CN104926825B - 促进神经营养活性的新木脂烷衍生物及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及医药技术领域，本发明提供了一类从八角科八角属植物滇西八角中分离制备得到的2',8:8',8‑双环氧‑7,7'‑新木脂烷衍生物。本发明的2',8:8',8‑双环氧‑7,7'‑新木脂烷衍生物的结构如通式(I)所示。本发明还提供了该类衍生物的制备方法，是采用乙醇对滇西八角的枝叶进行提取，提取物经多种分离方法反复纯化后得到了本发明中的2',8:8',8‑双环氧‑7,7'‑新木脂烷衍生物，利用现代波谱技术鉴定了它们的结构。本发明经药理学研究发现，该类衍生物对神经营养因子(NGF)的活性具有促进作用，具有应用于医药品领域，作为潜在的神经营养辅助药物的作用。

Description

促进神经营养活性的新木脂烷衍生物及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及八角科八角属植物滇西八角中分离制备得到的一类2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物及其制备方法，以及其在神经营养药物中的应用。
背景技术
神经退行性疾病是一组以脑组织不同区域神经元慢性、进行性变性和缺失而产生疾病的总称。这些疾病包括老年痴呆症(Alzheimer Disease,AD)、帕金森病(Parkinson'sDisease,PD)、亨廷顿舞蹈症(Huntington)等。在美国，65岁以上人群中Alzheimer病的发病率约为13％，而85岁以上人群的发病率近33％，每年医护费近$1000亿(1.Tsai LH,Madabhushi R.Alzheimer's disease:A protective factor for the ageingbrain.Nature 2014,507:439–440.)。随着人口老龄化程度的加剧，Alzheimer病患者的数量也将急剧增加，本组疾病已成为继心血管疾病和癌症后，严重影响人类健康的第三位因素。由于此类疾病的发病机制尚不清晰，虽然人们对神经退行性疾病的病理生理机制及治疗进行了大量的研究，但至今尚无有效成熟的方法和药物来防治这类疾病。
神经生长因子(NGF)是一种对神经细胞起营养作用的多肽分子，它是迄今为止了解最透彻的神经营养因子，也是公认的神经系统调控物质。目前认为，NGF是Alzheimer病、Huntington症、肌萎缩性脊髓侧索硬化症等一系列神经系统疾病的潜在治疗药物(2.Emanueli C,Salis MB,Pinna A,Graiani G,Manni L,Madeddu P.Nerve growthfactor promotes angiogenesis and arteriogenesis in ischemichindlimbs.Circulation 2002,106:2257–2262.)。虽然NGF对神经退行性疾病具有潜在治疗作用，但作为大分子的多肽制剂，它有药代动力学差，不易跨越血脑屏障等副作用(3.Granholm AC,Albeck D,Backman C,Curtis M,Ebendal T,Friden P,Henry M,HofferB,Kordower J,Rose GM.A non-invasive system for delivering neural growthfactors across the blood-brain barrier:a review.Rev.Neurosci.1998,9(1):31–55.)。因此，人们以寻找促进NGF在细胞内合成分泌，即促进NGF活性的小分子作为解决这一难题的有效途径。
天然药物由于具有作用机制的多靶点和低毒性等特点，被广泛用于神经系统疾病药物的研究开发(4.杨春艳,邹坤.天然药物神经保护作用的研究进展.中草药.2005,36(3):461–464.)，如石杉碱甲、人参皂苷、远志皂苷、姜黄素、白藜芦醇、银杏提取物、蛇床子素、丹酚酸等已被研究证实能不同程度的改善Alzheimer病症状。
八角属(Illicium)植物全世界近50种，我国有28种，其中19种为中国特有(5.中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志.北京:科学出版社.1996,30(1):220–227.)。该属植物八角(I.verum)、华中八角(I.fargesii)、假地枫皮(I.jiadifengpi)、少药八角(I.oligandrum)、峦大八角(I.tashirio)中均发现了具有显著神经营养活性的单体成分(6.Moriyama M,Huang JM,Yang CS,Hioki H,Kubo M,Harada K,Fukuyama Y.Structureand neurotrophic activity of novel sesqui-neolignans from the pericarps ofIllicium fargesii.Tetrahedron 2007,63(20):4243–4249.；7.Nakamura T,Okuyama M,Yamazaki M.Neurotropic Components from Star Anise:Illicium verumHOOK.fil.Chem.Pharm.Bull.1996,44(10):1908–1914.；8.Kubo M,Okada C,Huang JM,Harada K,Hioki H,Fukuyama Y.Novel Pentacyclic seco-Prezizaane-TypeSesquiterpenoids with Neurotrophic Properties from Illiciumjiadifengpi.Org.Lett.2009,11(22):5190–5193.；9.Zhu Q,Tang CP,Ke CQ,Wang W,Zhang HY,Ye Y.Sesquiterpenoids and Phenylpropanoids from Pericarps ofIllicium oligandrum.J.Nat.Prod.2009,72(2):238–242.；10.Takaoka S,Takaoka N,Minoshima Y,Huang JM,Kubo M,Harada K,Hioki H,Fukuyama Y.Isolation,synthesis,and neurite outgrowth-promoting activity of illicinin A from the flowers ofIllicium anisatum.Tetrahedron 2009,65(40):8354–8361.；11.Fukuyama Y,Hata Y,Kodama M.Bicycloillicinone Asarone Acetal:A Novel Prenylated C6-C3 CompoundIncreasing Choline Acetyltransferase(ChAT)Activity from Illiciumtashiroi.Planta Med.1997,63(3):275–277.)。因此八角属植物在基于中药和植物药基础上的新型神经营养药物的开发中显示了巨大的应用前景。滇西八角(Illiciummerrillianum A.C.Smith)为八角科八角属植物，产于云南西部，缅甸北部也有分布，它的根皮、皮和果实入药， 在云南民间用来治疗风湿病。早在上世纪90年代，日本学者Yoshiyasu Fukuyama对滇西八角果皮中的化学成分进行了深入研究，从中分离得到大量的倍半萜类成分(12.Huang JM,Yang CS,Wang H,Wu QM,Wang JL,Fukuyama Y.Structuresof Novel Sesquiterpenes from the Pericarps of Illiciummerrillianum.Chem.Pharm.Bull.1999，47(12)：13.Huang JM,Fukuyama Y,Yang CS,Minami H,Tanaka M.Three New Sesquiterpene Lactones from the Pericarpsof Illicium merrillianum.Chem.Pharm.Bull.2000,48(5)：14.Huang JM,YangCS,Zhao R,Takahashi H,Fukuyama Y.Seven Novel seco-Prezizaane-TypeSesquiterpenes from the Pericarps of Illiciummerrillianum.Chem.Pharm.Bull.2004,52(1)：15.Huang JM,Yang CS,TanakaM,Fukuyama Y.Structures of merrilactones B and C,novel anislactone-typesesquiterpenes from Illicium merrillianum,and chemical conversion ofanislactone B to merrilactone A.Tetrahedron 2001,57(22): 16.HuangJM,Yang CS,Kondo M,Nakade K,Takahashi H,Takaokab S,Fukuyama Y.Merrillianin,aunique seco-prezizaane-type sesquiterpene,and(6R)-pseudomajucin from Illiciummerrillianum.Tetrahedron 2002，58(34)：17.Huang JM,Yang CS,TakahashiH,Fukuyama Y.Seco-Prezizaane-type sesquiterpenes from Illiciummerrillianum.Phytochemistry2000，55(8)：18.Huang JM,Yokoyama R,YangCS,Fukuyama Y.Merrilactone A,a novel neurotrophic sesquiterpene dilactonefrom Illicium merrillianum.Tetrahedron Lett.2000,41(32):6111–6114.；19.HuangJM,Yokoyama R,Yang CS,Fukuyama Y.Structure and Neurotrophic Activity of seco-Prezizaane-Type Sesquiterpenes from Illicium merrillianum.J.Nat.Prod.2001,64(4):428–431.；20.Huang JM,Nakade K,Kondo M,Yang CS,Fukuyama Y.Brine ShrimpLethality Test Active Constituents and New Highly Oxygenated Seco-prezizaane-Type Sesquiterpenes from Illicium merrillianum.Chem.Pharm.Bull.2002，50(1)：21.Kuroyanagi M,Ikeda R,Gao HY,Muto N,Otaki K,Sano T,Kawahara N,Nakane T.Neurite outgrowth-promoting active constituents of the Japanesecypress(Chamaecyparis obtusa).Chem.Pharm.Bull.2008,56(1):60–63.)，其中化合物merrilactone A、11-O-debenzoyltashironin、(-)-hinokinin不仅结构新颖而且具有显著的神经营养活性。
本发明对滇西八角化学成分进行深入的研究，以期望得到结构新颖和具有良好生物活性的先导化合物。
发明内容
本发明的目的在于从滇西八角中分离得到结构新颖和活性良好的天然产物，具体是一类2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物；本发明的另一目的是提供该类2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物的制备方法；本发明的第三目的在于提供该类2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物的医药用途，具体是在制备促进神经营养活性药物中的应用。
本发明人在对滇西八角化学成分的系统研究中，得到了一类骨架新颖的2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物，实验发现它们具有显著的促进神经营养活性的作用。
本发明的第一方面，提供一类2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物，包括其对映异构或非对映异构体以及其这些形式的任意混合物或其药用盐，所述的2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物，其化学通式如(I)所示：
其中，
R1、R2、R3、R4、R5基团，分别选自OH、OCH3、OAc、CH3、C2H5、H、NH2、Glu、Rha。
本发明中该类化合物具有手性(7,8,7',8'位碳原子为手性碳原子)，它们可以是对映异构体混合物或非对映异构体混合物的形式，或者可以是单个对映异构体或非对映异构体形式。如：7、8、7'、8'位可以为S或R或S与R混旋体。
本发明的一类2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物，优选的化合物，其R1-R5基团，7、8、7'、8'的组合如下：
最优的，化合物1a：(7R,8S,7'S,8'S)-2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷，命名为merrilianoid A。化合物1b：(7S,8R,7'R,8'R)-2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷，命名为merrilianoid B。化合物1-10均是从滇西八角中分离得到。
本发明中化合物所述的药用盐，是指药学上可接受的各种形式的盐，如无机盐或有机盐，无机盐优选为钠盐等，有机盐优选为甲基钠等。
本发明的第二方面，提供上述的2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物的制备方法，具体为从八角属植物滇西八角中分离制备的方法。
本发明提供了一类2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物的制备方法，该方法包括以下步骤：
将八角属植物滇西八角的枝叶粉碎后用乙醇加热回流提取，提取液减压浓缩后得到的浸膏用水分散，采用液-液萃取的方法分别制备得到石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水五种不同极性的提取部位，以上部位以一次或多次使用硅胶、聚酰胺、大孔吸附树脂、ODS、Sephadex LH-20等常用色谱填料作为固定相，以石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、乙腈、水等常用溶剂以单一或不同组合配比作为洗脱剂或重结晶溶剂，分离并纯化制备得到本发明的2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物。
本发明化合物1-10的制备方法：取滇西八角的枝叶，以95％的乙醇进行加热回流提取。提取液减压浓缩后所得浸膏经水分散后采用液-液萃取的方法，分别得到石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水五个不同极性的提取物。取石油醚部位的浸膏488g，经硅胶柱色谱(80–100目)，以石油醚-乙酸乙酯系统(50:1–0:1)梯度洗脱，得到7个组分A(51g),B(86g),C(95g),D(16g),E(21g),F(129g),G(17g)。组分F 经硅胶柱色谱(1.5kg,80–100目)，以石油醚-丙酮系统(20:1–0:1)梯度洗脱得到7个组分(F-1,F-2,F-3,F-4,F-5,F-6,F-7)。F-6(11g)经中低压反相柱色谱(RP-MPLC)以MeOH-H2O(40–100％)梯度洗脱得到5个组分(F-61,F-62,F-63,F-64,F-65)。组分F-61经硅胶柱色谱(200–300目)，以石油醚-丙酮(50:1–0:1)梯度洗脱得到化合物6(3.0mg)，7(7.2mg)，8(6.5mg)。组分F-63经制备薄层色谱得到化合物1(石油醚:丙酮3:1,Rf＝0.43,14.8mg)。化合物1经高效液相的手性制备方法拆分为一对对映异构体1a(2.0mg)和1b(1.3mg)。组分F-64经半制备的高效液相色谱分离得到化合物4(65％甲醇,254nm,TR＝27.0min,22.0mg)和10(65％甲醇,254nm,TR＝15.0min,17.0mg)。组分F-65经硅胶柱色谱(200–300目)，以石油醚-丙酮(50:1–0:1)梯度洗脱得到化合物3(4.0mg)，5(6.2mg)，9(8.5mg)。
本发明的第三方面，提供上述的具有2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷骨架类型的衍生物在制备神经营养辅助药物(促进神经营养药物活性)中的应用。
本发明经细胞实验证明，本发明的化合物促进NGF在细胞内合成分泌，可以作为神经营养辅助药物使用。
所述的药物，是以本发明的2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷衍生物及其药学上可接受的药用组合物，或以其作为活性成分组成的药用组合物，包括与药用载体组合，用于制备神经营养相关的药物；可通过口服、非肠道、脑内直接给药、鼻腔脑靶向给药、基因工程法、受体介导转运法给药或其它局部途径给药；给药剂型可以是片剂、分散片、含片、口崩片、缓释片、颗粒剂、丸剂、胶囊剂、乳剂、溶液、悬浮液、注射剂、滴注剂、粉针剂或气雾剂等药学上可接受的剂型。
本发明的有益效果和意义在于：本发明中的中药活性成分是从滇西八角中而得，它在我国云南地区有大量的药用历史，而且资源十分丰富。我们的研究发现可用作潜在的神经营养辅助药物，同时为进一步综合利用药用植物，带动云南地区经济的发展具有重要意义。
附图说明
图1：化合物1a和1b的CD谱图；
图2：化合物7R,8S,7'S,8'S-1a的三个最优构象(ABC)；
图3：实验测得的CD谱图与计算得到的7R,8S,7'S,8'S-1a的ECD谱图；
图4：化合物1,1a,1b对20ng/mL NGF诱导的PC12细胞轴突生长作用代表性图片：其中(a)空白对照，(b)20ng/mL NGF，(c)20ng/mL NGF+1μM外消旋体1，(d)20ng/mL NGF+10μM外消旋体1，(e)20ng/mL NGF+1μM化合物1a，(f)20ng/mL NGF+1μM化合物1b；
图5：化合物1,1a,1b在不同浓度时对20ng/mL NGF诱导的PC12细胞轴突生长作用；试验中数据均以平均数±标准误表示，采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，Duncantest检验，P<0.05为差异显著(##,P<0.01vs.Vehicle；**,P<0.01vs.20ng/mL NGF)。
具体实施方式
现结合实施例，对本发明作进一步描述，但本发明的实施并不仅限于此。
实施例1：2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷的制备
1.样品来源
八角科八角属植物滇西八角(Illicium merrillianum A.C.Smith)的枝叶。
2.提取分离与纯化方法
取滇西八角的枝叶，以95％的乙醇进行加热回流提取。提取液减压浓缩后所得浸膏经水分散后采用液-液萃取的方法，分别得到石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水五个不同极性的提取物。取石油醚部位的浸膏488g，经硅胶柱色谱(80–100目)，以石油醚-乙酸乙酯系统(50:1–0:1)梯度洗脱，得到7个组分A(51g),B(86g),C(95g),D(16g),E(21g),F(129g),G(17g)。组分F经硅胶柱色谱(1.5kg,80–100目)石油醚-丙酮系统(20:1–0:1)梯度洗脱得到7个组分(F-1,F-2,F-3,F-4,F-5,F-6,F-7)。F-6(11g)经中低压反相柱色谱(RP-MPLC)以MeOH-H2O(40–100％)梯度洗脱得到5个组分(F-61,F-62,F-63,F-64,F-65)。组分F-63经制备薄层色谱得到化合物1(石油醚:丙酮3:1,Rf＝0.43,14.8mg)。
3.化合物1的结构鉴定
利用现代波谱技术(IR,1H-NMR,13C-NMR,1H-1H COSY,HSQC, HMBC,NOESY,HRESI-MS)鉴定化合物1的结构，它的结构如下所示：
化合物1：白色针状结晶(甲醇)；熔点58～59℃；IR(KBr)νmax 2935,1618,1508,1465,1204,1034,884cm-1；HRESI-MS m/z 439.1785[M+Na]+(C23H28O7+Na的计算值439.1733)；1H-NMR(500MHz,CDCl3)δ:1.36(3H,d,J＝6.5Hz,H-9'),1.65(3H,s,H-9),3.03(1H,d,J＝3.5Hz,H-7'),3.55(3H,s,OCH3-5),3.74(3H,s,OCH3-5'),3.77(3H,s,OCH3-4'),3.82(1H,m,H-7),3.83(3H,s,OCH3-2),3.85(3H,s,OCH3-4),4.49(1H,q,J＝6.5Hz,H-8'),6.39(1H,s,H-6'),6.45(1H,s,H-3'),6.46(1H,s,H-3),6.86(1H,s,H-6)；13C-NMR(125MHz,CDCl3)δ:115.2(C-1),147.9(C-2),96.8(C-3),152.3(C-4),142.5(C-5),112.6(C-6),38.9(C-7),106.0(C-8),22.6(C-9),117.9(C-1'),146.5(C-2'),100.3(C-3'),148.9(C-4'),143.1(C-5'),110.9(C-6'),47.9(C-7'),85.2(C-8'),20.7(C-9'),56.1(OCH3-2),56.2(OCH3-4),56.0(OCH3-5,4'),56.4(OCH3-5')。
实施例2：对映异构体1a和1b的高效液相色谱法手性固定相拆分
由于化合物1的旋光值为零，测定的CD谱图无Cotton效应，判断该化合物为外消旋体。通过采用高效液相色谱的手性固定相分离方法(22.Gao YP,Shen YH,Zhang SD,TianJM,Zeng HW,Ye J,Li HL,Shan L,Zhang WD.Incarvilleatone,a newcyclohexylethanoid dimer from Incarvillea younghusbandii and its inhibitionagainst Nitric Oxide(NO)release.Org.Lett.2012,14(8):1954–1957.)，我们将外消旋体1拆分为两个旋光方向相反的对映异构体(c 0.25,MeOH)}(2.0mg)和 (c 0.23,MeOH)}(1.3mg)，它们在CD谱图上表现出强度相等而符号完全相反的Cotton效应(图1)。实验所采用的手性固定相：0.46cm I.D.×25cm；流动相：Hexane/DCM/DEA＝45/55/0.1(v/v/v)；进样量：10μL；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：254nm。
1a的结构如下所示：
1b的结构如下所示：
实施例3：对映异构体化合物1a和1b的绝对构型确定
我们通过对化合物圆二色谱的量子力学计算来确定1a和1b的绝对构型(22.GaoYP,Shen YH,Zhang SD,Tian JM,Zeng HW,Ye J,Li HL,Shan L,ZhangWD.Incarvilleatone,a new cyclohexylethanoid dimer from Incarvilleayounghusbandii and its inhibition against Nitric Oxide(NO)release.Org.Lett.2012,14(8):1954–1957.)。实验以7R,8S,7'S,8'S作为1a的假想绝对构型，在B3LYP/3-21G*水平对7R,8S,7'S,8'S-1a的几何构型进行优化，得到它的3个最优构象A-C(图2)。
使用含时密度泛函(TDDFT)中的B3LYP/3-21G方法计算低能构象在甲醇溶液(COMSO模型)中的ECD谱，从图中可以看出计算得到的ECD谱图与实测CD谱图非常匹配，它们都在190–200nm显示负的Cotton效应，204–218nm范围内显示正的Cotton效应，因此我们将化合物1a的绝对构型确定为7R,8S,7'S,8'S(图3)。由于1b和7R,8S,7'S,8'S-1a的旋光方向和Cotton效应完全相反，因此将1b的绝对构型相应地被确定为7S,8R,7'R,8'R(图3)。
实施例4：神经营养活性测试
1.实验材料
PC12细胞(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所)；
外消旋体1,实施例1制得；
对映异构体化合物1a和1b，实施例2制得；
NGF(金路捷注射用鼠神经生长因子，武汉海特生物制药股份有限公司)。
2.神经营养活性筛选方法
①细胞的前处理
将未分化的大鼠PC12细胞于Ham's F12K(含2mM L-谷酰胺，1.5g/L NaHCO3)+15％马血清+2.5％热灭活胎牛血清+100U/mL双抗的完全培养液中，在37℃的饱和湿度条件下，于5％CO2中培养72h后，再以无血清培养基培养12–16h备用。将待测样品和NGF分别溶于DMSO和PBS(PH＝7.2–7.4)中制成母液备用。
②细胞形态实验
本实验设空白组、NGF组、不同浓度的样品组、不同浓度的样品+NGF组。将血清饥饿的PC12细胞悬浮液按1×105个/孔的密度接种于96孔板，分别加入20ng/mL NGF和待测样品，或是单独加入待测样品处理细胞。24h后，用光学显微镜观察。将含一个或多个轴突且至少有一个轴突长度达到胞体直径1.5倍的细胞视作阳性反应细胞，记做“1”(细胞团视为一个细胞)，在多个随机视野中计数细胞。细胞分化率＝有效细胞数/细胞总数。
③统计学分析
实验重复3次，每个处理也至少重复3次。实验数据以平均数±标准误差表示。采用SPSS 13.0软件进行单因素方差分析(One-Way ANOVA)，Duncan test检验，P＜0.05为差异显著。
3.实验结果
对从滇西八角中分离得到的外消旋体1，以及对映异构体化合物1a和1b进行了体外的神经营养活性评价，结果显示该化合物在与20ng/mL的NGF共同作用时，1和1a在1-10μM的浓度范围内能浓度依赖性的提高PC12细胞的分化率(图4，5)，而1b对NGF诱导的PC12细胞生长表现出抑制活性，化合物1a和1b之间的活性差别显著。
实验结果可见，本发明中的化合物1和1a能显著促进NGF诱导的PC12细胞生长，表现出NGF激动剂活性。
实施例5：2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷片剂制备
2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷 10g
NGF 250g
乳糖 130g
玉米淀粉 55g
硬脂酸镁 5g
制备方法：将2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷、NGF、乳糖和玉米淀粉混合，用水均匀湿润，把湿润后的混合物过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁，然后将混合物压片，每片重200mg，2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷含量为10mg。
实施例6：2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷注射液制备
2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷 2g
葡萄糖 50g
NGF 10g
制备方法：2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷、NGF、葡萄糖溶解于适量的注射用水中，过滤所得溶液，在无菌条件下装入输液瓶(每瓶100mL)中，每瓶含2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷2mg。
实施例7：2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷注射用冻干粉针剂制备
2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷 2g
甘露醇 28g
NGF 10g
制备方法：将2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷、NGF、甘露醇溶解于适量的注射用水中，过滤所得溶液，在无菌条件下装入西林瓶(10mL西林瓶，每瓶2mL)中，冻干，每支含2,4,4',5,5'-五甲氧基-2',8:8',8-双环氧-7,7'-新木脂烷2mg。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和 说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。

Claims (4)

1.化合物，其结构式选自如下结构：
2.如权利要求1所述的化合物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法如下：
取滇西八角的枝叶，以95％的乙醇进行加热回流提取；提取液减压浓缩后所得浸膏经水分散后采用液-液萃取的方法，分别得到石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇和水五个不同极性的提取物；
取石油醚部位的浸膏，经80–100目硅胶柱色谱，以石油醚-乙酸乙酯系统50:1–0:1梯度洗脱，得到7个组分A,B,C,D,E,F,G；组分F经1.5kg,80–100目硅胶柱色谱，以石油醚-丙酮系统20:1–0:1梯度洗脱得到7个组分F-1,F-2,F-3,F-4,F-5,F-6,F-7；
F-6经中低压反相柱色谱以40–100％的MeOH-H2O梯度洗脱得到5个组分F-61,F-62,F-63,F-64,F-65；
组分F-63经制备薄层色谱得到化合物1，石油醚:丙酮3:1,Rf＝0.43,14.8mg；化合物1经高效液相的手性制备方法拆分为一对对映异构体1a和1b。
3.如权利要求1所述的化合物在制备神经营养辅助药物中的应用。
4.如权利要求1所述的化合物在制备促进神经生长因子活性药物中的应用。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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Structures of merrilactones B and C , novel anislactone-type sesquiterpenes from illicium merrillianum, and chemical conversion of anislactone B to merrilactone A;Jian-Mei Huang,等;《Tetrahedron》;20011130;第57卷(第22期);4691-4698页 *
Three new sesquiterpene lactones from the preicarps of Illicium merrillianum;jian-mei Huang，等;《Chem.pharm.bull》;20000531;第48卷(第5期);657-659页 *

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