CN104857551B - 一种含银抗菌敷料及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含银抗菌敷料及制备方法，制备步骤为：1)向多糖溶液中滴加氯离子盐水溶液；2)将硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；3)光激发下，反应；4)将步骤3)获得的液体与天然高分子溶液混合均匀，预冻，冻干；5)切割、封装、灭菌。本发明能够通过天然高分子的选择和配比改善敷料的力学性能，调整其降解速率。由于受到天然高分子的保护，纳米结构分散均匀、稳定性好，具有杀菌速度快、银离子持续稳定释放的优势。又以天然高分子为基材，具有三维多孔的结构特征，使该敷料在发挥抗菌功能的同时，具有很好的吸湿性、降解性和生物相容性。本发明的方法制备的产品可用于临床上因各种原因造成的皮肤缺损感染的治疗。

Description

一种含银抗菌敷料及制备方法

技术领域

本发明属于医药卫生技术领域，具体涉及一种含银抗菌敷料及制备方法。

背景技术

皮肤损伤为临床常见疾病，湿疹、皮炎、压疮、外伤、烧烫伤、溃疡等均会引起皮肤损伤，创面的正确处理是该类疾病治疗的关键。积极的伤口处理，可有效促进创面愈合，改善预后，减少伤残。由天然高分子制成的伤口敷料能够在伤口表面形成凝胶保护膜，具有生物相容性、降解性好，高吸湿性、易去除，迅速止血，加速伤口愈合的优势。然而，这类新型敷料易于被细菌侵染，从而对伤口及其周围的机体产生潜在危险。银系抗菌剂历史悠久、耐药性小、广谱高效，兼有消炎作用。因此，受到科研工作者的广泛重视，大量新型载银抗菌敷料研究成果获报道。目前，具有抗菌作用的含银敷料中的银主要有离子银、氯化银、单质银和氧化银四类存在形式。

以离子银为抗菌剂的研究有：中国专利CN201210060672.2,发明专利名称为：“一种制备脱细胞生物膜敷料的方法”，公开了将动物生物膜通过病毒灭活、脱脂、脱细胞后，浸入银离子、冻干、包装和辐照消毒工艺后得到脱细胞生物膜，作为抗菌敷料；中国专利CN201310465650.9，发明名称为：“一种治疗激光灼伤和烧烫伤的水凝胶伤口敷料及其制备方法”是以糊精包载银离子，加入凝胶中，混入保湿剂和稳定剂，制得抗菌凝胶；中国专利CN201410268822.8，发明名称为：“一种具有抗菌功能的纳米粒子改性海绵敷料的制备方法”将清洗、消毒的海绵基材在金属盐或金属氧化物分散液中浸泡、超声，干燥后制得抗菌海绵敷料。生物大分子络合的银离子在与伤口接触后能迅速释放银离子，杀灭细菌，但它具有一定的刺激性，与体液接触后易迅速失活。

以氧化银为抗菌剂的研究有：中国专利CN201110024696.8“微米级Ag₂O₂掺杂壳聚糖水凝胶抗菌辅料的制备方法”，以过硫酸钾氧化银离子形成微米级Ag₂O₂颗粒，表面硅烷化处理后，混入壳聚糖酸溶液，戊二醛交联，制备成微米级Ag₂O₂掺杂壳聚糖水凝胶。氧化银微粒的主要优势在于能够避免银离子对皮肤的染色问题，但其抗菌活性也相应下降。

以氯化银为抗菌剂的研究有：中国专利CN200810037074.7“含氯化银纳米粒子细菌纤维素膜及其制备方法和用途”，将氯化银纳米粒子负载于细菌纤维素微结构中，制得含氯化银纳米粒子的细菌纤维素膜；中国专利CN201410497949.7“一种纳米氯化银-壳聚糖纤维抗菌敷料的制备方法”，在吸附银离子的壳聚糖纤维无纺布表面喷淋氯化钠溶液，制得纳米氯化银抗菌敷料；CN201210510095.2“抗菌性含银纤维类伤口敷料及其制备方法”，将氯化银颗粒分散于聚合物纺丝液中制得一种含银纤维类伤口敷料。氯化银可通过电离平衡持续向伤口释放银离子，使伤口处的银离子浓度得以稳定。即降低了高浓度银离子的刺激性，又避免了低浓度银离子诱发的耐药性。

以单质纳米银为抗菌剂的研究很多，如：CN201210590431.9“一种治疗糖尿病足溃疡的湿性抗菌水凝胶敷料”，将银离子化合物溶于海藻酸钠水溶液中，加入化学还原剂得到纳米银海藻酸钠溶液，通过浸渍，使纳米银海藻酸钠溶液进入细菌纤维素膜中，冷冻干燥，浸入氯化钙溶液，得到湿性抗菌水凝胶敷料；CN201210163445.2“一种可用于医用敷料含纳米银的复合纤维膜的制备方法”将纳米银胶混入聚己内酯(PCL)/聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶液，通过静电纺丝法制备纳米银复合纤维膜；CN201310164972.X“一种纳米银海藻酸钙抗菌医用敷料的制备方法”先以海藻酸钠为稳定剂和分散剂，硼氢化钠为还原剂，制备纳米银溶胶，然后向纳米银溶胶中加入海藻酸钠，干燥成膜后，钙离子交联；CN201110192110.9”一种载银改性细菌纤维素基复配功能湿态敷料的制备方法”,将细菌纤维素冷冻干燥，氧化、胺化后制得选择性胺化的细菌纤维素，通过氨基配位形成银离子螯合物或选择性负载纳米银颗粒的细菌纤维素敷料。纳米银具有很高的比表面积和表面活性，通过其表面原子对Ag⁺的缓释作用，纳米银提高了银系抗菌药物的稳定性，延长了作用时间，降低了刺激性和对机体的毒副作用。

但是，目前尚未有将银离子、氯化银纳米颗粒以及单质纳米银结合到天然高分子敷料中的报道。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种安全、广谱的含银抗菌敷料。

本发明的第二个目的是提供一种含银抗菌敷料的制备方法。

本发明的第三个目的是提供另一种含银抗菌敷料。

本发明的第四个目的是提供另一种含银抗菌敷料的制备方法。

本发明的技术方案概述如下：

一种含银抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：

1)向质量浓度为0.1％-0.6％的多糖溶液中滴加氯离子盐水溶液，使氯离子的浓度达5-15ppm；所述氯离子盐为氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钡、氯化铁、氯化钙和氯化锌至少一种。

2)按体积比为1-9：9-1的比例，将质量浓度为0.05％-1％的硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；

3)光激发下，反应1分钟-30小时；

4)按体积比为1:5-10的比将步骤3)获得的液体与质量浓度为0.2％-0.8％的天然高分子溶液混合均匀，于-20—-80℃预冻，冻干；

5)切割、封装、灭菌。

所述多糖溶液为海藻酸钠水溶液、透明质酸水溶液、硫酸软骨素水溶液、肝素水溶液和壳聚糖溶液至少一种，所述壳聚糖溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液。

所述光激发为紫外光激发、日光激发或波长小于500nm，照度为300-20000lux的可见光激发。

所述天然高分子溶液为胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液、明胶水溶液、海藻酸钠水溶液至少一种，胶原蛋白溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液，壳聚糖溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液。

上述方法制备的含银抗菌敷料。

第二种含银抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：

1)向质量浓度为0.1％-0.6％的多糖溶液中滴加氯离子盐水溶液，使氯离子的浓度达5-15ppm；所述氯离子盐为氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钡、氯化铁、氯化钙和氯化锌至少一种。

2)按体积比为1-9：9-1的比例，将质量浓度为0.05％-1％的硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；

3)光激发下，反应1分钟-30小时；

4)按体积比为1:5-10的比将步骤3)获得的液体与质量浓度为0.2％-0.8％的天然高分子溶液混合均匀，于-20—-80℃预冻，冻干；

5)室温下，按1-5mg:1mL的比例，将步骤4)获得的产物浸泡于50mM L2-吗啉乙烷磺酸溶液，浸泡10-120min；取出，浸泡在交联液中，室温下交联1-24h；在蒸馏水中浸洗3-6次，0.5h/次-1.5h/次，于-20—-80℃预冻，冻干；所述L2-吗啉乙烷磺酸溶液的溶剂为体积浓度30％-50％乙醇水溶液；所述交联液用下述方法配成：将L2-吗啉乙烷磺酸加入到体积浓度30％-50％乙醇水溶液中使L2-吗啉乙烷磺酸浓度为10-100mM；加入碳化二亚胺，使碳化二亚胺的浓度为10-50mM，加入琥珀酰亚胺，使琥珀酰亚胺的浓度为2-20mM；

6)切割、封装、灭菌。

所述多糖溶液为海藻酸钠水溶液、透明质酸水溶液、硫酸软骨素水溶液、肝素水溶液和壳聚糖溶液至少一种，所述壳聚糖溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液。

所述光激发为紫外光激发、日光激发或波长小于500nm，照度为300-20000lux的可见光激发。

所述天然高分子溶液为胶原蛋白溶液、明胶水溶液、海藻酸钠水溶液至少一种，胶原蛋白溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液。

上述第二种方法制备的含银抗菌敷料。

本发明的含银抗菌敷料中银元素以银离子、单质银纳米结构和氯化银纳米结构三种形式并存，能够通过对氯离子浓度、反应时间和光激发条件的控制，调整银离子、纳米银和纳米氯化银三者的比例。其中氯化银通过原位反应制得，再由氯化银介导银离子的光化学还原，原位生成纳米银。因此，三种抗菌成分均能稳定存在于天然高分子敷料基质，避免了纳米颗粒团聚、脱落等问题，发挥各自抗菌优势的同时，提高了抗菌敷料的安全性。降低了高浓度银离子产生的毒性，避免了银离子在生物体中快速失活的现象。以少量的氯化银晶核诱导银离子的光化学还原形成纳米银，避免了化学还原剂的使用，减少了毒性杂质的引入。本发明能够通过天然高分子的选择和配比改善敷料的力学性能，调整其降解速率。由于受到天然高分子的保护，纳米结构分散均匀、稳定性好，敷料的生物安全性能够满足生物医用材料0－1级毒性(RGR≥75％)的标准，具有杀菌速度快、银离子持续稳定释放等优点。又以天然高分子为基材，具有三维多孔的结构特征，使该敷料在发挥抗菌功能的同时，具有很好的吸湿性、降解性和生物相容性。本发明的方法制备的产品抗菌活性好，杂质少、毒性小，纳米结构形貌和粒径可控，可用于临床上因各种原因造成的皮肤缺损感染的治疗。

附图说明

图1壳聚糖体系中(日光激发2h)生成的单质银、氯化银混合晶体的X射线衍射图谱。

图2壳聚糖-Ag抗菌液体积(0-40mL)对敷料抗菌效果的影响(培养18h)。

图3MTT方法评价壳聚糖-Ag抗菌液体积(0-40mL)对敷料细胞相容性的影响(培养2天)(n＝8)。

具体实施方式

明胶、海藻酸钠、糖胺聚糖来源于sigma公司；

壳聚糖来源于浙江金壳生物化学有限公司；

胶原蛋白来源于福建博特生物科技有限公司。

上述原料的来源是为了使本领域的技术人员能够更好地理解本发明，但并不对本发明作任何限制。

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但不能视为对本发明保护范围的任何限制。

实施例1

一种含银抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：

1)向质量浓度为0.5％的壳聚糖溶液中滴加氯化钠水溶液和氯化钙水溶液，使氯离子的浓度达10ppm；壳聚糖溶液的溶剂为0.05M的乙酸水溶液；

2)按体积比为1：1的比例，将质量浓度为0.5％的硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；

3)日光激发下，反应2小时；X射线晶体衍射分析(图1)证明此时溶液中存在氯化银、纳米银两种晶体形态；

4)按体积比为1:10的比将步骤3)获得的液体与质量浓度为0.2％的胶原蛋白溶液混合均匀，于-20℃预冻，冻干；胶原蛋白溶液的溶剂为0.8M的乙酸水溶液；

5)切割、封装、灭菌。

实施例2

1)向质量浓度为0.6％的海藻酸钠水溶液中滴加氯化镁水溶液，使氯离子的浓度达15ppm；

2)按体积比为9:1的比例，将质量浓度为0.05％的硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；

3)在波长为404nm，照度为300lux，可见光激发下，反应24小时；

4)按体积比为1:6的比将步骤3)获得的液体与质量浓度为0.6％的明胶水溶液混合均匀，于-40℃预冻，冻干；

5)切割、封装、灭菌。

实施例3

1)向质量浓度为0.4％的透明质酸水溶液中滴加氯化钡水溶液，使氯离子的浓度达10ppm；

2)按体积比为3:2的比例，将质量浓度为0.2％的硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；

3)在波长为486nm，照度为20000lux，可见光激发下，反应30小时；

4)按体积比为1:7的比将步骤3)获得的液体与质量浓度为0.5％的海藻酸钠水溶液混合均匀，于-80℃预冻，冻干；

5)切割、封装、灭菌。

实施例4

1)向质量浓度为0.2％的肝素水溶液中滴加氯化铁水溶液，使氯离子的浓度达8ppm；

2)按体积比为1:2的比例，将质量浓度为0.3％的硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；

3)在日光激发下，反应2小时；

4)按体积比为1:8的比将步骤3)获得的液体与质量浓度为0.4％的胶原蛋白溶液混合均匀，于-20℃预冻，冻干；胶原蛋白溶液的溶剂为0.8M的乙酸水溶液；

5)切割、封装、灭菌。

实施例5

一种含银抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：

1)向质量浓度为0.1％的硫酸软骨素水溶液中滴加氯化钾水溶液和氯化锌水溶液，使氯离子的浓度达5ppm；

2)按体积比为1:9的比例，将质量浓度为1％的硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；

3)紫外光激发，反应1分钟；

4)按体积比为1:5的比将步骤3)获得的液体与质量浓度为0.8％的壳聚糖溶液混合均匀，于-80℃预冻，冻干；壳聚糖溶液的溶剂为0.05M的乙酸水溶液；(本实施例壳聚糖溶液的溶剂也可以选用0.8M的乙酸水溶液)

5)切割、封装、灭菌。

实施例6

第二种含银抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：

(1)-(4)同实施例1(1)-(4)；

5)室温下，按1mg:1mL的比例，将步骤4)获得的产物浸泡于50mM L2-吗啉乙烷磺酸溶液，浸泡10min；取出，浸泡在交联液中，室温下交联1h；在蒸馏水中浸洗3次，1.5h/次，于-20℃预冻，冻干；所述L2-吗啉乙烷磺酸溶液的溶剂为体积浓度30％的乙醇水溶液；所述交联液用下述方法配成：将L2-吗啉乙烷磺酸加入到体积浓度30％的乙醇水溶液中使L2-吗啉乙烷磺酸浓度为100mM；加入碳化二亚胺，使碳化二亚胺的浓度为50mM，加入琥珀酰亚胺，使琥珀酰亚胺的浓度为20mM；

(6)切割、封装、灭菌。

实施例7

第二种含银抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：

(1)-(4)同实施例2(1)-(4)；

(5)室温下，按2mg:1mL的比例，将步骤4)获得的产物浸泡于50mM L2-吗啉乙烷磺酸溶液，浸泡30min；取出，浸泡在交联液中，室温下交联5h；在蒸馏水中浸洗4次，1h/次，于-40℃预冻，冻干；所述L2-吗啉乙烷磺酸溶液的溶剂为体积浓度35％的乙醇水溶液；所述交联液用下述方法配成：将L2-吗啉乙烷磺酸加入到体积浓度35％的乙醇水溶液中使L2-吗啉乙烷磺酸浓度为80mM；加入碳化二亚胺，使碳化二亚胺的浓度为40mM，加入琥珀酰亚胺，使琥珀酰亚胺的浓度为15mM；

(6)切割、封装、灭菌。

实施例8

第二种含银抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：

(1)-(4)同实施例3(1)-(4)；

(5)室温下，按3mg:1mL的比例，将步骤4)获得的产物浸泡于50mM L2-吗啉乙烷磺酸溶液，浸泡50min；取出，浸泡在交联液中，室温下交联12h；在蒸馏水中浸洗5次，0.8h/次，于-20℃预冻，冻干；所述L2-吗啉乙烷磺酸溶液的溶剂为体积浓度40％的乙醇水溶液；所述交联液用下述方法配成：将L2-吗啉乙烷磺酸加入到体积浓度40％的乙醇水溶液中使L2-吗啉乙烷磺酸浓度为60mM；加入碳化二亚胺，使碳化二亚胺的浓度为30mM，加入琥珀酰亚胺，使琥珀酰亚胺的浓度为10mM；

(6)切割、封装、灭菌。

实施例9

第二种含银抗菌敷料的制备方法，包括如下步骤：

(1)-(4)同实施例4(1)-(4)；

(5)室温下，按5mg:1mL的比例，将步骤4)获得的产物浸泡于50mM L2-吗啉乙烷磺酸溶液，浸泡120min；取出，浸泡在交联液中，室温下交联24h；在蒸馏水中浸洗6次，0.5h/次，于-80℃预冻，冻干；所述L2-吗啉乙烷磺酸溶液的溶剂为体积浓度50％的乙醇水溶液；所述交联液用下述方法配成：将L2-吗啉乙烷磺酸加入到体积浓度50％的乙醇水溶液中使L2-吗啉乙烷磺酸浓度为10mM；加入碳化二亚胺，使碳化二亚胺的浓度为10mM，加入琥珀酰亚胺，使琥珀酰亚胺的浓度为2mM；

(6)切割、封装、灭菌。

实施例10

1.抗菌性实验

(1)

a)LB液体培养基的配制：在950ml去离子水中加入10g胰化蛋白胨、5g酵母提取物、10gNaCl，摇动容器直至溶质溶解。滴加5M NaOH(约0.2ml)将其pH调至7.0，用去离子水定容至1L。在1.05kg/cm²的压力下121℃湿热灭菌20min，4℃保存。

b)大肠杆菌菌液的制备：向无菌的三角瓶中注入50ml液体LB培养基，用移液枪枪头沾取DH5α大肠杆菌(美国Promega公司)的单克隆菌落后投入液体LB培养基中，37℃、200rpm条件下摇菌15h，备用。

c)抗菌敷料准备：在实施例1的步骤4)中，首先配置200mL 0.2％的胶原蛋白溶液7份，将实施例1的步骤3)中制得的壳聚糖-Ag抗菌液分别加入0mL、2mL、5mL、10mL、20mL、30mL、40mL，分别混合均匀，于-20℃预冻，冻干。切割成1cm×1cm片状，封装，Co 60辐照灭菌。

d)抗菌性能评价：在15ml试管中加入5ml LB液体培养基，1cm²抗菌敷料，震荡使其充分浸润LB液体培养基，再加入100μl DH5α大肠杆菌菌液，37℃震荡过夜，600nm测吸光度(平行样5个)。实验结果如图2所示，该图表明加入5-40mL壳聚糖-Ag抗菌液制备的敷料均能显著抑制细菌生长。其中，加入20-40mL壳聚糖-Ag抗菌液制备的敷料能完全杀灭培养基中的大肠杆菌。

(2)

a)固体LB培养基的准备：在950ml去离子水中加入10g胰化蛋白胨、5g酵母提取物、10gNaCl、15g琼脂糖，摇动容器使溶质溶解或分散。然后用5M NaOH(约0.2ml)调pH＝7.0,最后用去离子水定容至1L。在1.05kg/cm²的压力下121℃湿热灭菌20min。待温度降至约60℃-70℃时，轻轻摇动容器使培养基成为均质溶液，在超净工作台内将该培养基注入无菌的直径9cm的玻璃培养皿中，每皿约30ml。冷却固化后用封口膜将玻璃培养皿密封，4℃倒置保存。

b)抗菌敷料准备：用打孔器将按照实施例1-9的方法制备的含银抗菌敷料制成直径d＝9mm的圆形试样，Co 60辐照灭菌。

c)抗菌性能评价：取固体LB培养板，用移液枪吸取100μl菌液[抗菌性试验(1)b)中的方法制得]滴在固体培养基表面，用玻璃刮铲按顺时针、逆时针方向分别涂抹2周，使菌液均匀分布于平板表面。将实施例1-9的含银抗菌敷料试样均匀分布于该培养板。制备好的培养板倒置于37℃培养箱中培养1h后正置培养,培养13h后取出，观察发现9种含银抗菌敷料周围均出现宽度不小于1.5mm的抑菌环，说明9种含银抗菌敷料均可杀灭其表面及周边的细菌。

2.细胞相容性实验

(1)

a)经由抗菌性实验(1)c)的方法制备的含银抗菌敷料(制备时分别加入0mL、5mL、10mL、20mL、30mL、40mL壳聚糖-Ag抗菌液)，切割成1cm×1cm。Co 60辐照灭菌后，按照5ml/cm²的计量加入含10％小牛血清的1640培养基，置于37℃培养箱中浸泡24h，取出材料，4℃保存浸提液。

b)消化L929细胞，在96孔培养板中按照3×10³/孔接种该细胞，在培养箱(37℃，5％CO2)中培养过夜。用浸提液替换各孔培养基(100μL/孔，8个平行样)，以含10％小牛血清的1640培养基换液的各孔为阴性对照。培养48h进行MTT检测。方法如下：吸干各孔培养基，向每孔加入50ml的四甲基偶氮砜(MTT，0.5％)，37℃静置4h。吸干MTT溶液，再向每孔加入100ml二甲基亚砜(DMSO)，37℃静置1h。最后，用酶标仪(ELX800)检测上述样品在490nm的吸光度。

c)以空白对照矫正后的吸光度如图3所示，该图显示随着抗菌敷料制备过程中加入抗菌液体积的增加，材料的细胞相容性有所下降，但即便是加入40mL壳聚糖-Ag抗菌液制备的敷料其细胞相容性依然能满足生物医用材料0－1级毒性(细胞相对增殖率≥75％)的标准，即该材料对细胞的生长无显著的抑制作用。

(2)

将实施例1-9中制备的含银抗菌敷料按照5ml/cm²的计量加入含10％小牛血清的1640培养基，置于37℃培养箱中浸泡24h，取出材料，4℃保存浸提液。用细胞相容性实验(1)b)的方法考察9种浸提液中细胞的增殖情况，实验结果证明，9种含银抗菌敷料浸提液中细胞相对增殖率均大于75％，即抗菌敷料满足生物医用材料0－1级毒性的标准。

Claims (6)

1.一种含银抗菌敷料的制备方法，其特征是包括如下步骤：

1)向质量浓度为0.1％-0.6％的多糖溶液中滴加氯离子盐水溶液，使氯离子的浓度达5-15ppm；所述氯离子盐为氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钡、氯化铁、氯化钙和氯化锌至少一种；

2)按体积比为1-9：9-1的比例，将质量浓度为0.05％-1％的硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；

3)光激发下，反应1分钟-30小时；

4)按体积比为1:5-10的比将步骤3)获得的液体与质量浓度为0.2％-0.8％的天然高分子溶液混合均匀，于-20—-80℃预冻，冻干；

5)切割、封装、灭菌；

所述多糖溶液为海藻酸钠水溶液、透明质酸水溶液、硫酸软骨素水溶液、肝素水溶液和壳聚糖溶液至少一种，所述壳聚糖溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液；

所述天然高分子溶液为胶原蛋白溶液、壳聚糖溶液、明胶水溶液、海藻酸钠水溶液至少一种，胶原蛋白溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液，壳聚糖溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述光激发为紫外光激发、日光激发或波长小于500nm，照度为300-20000lux的可见光激发。

3.权利要求1或2的方法制备的含银抗菌敷料。

4.一种含银抗菌敷料的制备方法，其特征在于它包括如下步骤：

1)向质量浓度为0.1％-0.6％的多糖溶液中滴加氯离子盐水溶液，使氯离子的浓度达5-15ppm；所述氯离子盐为氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钡、氯化铁、氯化钙和氯化锌至少一种；

2)按体积比为1-9：9-1的比例，将质量浓度为0.05％-1％的硝酸银水溶液与步骤1)获得的溶液混合均匀；

3)光激发下，反应1分钟-30小时；

4)按体积比为1:5-10的比将步骤3)获得的液体与质量浓度为0.2％-0.8％的天然高分子溶液混合均匀，于-20—-80℃预冻，冻干；

5)室温下，按1-5mg:1mL的比例，将步骤4)获得的产物浸泡于50mM L2-吗啉乙烷磺酸溶液，浸泡10-120min；取出，浸泡在交联液中，室温下交联1-24h；在蒸馏水中浸洗3-6次，0.5h/次-1.5h/次，于-20—-80℃预冻，冻干；所述L2-吗啉乙烷磺酸溶液的溶剂为体积浓度30％-50％乙醇水溶液；所述交联液用下述方法配成：将L2-吗啉乙烷磺酸加入到体积浓度30％-50％乙醇水溶液中使L2-吗啉乙烷磺酸浓度为10-100mM；加入碳化二亚胺，使碳化二亚胺的浓度为10-50mM，加入琥珀酰亚胺，使琥珀酰亚胺的浓度为2-20mM；

6)切割、封装、灭菌；

所述多糖溶液为海藻酸钠水溶液、透明质酸水溶液、硫酸软骨素水溶液、肝素水溶液和壳聚糖溶液至少一种，所述壳聚糖溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液；

所述天然高分子溶液为胶原蛋白溶液、明胶水溶液、海藻酸钠水溶液至少一种，胶原蛋白溶液的溶剂为0.05M-0.8M的乙酸水溶液。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征是所述光激发为紫外光激发、日光激发或波长小于500nm，照度为300-20000lux的可见光激发。

6.权利要求4或5的方法制备的含银抗菌敷料。