CN104860755B - 富含核酸的微生物有机菌肥及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种富含核酸的微生物有机菌肥，其特征在于是以胶冻样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、褐球固氮菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、放线菌及沼泽红假单胞菌为菌种，在以核酸废水为基质的发酵培养基中发酵的产物，所述的有机菌肥中总有效活菌数至少为10×108个/mL，总核酸含量至少为2.4 wt %。本发明配方合理，功效稳定，能促进作物生长、促早熟、改善果实品质、增加产量，提高作物的抗逆性，提高肥料利用率，改良土壤生态环境，并且有防病抗病功效。
Description
技术领域
本发明涉及一种有机菌肥以及制备方法，特别是一种富含核酸的微生物有机菌肥及其制备方法。
背景技术
国家支持微生物肥料发展，同时鼓励进行微生物肥料在“土壤调理”方面的技术研发。2012年12月国务院发布《生物产业发展规划》，明确提出要加快突破“保水抗旱、荒漠化修复、磷钾活化、抗病促生、生物固氮、秸秆快速腐熟、残留除草剂降解及土壤调理”等生物肥料的规范化和标准化生产技术瓶颈，提升产业水平。
珍奥集团股份有限公司作为中国最大的核酸生产企业，每天生产核酸所产废水高达数千吨。尽管该废水因含有一定的核酸而成为公开销售的商品，但是仍供过于求，需要投入巨资进行水处理排放，浪费大量资源。
发明内容
本发明是为了解决现有技术所存在的上述不足，提出一种具有刺激植物生长、缓解土地板结、改良土壤生态环境、防病抗病等作用的富含核酸的微生物有机菌肥及其制备方法。
本发明的技术解决方案是： 一种富含核酸的微生物有机菌肥，其特征在于是以胶冻样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、褐球固氮菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、放线菌及沼泽红假单胞菌为菌种，在以核酸废水为基质的发酵培养基中发酵的产物，总有效活菌数至少为10×108个/mL，总核酸含量至少为2.4 wt %。
所述菌种具体含量如下：
胶冻样芽孢杆菌液15～20wt%
巨大芽孢杆菌液15～18 wt %
褐球固氮菌液15～18 wt %
酿酒酵母液9～12 wt %
枯草芽孢杆菌液9～12 wt %
植物乳杆菌液9～12 wt %
放线菌液9～12wt %
沼泽红假单胞菌液9～12 wt %，
各菌液中的有效活菌数为10～20×108个/mL。
所述以核酸废水为基质的发酵培养基的pH 6.0～8.0，具体组分及含量如下：蔗糖10～50g/L、葡萄糖10～50g/L、蜂蜜10～50g/L、蛋白胨1～5g/L、磷酸二氢钾 1～5g/L、磷酸氢二钾 5～20g/L、尿素1～5g/L、硫酸镁5～20g/L，其余为核酸废水。
一种上述的富含核酸的微生物有机菌肥的制备方法，其特征在于按照以下步骤进行：
a. 取胶冻样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、褐球固氮菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、放线菌、沼泽红假单胞菌分别培养，得到有效活菌数至10～20×108个/mL的菌液；
b. 将得到的各菌种发酵液混合均匀，得到混合菌液，所得到的混合菌液中胶冻样芽孢杆菌15～20wt%、巨大芽孢杆菌15～18wt%、褐球固氮菌15～18wt%、酿酒酵母9～12wt%、枯草芽孢杆菌9～12wt%、植物乳杆菌9～12wt%、放线菌9～12wt%、沼泽红假单胞菌9～12wt%；
c. 将混合菌液接种于以核酸废水为基质的发酵培养基中，28~30℃下培养4～7天，即得到富含核酸的微生物有机菌肥，所述以核酸废水为基质的发酵培养基pH 6.0～8.0，其中蔗糖10～50g/L、葡萄糖10～50g/L、蜂蜜10～50g/L、蛋白胨1～5g/L、磷酸二氢钾1～5g/L、磷酸氢二钾 5～20g/L、尿素1～5g/L、硫酸镁5～20g/L，其余为核酸废水。
本发明配方合理，功效稳定，能促进作物生长、促早熟、改善果实品质、增加产量，提高作物的抗逆性，提高肥料利用率，缓解土地板结，改良土壤生态环境，并且有防病抗病功效。
具体实施方式
制备方法如下：
实施例1：
（1）菌种活化：以胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）CICC No. 21700、巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）CICC No. 22682、褐球固氮菌 （Azotobacter chroococcum）CICC No. 22663、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）ACCC No. 20042、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CICC No.10458、植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）ACCC No. 11118、放线菌（Dactylosporangium sp.）ACCC No. 40661及沼泽红假单胞菌（Rhodosedoseudomouas padustris）CICC No.23812作为制备菌种，将各菌种分别接种于各菌种对应的斜面培养基上培养；灭菌后严格进行无菌操作，从斜面转接至平板，温度30℃下培养2～3天；
（2）一级菌种培养：将步骤（1）活化的各菌种分别接种于各菌种对应的液体培养基中，摇床振荡培养至各菌种培养液中菌种有效活菌数分别为10～20×108个/mL；
（3）二级发酵：将步骤（2）各菌种培养液按接种量5%分别接种于菌株发酵培养基中，摇床振荡培养至各菌种发酵培养液中菌种有效活菌数分别为10～20×108个/mL，收集发酵培养液，分别得各菌种发酵液；
（4）将步骤（3）制得的各菌种发酵液混合均匀，得混合菌液；在混合菌液中胶冻样芽孢杆菌18wt%、巨大芽孢杆菌16wt%、褐球固氮菌16wt%、酿酒酵母10wt%、枯草芽孢杆菌10wt%、植物乳杆菌10wt%、放线菌10wt%、沼泽红假单胞菌10wt%；
（5）三级发酵：将混合菌液按接种量1～5%接种于以核酸废水为基质的发酵培养基中，在 28~30℃下培养4～7天，发酵液中有效活菌数达到10～20×108个/mL，即得到富含核酸的微生物有机菌肥。
以核酸废水为基质的发酵培养基为：蔗糖25g/L、葡萄糖25g/L、蜂蜜25g/L、蛋白胨3g/L、磷酸二氢钾 3g/L、磷酸氢二钾 15g/L、尿素3g/L、硫酸镁15g/L，其余为核酸废水；pH6.0～8.0。其中的核酸废水为珍奥集团股份有限公司生产核酸产废水，已公开销售。
经测定富含核酸的微生物有机菌肥中总有效活菌数至少为10×108个/mL，总核酸含量至少为2.4 wt %。
应用例1：富含核酸的微生物有机菌肥在黄瓜种植中的应用效果
将实施例1得到的富含核酸的微生物有机菌肥在黄瓜种植上进行对比试验。
1. 试验材料与方法
供试品种：密刺黄瓜德瑞特D19（山东寿光）
试验方法：试验设两个处理（本发明实施例及常规产品CK），三次重复，一个棚区一半对照一半试验，两叶一心时1:100倍喷施，以后每月滴管一次，稀释1:200倍，其他管理同田间常规管理。
2. 试验结果与分析
（1）对黄瓜幼苗素质的影响
黄瓜苗期生长情况对定植后黄瓜缓苗、生长发育、生长势等都具有主要影响。从表中可以看出，苗期施用实施例1的产品后黄瓜幼苗株高增加41.77%，茎粗较对照增粗17.31%，叶片数增加，株幅增大，叶绿素含量高9.38%，根系活力明显增强。由此表明，富含核酸的微生物有机菌肥对提高黄瓜幼苗素质，培育壮苗，促进植株生长方面具有积极作用。
注：营养钵育苗，10株平均值
（2）对黄瓜植株生物学性状的影响
在黄瓜生长初期分别调查黄瓜生长状况，结果如下表：施用实施例1产品区黄瓜株高、茎粗、叶片数都明显优于对照组，至调查时平均每株黄瓜雌花数高于对照。这表明富含核酸的微生物菌肥在黄瓜生长初期具有明显的促进生长作用，能够为黄瓜早起生长提供良好的土壤环境和营养供给。
（3）对黄瓜产量和品质的影响
试验测定了黄瓜的产量、可溶性糖、Vc、硝酸盐含量，结果见下表：实施例1产品可以增产16.1%，增加黄瓜的可溶想糖含量和维生素C含量，并降低硝酸盐含量。
应用例2：富含核酸的微生物有机菌肥在番茄种植中的应用效果
将实施例1得到的富含核酸的微生物有机菌肥在番茄种植上进行对比试验。
试验方法如应用例1。
试验结果如下：
从表中可以看出，试验区秧苗墩实，植株生长健壮，根系发达，叶色深绿，叶片相对较多、茎秆粗壮、植株萎蔫少，抗早衰，抗早疫病和晚疫病强。番茄果个大，果实表面光洁，着色鲜艳，无畸形果，口味甘甜；能改善果实外观质量和提高果实品质，增产效果明显，能显著提高经济效益。
Claims (1)
1.一种富含核酸的微生物有机菌肥，其特征在于是以胶冻样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、褐球固氮菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、放线菌及沼泽红假单胞菌为菌种，在以核酸废水为基质的发酵培养基中发酵的产物，所述的有机菌肥中总有效活菌数至少为10×108个/mL，总核酸含量至少为2.4 wt %，按照以下步骤进行制备：
a. 取胶冻样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、褐球固氮菌、酿酒酵母、枯草芽孢杆菌、植物乳杆菌、放线菌、沼泽红假单胞菌分别培养，得到有效活菌数为10～20×108个/mL的菌液；
b. 将得到的各菌种发酵液混合均匀，得到混合菌液，所得到的混合菌液中胶冻样芽孢杆菌15～20wt%、巨大芽孢杆菌15～18wt%、褐球固氮菌15～18wt%、酿酒酵母9～12wt%、枯草芽孢杆菌9～12wt%、植物乳杆菌9～12wt%、放线菌9～12wt%、沼泽红假单胞菌9～12wt%；
c. 将混合菌液接种于以核酸废水为基质的发酵培养基中，28~30℃下培养4～7天，即得到富含核酸的微生物有机菌肥，所述以核酸废水为基质的发酵培养基pH 6.0～8.0，其中蔗糖10～50g/L、葡萄糖10～50g/L、蜂蜜10～50g/L、蛋白胨1～5g/L、磷酸二氢钾 1～5g/L、磷酸氢二钾 5～20g/L、尿素1～5g/L、硫酸镁5～20g/L，其余为核酸废水。
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