CN104744565A

CN104744565A - 一种血管内皮生长因子c拮抗多肽及其应用

Info

Publication number: CN104744565A
Application number: CN201510157272.7A
Authority: CN
Inventors: 罗瑞雪
Original assignee: Suzhou Puluoda Biological Science and Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Puluoda Biological Science and Technology Co Ltd
Priority date: 2015-04-06
Filing date: 2015-04-06
Publication date: 2015-07-01

Abstract

本发明涉及药物领域，具体涉及具有抑制血管内皮生长因子C，治疗急性淋巴细胞性白血病的多肽。其序列为DFMCQCVCNKLFRRP是全新的序列，它们可以在1微摩尔水平上体外抑制血管内皮生长因子C，并在体内试验中提高荷瘤小鼠生存率，具有潜在的新药开发价值。

Description

一种血管内皮生长因子C拮抗多肽及其应用

技术领域

本发明涉及血管内皮生长因子C拮抗多肽及其应用，具体涉及具有抑制血管内皮生长因子C，治疗急性淋巴细胞性白血病的多肽。

背景技术

急性淋巴细胞性白血病（ALL）是一种进行性恶性疾病，其特征为大量的类似于淋巴母细胞的未成熟白细胞。这些细胞可在血液、骨髓、淋巴结、脾脏和其它器官中发现。急性淋巴细胞性白血病占儿童急性白血病的80%，发病率高峰在3岁至7岁之间。对急性淋巴细胞性白血病患者的最大的威胁是扩散和转移。如何消灭某种癌症的远处转移或防止复发，是癌症治疗方法中不可缺少的组成部分，也是目前正在探讨的治疗急性淋巴细胞性白血病热点问题。

淋巴是人和动物体内的无色透明液体，内含淋巴细胞，由组织液渗入淋巴管后形成。淋巴管是结构跟静脉相似的管子，分布在全身各部。急性淋巴细胞性白血病患者淋巴组织中产生的异淋巴细胞在淋巴管内循环，最后流入静脉，进入血液。如果抑制淋巴管的生成，就可以抑制异常淋巴细胞的迁移，进入血液组织中，降低白血病细胞的迁移和疾病的复发。因此，淋巴管的生成对白血病细胞的转移有着至关重要的作用。

血管内皮生长因子-C（VEGF-C）调节淋巴管生成的重要细胞因子，VEGF-C通过与VEGFR3的结合，发生生化信号的复杂级联作用，导致腔管形成并且分化成成熟的淋巴管。因此，血管内皮生长因子-C与白血病细胞的迁移密切相关。抑制血管内皮生长因子-C，能够抑制血管内皮生长因子-C与VEGFR3的结合，抑制成熟的淋巴管形成，从而抑制白血病细胞的转移，能有效降低疾病的症状，控制疾病的发展。

目前，没有成熟开发的血管内皮生长因子-C拮抗多肽问世，用于治疗急性淋巴细胞性白血病。

本专利中的血管内皮生长因子C拮抗多肽已证明在急性淋巴细胞白血病中有效，具有在其他肿瘤模型中开发的前景。

发明内容

发明目的

本发明提供全新的序列，该序列为血管内皮生长因子C拮抗剂，对急性淋巴细胞白血病具有很好的疗效。

技术方案

血管内皮生长因子C拮抗多肽，其特征在于其序列为DFMCQCVCNKLFRRP 。

血管内皮生长因子C拮抗多肽在治疗急性淋巴细胞白血病药物中的应用。

有益效果

利用固相合成法化学合成血管内皮生长因子C拮抗多肽，该多肽具有全新的序列，该多肽可体外抑制血管内皮生长因子C，治疗急性淋巴细胞白血病。我们发现的血管内皮生长因子C拮抗多肽可以同时抑制淋巴内皮细胞增殖活力，并在体内试验中提高荷瘤小鼠生存率，具有潜在的新药开发价值。

具体实施方式

实施例1

血管内皮生长因子C拮抗多肽对体外血管内皮生长因子C受体与血管内皮生长因子C亲和力的影响。

将对数生长的人淋巴内皮细胞，以 1.0×10⁵加入 96 孔培养板中，培养 24h，实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物血管内皮生长因子C拮抗多肽（上海生工合成）和阳性对照药物长春新碱；空白组加入相同体积的溶剂，同时，加入¹²⁵I标记的血管内皮生长因子C。每孔设五个复孔，培养48h。洗去上清液，用ɣ-液体闪烁计数器计算放射强度，判断血管内皮生长因子C受体与血管内皮生长因子C的结合力，放射强度强度越强，结合越多，反之，放射强度强度越弱，结合越少。结果表明，随血管内皮生长因子C拮抗多肽浓度增加，与血管内皮生长因子C结合逐渐增加，说明与血管内皮生长因子C结合能力随药物浓度的增加而不断减少。

实施例2

血管内皮生长因子C拮抗多肽对体外培养人淋巴内皮细胞的生长和存活IC50。

采用 MTT 比色法。将对数生长的人淋巴内皮细胞，以 1.0×10⁵加入 96 孔培养板中，培养 24h，实验孔、阳性药物对照孔分别加入不同浓度的实验药物血管内皮生长因子C拮抗多肽和阳性对照药物紫杉醇；空白组加入相同体积的溶剂。每孔设五个复孔，培养 48h，分别在0h、2h、8h、14h、20h、24h、36h、，48h 每孔加入 MTT，作用 4h 后，加入 DMSO，孵育 30min，在酶标仪 620nm 处测定吸光度 A 值，按公式人淋巴内皮细胞生长抑制率＝（1-实验组吸光值/对照组吸光值）×100％。计算出实验药物的 IC50 为3.75μM。

实施例3

用肿瘤模型检测血管内皮生长因子C拮抗多肽的体内活力。

建立U937肿瘤模型，阳性对照药物紫杉醇；空白组加入相同体积的溶剂，实验组设3个剂量：0.75、1.5、3 mg/Kg。21天后，观察小鼠存活数量，计算存活率。结果显示，血管内皮生长因子C拮抗多肽可有效地保护小白鼠，提高荷瘤小鼠的生存率，生存率达到71.3%。

SEQUENCE LISTING

<110> 苏州普罗达生物科技有限公司

<120> 一种血管内皮生长因子C拮抗多肽及其应用

<130>

<160> 1

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<400> 1

Asp Phe Met Cys Gln Cys Val Cys Asn Lys Leu Phe Arg Arg Pro

1 5 10 15

Claims

1.血管内皮生长因子C拮抗多肽，其特征在于其序列为DFMCQCVCNKLFRRP。

2.血管内皮生长因子C拮抗多肽在治疗急性淋巴细胞性白血病药物中的应用。