CN104622758A - 一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法及应用，制备方法包括以下步骤：(1)选取茉莉花植物叶作为原料；(2)称取10-15倍茉莉花植物叶重量的乙醇与茉莉花植物叶混合配置成料液，置于真空度为0.4-0.6MPa的环境中，在温度为50-60℃和超声波功率为420W下反应1-15min；(3)过滤收集得到茉莉花植物叶细胞提取物。本发明采用真空耦合超声波提取法提取茉莉花植物叶细胞提取物，缩短了提取时间的同时产品得率高、工作效率且产品安全；将茉莉花植物液叶细胞提取物添加到面霜等化妆品中，具有抗衰老、抗紫外线等美容功效。

Description

一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法及应用

技术领域

本发明属于生物美容领域，具体涉及一种具有美容功效的茉莉花叶细胞提取物的制备方法及应用。

背景技术

茉莉花为紫茉莉紫茉莉属植物，俗名地雷花，胭脂花，粉豆花，夜饭花。叶对生，单叶，叶片纸质，圆形、椭圆形、卵状椭圆形或倒卵形，两端圆或钝，基部有时微心形，在上面稍凹入或凹起，下面凸起，细脉在两面常明显，微凸起，除下面脉腋间常具簇毛外，其余无毛；裂片长圆形至近圆形，先端圆或钝。果球形，呈紫黑色。花期5-8月，果期7-9月。多年生草本花卉，生产上常作一年生栽培。紫茉莉既是一种可起到绿化，美化环境和净化空气作用的好花卉。前人对紫茉莉的化学成分研究分离得到脂肪酸，萜，甾类，酚和鱼藤酮类化合物。紫茉莉花晚上散发的浓郁香气，可麻醉及驱除蚊虫。叶可治疮毒，对二氧化硫，一氧化碳和氯气都具有较强的抗毒作用，能吸收铅，汞蒸气等有害物质。茉莉的花极香，为著名的花茶原料及重要的香精原料；花、叶药用治目赤肿痛，并有止咳化痰之效。

目前关于从叶细胞中提取出茶多酚物质的有效成分主要有以下方法：超临界萃取法、有机溶剂萃取法、微波提取法、热萃取法等；超临界萃取法：超临界流体萃取法的特点在于充分利用超临界流体兼有气、液两重性的特点，在临界点附近，超临界流体对组分的溶解能力随体系的压力和温度发生连续变化，从而可方便的调节组分的溶解度和溶剂的选择性。超临界流体萃取法具有萃取和分离的双重作用，物料无相变过程因而节能明显，工艺流程简单，萃取效率高，无有机溶剂残留，产品质量好，无环境污染。超临界萃取法获得的茶多酚纯度高，但是其生产率低，较难实现工业化。有机溶剂萃取法：有机溶剂萃取法也称——液萃取法，简称萃取法。萃取法由有机相和水相相互混合，水相中要分离出的物质进入有机相后，再靠两相质量密度不同将两相分开。有机相一般由三种物质组成，即萃取剂、稀释剂、溶剂。有时还要在萃取剂中加入一些调节剂，以使萃取剂的性能更好。从氰化物溶液中萃取有色金属氰络物一般用高分子有机胺类，如氯化三烷基甲胺(N263)、稀释剂为高碳醇、溶剂是磺化煤油。水相即是要处理的废水。有机溶剂萃取法需要使用较多的有机溶剂，工艺繁琐，操作安全性差，且有机溶剂消耗大，成本高。微波提取法：由于吸收微波能，细胞内部温度迅速上升，使其细胞内部压力超过细胞壁膨胀承受能力，细胞破裂。细胞内有效成分自由流出，在较低的温度条件下萃取介质捕获并溶解。通过进一步过滤和分离，便获得萃取物料。另一方面，微波所产生的电磁场加速被萃取部分成分向萃取溶剂界面扩散速率，用水作溶剂时，在微波场下，水分子高速转动成为激发态，这是一种高能量不稳定状态，或者水分子汽化，加强萃取组分的驱动力；或者水分子本身释放能量回到基态，所释放的能量传递给其他物质分子，加速其热运动，缩短萃取组分的分子由物料内部扩散到萃取溶剂界面的时间，从而使萃取速率提高数倍，同时还降低了萃取温度，最大限度保证萃取的质量。还有的文献是这样描述的：由于微波的频率与分子转动的频率相关连，所以微波能是一种由离子迁移和偶极子转动引起分子运动的非离子化辐射能。当它作用于分子上时，促进了分子的转动运动，分子若此时具有一定的极性，便在微波电磁场作用下产生瞬时极化，并以2.45亿次/秒的速度做极性变换运动，从而产生键的振动、撕裂和粒子之间的相互摩擦、碰撞，促进分子活性部分(极性部分)更好地接触和反应，同时迅速生成大量的热能，促使细胞破裂，使细胞液溢出来并扩散到溶剂中。3.微波提取法：时间太短，操作不容易控制，多酚类物质损失比较严重。热萃取法：以热为传导，热辐射等方式由外向里进行，热萃取法：提取率低，产量低，对萃取物选择性低，耗时长。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种采用真空耦合超声波提取法提取茉莉花植物叶细胞提取物，本方法缩短了提取时间，提高了工作效率且产品安全，将其应用在抗衰老产品中，具有抗衰老和抗紫外线的效果。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：

一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，包括如下步骤：

(1)选取茉莉花植物叶作为原料；

(2)称取(10-15)倍茉莉花植物叶重量的乙醇与茉莉花植物叶混合配置成料液，能够充分的使乙醇溶解茉莉花植物叶中的有效成分；置于真空度为0.4MPa-0.6MPa的环境中，优选0.06MPa的真空度环境；及在温度为50-60℃环境中，优选55℃，通过单因素实验和正交实验，本法所用的纤维素酶最适温度为55℃；和超声波功率为420W下反应1-15min，优选12min,这样可以节省能源降低反应成本；

(3)过滤收集得到茉莉花植物叶细胞提取物。

优选的，步骤(1)中选取茉莉花植物叶作为原料，剪碎后过(40—60)目筛后粉碎。

优选的，步骤(2)中所述环境的真空度为0.6MPa。

优选的，步骤(2)中乙醇质量分数为70％。

优选的，步骤(2)中温度为55℃。

优选的，所述茉莉花植物叶细胞提取物为茶多酚。

本发明制备的所述一种茉莉花植物叶细胞提取物在抗衰老和抗紫外线护肤品中应用。

所述抗衰老和抗紫外线护肤品为面膜、爽肤水、面霜、乳液、眼霜、洗面乳、霜膏。

所述茉莉花植物叶细胞提取物在抗衰老和抗紫外线护肤品中的添加量为10-1200μg/ml；优选的，添加量为1000μg/ml；在10-1200μg/ml的情况下，其抗紫外线效果呈线性关系，y＝0.434x+7.6631,R2＝0.9958,抗紫外效果随质量浓度的增加而上升，在1000--5000μg/ml，抗紫外效果趋向平衡，故添加1000μg/ml最适合。

有益效果：

1.缩短了提取时间的同时产品得率高、工作效率且产品安全。本发明采用真空耦合超声波提取法提取茉莉花植物叶细胞提取物，利用空话效应、机械效应和热效应增大介质的穿透力，加速活性物质的溶出，降低提取沸点，与常规回流法比较缩短了3倍的提取时间。较超声波方法提高了提取效率，缩短了提取时间。

其中，超声波空化效应是指存在于液体中的微小泡核在超声波作用下，经历超声的稀疏相和压缩相，体积生长、收缩、再生长、再收缩，多次周期性震荡，最终高速度崩裂的动力学过程。

2.茉莉花植物叶细胞提取物不存在重金属和有机溶剂残留等问题，而且溶剂损耗少。

3.茉莉花植物叶细胞提取物具有抗衰老和抗紫外线的作用。本发明把提取的茉莉花叶细胞提取物添加到美国野生黑腹果蝇和昆明种小鼠中证明具有抗衰老的作用。

4.将茉莉花植物液叶细胞提取物添加到面霜等化妆品中，具有清洁皮肤，控制油分，祛斑美白，祛皱嫩肤等美容功效。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明，但本发明要求保护的范围并不局限于实施例表达的范围。

实施例1

(1)样品的预处理：摘取茉莉花叶子，剪碎，使用40目粉碎，待用。

(2)称取10倍茉莉花植物叶重量的乙醇与茉莉花植物叶于烧瓶中混合配置成料液，系统中真空度为0.6MPa，在温度为55℃和超声波功率为420W下反应12min，质量分数为70％乙醇，完成整个提取后，过滤收集得到茶多酚提取液，标记为样品1。

(3)茶多酚的含量测定：采用高效液相色谱法进行茶多酚含量的测定(，其分析时间短，操作简便。其最佳分析条件为:甲醇：水：乙酸＝20:60:0.4(体积比)，流速为1.1ml/min,进样体积：5×10^-3，温度25℃，紫外检测波波长为277nm；经过5次重复试验验证，在以上情况下茶多酚的平均提取率为23.55％；

(4)作用测试：测定美国野生型黑腹果蝇头部的脂褐素和昆明种小鼠的过氧化脂质产物丙二醇；

以美国野生型黑腹果蝇160只，分为3组，分别为实验组1、实验组2和对照组。在果蝇培养基中按照王厚德法稍加改进配制。对照组1不加入茶多酚，实验组1和实验组2于100g基础培养基中分别加入10mg/L与100mg/L的茶多酚；

脂褐素(lipofuscin)又称老年素。沉积于神经、心肌、肝脏等组织衰老细胞中的黄褐色不规则小体，内容物为电子密度不等的物质、脂滴、小泡等，是溶酶体作用后剩下不再能被消化的物质而形成的残余体。其积累随年龄增长而增多，是衰老的重要指征之一。见于浅表皮肤者俗称“老年斑”。能用苏丹黑染色，西夫氏过碘酸反应阳性，紫外线照射时发射的荧光波长最大值在420～480nm，可显示微弱溶酶体酶活性。

在美国野生型黑腹果蝇测定果蝇头部脂褐素含量测定：处死65日龄果蝇，取头部精密称重，按Soahl法提取脂褐素，用英冠分光光度法测定荧光强度，推算每克样品中脂褐素含量。结果如下

表1茶多酚对果蝇脑内脂褐素含量的影响

表1结果表明：

茉莉花叶提取物茶多酚能抑制果蝇头部脂褐素生成，实验组1和实验组2的每克组织脂褐素均低于对照组，其下降的程度与剂量程依赖关系，即说明茉莉花叶细胞提取物具有抗衰老，抗氧化的功效。

实施例2

(1)样品的预处理：摘取茉莉花叶子，剪碎，使用60目粉碎，待用。

(2)称取15倍茉莉花植物叶重量的乙醇与茉莉花植物叶于烧瓶中混合配置成料液，连接好设备，开启真空泵使整个系统形成负压，系统中真空度为0.4MPa，在温度为50℃和超声波功率为420W下反应1min，乙醇质量分数70％，完成整个提取后，过滤收集得到茶多酚提取液，标记为样品2。

对样品2进行过氧化脂质产物丙二醇的含量测定：测定昆明种小鼠体外组织匀浆与不同浓度茶多酚孕育吼过氧化脂质产物丙二醇含量；

实验分组：以昆明种小鼠体270只，分为3组，分别为实验组1、实验组2和对照组。对照组1不加入茶多酚，实验组1和实验组2于100g基础培养基中分别加入100mg/L与200mg/L的茶多酚；

结果如下：

表2体外茶多酚对大鼠组织匀浆过氧化脂质的影响

表2结果表明体外茶多酚对大鼠匀浆过氧化脂质的影响：当不同浓度的茶多酚与大鼠的心肝脑组织均匀孵育，结果表示茉莉花叶细胞提取物具有能降低脑、肝、心组织匀浆中的过氧化脂质，减少其产物丙二醛的生成量，即说明茉莉花叶细胞提取物具有抗衰老的功效。

根据上述说明书的揭示和教导，本发明所属领域的技术人员还可以对上述实施方式进行变更和修改。因此，本发明并不局限于上面揭示和描述的具体实施方式，对本发明的一些修改和变更也应当落入本发明的权利要求的保护范围内。此外，尽管本说明书中使用了一些特定的术语，但这些术语只是为了方便说明，并不对本发明构成任何限制。

Claims (9)

1.一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)选取茉莉花植物叶作为原料；

(2)称取(10-15)倍茉莉花植物叶重量的乙醇与茉莉花植物叶混合配置成料液，置于真空度为0.4MPa-0.6MPa的环境中，在50-60℃下和超声波功率为420W的条件下反应1-15min；

(3)过滤收集得到茉莉花植物叶细胞提取物。

2.根据权利要求1所述的一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中选取茉莉花植物叶作为原料，剪碎后过(40—60)目筛后粉碎。

3.根据权利要求1所述的一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述环境的真空度为0.6MPa。

4.根据权利要求1所述的一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中乙醇质量分数为70％。

5.根据权利要求1所述的一种茉莉花植物叶细胞提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中温度为55℃。

6.权利要求1-5任意一项所述的制备方法制得的一种茉莉花植物叶细胞提取物在抗衰老护肤品中应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于：所述抗衰老护肤品为面膜、爽肤水、面霜、乳液、眼霜、洗面乳、霜膏。

8.如权利要求6所述的应用，其特征在于：所述茉莉花植物叶细胞提取物在抗衰老护肤品中的添加量为10-1200μg/ml。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于：所述茉莉花植物叶细胞提取物在抗衰老护肤品中的添加量为1000μg/ml。