CN104914056A - 一种测定等离子体杀菌后悬浮液中多糖含量的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种测定等离子体杀菌后悬浮液中多糖含量的方法，首先配制二种试剂；接着完成多糖标准曲线的制定；然后完成待测液中多糖含量的测定。本方明方法灵敏度非常高，可以根据多糖浓度的变化来判定等离子体刻蚀作用对大肠杆菌的损伤程度。
Description
技术领域
本发明属于消毒技术领域，特别是提供了一种测定等离子体杀菌后悬浮液中多糖含量的方法。
背景技术
细胞壁、细胞膜和胞内物质是大肠杆菌的三大基本结构，而这些结构的主要组成部分就是蛋白质和多糖。等离子体处理对胞壁、胞膜的刻蚀氧化作用会引起细胞膜通透性发生变化，胞内物质逸出，持续作用最终导致细胞膜发生碎片化并裂解。在这个过程中，菌液中多糖浓度会随着胞内物质的逸出和胞膜、胞壁的裂解发生变化。所以可以根据多糖浓度的变化来判定刻蚀作用对大肠杆菌的损伤程度。目前国内外对等离子体杀菌后悬浮液中细菌多糖含量的研究甚少。
发明内容
为解决上述问题，本发明提出一种测定等离子体杀菌后悬浮液中多糖含量的方法。
本发明为达到以上目的，是通过以下的技术方案来实现的，包括的步骤如下：
(1)配制A、B试剂；
A：5％苯酚，即5g苯酚加水至100g
B：97％的浓硫酸
(2)多糖标准曲线的制定，将1ml葡萄糖溶液与1ml 5％的苯酚混合，然后用涡流振荡器彻底混匀，放置10min后，快速加入5ml 97％的硫酸，室温冷却5min，再次用涡流振荡器摇荡试剂瓶，室温冷却25min之后，在490nm的波长用10mm比色皿以空白做参比测吸光度；
(3)待测液中多糖含量的测定，等离子体杀菌后，将经等离子体处理后的样品以及未经过处理的对照组细菌溶液，所得悬浮菌液离心处理；然后每个样品取上清液3ml加入到干净试管中，按照上述方法测定每个样品的吸光度值；根据样品所得的吸光度，代入到标准曲线中计算出相对应的多糖含量。
附图说明
图1为多糖标准曲线。
图2为多糖含量变化曲线。
具体实施方式
实施例
在超净工作台中，制备含有大肠杆菌菌种(编号：ATTC25922)的1×1cm的菌膜膜块备用。
(1)配制A、B试剂；
A：5％苯酚，即5g苯酚加水至100g
B：97％的浓硫酸
(2)多糖标准曲线的制定，将1ml葡萄糖溶液与1ml 5％的苯酚混合，然后用涡流振荡器彻底混匀，放置10min后，快速加入5ml 97％的硫酸，室温冷却5min，再次用涡流振荡器摇荡试剂瓶，室温冷却25min之后，在490nm的波长用10mm比色皿以空白做参比测吸光度；多糖标准曲线如附图1所示。
(3)待测液中多糖含量的测定，选用空气微弧等离子体射流作为等离子体发生源，等离子体杀菌后，将经等离子体处理0s、15s、30s、45s、60s、90s后的样品，一共6个样品所得悬浮菌液离心处理；然后每个样品取上清液3ml加入到干净试管中，按照上述方法测定每个样品的吸光度值；根据样品所得的吸光度，代入到标准曲线中计算出相对应的多糖含量。得到结果如附图2所示，多糖浓度在90s的时间内都呈现增长的趋势，其中0-60s内增长相对较平稳，而在60s后，多糖浓度都出现了成倍的增长，使得多糖浓度接近10mg/L。当等离子体作用到细菌体上时，细胞壁和细胞膜的通透性增加或者直接破裂，导致细胞质和核糖体逸出，这就是在60s内多糖和蛋白质浓度不断升高的原因所在。当灭菌时间达到60s后，再继续将其暴露在微等离子体下就会出现细胞壁和细胞膜的碎片化，从而产生大量无法离心去掉的蛋白质和多糖碎片，这就出现了60s-90s的过程中蛋白质和多糖浓度急剧升高的现象。从这里我们也能看出，微等离子体射流不仅能够杀灭微生物，也能清除微生物的残余的躯体。
Claims (1)
1.一种测定等离子体杀菌后悬浮液中多糖含量的方法，其特征在于该方法的步骤如下：
(1)配制A、B试剂；
A：5％苯酚，即5g苯酚加水至100g
B：97％的浓硫酸
(2)多糖标准曲线的制定，将1ml葡萄糖溶液与1ml 5％的苯酚混合，然后用涡流振荡器彻底混匀，放置10min后，快速加入5ml 97％的硫酸，室温冷却5min，再次用涡流振荡器摇荡试剂瓶，室温冷却25min之后，在490nm的波长用10mm比色皿以空白做参比测吸光度；
(3)待测液中多糖含量的测定，等离子体杀菌后，将经等离子体处理后的样品以及未经过处理的对照组细菌溶液，所得悬浮菌液离心处理；然后每个样品取上清液3ml加入到干净试管中，按照上述方法测定每个样品的吸光度值；根据样品所得的吸光度，代入到标准曲线中计算出相对应的多糖含量。
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|---|---|---|---|---|
| CN104155250A (zh) * | 2014-08-15 | 2014-11-19 | 广州衡创测试技术服务有限公司 | 一种粗多糖的测定方法 |
| CN104498402A (zh) * | 2014-12-19 | 2015-04-08 | 北京工商大学 | 一株具有生理活性产胞外多糖植物乳杆菌及其应用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 刘红霞等: "低温氧等离子体灭活机理分析", 《2011 INERNATIONAL SYMPOSIUM ON BIOMEDICINE AND ENGINEERING》 * |
| 周桂芬等: "铁皮石斛茎、叶多糖含量及多糖部位柱前衍生化_高效液相色谱指纹图谱比较研究", 《中国中药杂志》 * |
| 李玉兰主编: "《李玉兰主编》", 30 June 2008, 李玉兰主编 * |
| 王静等: "滑动弧放电等离子体杀菌的基础研究", 《广东化工》 * |
| 顾春英等: "等离子体臭氧对大肠杆菌的杀灭机理研究", 《现代预防医学》 * |
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