CN104792594A - 适用于狭缝载网捞片的组合器具 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种适用于狭缝载网捞片的组合器具。包括放样台和捞样器；放样台呈方形，放样台顶面的每个边缘间隔均布设有平行排列的放样孔，放样孔由一圆形盲孔以及与盲孔连接的条形槽构成，条形槽开在放样台边缘，狭缝载网放在放样孔的盲孔内；捞样器包括位于前端的捞片环与位于后端的手柄，捞片环与手柄固定连接，手柄为棒状结构，捞片环为具有柄部的腰形环体，捞片环的腰形环体覆盖在狭缝载网上；其腰形环体为金属片腰形环或者金属丝腰形环。本发明解决了透射电镜研究中难浸透样品的狭缝载网捞片存在的系列问题，并解决了其他所有样品的狭缝载网捞片皱褶问题，捞取样品切片不折叠或整片脱离树脂切片，样品切片完整、无破损。

Description

适用于狭缝载网捞片的组合器具

技术领域

本发明涉及了一种组合器具，尤其是涉及了一种适用于狭缝载网捞片的组合器具。

背景技术

在应用透射电镜技术研究生物组织超微结构时，对经树脂包埋的生物样品进行超薄切片及捞片操作，是非常关键的一步。

常用的以具膜载网从上而下的捞片方法，以载网具膜一面粘取水面上的超薄切片，而后再将载网从水面提起，在此过程中，很容易使超薄切片受到来自载网膜、水面等各方面的作用力而产生皱褶，从而在很大程度上直接影响对样品的观察。尤其是对于组织致密、硬度较大的样品而言，由于包埋剂难于浸透而往往导致样品与树脂聚合不好，当使用具膜载网从上而下捞取这类样品的树脂包埋块超薄切片时，除了会使超薄切片产生皱褶，还会使样品切片在捞片过程中因受力而与树脂切片呈不同程度的脱开、错位，样品切片折叠甚至整片脱离树脂切片，同时很可能在与树脂脱离过程中被撕裂而破损，从而严重影响了对样品的观察研究。由于样品本身组织致密、硬度大等因素而导致的树脂包埋剂对样品浸透不充分、样品与树脂聚合不佳问题，可谓是透射电子显微镜技术中的制样瓶颈，延长脱水及浸透时间、真空条件浸透、对样品软化处理等措施都只是在一定程度上改善浸透不充分的问题，目前还没有根本有效的解决方法，故而导致利用透射电镜技术对此类样品进行大结构的连续超薄切片观察几乎不太可能。

虽然市售的环形捞样器可有效解决捞片过程中所产生的切片皱褶等问题，但并不适用于进行连续切片收集时通常所采用的狭缝载网。狭缝载网即在其圆形的金属片中间有一定规格的腰形孔，并覆盖有支持膜，可允许透射电子通过，样品必须要在腰形孔处的支持膜上才可以被观察，腰形孔以外的金属材质虽覆盖有支持膜，但是不能透过透射电子，因此不能观察样品。以环形捞样器捞取的超薄切片会在捞起水滴的圆形水面上呈不定向漂移，当将环形捞样器套在载网支持膜上，用滤纸吸水时，超薄切片又会随滤纸吸水所产生的细小水流而飘移，最后在水完全被吸干时随机贴附在载网支持膜上的某一区域，对于狭缝载网而言，很多情况下超薄切片会贴附在金属覆膜区，根本无法保证超薄切片最终贴附在腰形孔处的支持膜上，因此环形捞样器不适用于狭缝载网捞片。而目前市面上尚未有针对狭缝载网的捞样器具，导致目前的狭缝载网捞片只能采取从上而下的方式粘取超薄切片，因此无法从根本上避免切片皱摺问题，更无法解决难浸透样品的树脂切片在从上而下的粘取式捞片过程中出现的样品与树脂切片脱开、错位，样品切片折叠甚至整片脱离树脂切片，样品切片在与树脂脱离过程中被撕裂而破损的问题。

发明内容

针对以上问题，本发明提供了适用于狭缝载网捞片的组合器具。本发明利用适用于狭缝载网捞片的组合器具成功解决了透射电镜研究中难浸透样品的狭缝载网捞片存在的系列问题，包括超薄切片皱褶，样品切片与树脂切片脱开、错位，样品切片折叠甚至整片脱离树脂切片，样品切片在与树脂脱离过程中被撕裂而破损的问题；并同时解决了其他所有样品的狭缝载网捞片皱褶问题，解决了已有环形捞样器捞取切片在载网上贴附位置不能保证的问题。

本发明采用的技术方案是：

本发明包括放样台和捞样器；放样台呈方形，放样台顶面的每个边缘间隔均布设有平行排列的放样孔，放样孔由一圆形盲孔以及与盲孔连接的条形槽构成，条形槽开在放样台边缘，狭缝载网放在放样孔的盲孔内；捞样器包括位于前端的捞片环与位于后端的手柄，捞片环与手柄固定连接，手柄为棒状结构，捞片环为具有柄部的腰形环体，捞片环的腰形环体覆盖在狭缝载网上。

所述的腰形环体为金属片腰形环，柄部连接到手柄端面。

所述的腰形环体为金属丝腰形环，捞片环由一条金属丝经绕拧制成，该金属丝围成在端部的金属丝腰形环结构后两边交错拧成螺旋状形成柄部，柄部连接到手柄端面。

所述的放样孔的圆孔直径比狭缝载网外径长0.1～0.2mm，放样孔圆孔深度与捞片环的环形体和狭缝载网的总厚度相同，放样孔条形槽的深度与捞片环的柄部厚度相同。

所述的腰形环体呈一字型或T字型，柄部连接到环形体沿长径的一侧中央或者沿短径的一侧中央。

所述的放样孔条形槽的宽度大于捞片环的柄部宽度，放样孔条形槽的长度小于捞片环的柄部长度。

所述的金属片腰形环的长、短外径均比狭缝载网的外径短；所述的金属片腰形环的长、短内径分别大于狭缝载网腰形孔的长、短径50～100μm。

所述的金属丝腰形环的长、短径均比狭缝载网的外径短，所述的金属丝腰形环的长、短径分别大于狭缝载网腰形孔的长、短径50～100μm。

所述的金属片腰形环上沿周向间隔均布开有多个圆孔。

所述的手柄采用木质或金属，手柄由握持端向与捞片环连接的前端逐渐变细。

本发明的有益效果是：

本发明可使捞取在狭缝载网上的所有样品超薄切片平整、无皱褶。

本发明可使捞取在狭缝载网上的难浸透、聚合不佳的样品切片仍与树脂切片嵌合良好，无明显脱开、错位，此类样品的spurr树脂包埋块超薄切片即使在经过有机溶剂展片后——样品与树脂切片也只是轻微脱离，样品切片不折叠或整片脱离树脂切片，样品切片完整、无破损。

本发明捞片环的腰形环体设计可方便控制超薄切片最终在狭缝载网上的贴附位置，捞片环腰形环体设计同时大大减小了捞取的超薄切片在所捞取水体上表面的不定向漂移及用滤纸吸水时超薄切片随滤纸吸水所产生的细小水流的漂移，从而使连续超薄切片易于贴附在狭缝载网腰形孔处的支持膜上。

附图说明

图1为本发明放样台的整体结构示意图。

图2为本发明放样台的顶面俯视结构示意图。

图3为放样孔的俯视示意图。

图4为狭缝载网的俯视示意图。

图5为采用一字型金属片腰形环作为腰形环体的捞样器结构示意图。

图6为采用T字型金属片腰形环作为腰形环体的捞样器结构示意图。

图7为采用一字型金属丝腰形环作为腰形环体的捞样器结构示意图。

图8为采用T字型金属丝腰形环作为腰形环体的捞样器结构示意图。

图9为一字型金属片腰形环作为腰形环体的捞片环结构示意图。

图10为T字型金属片腰形环作为腰形环体的捞片环结构示意图。

图11为一字型金属丝腰形环作为腰形环体的捞片环结构示意图。

图12为T字型金属丝腰形环作为腰形环体的捞片环结构示意图。

图13为放样孔中载有腰形孔呈水平放置的狭缝载网和一字型金属片腰形环捞片环的俯视示意图。

图14为放样孔中载有腰形孔呈竖直放置的狭缝载网和T字型金属片腰形环捞片环的俯视示意图。

图15为放样孔中载有腰形孔呈水平放置的狭缝载网和一字型金属丝腰形环捞片环的俯视示意图。

图16为放样孔中载有腰形孔呈竖直放置的狭缝载网和T字型金属丝腰形环捞片环的俯视示意图。

图中：1、放样台，2、放样孔，3、狭缝载网，4、捞样器，5、捞片环，6、手柄，7、金属片腰形环，8、柄部，9、金属丝腰形环。

具体实施方式

下面结合附图及具体实施例对本发明作进一步详细说明。

本发明包括放样台1和捞样器4；如图1和图2所示，放样台1呈方形，放样台1顶面的每个边缘间隔均布设有平行排列的放样孔2，如图3所示，放样孔2由一圆形盲孔以及与盲孔连接的条形槽构成，条形槽开在放样台1边缘，狭缝载网3放在放样孔2的盲孔内，狭缝载网3如图4所示，其中间的腰形孔可以横置也可竖直放置；如图5～图8所示，捞样器4包括位于前端的捞片环5与位于后端的手柄6，捞片环5与手柄6固定连接，手柄6为棒状结构，捞片环5为具有柄部8的腰形环体，捞片环5的腰形环体覆盖在狭缝载网3上。手柄6采用木质或金属，手柄6由握持端向与捞片环连接的前端逐渐变细，与捞片环连接处的手柄6端面直径约为1～1.2mm。

如图9～图12所示，本发明腰形环体呈一字型或T字型，一字型的腰形环体是其柄部8连接到环形体沿短径的一侧中央，T字型的腰形环体是其柄部8连接到环形体沿长径的一侧中央。

本发明的第一种实施例：

腰形环体为金属片腰形环7，捞片环5为具有柄部8的金属片腰形环7结构，柄部8连接到手柄6端面，柄部8可连接到金属片腰形环7沿长径的一侧中央或者沿短径的一侧中央，分别如图9和图10所示。其孔设计为腰形是为了与狭缝载网的腰形孔覆膜区形状保持一致。捞片环5连接上手柄后形成如图5和图6所示的捞样器结构。

放样孔2的圆孔直径比狭缝载网3外径长0.1～0.2mm，是为方便用镊子放入及夹取出狭缝载网，同时保持狭缝载网位置相对固定，不会在放样孔内有大幅度偏移。放样孔2圆孔深度与捞片环5的金属片腰形环7和狭缝载网3的总厚度相同，放样孔2条形槽的深度与捞片环5的柄部8厚度相同，使得捞片环1和狭缝载网3放入放样孔2后与放样台1的顶面相平，比较稳定，一字形和T字形的放置后分别如图13和图14所示。

金属片腰形环7的长、短外径均比狭缝载网3的外径短，尽可能减少了腰形环体的尺寸，从而减少腰形环体在从水槽捞片时所附带的水量，最大程度上保证捞取切片在腰形环体水面上的固定位置。现有市面上的捞片环采用金属片圆形环，其环形体设计增加了超薄切片在捞起水滴圆形水面上的不定向漂移，增加了超薄切片在用滤纸吸水时所产生的漂移，很难保证超薄切片最终贴附在狭缝载网腰形孔处的支持膜上，不适用于狭缝载网捞片。

金属片腰形环7的长、短内径分别大于狭缝载网3腰形孔的长、短内径50～100μm，是为了确保在放样过程中，腰形环体7的腰形孔边缘不会触碰到狭缝载网3的腰形孔边缘而引起狭缝载网3的腰形孔处支持膜的破裂，同时使得所述两个腰形孔的尺寸尽量接近，更易于使切片贴敷在狭缝载网3腰形孔的覆膜区。

金属片腰形环7上沿周向间隔均布开有多个圆孔，圆孔用激光加工而成。周围具有圆孔是为了增加捞片环的亲水性，从而易于从水面上捞取超薄切片。

放样孔2条形槽的宽度大于捞片环5的柄部宽度0.1～0.2mm，是为了方便将捞片环5放入及拿出条形槽。

放样孔2条形槽的长度比捞片环5的柄部长度短0.4～0.5mm，是为了排除狭缝载网位置稍微偏移及捞片环柄部在使用时弯折所引起的计量差，确保捞片环环形体的腰形孔能自如套住狭缝载网的腰形孔，同时又能比较稳定地以放样台的边缘作为支点。

优选采用的金属片厚度为40～50μm，腰形环体金属片宽度为300～400μm，柄部8的金属片宽度为500～600μm。

与捞片环连接处的手柄6端面直径约为1～1.2mm，是为防止与捞片环连接处的手柄端在捞取超薄切片时浸入水槽，以免对水面及超薄切片的位置产生影响。

本发明的第二种实施例：

腰形环体为金属丝腰形环9，捞片环5由一条金属丝经绕拧制成，该金属丝围成在端部的金属丝腰形环9结构后两边交错拧成螺旋状形成柄部，柄部8可连接到金属丝腰形环9沿长径的一侧中央或者沿短径的一侧中央，分别如图11和图12所示。捞片环5由金属丝经绕拧成腰形是为了与狭缝载网的腰形孔覆膜区形状保持一致。捞片环5连接上手柄后形成如图7和图8所示的捞样器结构。

放样孔2的圆孔直径比狭缝载网3外径长0.1～0.2mm，是为方便用镊子放入及夹取出狭缝载网，同时保持狭缝载网位置相对固定，不会在放样孔内有大幅度偏移。放样孔2圆孔深度与捞片环5的金属丝腰形环9和狭缝载网3的总厚度相同，放样孔2条形槽的深度与捞片环5的柄部8厚度相同，使得捞片环1和狭缝载网3放入放样孔2后与放样台1的顶面相平，比较稳定，一字形和T字形的放置后分别如图15和图16所示。

金属丝腰形环9的长、短径均比狭缝载网3腰形孔的长、短径短，尽可能减少了腰形环体的尺寸，从而减少腰形环体在从水槽捞片时所附带的水量，最大程度上保证捞取切片在腰形环体水面上的固定位置。现有市面上的捞片环采用金属丝圆形环，其环形体设计增加了超薄切片在捞起水滴圆形水面上的不定向漂移，增加了超薄切片在用滤纸吸水时所产生的漂移，很难保证超薄切片最终贴附在狭缝载网腰形孔处的支持膜上，不适用于狭缝载网捞片。

金属丝腰形环9的长、短径分别大于狭缝载网3腰形孔的长、短内径50～100μm，是为了确保在放样过程中，金属丝腰形环9的腰形孔边缘不会触碰到狭缝载网3的腰形孔边缘而引起狭缝载网3的腰形孔处支持膜的破裂，同时使得所述两个腰形孔的尺寸尽量接近，更易于使切片贴敷在狭缝载网3腰形孔的覆膜区。

放样孔2条形槽的宽度大于捞片环5的柄部宽度0.1～0.2mm，是为了方便将捞片环5放入及拿出条形槽。

放样孔2条形槽的长度小于捞片环5的柄部长度0.4～0.5mm，是为了排除狭缝载网位置稍微偏移及捞片环柄部在使用时弯折所引起的计量差，确保捞片环环形体的腰形孔能自如套住狭缝载网的腰形孔，同时又能比较稳定地以放样台的边缘作为支点。

优选采用的金属丝直径为200～250μm。

与捞片环连接处的手柄6端面直径约为1～1.2mm，是为防止与捞片环连接处的手柄端在捞取超薄切片时浸入水槽，以免对水面及超薄切片的位置产生影响。

本发明放样台上的放样孔有两种尺寸设计，分别适用于金属片腰形环7和金属丝腰形环9。一种是适合金属片的，柄部比较宽。一种是适合金属丝的，柄部比较窄。

本发明的具体实施例及其实施过程如下：

实施例1（腰形环体呈一字型）：

将聚合好的样品的树脂包埋块，进行手工修整、定位，用单面刀片将包埋块修成金字塔状，顶面约0.5mm²，形状为梯形。在超薄切片机上切片，获得70-90 nm成带的连续超薄切片。

用睫毛针将在水槽中竖直成带的超薄切片轻轻调成水平方向，采用一字型的金属片腰形环7或者一字型的金属丝腰形环9，从水槽右侧一方捞取切片。将载有超薄切片的捞样器转移至体视显微镜下，事先在放样台的放样孔2中放置狭缝载网3，并在体视镜下调节至视野清晰。

将捞片环柄部的适当位置靠在放样孔的条形槽边缘作为稳固支点，轻轻将捞片环腰形环体的腰形孔套住狭缝载网的腰形孔，如图13和图15所示，用事先剪好的滤纸片从腰形环体沿长径一端慢慢吸水，水被滤纸吸走的同时，超薄切片即贴附在狭缝载网的腰形孔覆膜区。

将捞样器拿开，必要时可用睫毛针从一侧轻轻将金属片腰形环7或金属丝腰形环9和狭缝载网3轻轻剥离，用镊子将载有超薄切片的狭缝载网放入样品盒中晾干或用红外烘烤灯烤干用于透射电镜观察。

经透射电镜检查，捞取的各种样品超薄切片均平整无皱褶，难浸透样品的切片与树脂切片无大幅脱开、无错位，样品切片无折叠、无整片脱离、完整无破损。

实施例2（腰形环体呈T字型）：

将聚合好的样品的树脂包埋块，进行手工修整、定位，用单面刀片将包埋块修成金字塔状，顶面约0.5 mm²，形状为梯形。在超薄切片机上切片，获得70-90 nm成带的连续超薄切片。

使超薄切片带保持在竖直方向，采用T字型的金属片腰形环7或者T字型的金属丝腰形环9，从水槽右侧一方捞取切片。将载有超薄切片的捞样器转移至体视显微镜下，事先在放样台的放样孔2中放置狭缝载网3，并在体视镜下调节至视野清晰。

将捞片环柄部的适当位置靠在放样孔的条形槽边缘作为稳固支点，轻轻将捞片环腰形环体的腰形孔套住狭缝载网的腰形孔，如图14和图16所示，用事先剪好的滤纸片从腰形环体沿长径一端慢慢吸水，水被滤纸吸走的同时，超薄切片即贴附在狭缝载网的腰形孔覆膜区。

将捞样器拿开，必要时可用睫毛针从一侧轻轻将金属片腰形环7或金属丝腰形环9和狭缝载网3轻轻剥离，用镊子将载有超薄切片的狭缝载网放入样品盒中晾干或用红外烘烤灯烤干用于透射电镜观察。

经透射电镜检查，捞取的各种样品超薄切片均平整无皱褶，难浸透样品的切片与树脂切片无大幅脱开、无错位，样品切片无折叠、无整片脱离、完整无破损。

上述具体实施方式用来解释说明本发明，而不是对本发明进行限制，在本发明的精神和权利要求的保护范围内，对本发明作出的任何修改和改变，都落入本发明的保护范围。

Claims (10)

1. 一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：包括放样台（1）和捞样器（4）；放样台（1）呈方形，放样台（1）顶面的每个边缘间隔均布设有平行排列的放样孔（2），放样孔（2）由一圆形盲孔以及与盲孔连接的条形槽构成，条形槽开在放样台（1）边缘，狭缝载网（3）放在放样孔（2）的盲孔内；捞样器（4）包括位于前端的捞片环（5）与位于后端的手柄（6），捞片环（5）与手柄（6）固定连接，手柄（6）为棒状结构，捞片环（5）为具有柄部（8）的腰形环体，捞片环（5）的腰形环体覆盖在狭缝载网（3）上。

2. 根据权利要求1所述的一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：所述的腰形环体为金属片腰形环（7），柄部（8）连接到手柄（6）端面。

3. 根据权利要求1所述的一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：所述的腰形环体为金属丝腰形环（9），捞片环（5）由一条金属丝经绕拧制成，该金属丝围成在端部的金属丝腰形环（9）结构后两边交错拧成螺旋状形成柄部，柄部（8）连接到手柄（6）端面。

4. 根据权利要求1～3任一所述的一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：所述的放样孔（2）的圆孔直径比狭缝载网（3）外径长0.1～0.2mm，放样孔（2）圆孔深度与捞片环（5）的环形体和狭缝载网（3）的总厚度相同，放样孔（2）条形槽的深度与捞片环（5）的柄部（8）厚度相同。

5. 根据权利要求1～3任一所述的一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：所述的腰形环体呈一字型或T字型，柄部（8）连接到环形体沿长径的一侧中央或者沿短径的一侧中央。

6. 根据权利要求1～3任一所述的一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：所述的放样孔（2）条形槽的宽度大于捞片环（5）的柄部（8）宽度，放样孔（2）条形槽的长度小于捞片环（5）的柄部（8）长度。

7. 根据权利要求2所述的一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：所述的金属片腰形环（7）的长、短外径均比狭缝载网（3）的外径短；所述的金属片腰形环（7）的长、短内径分别大于狭缝载网（3）腰形孔的长、短径50～100μm。

8. 根据权利要求3所述的一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：所述的金属丝腰形环（9）的长、短径均比狭缝载网（3）的外径短，所述的金属丝腰形环（9）的长、短径分别大于狭缝载网（3）腰形孔的长、短径50～100μm。

9. 根据权利要求2所述的一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：所述的金属片腰形环（7）上沿周向间隔均布开有多个圆孔。

10. 根据权利要求2所述的一种适用于狭缝载网捞片的组合器具，其特征在于：所述的手柄（6）采用木质或金属，手柄（6）由握持端向与捞片环连接的前端逐渐变细。