CN104651248A - 一种甘露醇高盐琼脂及其应用 - Google Patents

一种甘露醇高盐琼脂及其应用 Download PDF

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    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
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Abstract

本发明为微生物领域，特别涉及一种甘露醇高盐琼脂，所述培养基的组分包括18.2g/L7.5%氯化钠肉汤、8.0g/LD-甘露醇、0.032g/L酚红、15.0g/L琼脂，pH值为7.2-7.6；所述7.5%氯化钠肉汤为每升7.5%氯化钠肉汤中含有胰蛋白胨10.0g、牛肉粉5.0g、氯化钠75.0g、磷酸氢二钾2.0g。本发明培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；菌生长迅速，变异率低；便于观察，分析。

Description

一种甘露醇高盐琼脂及其应用
技术领域    
    本发明为微生物领域，特别涉及一种甘露醇高盐琼脂及其应用。
背景技术    
    金黄色葡萄球菌，也称“金葡菌”，细胞壁含90%的肽聚糖和10%的磷壁酸。其肽聚糖的网状结构比革兰氏阴性菌致密，染色时结晶紫附着后不被酒精脱色故而呈现紫色，相反，阴性菌的细胞壁肽聚糖层薄、交联度差，脂类含量高，所以紫色复合物被酒精冲掉然后附着了沙黄的红色。金黄色葡萄球菌与青霉素的发现有很大的渊源。当年弗莱明就是在他的金黄色葡萄球菌的培养皿中发现有些球菌被杀死了，于是发现了青霉素。而研究也表明青霉素只对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌作用明显。这也是由肽聚糖层的厚度和结构造成的。新出现的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，被称作超级细菌，几乎能抵抗人类所有的药物，但是万古霉素可以对付它。典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
    金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH7.4,干燥环境下可存活数周。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径0.5~1.0mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物、青霉素、红霉素、土霉素、新霉素等抗生素敏感，但易产生耐药性，原因是由于这些菌株产生青霉素酶等。对碱性染料敏感，十万分之一的龙胆紫液即可抑制生长。
发明内容
     本发明克服现有技术中的不足，提供一种甘露醇高盐琼脂及其应用。
     本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了本发明的培养基。
     本发明所采用的技术方案为：
    一种甘露醇高盐琼脂，所述培养基的组分包括18.2g/L 7.5%氯化钠肉汤、8.0g/L D-甘露醇、0.032g/L酚红、15.0g/L琼脂，pH值为7.2-7.6；
    在以上方案的基础上，所述7.5%氯化钠肉汤为每升7.5%氯化钠肉汤中含有胰蛋白胨10.0g 、牛肉粉5.0g、氯化钠75.0g、磷酸氢二钾2.0g。
    本发明还公开了所述的甘露醇高盐琼脂的应用，用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。
    蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；D-甘露醇为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为pH指示剂。
    称取本品 88.25g，加入 1000ml 蒸馏水中，加热溶解并不停搅拌煮沸 1 分钟。121℃高压灭菌15分钟，冷至45-50℃左右时，倾入无菌平皿。    
      本发明的有益效果：
      1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；
      2、菌生长迅速，变异率低；
      3、便于观察，分析。
具体实施方式   
实施例1：
      一种甘露醇高盐琼脂，所述培养基的组分包括18.2g/L 7.5%氯化钠肉汤、8.0g/L D-甘露醇、0.032g/L酚红、15.0g/L琼脂，pH值为7.2-7.6；
    所述7.5%氯化钠肉汤为每升7.5%氯化钠肉汤中含有胰蛋白胨10.0g 、牛肉粉5.0g、氯化钠75.0g、磷酸氢二钾2.0g。
    蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；D-甘露醇为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为pH指示剂。
    称取本品 88.25g，加入 1000ml 蒸馏水中，加热溶解并不停搅拌煮沸 1 分钟。121℃高压灭菌15分钟，冷至45-50℃左右时，倾入无菌平皿。    
  在37℃培养18-24小时
质控菌株 生长情况 菌落颜色
金黄色葡萄球菌 +++ 黄色
大肠杆菌 +/- -
沙门氏菌 + 无色

Claims (2)

1.一种甘露醇高盐琼脂，其特征在于所述培养基的组分包括18.2g/L 7.5%氯化钠肉汤、8.0g/L D-甘露醇、0.032g/L酚红、15.0g/L琼脂，pH值为7.2-7.6；
根据权利要求1所述的甘露醇高盐琼脂，其特征在于所述7.5%氯化钠肉汤为每升7.5%氯化钠肉汤中含有胰蛋白胨10.0g 、牛肉粉5.0g、氯化钠75.0g、磷酸氢二钾2.0g。
2.一种根据权利要求1所述的甘露醇高盐琼脂的应用，其特征在于用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105950701A (zh) * 2016-05-20 2016-09-21 深圳市南山区人民医院 一种用于检测耐药金黄色葡萄球菌定植的方法及其试剂

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PB01 Publication
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Application publication date: 20150527