CN104644840A - 一种治疗痤疮的药物组合物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明的一种治疗痤疮的药物组合物的制备方法，其特征在于：用双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌发酵中药原料。用药剂学上常用的方法制成化妆品。经过试验证明，疗效能进一步提高。

Description

一种治疗痤疮的药物组合物的制备方法

技术领域

本发明涉及药品，具体涉及一种治疗痤疮的药物组合物的制备方法，属药品、化妆品技术领域。

背景技术

痤疮，俗名青春痘，是一种发生在毛囊皮脂腺及其周围组织的炎症病变，在各类人群，尤其是年轻人中发生较为普遍。为此，许多化妆品企业推出了祛痘产品。祛痘产品中有效成分的种类和含量不仅决定祛痘效果的优劣，而且对消费者的健康也有一定影响。抗生素类及糖皮质激素类对青春痘有一定的治疗效果而常用于外用药中。水杨酸有中等抗粉刺功效及抗菌性能，而且对皮肤的刺激性较小，因此也常用作座疮治疗药。与药品相比，化妆品的安全性要求更高，不仅要求使用安全，且不能对施用部位产生明显刺激和损伤，更不能产生任何抗药性。目前，市场上有很多祛痘产品滥用抗生素、糖皮质激素、化学药品的现象非常严重，结果令人担忧。

中医药治疗痤疮有独特的疗效，经过反复试验我们发现，中药经过生物发酵，其疗效能进一步提高。

发明内容

本发明的目的是提供一种不含抗生素、糖皮质激素、化学药品的治疗痤疮的中药药物组合物的其制备方法，使中药治疗痤疮的疗效进一步提高。

本发明的目的通过以下技术方案实现。

一种治疗痤疮的药物组合物的制备方法，其特征在于：用双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌发酵中药原料。

本发明的一种治疗痤疮的药物组合物的制备方法，其特征在于：用双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌发酵中药原料后，用药剂学上常用的方法制成凝胶剂、软膏剂。

本发明制成的治疗痤疮的药物或化妆品为外用，外用指组合物的给药途径，直接涂于产生痤疮的皮肤部位。

至此完成了本发明，本发明的治疗痤疮的中药药物组合物的制备方法，经过反复试验证明，疗效能进一步提高。

以下通过药效学试验及临床研究进一步阐述本发明的有益效果。下面试验旨在进一步说明本发明的作用，而非本发明的限制。

试验例1  本发明制备方法制备的凝胶剂抑菌作用

一、不同制法制备的制剂抑菌效果比较

试验1

中药提取物：丁香油2g、丹参提取物1.2g、黄柏提取物0.6g、甘草提取物0.6g、葛根提取物0.6g、玉兰香花油0.5g。

制法：

1、非发酵法制备凝胶

取中药提取物，加水至1000g，加热至沸1小时灭菌，当温度降至室温时，过滤，加入卡波普（940）10g、尿素30g、尿囊素3g、氢氧化钠2g、放置过夜，加水至1000g，搅拌均匀，即得凝胶。

2、发酵法凝胶

取中药提取物，加水至1000g；再加入葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g、硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g。加热至沸1h灭菌，当温度降至38℃时，将双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，每株菌种子液接种量均为1g，38℃培养4天；过滤，滤液加热至沸1h灭菌，当温度降至室温时，过滤，加入卡波普（940）10g、尿素30g、尿囊素3g、氢氧化钠2g、放置过夜，加水至1000g，搅拌均匀，即得凝胶。

体外抑菌活性试验：

委托山东省医学科学院基础所微生物研究室分别对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌进行体外抑菌实验和最小抑菌浓度测定，结果表明，发酵法制备的凝胶剂对金黄色葡萄球菌的抑菌直径为26.63mm，对痤疮丙酸杆菌的抑菌直径为25.18 mm；非发酵法制备的凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌直径为17.25mm，对痤疮丙酸杆菌的抑菌直径为16.97mm。发酵法制备的凝胶对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为3.12mg/mL、非发酵法制备的凝胶为9.51mg/mL。比较可知，发酵法制备的凝胶剂对金黄色葡萄和痤疮丙酸杆菌的抑菌活性明显强于非发酵法制备的凝胶剂。

试验2

中药：天然牛黄粉50g，黄芩100g、金银花100g。

制法：

1、非发酵法制备凝胶

取金银花，加入2000ml水，加热至沸，加热黄芩，煎煮1.5h，取煎液，再加入1600ml水，煎煮1h，2次煎液合并，过滤；滤液加入卡波普（940）100g 、丙二醇500g  氢氧化钠40g、天然牛黄粉50g，放置过夜，蒸馏水加至10kg，搅拌均匀，即得凝胶。

2、发酵法制备凝胶

1）取牛黄50g、黄芩100g、金银花100g、葡萄糖5g、蛋白胨20g、硫酸锌0.44g、硫酸铁0.1g,硫酸钠0.02g、硫酸镁7g份、硫酸锰0.05份、磷酸二氢钾0.01g、磷酸氢二钾0.01g，加水至10kg；加热至沸1h灭菌，当温度降至38℃时，将双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，每株菌种子液接种量均为1.0%，38℃培养4天；过滤，滤液加热至沸1h灭菌，滤液加入卡波普（940）100g 、丙二醇500g  氢氧化钠40g，放置过夜，蒸馏水加至10kg，搅拌均匀，即得凝胶

体外抑菌活性试验：

委托山东省医学科学院基础所微生物研究室分别对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌进行体外抑菌实验和最小抑菌浓度测定，结果表明，发酵法制备的凝胶剂对金黄色葡萄球菌的抑菌直径为19.58mm，对痤疮丙酸杆菌的抑菌直径为19.24 mm；非发酵法制备的凝胶对金黄色葡萄球菌的抑菌直径为12.33mm，对痤疮丙酸杆菌的抑菌直径为11.25mm。发酵法制备的凝胶对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为4.05mg/mL、非发酵法制备的凝胶为6.94mg/mL。比较可知，发酵法制备的凝胶剂对金黄色葡萄和痤疮丙酸杆菌的抑菌活性明显强于非发酵法制备的凝胶剂。

试验3

中药：麻黄3g、葛根3g、夜关门9g、地黄花9g、甘草1g。

制法：

1、非发酵法制备软膏

取中药，加10倍量水煎煮2次，每次1.5h，2次提取液合并，过滤，浓缩至相对密度1.15（60℃），60℃减压干燥，粉碎，得中药干燥物。将硬脂酸120 g、蓖麻油100g、液状石蜡100g置蒸发皿中，在水浴上加热(75-80℃)使熔化，得油相，另取三乙醇胺9 g、甘油40g与适量水混匀，加热至同温度，缓缓加入油相中，边加边搅拌直至乳化完全，再加入中药干燥物，边加边搅拌，蒸馏水至1000g，然后搅拌至室温，即得

2、发酵法制备软膏

取中药，加入葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g,硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g，加水至1000g，加热至沸1小时灭菌，当温度降至38℃时，加入双歧杆菌种子液10g，38℃培养72小时，过滤，浓缩至相对密度1.15（60℃），60℃减压干燥，粉碎，得中药干燥物。将硬脂酸120 g、蓖麻油100g、液状石蜡100g置蒸发皿中，在水浴上加热(75-80℃)使熔化，得油相，另取三乙醇胺9 g、甘油40g与适量水混匀，加热至同温度，缓缓加入油相中，边加边搅拌直至乳化完全，再加入中药干燥物，边加边搅拌，蒸馏水至1000g，然后搅拌至室温，即得。

体外抑菌活性试验：

委托山东省医学科学院基础所微生物研究室分别对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌进行体外抑菌实验和最小抑菌浓度测定，结果表明，发酵法制备的软膏对金黄色葡萄球菌的抑菌直径为21.72mm，对痤疮丙酸杆菌的抑菌直径为19.05 mm；非发酵法制备的软膏对金黄色葡萄球菌的抑菌直径为15.75mm，对痤疮丙酸杆菌的抑菌直径为13.18mm。发酵法制备的软膏对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为4.05mg/mL、非发酵法制备的软膏为6.94mg/mL。比较可知，发酵法制备的软膏剂对金黄色葡萄和痤疮丙酸杆菌的抑菌活性明显强于非发酵法制备的软膏剂。

二、不同制法制备的制剂临床效果比较

试验1

中药提取物：取丁香油2g、丹参提取物1.2g、黄柏提取物0.6g、甘草提取物0.6g、葛根提取物0.6g、玉兰香花油0.5g。

制法：

1、非发酵法制备凝胶剂

取中药提取物，加水至1000g，加热至沸1小时灭菌，当温度降至室温时，过滤，加入卡波普（940）10g、尿素30g、尿囊素3g、氢氧化钠2g、羟苯乙酯1g，放置过夜，加水至1000g，搅拌均匀，即得凝胶。

2、发酵法制备凝胶剂

1）取中药提取物，加水至1000g；再加入葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g、硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g。加热至沸1h灭菌，当温度降至38℃时，将双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，每株菌种子液接种量均为1g，38℃培养4天；过滤，滤液加热至沸1h灭菌，当温度降至室温时，过滤，加入卡波普（940）10g、尿素30g、尿囊素3g、氢氧化钠2g、羟苯乙酯1g，放置过夜，加水至1000g，搅拌均匀，即得凝胶。

不同制法疗效比较：

1、资料与方法： 一般资料选择有典型痘痘皮损的患者61例，其中男35例，女26例；年龄15-27岁；病史3个月至4年。所有患者2周内未服可能影响痘痘治疗的内服药及治疗痘痘的外用药。

2、分组治疗：将患者随机分成两组，生物发酵法凝胶组31例，非生物发酵法凝胶组30例，分别给予本发明凝胶、现有技术凝胶，涂患处，每日2次，一个月为疗程。全部患者在服药期间不用其它药物。

3、疗效判定痊愈：痘痘全部消退；显效：痘痘消退75％以上，偶有个别新出的痘痘；有效：痘痘消退50％-70％，新出的痘痘少于10个；无效：痘痘消退少于50％ 或无明显好转。

4、结果：生物发酵凝胶组总有效率100%，非生物发酵凝胶组总有效率76.7%，两组治疗结果比较，差异具有显著性(P<0.05)，本发明凝胶组明显优于现有技术凝胶组，整个治疗过程所有患者均未见不良反应。具体结果见表1。

表1  两组治疗结果比较[例（%）]

组别	治愈	显效	有效	无效	总有效
						发酵组	14（45.2）	12（38.7）	4（12.9）	1（3.2）	30（96.8）
非发酵组	10（33.3）	7（23.3）	6（0.20）	7（23.3）	23（76.7）

试验2

中药：黄芩100g、金银花100g、天然牛黄粉50g。

制法：

1、非发酵法制备凝胶剂

取中药，加入2000ml水，煎煮1.5h，取煎液，再加入1600ml水，煎煮1h，2次煎液合并，过滤，滤液加入卡波普（940）100g 、丙二醇500g  聚山梨酯（80）20g、羟苯乙酯10g、氢氧化钠40g、放置过夜，蒸馏水加至10kg，搅拌均匀，即得凝胶。

2、非发酵法制备凝胶剂

取中药，加入2000ml水、加入葡萄糖5g、蛋白胨20g、硫酸锌0.44g、硫酸铁0.1g,硫酸钠0.02g、硫酸镁7g份、硫酸锰0.05份、磷酸二氢钾0.01g、磷酸氢二钾0.01g，加水至10kg；加热至沸1h灭菌，当温度降至38℃时，将双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，每株菌种子液接种量均为1.0%，38℃培养4天，过滤，滤液加热至沸1h灭菌，滤液加入卡波普（940）100g 、丙二醇500g  聚山梨酯（80）20g、羟苯乙酯10g、氢氧化钠40g，放置过夜，蒸馏水加至10kg，搅拌均匀，即得凝胶

不同制法疗效比较：

1、一般资料：选择有典型痘痘皮损的患者65例，其中男37例，女28例，年龄16～30岁，病程2个月至3年，所有患者1个月内未服可能影响痘痘治疗的内服药，半个月内未用治疗痘痘的外用药。

2、治疗：将患者随机分成两组，发酵法制备凝胶剂组33例，用温水洗净脸擦干后，用本发明法制备的凝胶涂患处，每日早晚各1次。非发酵法制备凝胶剂组32例，用温水洗净脸擦干后，用煎煮法制备的凝胶涂患处，每日早晚各1次。

3、痘痘分类计数：面部黑头、白头、丘疹、脓疱、结节及囊肿分别记数。

4、疗效判定：痊愈：痘痘全部消退，无新出痘痘；显效：痘痘消退75％ 以上，偶有个别新出的痘痘；有效：痘痘消退50-70％，新出的痘痘少于10个；无效：痘痘消退少于50％或无明显好转。

5、结果：发酵法制备凝胶剂治愈率42.4%、显效率39.4%、有效率18.2%、总有效率100%；非发酵法制备凝胶剂组愈率率31.3%、显效率25.0%、有效率15.6%、总有效率71.9 %，两组治疗结果比较，差异具有显著性(P<0.05)，发酵法制备凝胶剂组愈率、显效率、有效率、总有效率均明显优于非发酵法制备凝胶剂组，整个治疗过程所有患者均未见不良反应。具体结果见表2。

表2  两组治疗结果比较（例，%）

组别	治愈	显效	有效	无效	总有效
						发酵组	14（42.4）	13（39.4）	6（18.2）	0（0）	33（100）
非发酵组	10（31.3）	8（25.0）	5（15.6）	9（28.1）	23（71.9）

试验3

中药：麻黄30g、葛根30g、夜关门90g、地黄花90g、甘草10g。

制法：

1、非发酵法制备凝胶剂

取中药，加入2500ml水，煎煮1.5h，取煎液，再加入2000ml水，煎煮1h，2次煎液合并，过滤，滤液加入卡波普（940）100g 、丙二醇500g  聚山梨酯（80）20g、羟苯乙酯10g、氢氧化钠40g，放置过夜，蒸馏水加至10kg，搅拌均匀，即得凝胶。

2、发酵法制备凝胶剂

取中药、加入葡萄糖5g、蛋白胨20g、硫酸锌0.44g、硫酸铁0.1g,硫酸钠0.02g、硫酸镁7g份、硫酸锰0.05份、磷酸二氢钾0.01g、磷酸氢二钾0.01g，加水至10kg；加热至沸1h灭菌，当温度降至38℃时，将双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，每株菌种子液接种量均为0.1kg，38℃培养4天；过滤，滤液加热至沸1h灭菌，滤液加入卡波普（940）100g 、丙二醇500g  聚山梨酯（80）20g、羟苯乙酯10g、氢氧化钠40g，放置过夜，蒸馏水加至10kg，搅拌均匀，即得凝胶

不同制法疗效比较：

1、资料与方法：一般资料选择有典型痘痘皮损的患者60例，所有患者2周内未服可能影响痘痘治疗的内服药及治疗痘痘的外用药。

2、分组治疗：将患者随机分成两组，每组30例，分别给予,发酵法制备凝胶剂、非发酵法制备凝胶剂，涂患处，每日2次，一个月为疗程。全部患者在服药期间不用其它药物。

3、疗效判定痊愈：痘痘全部消退；显效：痘痘消退75％以上，偶有个别新出的痘痘；有效：痘痘消退50％-70％，新出的痘痘少于10个；无效：痘痘消退少于50％ 或无明显好转。

4、结果：见表3。

表3  两组治疗结果比较（例，%）

组别	治愈	显效	有效	无效	总有效
						发酵组	13（43.3）	11（36.7）	6（20.0）	0（0.0）	30（100）
非发酵组	10（33.3）	7（23.3）	7（23.3）	6（20.0）	24（80.0）

发酵法制备凝胶剂组总有效率100%，非发酵法制备凝胶剂组总有效率80.0%，治疗结果比较，差异具有显著性，发酵法制备凝胶剂组明显优于非发酵法制备凝胶剂组，整个治疗过程所有患者均未见不良反应。

具体实施方式

实施例1：

处方：麻黄1g、葛根1g、芦根2g、地黄花2g、甘草1g。

制法：取麻黄、葛根、芦根、地黄花、甘草，加入葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g,硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g，加水至1000g，加热至沸1小时灭菌，当温度降至38℃时，加入双歧杆菌种子液10g，38℃培养72小时，过滤，加热至沸1h灭菌。加入卡波普（940）10g、聚山梨酯（80）2g、氢氧化钠4g，加蒸馏水至1000ml，搅拌均匀，分装后灭菌，即得凝胶。

实施例2：

取麻黄3g、葛根3g、夜关门9g、地黄花9g、甘草1g、葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g,硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g，加水至1000g，加热至沸1小时灭菌，当温度降至38℃时，将双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，每株菌种子液接种量均为10g，38℃培养48小时，过滤，加热至沸浓缩至相对密度1.2时，60℃减压干燥，粉碎，得中药发酵干燥物。

取硬脂酸120 g、蓖麻油100g、液状石蜡100g，置蒸发皿中，在水浴上加热(75-80℃)使熔化（油相），另取羟苯乙酯1g、三乙醇胺9 g、甘油40g与适量水混匀，加热至同温度，缓缓加入油相中，边加边搅拌直至乳化完全，再加入中药发酵干燥物，边加边搅拌，蒸馏水至1000g，然后搅拌至室温，即得软膏。

实施例3：

取黄芩5g、金银花6g，加水煎煮2次，每次1.5h，2次提取液合并，过滤，加入牛黄3g、葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g,硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g，加水至1000g，加热灭菌，当温度降至37℃时，将双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，每株菌种子液接种量均为10g，38℃培养80h，过滤，加热至沸浓缩至相对密度1.12时，60℃减压干燥，粉碎，得中药发酵干燥物。

   取硬脂醇220g、白凡土林250g，在水浴上熔化，加热至80℃，加入预先溶在水中并加热至80℃的十二烷基硫酸钠15g、羟苯乙酯0.25g、羟苯丙酯0.75g、甘油120g，搅拌均匀，加入中药发酵干燥物，蒸馏水至1000g，搅拌至冷凝，即得软膏。

实施例4：

取丁香油2g、丹参提取物1.2g、黄柏提取物0.6g、甘草提取物0.6g、葛根提取物0.6g、玉兰香花油0.5g、葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g,硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g，加水至1000g，加热至沸1小时灭菌，当温度降至38℃时，将双歧杆菌种子液接入到发酵培养基中，接种量为10g，38℃培养48小时，过滤，加热至沸1h灭菌。加入卡波普（940）10g、聚山梨酯（80）2g、氢氧化钠4g，加蒸馏水至1000ml，搅拌均匀，分装后灭菌，即得凝胶。

实施例5：

取丁香油2g、丹参提取物1.2g、黄柏提取物0.6g、甘草提取物0.6g、葛根提取物0.6g、玉兰香花油0.5g、加水至1000g；再加入葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g,硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g，加水至1000g，加热灭菌，当温度降至37℃时，将双歧杆菌、嗜酸乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，每株菌种子液接种量均为10g，38℃培养72h，过滤，加入PEG（4000）80g、甘油100g、苯扎溴铵8g、交联型聚丙烯酸钠 10g，加蒸馏水至1000ml，水用胶体磨处理均匀，与分装后钴60照射灭菌，即得凝胶。

实施例6：

取丁香油2g、丹参提取物1.2g、黄柏提取物0.6g、甘草提取物0.6g、葛根提取物0.6g、玉兰香花油0.5g、加水至1000g；再加入葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g,硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g，加水至1000g，加热灭菌，当温度降至37℃时，将嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，每株菌种子液接种量均为10g，38℃培养72h，过滤，加入PEG（4000）80g、甘油100g、苯扎溴铵8g、交联型聚丙烯酸钠 10g，加蒸馏水至1000ml，水用胶体磨处理均匀，与分装后钴60照射灭菌，即得凝胶。

实施例7：

取丁香油2g、丹参提取物1.2g、黄柏提取物0.6g、甘草提取物0.6g、葛根提取物0.6g、玉兰香花油0.5g、加水至1000g；再加入葡萄糖0.5g、蛋白胨2g、硫酸锌0.044g、硫酸铁0.01g,硫酸钠0.002g、硫酸镁0.7g、硫酸锰0.005g、磷酸二氢钾0.001g、磷酸氢二钾0.001g，加水至1000g，加热灭菌，当温度降至37℃时，将10g嗜酸乳杆菌种子液接入到发酵培养基中，38℃培养72h，过滤，加入PEG（4000）80g、甘油100g、苯扎溴铵8g、交联型聚丙烯酸钠 10g，加蒸馏水至1000ml，水用胶体磨处理均匀，与分装后钴60照射灭菌，即得凝胶。

Claims (2)

1.一种治疗痤疮的药物组合物的制备方法，其特征在于：用双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌发酵中药原料。

2.根据权利要求1的的一种治疗痤疮的药物组合物的制备方法，其特征在于：用双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌发酵中药原料后，用药剂学上常用的方法制成凝胶剂、软膏剂。