CN104825469A

CN104825469A - 闭花木酮的o-(苯并咪唑基)乙基衍生物在制备升高白细胞的药物中的应用

Info

Publication number: CN104825469A
Application number: CN201510213210.3A
Authority: CN
Inventors: 王慧; 吴俊艺
Original assignee: Nanjing Guangkangxie Biomedical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Guangkangxie Biomedical Technology Co Ltd
Priority date: 2015-04-29
Filing date: 2015-04-29
Publication date: 2015-08-12

Abstract

本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物、制备方法及其在制备抗炎药物上的用途。本发明合成了一个新的闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物，并公开了其制备方法。药理学实验表明，本发明的闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物具有升高白细胞的作用，具有开发升高白细胞药物的价值。

Description

闭花木酮的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物在制备升高白细胞的药物中的应用

技术领域

本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物、制备方法及其用途。

背景技术

白细胞减少症是由于原因不明和继发于其他疾病之后而引起的疾病，分为原发性和继发性两大类。原发性者原因不明；继发性者认为其病因可由急性感染，物理、化学因素，血液系统疾病，伴脾肿大的疾病，结缔组织疾病，过敏性疾病，遗传性疾病等，获得性或原因不明性粒细胞减少等。

白细胞减少的治疗目前已有的药物存在毒性大、安全性低的问题，从天然产物中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其衍生物，从而得到高效低毒的潜在药物有重要价值。

本发明涉及的化合物闭花木酮Cleistanone是一个2011年发表(Van Trinh ThiThanh et al.,2011.Cleistanone:A Triterpenoid from Cleistanthus indochinensis witha New Carbon Skeleton.Volume2011,Issue22,pages 4108–4111,August 2011)的化合物，我们对化合物闭花木酮Cleistanone进行了结构修饰，获得了一个新的闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物，并对其升高白细胞活性进行了评价，其具有升高白细胞活性。

发明内容

本发明公开了一个闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物，其结构为：

本发明闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物(III)可通过下面方法制备：

(1)闭花木酮Cleistanone(I)与1,2-二溴乙烷反应得到闭花木酮Cleistanone的O-溴乙基衍生物(II)；

(2)闭花木酮Cleistanone的O-溴乙基衍生物(II)与苯并咪唑发生取代反应制得闭花木酮Cleistanone衍生物(III)。

进一步的闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物(III)的制备方法为：

(1)将440mg化合物闭花木酮Cleistanone(I)溶于10mL苯，向溶液中加入0.04g的四丁基溴化铵，3.760g的1,2-二溴乙烷和6mL的50％氢氧化钠溶液；混合物在25摄氏度搅拌24h；24h之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶液；然后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涤3次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩去除溶剂得到产物粗品；产物粗品用硅胶柱层析纯化，流动相为：石油醚/丙酮＝100:1，v/v，收集黄色集中洗脱带即得到闭花木酮Cleistanone的O-溴乙基衍生物(II)的黄色固体。

(2)将273mg的闭花木酮Cleistanone的O-溴乙基衍生物溶于15mL乙腈当中，向其中加入345mg的无水碳酸钾，84mg的碘化钾和1180mg的苯并咪唑，混合物加热回流5h；反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有机相；依次用水和饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗品；产物粗品用硅胶柱层析纯化，流动相为：石油醚/丙酮＝100:1.5，v/v，收集棕色集中洗脱带即得到闭花木酮Cleistanone衍生物(III)的棕色固体。

本发明公开的化合物可以制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。

本发明的目的是提供闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物(III)在制备升高白细胞药物中的应用。闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物(III)可以显著升高失血和化学物品引起的白细胞降低。

以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。

具体实施方式

实施例1化合物闭花木酮Cleistanone的制备

化合物闭花木酮Cleistanone(I)的制备方法参照Van Trinh Thi Thanh等人发表的文献(Van Trinh Thi Thanh et al.,2011.Cleistanone:A Triterpenoid fromCleistanthus indochinensis with a New Carbon Skeleton.Volume 2011,Issue 22,pages 4108–4111,August 2011)的方法。

实施例2闭花木酮Cleistanone的O-溴乙基衍生物(II)的合成

将化合物I(440mg，1.00mmol)溶于10mL苯，向溶液中加入四丁基溴化铵(TBAB)(0.04g)，1,2-二溴乙烷(3.760g，20.00mmol)和6mL的50％氢氧化钠溶液。混合物在25摄氏度搅拌24h。24h之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烷萃取两次，合并有机相溶液。然后对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涤3次，再用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化(流动相为：石油醚/丙酮＝100:1，v/v)，收集黄色集中洗脱带即得到化合物II的黄色固体(344mg，63％)。

1H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ5.04(s,1H),4.82(s,1H),3.94(d,J＝26.5Hz,1H),3.87(d,J＝26.5Hz,2H),3.57(s,2H),2.40(d,J＝14.0Hz,1H),2.39(d,J＝14.0Hz,1H),2.27(s,1H),2.21(s,1H),2.15(s,1H),1.82(s,1H),1.62(s,2H),1.57(d,J＝3.3Hz,1H),1.54(d,J＝3.3Hz,1H),1.50(d,J＝1.2Hz,1H),1.47(d,J＝1.2Hz,1H),1.39(d,J＝15.3Hz,2H),1.34(d,J＝15.3Hz,1H),1.26(dd,J＝32.6,13.7Hz,4H),1.13(d,J＝18.0Hz,2H),1.05(s,6H),0.98(s,1H),0.88(s,12H),0.78(s,3H),0.74(s,1H)。

13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ216.59(s),154.50(s),105.23(s),74.63(s),69.85(s),59.71(s),52.55(s),51.21(s),47.92(s),44.10(s),42.25(s),41.73(s),40.64(s),40.16(s),38.88(s),38.65(s),37.21(s),36.23(s),33.34(d,J＝1.1Hz),32.96(s),29.91(s),27.18(s),26.03(s),24.23(s),23.96(s),20.77(s),18.48(s),17.98(s),16.93(s)。

HRMS(ESI)m/z[M+H]⁺calcd for C₃₂H₅₂BrO₂:547.3151；found 547.3159.

实施例3闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物(III)的合成

将化合物II(273mg，0.5mmol)溶于15mL乙腈当中，向其中加入无水碳酸钾(345mg，2.5mmol)，碘化钾(84mg，0.5mmol)和苯并咪唑(1180mg，10mmol)，混合物加热回流5h。反应结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烷萃取三次，合并有机相。依次用水和饱和食盐水洗涤合并之后的有机相，再用无水硫酸钠干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化(流动相为：石油醚/丙酮＝100:1.5，v/v)，收集棕色集中洗脱带，浓缩即得到化合物III的棕色固体(105.2mg,36％)。

1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.27(s,1H),7.68(d,J＝25.0Hz,2H),7.31(s,1H),7.21(s,1H),4.65(s,1H),4.56(s,1H),4.14(d,J＝7.9Hz,2H),4.05(s,1H),3.93(s,2H),2.51(d,J＝127.9Hz,1H),2.37(s,1H),2.28(d,J＝15.8Hz,2H),2.22(s,1H),1.90(s,2H),1.83(s,1H),1.66(s,2H),1.62–1.49(m,4H),1.29(t,J＝17.7Hz,3H),1.19(d,J＝14.3Hz,2H),1.11(d,J＝7.6Hz,7H),1.02(dd,J＝42.5,9.8Hz,13H),0.88(s,3H),0.80(s,1H),0.63(s,1H).

13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ216.57(s),154.46(s),146.57(s),139.24(s),134.35(s),124.01(s),123.47(s),118.67(s),110.97(s),105.19(s),74.62(s),67.84(s),59.73(s),52.52(s),51.17(s),47.88(s),45.48(s),44.08(s),42.26(s),41.75(s),40.61(s),40.13(s),38.83(s),38.62(s),37.22(s),36.24(s),33.30(s),32.92(s),29.86(s),27.16(s),26.04(s),24.24(s),23.92(s),20.75(s),18.43(s),17.97(s),16.93(s).

HRMS(ESI):m/z[M+H]⁺calcd for C₃₉H₅₇N₂O₂:585.4420；found:585.4416。

实施例4Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物升高白细胞活性

一、Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物对失血小鼠的治疗作用

对失血小鼠的影响ICR小鼠30只，♀♂各半，均分成3组(n＝10)。除生理盐水组外，其它组每只小鼠从眼眶静脉放血0.5ml，24h后再取血测全部各组白细胞指标，然后连续灌胃给药1周，末次给药1h后，从眼眶静脉丛取血用F-800全血小板分析仪测白细胞指标。

表1 Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物对因失血所致白细胞减少的治疗作用(10⁹/L)

与模型组比较：**p<0.01

结果表明，放血小鼠经服用Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物治疗7天后，Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物给药组与模型组比较，白细胞显著高于模型组，接近生理盐水组。

二、Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物对环磷酰胺致白细胞减少的治疗作用

对小鼠骨髓造血功能损伤的防治作用ICR小鼠30只，♀♂兼用，均分成3组(n＝10)，即生理盐水组、造模组、Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物1.2mg/kg组，口服给药，每天1次。第0、5、10日除生理盐水组外，其它各组小鼠分别腹腔注射环磷酸胺80mg/kg，然后继续给药3天。于末次给药后1h，从眼眶静脉丛取血，测白细胞。

表2 Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物对环磷酰胺所致白细胞减少的治疗作用(10⁹/L)

与模型组比较：**p<0.01

结果表明，与生理盐水组比较，环磷酸胺能使小鼠骨髓损伤，造成外周血细胞下降，Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物组与模型组比较，均可明显对抗环磷酸胺所致小鼠白细胞下降。

三、Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物对苯所致白细胞减少的治疗作用

对再生障碍性贫血小鼠的影响：昆明种小鼠30只，♀♂兼用，均分成3组(n＝10)，除生理盐水组外，其它组小鼠皮下注射苯0.5ml/kg，连续12天，造模的当日，同时口服给药，每天1次，共18天，末次给药后1h，眼眶静脉丛取血，测白细胞。

表3 Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物对苯所致血细胞减少的治疗作用(10⁹/L)

与模型组比较：**p<0.01

结果表明，给药组与模型组比较，可明显对抗苯所致再生障碍性贫血小鼠白细胞的下降。

结论：Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物能够显著升高白细胞，可以用来制备抗白细胞降低药物。

实施例5本发明所涉及化合物II和III片剂的制备

取20克Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物或者其药学上可接受的盐当中的一种，加入制备片剂的常规辅料180克，混匀，常规压片机制成1000片。

实施例6本发明所涉及化合物II和III胶囊的制备

取20克Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物或者其药学上可接受的盐当中的一种，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉180克，混匀，装胶囊制成1000粒。

Claims

1.一种具有式III所示结构的闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物及其药学上可接受的盐在升高白细胞药物中的应用，

2.如权利要求1所述的闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物(III)及其药学上可接受的盐在升高白细胞药物中的应用，其特征在于所述闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物升高失血所致白细胞的降低。

3.如权利要求1所述的闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物(III)及其药学上可接受的盐在升高白细胞药物中的应用，其特征在于所述闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物升高化学品所致白细胞的降低。

4.如权利要求3所述的闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物(III)及其药学上可接受的盐在升高白细胞药物中的应用，其特征在于所述化学品为环磷酰胺。

5.如权利要求3所述的闭花木酮Cleistanone的O-(苯并咪唑基)乙基衍生物(III)及其药学上可接受的盐在升高白细胞药物中的应用，其特征在于所述化学品为苯。