CN104698160B - 一种用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒 - Google Patents

一种用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒。本发明的试剂盒包括用于检测点尿钠值的产品，用于检测点尿肌酐值的产品，和记载有如下公式的载体：e‑24HUNa＝0.225×PRCr×(SUNa/SUCr)0.310；其中，PRCr代表预测的24h尿肌酐值，且PRCr＝e(6.916‑0.007×年龄‑0.002×身高+0.013×体重)；e‑24HUNa代表预测的24h尿钠值；SUNa代表点尿钠值；SUCr代表点尿肌酐值；SUNa/SUCr代表所述点尿钠值与所述点尿肌酐值的比值。本发明的试剂盒预测得到的男性24小时尿钠值与传统的Kawasaki法和Tanaka法相比准确性相当，对于帮助判断高血压患者盐摄入量是否超标及指导他们的生活方式和药物治疗有重要作用。

Description

一种用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及一种用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒。
背景技术
高盐是高血压发生的重要环境因素。多数研究结果均证实高盐饮食是高血压的重要危险因素，通过减少盐的摄入，降血压效果作用较为明显，尤其对盐敏感者。高盐摄入与左心室肥厚、动脉硬化、蛋白尿等高血压靶器官损害以及心脑血管病事件的发生率和病死率有关，限盐对靶器官有独立于降压作用之外的保护作用。因此，通过限盐干预，不仅能防控高血压和减少高血压的发病率，更能降低心血管不良事件和病死率，改善预后，额外获益。
根据膳食调查，我国各地居民的钠盐摄入量均明显高于世界卫生组织应＜5g/d的推荐，我国大部分地区，人均盐摄入量＞12g/d。广大医务工作者和患者虽已经意识到高血压患者应该限制饮食中盐的摄入，但患者钠的摄入量，往往缺乏客观的观测指标。
目前评估饮食中钠盐摄入主要有两类方法，分别是基于饮食中钠含量测定和基于尿钠排泄量测量。前者包括饮食回顾问卷法、称重法、进餐前测量及试纸或传感器测量。饮食回顾调查法的可靠程度主要取决于受访对象能否准确提供饮食相关信息，有研究发现，饮食回顾调查法容易低估全部摄盐量的30-50％，准确性欠佳。称重法和进餐前测量准确可靠，但操作复杂，需要专业人员参与，不适于大规模调查。试纸或传感器测量饮食或尿中的钠最简单，但该方法检测的是氯的浓度而非钠，可靠性较差。
基于尿钠排泄量推测钠盐摄入量的方法具体包括24小时尿钠测量、夜尿/晨尿、点尿(包括晨起第二次尿、随机尿等)的尿钠测量。24小时尿钠测量是目前最可靠和准确的方法，但24小时尿液的收集时间长，过程繁琐，给患者带来诸多不便。此外，个体每天的食盐摄入量是根据饮食的不同不断变化的，只通过收集单次24小时尿液来判断其平均食盐摄入水平是不恰当的。因此，从化繁为简和提高普及率的角度出发，采用检测点尿中钠含量来估算24小时尿钠值则是临床需求的一种方法。
1993年Kawasaki等通过检测清晨空腹第二次尿(SMU sample)中钠(Na)与肌酐(Cr)比值来估算24小时尿钠值。Tanaka等则通过检测随机留取的尿样本中Na/Cr来估算24小时尿钠值。Kawasaki法和Tanaka法已经在日本国内广泛应用，是日本高血压协会推荐用来评估24小时尿钠的方法。Mann等应用下午晚餐前时间留取的尿样本(PM sample)来估算24小时尿Na值的准确性优于晨尿和随机尿。
采用何时的点尿估算24小时尿钠，鉴于种族、饮食状况等不同，不同国家研究结果是不一致的，目前还没有中国人群的相关数据。我国是高血压大国，许多高血压患者就诊于基层，采用24小时尿钠的测定评估尿钠的摄入是极不方便的。
基于高血压患者钠的摄入特点，建立国人高血压患者点尿预测24小时尿钠的试剂盒，对于帮助判断高血压患者盐摄入量是否超标及指导他们的生活方式和药物治疗有重要作用。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒。所述试剂盒可基于男性清晨空腹第二次尿的点尿钠值评估男性24小时尿钠值。
本发明所提供的用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒，包括：用于检测点尿钠值的产品，用于检测点尿肌酐值的产品，和记载有如下公式的载体：
e-24HUNa＝0.225×PRCr×(SUNa/SUCr)0.310；
其中，PRCr代表预测的24h尿肌酐值，且PRCr＝e(6.916-0.007×年龄-0.002×身高+0.013×体重)；e-24HUNa代表预测的24h尿钠值；SUNa代表点尿钠值；SUCr代表点尿肌酐值；SUNa/SUCr代表所述点尿钠值与所述点尿肌酐值的比值。
所述试剂盒中，所述点尿钠值是指男性清晨空腹第二次尿(SMU sample)中的点尿钠值；
所述点尿肌酐值是指男性清晨空腹第二次尿(SMU sample)中的点尿肌酐值；
所述PRCr的单位具体为mg/day；所述e-24HUNa的单位具体为mmol/day。
所述载体上还可记载有如下判断标准：当e-24HUNa≤100mmol/d时，受试者为低盐摄入者，当100<e-24HUNa≤200mmol/d，受试者为中盐摄入者，当e-24HUNa＞200mmol/d，受试者为高盐摄入者。
所述用于检测点尿钠值的产品具体可为贝克曼DXC800全自动生化分析仪。
所述用于检测点尿肌酐值的产品具体可为贝克曼DXC800全自动生化分析仪。
上述用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒的使用方法也属于本发明的保护范围。
所述用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒的使用方法，包括下述步骤：
1)检测点尿钠值及点尿肌酐值；
2)将所述点尿钠值和点尿肌酐值代入如下公式中，计算得到男性24小时尿钠值：
e-24HUNa＝0.225×PRCr×(SUNa/SUCr)0.310；
其中，PRCr代表预测的24h尿肌酐值，且PRCr＝e(6.916-0.007×年龄-0.002×身高+0.013×体重)；e-24HUNa代表预测的24h尿钠值；SUNa代表点尿钠值；SUCr代表点尿肌酐值；SUNa/SUCr代表所述点尿钠值与所述点尿肌酐值的比值。
上述使用方法中，所述点尿钠值是指男性清晨空腹第二次尿(SMU sample)中的点尿钠值；
所述点尿肌酐值是指男性清晨空腹第二次尿(SMU sample)中的点尿肌酐值。
由24小时尿钠计算饮食中钠的质量，再根据钠在氯化钠中的比重和氯化钠在食盐中的比例(99％)计算每日摄入盐量(g)，从而为高血压患者甚至是普通人群的每日摄入盐量提供客观的观测指标，这对于帮助判断高血压患者盐摄入量是否超标及指导他们的生活方式和药物治疗有重要作用。
附图说明
图1为K法SMU预测尿钠与实测尿钠的Bland-Altman图。
图2为T法SMU预测尿钠与实测尿钠的Bland-Altman图。
图3为本发明的SUN1法SMU预测尿钠与实测尿钠的Bland-Altman图。
图4为SMU样本K法、T法和SUN1法预测24小时尿钠排泄是否达标的ROC曲线。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行说明，但本发明并不局限于此。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试剂、生物材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、本发明方法的建立
数据来自于2011.8—2012.11在北京大学人民医院高血压病房住院的高血压患者。入选标准：①高血压病诊断明确。高血压诊断标准依据2010年中国高血压防治指南。高血压定义为在未使用降压药物的情况下，非同日3次测量血压，收缩压≥140mmHg(1mmHg＝0.133kPa)和(或)舒张压≥90mmHg。患者既往有高血压史，目前正在使用降压药物，血压＜140/90mHg，也诊断为高血压。②近1个月稳定常规饮食。③填写知情同意。排除标准：①高血压伴有严重多系统性疾病(如风湿免疫病和肿瘤)及继发性高血压；②严重水肿，大量胸腔积液、腹腔积液者，以及肾脏移植患者；③心力衰竭失代偿期或CKD3-5期需要使用利尿剂者；④使用糖皮质激素者；⑤高血压急症需要紧急处理无法留取24小时尿；⑥高龄、行动不便或拒绝参与本研究者。
24小时尿标本和点尿标本留取及检测方法：患者在常规饮食下，从清晨7:00排空膀胱并弃去，依此时开始计时，把24小时所排出的尿液全部贮存，包括第2天早上7:00解出的尿。SMU点尿样本的留取：24小时尿液留取过程中的第二天晨起排尿后至早餐前的1个小时内留取第二次尿标本5ml。尿钠和尿肌酐的测定采用贝克曼DXC800全自动生化分析仪进行检测。留尿时间小于24小时或病人叙述有尿液的丢失或24小时总尿量＜500mL均排除。点尿均未按规定时间留取也排除。
根据上述入选标准及排除标准，共有590例高血压患者入选，将入选人群按2:1随机分为2组，2/3作为开发人群得出新公式，其余作为验证人群评估所述公式的适用性。即从入选人群中任选393人(其中男性197人)为新公式建立人群，197人(其中男性96人)人作为新公式适用性验证人群。
由24小时尿钠计算饮食中钠的质量，再根据钠在氯化钠中的比重和氯化钠在食盐中的比例(99％)计算每日摄入盐量(g)。故大致的每日盐摄入量≈尿钠浓度(mol/L)×24小时尿量(L)×58.5(g/mol)。
尿钠的分组：2010版中国高血压防治指南建议高血压患者每日摄盐量不超过6g(当于尿钠100mmol/d)，而在1999年INTERMAP研究公布的结果中，中国北方人群每日食盐摄入量在12g以上(相当于尿钠200mmol/d)，以此为标准，把所有验证人群依据24小时尿钠水平分为三组：A组(尿钠≤100mmol/d)，B组(100<尿钠≤200mmol/d)和C组(尿钠＞200mmol/d)。分别评估三组不同尿钠水平中新公式适用性。
应用统计学软件SPSS 16.0和MedCalc 11.4进行资料分析。对符合入组标准的受试者进行统计分析，以K-S-检验判断其分布形态，计量指标符合正态分布的以均数±标准差表示，不符合正态分布的用中位数(25％，75％)及百分比(％)表示。两组间均数比较符合正态分布的计量资料采用t检验、总体方差不齐时用校正t检验，非正态分布用M-W-U检验分析组间差异。多组间均数比较采用one-way ANOVA方差分析，两两比较方差齐时采用LSD-t法，方差不齐时采用Tamhane法。计数资料采用卡方检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。
公式的推算方法如下：
经分析，研究人群的24小时尿肌酐(24HUCr)不符合正态分布(偏度14.0，峰度274.8)，将24小时尿肌酐取对数(即Ln 24HUCr)后基本符合正态分布(偏度0.6，峰度2.9)。散点图提示Ln 24HUCr与年龄、身高、体重分别呈线性关系。分别将Ln24HUCr与年龄、身高、体重进行曲线拟合亦支持为线性关系。用线性回归法建立预测24小时尿肌酐对数(Ln PRCr)的回归方程，从而得出预测的24小时尿肌酐(PRCr)。
基于开发组197个男性患者资料，用线性回归法建立预测24小时尿肌酐对数(LnPRCr)的回归方程，进而得出预测的24小时尿肌酐(PRCr)，在男性中得出PRCr的公式为：PRCr(Male)＝e(6.916-0.007×年龄-0.002×身高+0.013×体重)。
多个实验已证实，24小时尿钠/24小时尿肌酐与点尿钠/点尿肌酐成正相关，分别计算24HUNa/PRCr、SUNa/SUCr。以24HUNa/PRCr为因变量、SUNa/SUCr为自变量作散点图及曲线拟合均提示两者呈指数关系(p<0.01)。将两变量进行对数转化后，用线性回归法得出男性的评估公式。
由点尿钠(SUNa)、点尿肌酐(SUCr)及PRCr计算出XNa＝(SUNa/SUCr)×PRCr，以XNa为自变量，实测r-24HUNa为因变量，将两变量进行对数转化后，用线性回归法得出新的评估公式。此新公式命名为SUN1公式，即e-24HUNa＝0.225×PRCr×(SUNa/SUCr)0.310，其中，PRCr代表预测的24h尿肌酐值，且PRCr＝e(6.916-0.007×年龄-0.002 ×身高+0.013×体重)；e-24HUNa代表24h尿钠值；SUNa代表点尿钠值；SUCr代表点尿肌酐值；SUNa/SUCr代表所述点尿钠值与所述点尿肌酐值的比值。
实施例2、本发明方法的验证
验证组男性患者共96人，分别用Kawasaki法、Tanaka法与SUN1方法的点尿计算所得24小时尿钠预测值(e-24HUNa)，用预测值与实测值(r-24HUNa)进行准确性比较，结果如表1：
表1 三种方法准确性比较
*P为与SUN1法比较卡方检验值
由表1可知：与K法相比，SUN1法估测e-24HUNa的30％准确性与之无统计学意义(P>0.05)，但50％准确性有明显改善(P<0.05)。与T法相比，SUN1法估测e-24HUNa的30％准确性与50％准确性均无统计学意义(P>0.05)，提示SUN1法估测e-24HUNa的准确性与T法相当。
图1为K法SMU预测尿钠与实测尿钠的Bland-Altman图。
图2为T法SMU预测尿钠与实测尿钠的Bland-Altman图。
图3为本发明的SUN1法SMU预测尿钠与实测尿钠的Bland-Altman图。
上述Bland-Altman图结果显示SUN1法中代表偏差均数的实线较接近Y＝0线，但较T法稍差，95％一致性界限外的数据点数为8(8.3％)，表明新公式预测尿钠排泄量与24小时尿钠测定两种方法有较好的一致性。
为评价新公式预测24小时尿钠排泄是否达标(<100mmol/L)的灵敏度及特异度，以100mmol/L为切点，完成ROC工作曲线，并得出ROC曲线下面积(AUC)。
图4为SMU样本K法、T法和SUN1法预测24小时尿钠排泄是否达标的ROC曲线。
表2为三种方法的ROC曲线AUC及95％置信区间。
表2 三种方法的ROC曲线AUC及95％置信区间
由图4和表2可知：SUN1公式的灵敏度和特异度可接受。

Claims (4)

1.用于检测点尿钠值的产品、用于检测点尿肌酐值的产品和记载有如下公式的载体在制备用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒中的应用：
e-24HUNa＝0.225×PRCr×(SUNa/SUCr)0.310；
其中，PRCr代表预测的24h尿肌酐值，且PRCr＝e(6.916-0.007×年龄-0.002×身高+0.013×体重)；e-24HUNa代表预测的24h尿钠值；SUNa代表点尿钠值；SUCr代表点尿肌酐值；SUNa/SUCr代表所述点尿钠值与所述点尿肌酐值的比值；
所述PRCr的单位为mg/day；所述e-24HUNa的单位为mmol/day；
所述SUNa的单位为mmol/L；所述SUCr的单位为mg/dL；
所述点尿钠值是指男性清晨空腹第二次尿中的点尿钠值；
所述点尿肌酐值是指男性清晨空腹第二次尿中的点尿肌酐值。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述载体上还记载有如下判断标准：当e-24HUNa≤100mmol/d时，受试者为低盐摄入者，当100<e-24HUNa≤200mmol/d，受试者为中盐摄入者，当e-24HUNa＞200mmol/d，受试者为高盐摄入者。
3.用于评估男性24小时尿钠值的试剂盒的使用方法，其特征在于：
所述试剂盒包括用于检测点尿钠值的产品、用于检测点尿肌酐值的产品和记载有如下公式的载体：
e-24HUNa＝0.225×PRCr×(SUNa/SUCr)0.310；
其中，PRCr代表预测的24h尿肌酐值，且PRCr＝e(6.916-0.007×年龄-0.002×身高+0.013×体重)；e-24HUNa代表预测的24h尿钠值；SUNa代表点尿钠值；SUCr代表点尿肌酐值；SUNa/SUCr代表所述点尿钠值与所述点尿肌酐值的比值；
所述PRCr的单位为mg/day；所述e-24HUNa的单位为mmol/day；
所述SUNa的单位为mmol/L；所述SUCr的单位为mg/dL；
所述试剂盒的使用方法包括如下步骤：
1)检测点尿钠值及点尿肌酐值；
2)将所述点尿钠值和点尿肌酐值代入上述公式中，计算得到男性24小时尿钠值；
所述点尿钠值是指男性清晨空腹第二次尿中的点尿钠值；
所述点尿肌酐值是指男性清晨空腹第二次尿中的点尿肌酐值。
4.根据权利要求3所述的使用方法，其特征在于：所述载体上还记载有如下判断标准：当e-24HUNa≤100mmol/d时，受试者为低盐摄入者，当100<e-24HUNa≤200mmol/d，受试者为中盐摄入者，当e-24HUNa＞200mmol/d，受试者为高盐摄入者。
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