CN104707131A - 一种药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种药物组合物及其制备方法和用途。所述药物组合物包括与人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体至少80%同源性的多肽和药学上可接受的载体。

Description

一种药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及药物制剂领域。更具体地涉及一种药物组合物及其制备方法和用途。

背景技术

中国糖尿病患病人数已经超过九千万，成为世界上糖尿病人口最多的国家，糖尿病治疗药物销售额仅次于肿瘤药、血脂调节药和呼吸系统药，排名第四。目前常用的糖尿病药有胰岛素（注射生物制品），二甲双胍类、α糖苷酶抑制剂、磺酰脲类（口服化药）等。注射给药方式往往给病人带来很多不便，口服化学药物又存在降糖效果不佳及副作用大的缺点。

上世纪60年代，研究者发现口服葡萄糖对胰岛素分泌的促进作用明显高于静脉注射,这种额外的效应被称为“肠促胰素效应”，后续研究者证实这种“肠促胰素效应”所产生的胰岛素占进食后胰岛素总量的50%以上。正常人在进餐后，肠促胰素以葡萄糖浓度依赖性方式促进胰岛β细胞分泌胰岛素,并减少胰岛α细胞分泌胰高血糖素(glucagon),以减少餐后血糖的波动。肠促胰素主要由胰高血糖素样肽（GLP-1）和糖依赖性胰岛素释放肽(GIP)组成。GLP-1则具有综合调节体内的糖代谢的功能，而且研究显示II型糖尿病患者中，GLP-1水平较正常人明显降低，但其促进胰岛素分泌以及降血糖的功能并无明显受损，因此GLP-1及其类似物可以作为II型糖尿病治疗的一个重要靶点，长效的GLP-1类似物、GLP-1受体拮抗剂以及其GLP-1降解酶抑制剂已经成为降糖药物研发的焦点。(PNAS,2006,103(36):13468–13473;Endocrinology,2010,151(5):1984–1989)

由于GLP-1在血液中的半衰期仅1-2min，近年来人们专注于寻找长效的GLP-1类似物或GLP-1受体拮抗剂，用于临床治疗II型糖尿病。目前国外已经有两个GLP-1类似药物被批准上市：（1）美国Lilly公司研制的百泌达（GLP-1类降糖药物，毒蜥唾液中的39肽激素组成），血液中半衰期延长到2.4小时，1天两次皮下注射即可。（2）丹麦诺和诺德公司研制的利拉鲁肽（GLP-1化学修饰物），其半衰期长达12-14小时，注射给药间隔缩短到每日一次。但是，注射剂型的不便和药物注射的副作用是这类药物的主要缺陷（肠胃道反应、增加胰腺炎、甲状腺癌的患病风险等）。另外，赛诺菲、罗氏、葛兰素史克等制药巨头也都在研制半衰期长的新型GLP制剂，但是这些研究均为基于皮下注射的给药方式。

因此，本领域迫切需要提供可用于口服给药方式的GLP-1药物制剂。

发明内容

本发明旨在提供一种以GLP-1为活性成分的口服药物制剂。

在本发明的第一方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括与人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体至少80%同源性的多肽和药学上可接受的载体。

在另一优选例中，所述药物组合物包括与人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体至少90%同源性的多肽。

在另一优选例中，所述药物组合物包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体或其功能等同物。

在另一优选例中，所述功能等同物为在不改变人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体多肽特性的前体下，对个别氨基酸残基的取代、缺失和/或加入。

在另一优选例中，所述药学上可接受的载体包括保护剂；所述保护剂选自牛血清白蛋白或其片段、人血清白蛋白或其片段中的至少一种。

在另一优选例中，所述的药学上可接受的载体还包括赋形剂和肠溶包衣材料；

所述赋形剂选自蔗糖，乳糖，微晶纤维素，羟丙甲纤维素，羟丙甲纤维素酯、羧甲基乙基纤维素、邻苯二甲酸醋酸纤维素、中的至少一种；

所述肠溶包衣材料选自聚乙烯醇乙酸苯二甲酸酯、丙烯酸树脂、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP）、醋酸纤维素邻苯二甲酸酯（CAP）、虫胶、乙基纤维素（EC）、玉米朊中的至少一种。

在本发明的第二方面，提供了一种药物组合物，以药物组合物的总重量计，其中含有：

0.3-13mg/g的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体或其功能等同物；所述功能等同物为在不改变人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体多肽特性的前体下，对个别氨基酸残基的取代、缺失和/或加入；

0.75-2.0%的药学上可接受的载体。

在另一优选例中，以药物组合物的总重量计，其中含有：

0.3-13mg/g的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体或其功能等同物；

0.1-1.0%的保护剂；所述保护剂选自牛血清白蛋白或其片段、人血清白蛋白或其片段中的至少一种。

在另一优选例中，所述药物组合物中还含有0.25-0.35%的赋形剂和肠溶包衣材料；

所述赋形剂选自蔗糖，乳糖，微晶纤维素，羟丙甲纤维素，羟丙甲纤维素酯、羧甲基乙基纤维素、邻苯二甲酸醋酸纤维素、中的至少一种；

所述肠溶包衣材料选自聚乙烯醇乙酸苯二甲酸酯、丙烯酸树脂、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP）、醋酸纤维素邻苯二甲酸酯（CAP）、虫胶、乙基纤维素（EC）、玉米朊或衍生物中的至少一种。

在本发明的第三方面，提供了一种如上所述的本发明提供的药物组合物的用途，用于制备降低血糖的药物；和/或制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物。

在另一优选例中，所述药物是口服制剂，例如但不限于，片剂、胶囊、微丸。

据此，本发明提供了可用于口服给药方式的GLP-1药物制剂。

附图说明

图1显示了本发明使用的GLP-1前体分子结构图。

图2显示了本发明提供的含有GLP-1前体的药物组合物对db/db糖尿病模型小鼠糖耐量曲线图。

具体实施方式

发明人经过广泛而深入的研究，发现了一种含有GLP-1前体分子的口服药物制剂，可以使让药物前体分子口服后在肠道吸收，在体内切割加工为天然GLP-1形式（GLP-1，7-37，即G31），从而发挥其控制血糖的作用。在此基础上，完成了本发明。

如本文所用，“药物前体”、“前体”和“前药”可以互换使用，都是指一个试剂在体内转化为原型药。在本发明的一种实施方式中，提供的GLP-1前体分子的结构如SEQ ID NO:1所示，或是其功能等同物。所述功能等同物为在不改变人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体多肽特性的前体下，对个别氨基酸残基的取代、缺失和/或加入。

SEQ ID NO:1

hdeferhaeg tftsdvssyl egqaakefia wlvkgrgrrd fpeevaivee lg（GLP-1前体（1-52））

如本文所用，“治疗(treatment or treating)”一词包括可导致欲求的药学和/或生理效果的防止性(即，预防性)、治愈性或缓和性处置。该效果较佳是指医疗上可部分或完全治愈或防止血糖的异常增高。此外，“治疗”一词在此是指基于可部分或完全减轻、延迟发生、抑制进程、减轻严重性、和/或减少一种特定疾病、异常和/或医疗状况之一或多个病征出现机率的目的，而对受测个体(或患者)，尤指具有一种医疗状况、一种该医疗状况的症状、一种因该医疗状况而引起的疾病或病症、或是一种会使朝向该医疗状况发展的先期状况的个体，施用或施加本发明提供的化合物。可对尚未出现特定疾病、异常和/或医疗状况的明显病征的个体，和/或仅对该特定疾病、异常和/或医疗状况产生早期病征的个体进行治疗，以期降低产生该特定疾病、异常和/或医疗状况相关的病理的风险。在本文中，所述病征、疾病、异常和/或医疗状况可以是糖尿病，优选Ⅱ型糖尿病。若能减少一或多个病征或临床指标即代表该治疗是“有效”的。

“一有效量(an effective amount)”一词意将对于治疗糖尿病的目的，此一用量在经过适当的给药期间后，能够达到保存血糖处于正常水平的欲求效果。

“化合物(compound)”、“组合物(composition)”、“制剂(agent)”、“药品或药物(medicine or medicament)”等词在此可交替使用，且都是指当施用于一个体（人类或动物）时，能够透过局部和/或全身性作用而诱发所亟求的药学和/或生理反应的一种化合物或组合物。

“施用(administered、administering或、administration)”一词在此是指直接施用所述的化合物或组合物，或施用活性化合物的前驱药(prodrug)、衍生物(derivative)、或类似物(analog)等，而可在施用个体体内形成该活性化合物的一相当用量者。

本文中交替使用“个体(subject)”或“患者(patient)”等词，其是指可接受所述化合物和/或方法治疗的动物(包括人类)。“个体”或“患者”在此涵盖了雄性与雌性两种性别，除非另有具体说明。因此“个体”或“患者”包含任何哺乳类动物，包括，但不限于，人类、非人类的灵长类，如哺乳动物、狗、猫、马、羊、猪、牛等，其可因利用所述化合物进行治疗而获益。适合接受本发明化合物和/或方法治疗的动物较佳为人类。一般来说，“患者”一词及“个体”一词在本文中可彼此交替使用。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.，N.J.1991)中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。在组合物中药学上可接受的载体可包括液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如崩解剂、润湿剂、乳化剂、pH缓冲物质等。

本发明提供的药物是口服制剂，其中含有结构如SEQ ID NO:1所示的GLP-1前体分子，或其功能等同物，以及可形成口服制剂的药学上可接受的载体。

在本发明的一个优选实施例中，提供一肠溶制剂，以提供的制剂的总重量计，其中结构如SEQ ID NO:1所示的GLP-1前体分子或其功能等同物的含量为0.3-13mg/g（该剂量是“安全、有效量”，即所述GLP-1的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。其根据治疗对象的年龄、病情、疗程等具体情况在0.3～13mg/g的范围内选择），药学上可接受的载体的含量为0.75-2.0%。所述药学上可接受的载体包括保护剂、还包括赋形剂和肠溶包衣材料。

所述的保护剂牛血清白蛋白或其片段、人血清白蛋白或其片段中的至少一种；优选牛血清白蛋白。

所述赋形剂选自蔗糖，乳糖，微晶纤维素，羟丙甲纤维素，羟丙甲纤维素酯、羧甲基乙基纤维素、邻苯二甲酸醋酸纤维素、中的至少一种；优选微晶纤维素和羟丙甲纤维素。

所述肠溶包衣材料选自聚乙烯醇乙酸苯二甲酸酯、丙烯酸树脂、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP）、醋酸纤维素邻苯二甲酸酯（CAP）、虫胶、乙基纤维素（EC）、玉米朊或衍生物中的至少一种，优选甲基丙烯酸和丙烯酸乙酯共聚物。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

本发明的主要优点在于：

1、本发明首次提供含有GLP-1前体的口服药物，既可以逃避胃肠道大量的蛋白水解酶和pH环境，肠道吸收屏障以及逃避肝代谢，增加其口服生物利用度，还能提高制剂在体内的半衰期，保证其在体内加工为活性分子后发挥其生物学功能。

2、本发明提供的含有GLP-1前体的口服药物，增加了糖尿病患者的依从性，避免了长期注射给药给患者带来的副作用和诸多不便。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。

本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶质的重量。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例1

GLP-1前体药物组合物主药成分设计

根据GLP-1前体结构图（图1）设计了由GLP-1的第1-52个氨基酸组成的GLP-1全长前体药物分子G52和前体片段药物分子G37，用化学方法合成。同时合成GLP-1（7-37）多肽作为对照。

GLP-1前体多肽1：即GLP-1（1-52），简称G52；

GLP-1前体多肽2：即GLP-1（1-37），简称G37；

GLP-1多肽：即GLP-1（7-37），简称G31。

实施例2

G31（GLP-1，7-37）肠溶制剂的制备

药物层的包裹

秤取G31多肽75毫克，牛血清白蛋白（BSA）19克，10%羟丙甲纤维素(HPMC)5克,加入纯净水45克混匀，以微晶纤维素丸CP507为内芯，采用流化床包被：出风温度设置为32度，风量15m3/h，喷雾压力0.7bar。

保护层的包裹

秤取硬酯酸镁2克，加入8克乙醇，分散均匀后加入80克HPMC和40克纯水，用流化床包被：出风温度设置为32度，风量20m3/h，喷雾压力0.9bar。

肠溶层的包裹

秤取18克硅酸镁，加入90克纯水搅拌均匀，加入4克TEC（柠檬酸三乙酯），匀化3-5分钟后缓慢加入40克L30D-55中（EVONIK Industies，甲基丙烯酸和丙烯酸乙酯（1：1）共聚物）。流化床包被条件：出风温度设置为32.7度，风量20m3/h，喷雾压力0.9bar。

最后用30#，40#筛去除大颗粒，得成品微粒。

实施例3

G37（GLP-1，1-37）肠溶制剂的制备

药物层的包裹

秤取G37多肽95毫克，牛血清白蛋白（BSA）19克，10%羟丙甲纤维素(HPMC)5克,加入纯净水45克混匀，以微晶纤维素丸CP507为内芯，采用流化床包被：出风温度设置为32度，风量15m3/h，喷雾压力0.7bar。

保护层的包裹

秤取硬酯酸镁2克，加入8克乙醇，分散均匀后加入80克HPMC和40克纯水，用流化床包被：出风温度设置为32度，风量20m3/h，喷雾压力0.9bar。

肠溶层的包裹

秤取18克硅酸镁，加入90克纯水搅拌均匀，加入4克TEC（柠檬酸三乙酯），匀化3-5分钟后缓慢加入40克L30D-55中（EVONIK Industies，甲基丙烯酸和丙烯酸乙酯（1：1）共聚物）。流化床包被条件：出风温度设置为32.7度，风量20m3/h，喷雾压力0.9bar。

最后用30#，40#筛去除大颗粒，得成品微粒。

实施例4

G52（GLP-1，1-52）肠溶制剂的制备

药物层的包裹

秤取G52多肽150毫克，牛血清白蛋白（BSA）19克，羟丙甲纤维素(HPMC)5克,加入纯净水45克混匀，以微晶纤维素丸CP507为内芯，采用流化床包被：出风温度设置为32度，风量15m3/h，喷雾压力0.7bar。

保护层的包裹

秤取硬酯酸镁2克，加入8克乙醇，分散均匀后加入80克HPMC和40克纯水，用流化床包被：出风温度设置为32度，风量20m3/h，喷雾压力0.9bar。

肠溶层的包裹

秤取18克硅酸镁，加入90克纯水搅拌均匀，加入4克TEC（柠檬酸三乙酯），匀化3-5分钟后缓慢加入40克L30D-55中（EVONIK Industies，甲基丙烯酸和丙烯酸乙酯（1：1）共聚物）。流化床包被条件：出风温度设置为32.7度，风量20m3/h，喷雾压力0.9bar。

最后用30#，40#筛去除大颗粒，得成品微粒。

实施例5

空白肠溶制剂的制备

药物层的包裹

秤取牛血清白蛋白（BSA）19克，10%羟丙甲纤维素(HPMC)5克,加入纯净水26克混匀，以微晶纤维素丸CP507为内芯，采用流化床包被：出风温度设置为32度，风量15m3/h，喷雾压力0.7bar。

保护层的包裹

秤取硬酯酸镁2克，加入8克乙醇，分散均匀后加入80克HPMC和40克纯水，用流化床包被：出风温度设置为32度，风量20m3/h，喷雾压力0.9bar。

肠溶层的包裹

秤取18克硅酸镁，加入90克纯水搅拌均匀，加入4克TEC（柠檬酸三乙酯），匀化3-5分钟后缓慢加入40克L30D-55中（EVONIK Industies，甲基丙烯酸和丙烯酸乙酯（1：1）共聚物）。流化床包被条件：出风温度设置为32.7度，风量20m3/h，喷雾压力0.9bar。

最后用30#，40#筛去除大颗粒，得成品微粒。

实施例6

GLP-1药物组合物口服给药的半衰期实验

禁食16小时的雄性SD大鼠，体重250-300克，分别给予口服G52、G37和G31肠溶制剂（50pmol/只），按采样时间点眼眶静脉丛采血，并用GLP-1检测试剂盒测定血清中的活性GLP-1的含量，测定血药浓度，计算半衰期如表1所示。可见G51前体药物的体内半衰期明显高于G31和G37。参见表1。

表1大鼠口服给药半衰期

组别	G31	G37	G52
				半衰期（min）	20.2±1.6	22.8±0.7	38.1±0.9

实施例7

GLP-1药物组合物对db/db糖尿病模型小鼠糖耐量实验

采用db/db糖尿病模型小鼠,体重40克左右，禁食12小时以上。给药组分别口服G52和G31肠溶制剂（50pmol/只），阴性对照组口服空白肠溶制剂，阳性对照组直接尾静脉注射G31蛋白溶液（3ug/只）。所有组给药后15分钟口服葡萄糖，按采样时间点尾静脉取血测定血糖浓度。

图2数据显示，GLP-1药物组合物肠溶制剂通过口服吸收，可有效降低db/db糖尿病模型小鼠的血糖浓度，其中G52口服降糖效果优于G31肠溶制剂，且G52口服降糖效果接近G31蛋白溶液直接静脉给药。可见，GLP-1前体多肽G52具有非常好的动物实验降糖效果，有潜在的临床应用前景。具有潜在的临床应用价值和药用开发潜力。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。

Claims (10)

1.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括与人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体至少80%同源性的多肽和药学上可接受的载体。

2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括与人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体至少90%同源性的多肽。

3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体或其功能等同物。

4.如权利要求3所述的药物组合物，其特征在于，所述功能等同物为在不改变人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体多肽特性的前体下，对个别氨基酸残基的取代、缺失和/或加入。

5.如权利要求1-4任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药学上可接受的载体包括保护剂；所述保护剂选自牛血清白蛋白或其片段、人血清白蛋白或其片段中的至少一种。

6.如权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述的药学上可接受的载体还包括赋形剂和肠溶包衣材料；

所述赋形剂选自蔗糖，乳糖，微晶纤维素，羟丙甲纤维素，羟丙甲纤维素酯、羧甲基乙基纤维素、邻苯二甲酸醋酸纤维素、中的至少一种；

所述肠溶包衣材料选自聚乙烯醇乙酸苯二甲酸酯、丙烯酸树脂、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯（HPMCP）、醋酸纤维素邻苯二甲酸酯（CAP）、虫胶、乙基纤维素（EC）、玉米朊中的至少一种。

7.一种药物组合物，其特征在于，以药物组合物的总重量计，其中含有：

0.3-13mg/g的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体或其功能等同物；

0.75-2.0%的药学上可接受的载体。

8.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述功能等同物为在不改变人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体多肽特性的前体下，对个别氨基酸残基的取代、缺失和/或加入。

9.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，以药物组合物的总重量计，其中含有：

0.3-13mg/g的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）前体或其功能等同物；

0.1-1.0%的保护剂；所述保护剂选自牛血清白蛋白或其片段、人血清白蛋白或其片段中的至少一种。

10.一种如权利要求1-9任一项所述的药物组合物的用途，其特征在于，用于制备降低血糖的药物；和/或制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物。