kg，妊娠期第13至19天服用所述褪黑素的剂量为0.0065g/kg。
优选地，每天对所述饲料或饮水进行定时更换，对饲料瓶或饮水瓶进行避光处理，如用锡箔纸包裹或进行暗室处理。因为光照可以加速褪黑素降解，所以对饲料瓶或饮水瓶进行避光处理，可将光照对褪黑素的影响最小化，从而确保褪黑素被多胎动物充分吸收。
本发明的有益效果在于：
通过使多胎动物在妊娠期口服褪黑素来提高多胎动物产仔数，这种方式不仅能够做到方便地按需添加，及时更改剂量，而且在自动喂料喂水系统下能够实现大范围使用。本发明通过动物实验证明，本发明所述方法能使哺乳动物如小鼠的平均窝产仔数提高0.48～1.38只，这为提高哺乳类动物繁殖力的研究提供有益参考。
具体实施方式
以下实施例仅用于说明本发明，而不用来限制本发明的范围。
以下实施例中使用的试剂和材料均为市售商品。使用的褪黑素(Melatonin，MT)购自Sigma公司(St.Louis,MO,USA)。
实施例1
本实施例涉及一种通过在妊娠期口服褪黑素来提高多胎动物产仔数的方法，具体为将褪黑素添加在处于妊娠期内前19天的昆明白小鼠的饲料或饮水中，昆明白小鼠服用褪黑素的日剂量为0.00035g/kg，每日服用3次，服用间隔为8小时。产后当天统计产仔数。
结果显示，服用褪黑素的日剂量为0.00035g/kg时能显著提高昆明白小鼠的产仔数。
实施例2～5
与实施例1相比，区别点仅在于：实施例2～5中，服用褪黑素的日剂量分别为0.00015g/kg、0.0035g/kg、0.035g/kg、0.055g/kg。
结果显示，服用褪黑素的日剂量为0.035g/kg、0.0035g/kg时能提高昆明白小鼠的产仔数，而当服用褪黑素的日剂量为0.00015g/kg时会没有效果，当服用褪黑素的日剂量为0.055g/kg时会降低产仔数。
实施例6
与实施例1相比，区别点仅在于：实施例6中，第1至6天服用褪黑素的日剂量为0.0035g/kg，妊娠期第7至12天服用褪黑素的剂量为0.0050g/kg，妊娠期第13至19天服用所述褪黑素的剂量为0.0065g/kg。
结果显示，按照上述递增量为0.0015g/kg的方案服用褪黑素，能够尤其明显地提高昆明白小鼠的产仔数。
实施例7
与实施例1相比，除了不服用任何剂量的褪黑素外，对昆明白小鼠的其它饲养方式相同。
结果显示，与实施例1的方案相比，不服用褪黑素时昆明白小鼠的产仔数较低。
实验例
1.实验动物
使用210只8周龄左右的昆明白母鼠进行上述实施例1-7，昆明白母鼠购自中国军事医学科学院实验动物中心，将昆明白母鼠随机分为7组，每组30只，母鼠可自由采食(军事医学科学院实验动物中心生产全价营养颗粒饲料)和饮水。
2.实验条件为：光照12h/d，室内温度为20～22℃。
3.实验过程
将实验母鼠经过一周的适应性饲养后，每一组于实验前一天熄灯前随机挑选出20只自然发情母鼠，将其与公鼠合笼，第二天早晨检栓。挑选出阴道口有淡黄色固体(阴道栓)的母鼠，在饲料或饮水中添加褪黑素，每天更换饲料或饮水，饲料瓶或饮水瓶用铝箔纸包裹。在预产期前两天将母鼠分笼，单独饲养，每天早晚观察分娩情况。产后当天称量并记录后代小鼠窝重和初生重。
分娩后第21天将母鼠从分娩笼中取出，仔鼠断奶。此时，统计每窝成活仔鼠数，记录每只后代昆明白小鼠的断奶体重并计算其断奶成活率。
4.实验结果
对上述记录的数据结果进行数据处理：采用spass18.0统计软件分别对数据进行单因素方差分析(ANOVA)，P<0.05认为数据是有显著性差异的，p<0.01认为数据差异极显著。均值的多重比较采用Duncan氏进行，结果用Means±SEM表示。
4.1不同剂量方案对昆明白小鼠产仔数的影响
表1 服用不同日剂量褪黑素对昆明白小鼠产仔数的影响
| 实施例 | 褪黑素日剂量 | 妊娠母鼠数(只) | 平均窝产仔数(只) |
| 实施例1 | 0.00035g/Kg | 20 | 12.17±2.48bc |
| 实施例2 | 0.00015g/Kg | 20 | 11.01±1.89a |
| 实施例3 | 0.0035g/Kg | 20 | 12.90±1.84bc |
| 实施例4 | 0.035g/Kg | 20 | 12.00±1.83ab |
| 实施例5 | 0.055g/Kg | 20 | 10.97±3.56a |
| 实施例7 | 0.00g/Kg | 20 | 11.52±2.14a |
注：肩标不同字母代表差异显著P<0.05，肩标含有相同字母代表差异不显著P>0.05。
由表1可知，实施例1、3和4中昆明白小鼠的平均窝产仔数均高于实施例7，而实施例2、5中昆明白小鼠的平均窝产仔数下降。
表2 服用褪黑素的日剂量递增量不同对昆明白小鼠产仔数的影响
| 实施例 | 褪黑素日剂量递增量 | 妊娠母鼠数(只) | 平均窝产仔数(只) |
| 实施例7 | 0.00g/Kg | 20 | 11.52±2.14a |
| 实施例3 | 0.00g/Kg | 20 | 12.90±1.84bc |
| 实施例6 | 0.0015g/Kg | 20 | 13.88±2.03b |
注：肩标不同字母代表差异显著P<0.05，肩标含有相同字母代表差异不显著P>0.05.
由表2可知，实施例3和6中昆明白小鼠的平均窝产仔数显著高于实施例7的，其中实施例6中昆明白小鼠的平均窝产仔数提高尤为明显。
4.2不同剂量方案对后代小鼠平均窝重的影响
表3 服用不同日剂量褪黑素对后代昆明白小鼠平均窝重的影响
| 实施例 | 褪黑素日剂量 | 妊娠母鼠数(只) | 平均窝重(克) |
| 实施例1 | 0.00035g/Kg | 20 | 23.24±0.65a |
| 实施例2 | 0.00015g/Kg | 20 | 20.92±0.63b |
| 实施例3 | 0.0035g/Kg | 20 | 24.33±0.68a |
| 实施例4 | 0.035g/Kg | 20 | 23.11±0.74a |
| 实施例5 | 0.055g/Kg | 20 | 20.23±1.01b |
| 实施例7 | 0.00g/Kg | 20 | 20.95±0.72b |
注：肩标不同字母代表差异显著P<0.05，肩标含有相同字母代表差异不显著P>0.05。
由表3可知，实施例1、3和4中后代昆明白小鼠的平均窝重均显著高于实施例7，而实施例2和5中后代昆明白小鼠的平均窝重无明显变化。
表4 服用褪黑素的日剂量递增量不同对后代昆明白小鼠平均窝重的影响
| 实施例 | 褪黑素日剂量递增量 | 妊娠母鼠数(只) | 平均窝重(克) |
| 实施例7 | 0.00g/Kg | 20 | 20.95±0.72b |
| 实施例3 | 0.00g/Kg | 20 | 24.33±0.68a |
| 实施例6 | 0.0015g/Kg | 20 | 24.73±0.83a |
注：肩标不同字母代表差异显著P<0.05，肩标含有相同字母代表差异不显著P>0.05.
由表4可知，实施例3和6中后代昆明白小鼠的平均窝重显著高于实施例7，其中实施例6中后代昆明白小鼠的平均窝重提高尤为明显。
4.3不同剂量方案对后代小鼠断奶成活率的影响
表5 服用不同日剂量褪黑素对后代昆明白小鼠断奶成活率的影响
| 实施例 | 褪黑素日剂量 | 妊娠母鼠数(只) | 断奶成活率(％) |
| 实施例1 | 0.00035g/Kg | 20 | 94.67±1.44a |
| 实施例2 | 0.00015g/Kg | 20 | 92.26±1.29a |
| 实施例3 | 0.0035g/Kg | 20 | 95.56±2.28a |
| 实施例4 | 0.035g/Kg | 20 | 93.38±1.87a |
| 实施例5 | 0.055g/Kg | 20 | 92.11±2.13a |
| 实施例7 | 0.00g/Kg | 20 | 92.87±2.62a |
注：肩标不同字母代表差异显著P<0.05，肩标含有相同字母代表差异不显著P>0.05。
由表5可知，实施例1、3和4中后代昆明白小鼠的断奶成活率高于实施例7，但无统计学差异，而实施例2、5中后代昆明白小鼠的断奶成活率下降。
表6 服用褪黑素的日剂量递增量不同对后代昆明白小鼠断奶成活率的影响
注：肩标不同字母代表差异显著P<0.05，肩标含有相同字母代表差异不显著P>0.05.
由表6可知，实施例3和6中后代昆明白小鼠的断奶成活率高于实施例7。
4.4不同剂量方案对后代小鼠初生重和断奶体重的影响
表7 服用不同日剂量褪黑素对后代昆明白小鼠初生重和断奶体重的影响
| 实施例 | 褪黑素日剂量 | 妊娠母鼠数(只) | 初生重(g) | 断奶体重(g) |
| 实施例1 | 0.00035g/Kg | 20 | 1.79±0.07a | 11.48±1.66a |
| 实施例2 | 0.00015g/Kg | 20 | 1.81±0.09a | 12.02±1.91a |
| 实施例3 | 0.0035g/Kg | 20 | 1.83±0.05a | 11.53±1.75a |
| 实施例4 | 0.035g/Kg | 20 | 1.82±0.04a | 11.12±1.69a |
| 实施例5 | 0.055g/Kg | 20 | 1.83±0.10a | 11.78±2.01a |
| 实施例7 | 0.00g/Kg | 20 | 1.84±0.04a | 11.98±1.80a |
注：肩标不同字母代表差异显著P<0.05，肩标含有相同字母代表差异不显著P>0.05。
由表7可知，实施例1、3、4、5中后代昆明白小鼠的初生重和断奶体重与实施例7中的无显著差异，这表明实施例1、3、4、5的方案不会对后代昆明白小鼠的初生重和断奶体重带来不良影响。
表8 服用褪黑素的日剂量递增量不同对后代昆明白小鼠初生重和断奶体重的影响
注：肩标不同字母代表差异显著P<0.05，肩标含有相同字母代表差异不显著P>0.05.
由表8可知，实施例3、7中后代昆明白小鼠的初生重和断奶体重与实施例6无统计学差异，这表明实施例3和7的方案不会对后代昆明白小鼠的初生重和断奶体重带来不良影响。
综上可知，使妊娠期小鼠服用褪黑素日剂量为0.00035g/Kg至0.035g/Kg能够提高小鼠的平均窝产仔数、后代小鼠的平均窝重以及断奶成活率，且对后代小鼠的初生重和断奶体重无不良影响。因此，本发明的方法有利于提高多胎动物如小鼠的产仔数且不会对后代小鼠的初生重和断奶体重带来不良影响。
以上所述，仅是对本发明的一般性说明及具体实施方案的描述而已，并非是对本发明作其它形式的限制。任何熟悉本领域的技术人员均可以基于本申请公开的技术内容加以更改或变型为其等同实施例。在不背离本发明的构思和精神的前提下，对本发明进行的任何修改或变型均属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (6)
1.一种提高多胎动物产仔数的方法，其特征在于，将褪黑素添加在妊娠期多胎动物的饲料或饮水中，所述多胎动物服用褪黑素的日剂量为0.00048g/kg至0.020g/kg，每日服用3次，每次服用间隔为8小时，其中所述多胎动物为小鼠。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，每天对所述饲料或饮水进行定时更换，对饲料瓶或饮水瓶进行避光处理。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述小鼠服用所述褪黑素的时间为妊娠期内第1至19天。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述小鼠服用所述褪黑素的日剂量为0.00072g/kg至0.010g/kg。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述小鼠妊娠期第1至6天服用所述褪黑素的日剂量为0.0035g/kg，妊娠期第7至12天服用所述褪黑素的剂量为0.0050g/kg，妊娠期第13至19天服用所述褪黑素的剂量为0.0065g/kg。
6.根据权利要求3-5任一项所述的方法，其特征在于，所述小鼠为昆明白小鼠。
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