CN104611381A - 一种木质纤维素连续酶解发酵产乙醇的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种木质纤维素连续酶解发酵产乙醇的方法，包括：（1）将预处理木质纤维素原料与酶液按比例加入到带螺杆装置的酶解反应器中进行连续酶解；（2）酶解后物料进入发酵罐Ⅰ，接入酵母菌在30℃～38℃进行同步糖化发酵；（3）发酵罐Ⅰ的物料进入发酵罐Ⅱ，在39℃～44℃继续同步糖化发酵；（4）发酵后物料进行减压蒸馏；（5）蒸馏后物料进行固液分离，含酶的液相回用于步骤（1）中。本发明采用螺杆装置实现原料的连续供给和连续酶解，提高了酶解的效率；并在不同温度下进行同步糖化发酵，进一步提高了酶解的效率，进而提高乙醇得率；最后得到的酶液可直接回用于酶解过程，降低了生产成本。

Description

一种木质纤维素连续酶解发酵产乙醇的方法

技术领域

本发明属于生物质能源领域，具体涉及一种木质纤维素连续酶解发酵产乙醇的方法。

背景技术

当前经济过分依赖于石油、煤炭等化石燃料，其不可再生性正导致资源逐渐枯竭，燃烧产生的二氧化碳已造成气候环境的日益恶化。寻找可再生的清洁能源成为科研人员关注的焦点。其中生物质能源因具有来源广泛、价格低廉、再生性强、二氧化碳可循环利用等优点，而成为最具潜力的能源物质。燃料乙醇是源于可再生生物质的重要能源之一，为避免与人争粮，木质纤维素将成为燃料乙醇生产最具潜力的原料。

木质纤维素炼制燃料乙醇过程通常包括预处理、水解、发酵、蒸馏等单元操作。其中纤维素水解为可发酵糖是纤维素乙醇炼制过程中至关重要的环节。目前，木质纤维素的降解主要有化学法水解和酶法水解。但是目前采用生物资源酶解纤维素的方法存在纤维素转化效率不高等缺点。

纤维素的酶解过程是纤维素制备乙醇工艺的一个重要过程。纤维素酶解的成本是纤维素乙醇制造成本的重要组成部分之一，占总生产成本的40%～55%。解决此问题，可以从两方面着手：（1）降低酶的生产成本，只有在酶的成本降低至1/10，投资成本降低30%，纤维素乙醇才能与石油相竞争；（2）充分利用参与酶解反应的酶， 使酶与纤维素充分接触，从而间接降低酶解成本。

当前，纤维素酶解的反应主要是在搅拌反应釜内进行。由于反应釜的形体尺寸以及搅拌桨的结构形式、组合不同，各种反应釜的反应时间和效果上也存在着差异。通过优化搅拌桨的组合形式，可以使酶与纤维素的接触更加充分，大大缩短酶解时间，提高酶解效率。但是，搅拌反应釜也存在以下几点不足：（1）酶解反应是在一定温度下进行的，因此反应釜需设置夹套对物料进行传热、保温，传热效率及传热均匀性存在一定问题；（2）反应釜酶解的操作过程是周期性、间歇性的，即：加料→搅拌酶解反应→出料，此过程反复进行就存在间歇操作的麻烦，降低了工业生产的效率；（3）反应釜的巨大形体尺寸要求与之配合的机电设备必须具有足够的大功率，能耗很大，不符合现在绿色节能理念。

燃料乙醇工业生产中固体底物浓度是影响过程经济性和能量平衡的重要因素之一。乙醇蒸馏要实现经济性，其浓度必须大于4%，提高反应的固液比可增大酶解后糖浓度及发酵后乙醇浓度，从而降低蒸馏过程的能耗，减小装置尺寸，降低投资和产品成本。目前以淀粉为原料，干物浓度已高于30%，而纤维素干料浓度仍很低，这是因为当木质纤维素固体含量高于10%时将使初始黏度增大，原料难以混合并加大搅拌能耗。

CN200810189465.0 公开了一种纤维素乙醇的生产方法，其中包括如下步骤：（1）将含有纤维素和/或半纤维素原料的培养基加入到发酵反应釜中；（2）向发酵反应釜中加入纤维素酶，并接种葡萄牙假丝酵母；（3）在纤维素酶和葡萄牙假丝酵母的共同作用下进行同步糖化发酵，分离得到纤维素乙醇。CN200810101314.5 公开了一种含纤维素的原料制备乙醇的方法，该方法包括蒸汽爆破含纤维素的原料；将得到的蒸汽爆破的产物与酶混合、酶解；发酵酶解得到的产物。采用上述方法均可实现由含木质纤维素原料制备乙醇的目的，但是酶解效率不高，乙醇产率较低。

综上可知，木质纤维素制备燃料乙醇方法中存在酶解纤维素效率不高、酶的利用率不高、操作繁琐，糖转化率较低，乙醇产率较低等问题。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种木质纤维素连续酶解发酵产乙醇的方法。本发明采用螺杆装置实现原料的连续供给和连续酶解，提高了酶解的效率；并在不同温度下进行同步糖化发酵，进一步提高了酶解的效率，进而提高乙醇得率；最后得到的酶液可直接回用于酶解过程，降低了生产成本。

本发明木质纤维素连续酶解发酵产乙醇的方法，包括如下步骤：（1）将预处理木质纤维素原料与酶液加入到带螺杆装置的酶解反应器中进行连续酶解；（2）酶解后物料进入发酵罐Ⅰ，接入酵母菌在30℃～38℃进行同步糖化发酵；（3）发酵罐Ⅰ的物料进入发酵罐Ⅱ，在39℃～44℃继续同步糖化发酵；（4）发酵后物料进行减压蒸馏；（5）蒸馏后物料进行固液分离，含酶的液相回用于步骤（1）中。

本发明中，步骤（1）所述的木质纤维素原料包括一切含纤维素的物料，如秸秆、木屑和能源作物等，优选玉米秸秆。木质纤维素原料需要机械粉碎到粒径为0.1～30mm，优选粒径为0.2～1.0mm。可以采用各种预处理手段，如稀酸预处理、蒸汽爆破预处理或稀酸蒸爆预处理等，预处理后原料的干物浓度为40wt%～60wt%。 

本发明中，步骤（1）所述的酶液由柠檬酸缓冲液、水和纤维素酶组成，酶解过程中酶加量为5～20IU/g纤维素干基。酶解的条件为：干物浓度为5wt%～40wt%，酶解温度为45℃～55℃，优选为48℃～52℃，停留时间为12～40h，优选20～30h，pH值为4.5～5.5。

本发明中，步骤（1）所述的酶解反应器为前端带螺杆装置的卧式酶解反应器，螺杆装置包括电机、螺杆和螺杆套管，螺杆的一端与电机相连，另一端与卧式酶解反应器搅拌桨转轴连接。螺杆套管设有木质纤维素原料进口和酶液进口，实现木质纤维素原料和酶液的边混合边输送。在木质纤维素原料进口处设置螺杆进料单元，包括进料斗、电机、螺杆和螺杆套管等；进料斗为倒扣的锥形结构，下方出口连接螺杆进料单元的入口；螺杆进料单元的出口与木质纤维素原料进口连接。通过螺杆进料单元可以把原料自动连续打入到卧式酶解反应器前端的螺杆装置中。螺杆进料的压力可以把等体积已经酶解的混合物料从卧式酶解反应器中打入到发酵罐Ⅰ中。根据酶解的要求，卧式酶解反应器的长径比为10:1～20:1。根据酶解反应器的容积尺寸和工艺需要，搅拌桨的叶片设置成针状搅拌刺儿，搅拌刺的长度是反应器半径的0.7～0.9倍，搅拌刺的排列方式为错位排列。控制螺杆推进物料的速度以及蠕动泵流加酶液的速度，螺杆进料速度为0.1～0.5rpm，蠕动泵流加速度为1.0～3.0rpm，使所加的物料正好和所需的酶液相等时间加入卧式酶解反应器。通过螺杆进料单元和卧式酶解反应器前端的螺杆装置的共同作用实现木质纤维素原料的连续输送、混合和酶解。酶解反应器外壁设置夹层，用于控制酶解反应的温度。

本发明中，螺杆进料的压力可以把等体积已经酶解的混合物料从酶解反应器中连续打入到发酵罐Ⅰ中，然后接入产乙醇的酵母菌进行发酵。所述的酵母菌为酿酒酵母，优选为耐高温酿酒酵母，更优选酿酒酵母FE-B，来自中国石化抚顺石油化工研究院专利菌种，保藏编号为CGMCC No. 2735。在发酵罐Ⅰ中，控制同步糖化发酵的温度为30℃～38℃，优选为34～38℃，停留时间为24h～48h，优选为30h～42h，发酵过程中进行充分搅拌。在发酵罐Ⅱ中，控制同步糖化发酵的温度为39℃～44℃，更优选39℃～42℃，停留时间为48h～96h，优选68h～76h，发酵过程中进行充分搅拌。本发明采用两级同步糖化发酵，混合物料首先在相对较低温度下进行同步糖化发酵，由于温度较低，并且酶解产生的可发酵糖的浓度较高，因此酶解的效率较低，主要是酵母菌利用可发酵糖进行发酵。进入二级发酵罐后，提高温度进行同步糖化发酵，由于酶解产生的大量可发酵糖得到有效利用，消除了葡萄糖等产物的抑制，可边酶解边发酵，系统内糖浓度持续保持较低水平，既有利于酶解又不影响发酵，实现酶解和发酵的同步高效进行。同时酶解和发酵过程共同完成可减小投资成本，在提高固液比反应和增大乙醇浓度方面也比先糖化后发酵更具优越性。

本发明中，收集发酵后的混合物料进行蒸馏，蒸馏采用减压蒸馏，为了防止在蒸馏过程中对酶造成不利影响，导致酶活性丧失，控制减压蒸馏的绝对压力为20～35kPa。

本发明中，减压蒸馏后的混合物料进行固液分离，实现木质纤维素物料和蒸馏后液体的分离。通过检测液相中的酶活，并根据酶解所需要的酶加量进行稀释或补充新鲜酶液，回用于步骤（1）中。

与现有技术相比，本发明具有如下优点：

1、采用螺杆装置实现木质纤维素原料的连续输送和连续酶解，提高了酶解的效率；同时在不同温度下进行同步糖化发酵，进一步提高了酶解的效率，进而提高乙醇得率；最后得到的酶液可直接回用于酶解过程，降低了酶解的成本。本发明的整个工艺实现了木质纤维素产乙醇过程中酶解步骤的高效低成本运行，提高酶解效率和乙醇得率的同时避免酶的浪费。

2、本发明使酶解和发酵的间歇性生产模式变成连续性生产模式，连续性操作带来许多便利性，反应的控制性很好。采用连续酶解生产模式，单套生产装置的产能是传统酶解反应釜无法比拟的，通过控制酶解反应器的长径比，以及特殊的搅拌桨实现高固含量体系，使单位时间内酶解的可发酵糖更多，发酵产乙醇的量随之提高，有利于提高生产效率；而且木质纤维素原料与酶液在小直径反应器内混合，不要求过大的轴功率，因此整个装置具有节能降耗的优点。

3、通过连续将预处理物料与酶液混合，使加入的物料能与酶液混合均匀并充分接触，并且反应过程中酶浓度一直保持在较高水平，因此物料能与酶充分反应，从而有效地提高了原料的糖转化率。

4、两步糖化发酵不仅可以提高酶解效率和乙醇得率，而且可以实现乙醇的连续酶解和发酵。酶解产生的单糖被酵母及时消化,系统内单糖浓度持续保持较低水平,可达到消除葡萄糖等产物抑制的目的；同时酶解和发酵过程共同完成可减小投资成本,在提高固液比反应和增大乙醇浓度方面也比先糖化后发酵更具优越性。

附图说明

图1为本发明连续酶解发酵制乙醇的流程图；

其中：1-螺杆进料单元，2-酶解反应器，3-发酵罐Ⅰ，4-发酵罐Ⅱ，5-减压蒸馏塔，6-过滤器。

图2为螺杆进料单元和卧式酶解反应器的结构示意图；

其中，7-进料斗，8-进料电机，9-控制箱，10-进料螺杆；11-卧式酶解反应器，12-搅拌刺，13-搅拌电机，14-前端螺杆装置，15-出料口，16-水浴进口，17-水浴出口，18-酶液流加口。

图3为发酵罐Ⅰ和发酵罐Ⅱ的进出物料流程示意图。

具体实施方式

结合图1所示，首先将预处理后的木质纤维素原料（PCS）通过螺杆进料单元（1）连续加入到酶解反应器（2）中进行连续酶解，酶解后的物料连续进入发酵罐Ⅰ（3）进行一级同步糖化发酵，当发酵罐Ⅰ充满后发酵物料进入发酵罐Ⅱ（4）中进一步糖化发酵，当发酵罐Ⅱ充满后发酵物料进入减压蒸馏塔（5）进行乙醇蒸馏，蒸馏后物料进入过滤器（6）进行固液分离，含酶的滤液回用于酶解步骤中。

本发明中，如图2所示，螺杆进料单元1包括进料斗7，进料电机8，控制箱9和进料螺杆10；酶解反应器包括卧式酶解反应器11，搅拌刺12，搅拌电机13，前端螺杆装置14，出料口15，水浴进口16，水浴出口17，酶液流加口18。木质纤维素原料首先连续加入到进料斗7中，通过控制箱9控制进料电机8和进料螺杆10，将原料连续加入到前端螺杆装置14中。启动电机13，将混合物料推进卧式酶解反应器11中，并将准备好的纤维素酶液通过蠕动泵加入到卧式酶解反应器，控制好螺杆进料单元推进物料的速度以及蠕动泵流加酶液的速度，使所加的物料正好和所需的酶液相等时间加入卧式酶解反应器。搅拌刺12随螺杆同时旋转，调控螺杆的旋转速度，使进入的物料在酶解反应器中的停留时间为20～30h。已经酶解的料液进入到发酵罐Ⅰ中，将酵母菌接入发酵罐中，随着酶解的进行，发酵罐Ⅰ中的发酵液逐渐增加，当发酵液充满发酵罐Ⅰ时会流入发酵罐Ⅱ中，控制合适的发酵条件继续进行同步糖化发酵。如图3所示，酶解后的料液从发酵罐Ⅰ的底部进入，经过上部的出口流出，然后从发酵罐Ⅱ的底部进入，从发酵罐Ⅱ的上部出口流出进入蒸馏塔。

本发明中，采用的木质纤维素原料为玉米秸秆，玉米秸秆中纤维素含量为38wt%，半纤维素含量为21wt%，木质素含量为17wt%。取干燥的玉米秸秆原料机械粉碎到粒径为0.2～1.0mm之间。采用稀酸蒸爆对玉米秸秆进行预处理，条件为：2wt%硫酸，干物浓度30wt%，蒸煮温度190℃，停留时间5.5min。预处理后原料的干物浓度为45wt%，纤维素含量为37.3wt%。酶解使用的纤维素酶为诺维信酶（ctec2），滤纸酶活（FPA）137 IU/g（国际单位）。

下面结合实施例对本发明进行更详细的说明。本发明中，wt%为质量分数。干物浓度指不含水的固体总质量占处理体系总质量的百分比。

实施例1

卧式酶解反应器的体积为2.2L，长径比为11:1，搅拌刺的长度是反应器半径的0.9倍。开启螺杆进料单元，PCS随着时间的推移逐渐充满卧式酶解反应器，控制螺杆进料速度为0.16rpm，蠕动泵流加速度为1.6rpm，使所加的物料和所需的酶液相等时间加入卧式酶解反应器，并在20h内充满卧式酶解反应器。采用 20wt%干物浓度，酶加量为7IU/g纤维素干基体系，即每20h螺杆加入PCS的量为978g。酶液包括110g的1M柠檬酸缓冲液、1104g水和8g纤维素酶，pH值为5.0。酶解温度为48℃，停留时间为20h。

随着酶解的进行，螺杆推进的压力使卧式酶解器末端已经部分酶解的PCS压入到发酵罐Ⅰ中，调节发酵罐Ⅰ的温度为34℃，接入酿酒酵母FE-B开始发酵。FE-B的接种量为10%，种子培养基为YPD培养基，组成为：2%葡萄糖，2%蛋白胨和1%酵母膏，115℃灭菌30min；培养24h。发酵罐Ⅰ的有效体积为3.3L，物料在发酵罐Ⅰ中的停留时间为30h，发酵过程中进行充分搅拌。随着时间进行，物料充满发酵罐Ⅰ后会流入发酵罐Ⅱ中，调节发酵罐Ⅱ的温度为39℃，发酵过程中进行充分搅拌。发酵罐Ⅱ的有效体积为8.4L，经过76h物料会充满发酵罐Ⅱ，之后完成酶解发酵流程进入蒸馏单元。蒸馏采用减压蒸馏，控制减压蒸馏的压力为20kPa。所得的混合物料进行固液分离，得到含酶的液相通过检测其中的酶活，滤纸酶活为（FPA）67IU/g。根据所需要的酶加量，回用于酶解过程。

取样测得酶解反应器出口葡萄糖浓度为7.5wt%，发酵罐Ⅰ的出口葡萄糖浓度为0.05wt%，乙醇浓度为3.5wt%；发酵罐Ⅱ的出口取样检测葡萄糖浓度为0.04wt%，乙醇浓度为4.1wt%。最终的葡萄糖得率为95.5%，乙醇得率为90.5%。

实施例2

采用30wt%干物浓度，酶加量为7IU/g纤维素干基体系连续酶解与发酵。

开启螺杆进料单元，卧式酶解反应器的体积为2.2L，PCS随着时间的推移逐渐充满卧式酶解反应器，控制螺杆进料速度为0.1rpm，蠕动泵流加速度为1.1rpm，使所加的物料和所需的酶液相等时间加入卧式酶解反应器，并在30h内充满卧式酶解反应器，即每30h螺杆加入的PCS的量为1467g。酶液包括110g的1M的柠檬酸缓冲液、611g的水和12g纤维素酶，pH值为5.0。酶解温度为52℃，停留时间为30h。

随着酶解的进行，螺杆推进的压力使卧式酶解器末端已经部分酶解的PCS压入到发酵罐Ⅰ中，调节发酵罐Ⅰ的温度为38℃，接入酿酒酵母FE-B开始发酵。FE-B的接种量为10%，种子培养基为YPD培养基，组成为：2%葡萄糖，2%蛋白胨和1%酵母膏，115℃灭菌30min；培养24h。发酵罐Ⅰ的有效体积为3.1L，物料在发酵罐Ⅰ中的停留时间为42h，发酵过程中进行充分搅拌。随着时间进行，物料充满发酵罐Ⅰ后会流入发酵罐Ⅱ中，调节发酵罐Ⅱ的温度为42℃，发酵过程中进行充分搅拌。发酵罐Ⅱ的有效体积为5.0L，经过68h物料会充满发酵罐Ⅱ，之后完成酶解发酵流程进入蒸馏单元。蒸馏采用减压蒸馏，控制减压蒸馏的压力为35kPa。所得的混合物料进行固液分离，得到含酶的液相通过检测其中的酶活，滤纸酶活为（FPA）64 IU/g。根据所需要的酶加量，回用于酶解过程。

取样测得酶解反应器出口葡萄糖浓度为12.1wt%，发酵罐Ⅰ的出口葡萄糖浓度为0.06wt%，乙醇浓度为5.5wt%；发酵罐Ⅱ的出口取样测定葡萄糖浓度为0.05wt%，乙醇浓度为6.1wt %。最终的葡萄糖得率为94.1%，乙醇得率为89.6%。

对比例1

本对比例用于说明连续酶解发酵比批次酶解发酵更具优越性。

采用20wt%干物浓度，酶加量为7IU/g纤维素，与实施例1同样的干基体系。取978g的PCS，110g的1M柠檬酸缓冲液，1104g水和8g纤维素酶混合后进行酶解，控制酶解的温度为50℃，可调速电机转速为300rpm，预水解48h后降低温度至36℃；接入FE-B酵母菌种子液，接种量为10%，开始同步糖化发酵，实验进行时间共计126h，发酵结束后取样测定葡萄糖浓度为1.1wt%，乙醇浓度2.8wt%，葡萄糖得率为81.8%，乙醇得率为77.5%。

对比例2

本对比例用于说明采用本发明能够实现在高干物浓度下依然可以得到较高的葡萄糖得率以及乙醇产率。

采用30%干物浓度，酶加量为7IU/g纤维素，与实施例2同样的干基体系。取1467g的PCS，110g的1M柠檬酸缓冲液，611水和12g纤维素酶混合后进行酶解，控制酶解的温度为50℃，可调速电机转速为300rpm，预水解48 h后降低温度至36℃，接入FE-B酵母菌种子液，接种量为10%，开始同步糖化发酵，实验进行时间共计140h，发酵结束后取样测定葡萄糖浓度为2.1wt %，乙醇浓度2.8wt %，葡萄糖得率为69.4%，乙醇得率为75.5%。

对比例3

本对比例用于说明采用本发明的二级变温同步糖化发酵可以使酶解效率更高，乙醇产量更大。

采用与实施例1相同的工艺条件，不同之处在于：发酵罐Ⅱ温度与发酵罐Ⅰ同为36℃，进行同步糖化发酵，取样测得酶解反应器出口葡萄糖浓度为7.5%，发酵罐Ⅰ的出口葡萄糖浓度为0.05%，乙醇浓度为3.5wt %，发酵罐Ⅱ的出口取样测定葡萄糖浓度为0.05%，乙醇浓度为3.8wt %。最终的葡萄糖得率为90.5%，乙醇得率为86.1%。

Claims (12)

1.一种木质纤维素连续酶解发酵产乙醇的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将预处理木质纤维素原料与酶液按比例加入到带螺杆装置的酶解反应器中进行连续酶解；（2）酶解后物料进入发酵罐Ⅰ，接入酵母菌在30℃～38℃进行同步糖化发酵；（3）发酵罐Ⅰ的物料进入发酵罐Ⅱ，在39℃～44℃继续同步糖化发酵；（4）发酵后物料进行减压蒸馏；（5）蒸馏后物料进行固液分离，含酶的液相回用于步骤（1）中。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述的木质纤维素原料为秸秆、木屑或能源作物，机械粉碎到粒径为0.1～30mm；采用稀酸预处理、蒸汽爆破预处理或稀酸蒸爆预处理，预处理后原料的干物浓度为40wt%～60wt%。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述的酶液由柠檬酸缓冲液、水和纤维素酶组成，酶解过程中酶加量为5～20IU/g纤维素干基。

4.根据权利要求1或3所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述酶解条件为：干物浓度为5wt%～40wt%，酶解温度为45℃～55℃，停留时间为12～40h，pH值为4.5～5.5。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）所述的酶解反应器为前端带螺杆装置的卧式酶解反应器，螺杆装置包括电机、螺杆和螺杆套管，螺杆的一端与电机相连，另一端与卧式酶解反应器搅拌桨转轴连接；螺杆套管设有木质纤维素原料进口和酶液进口，实现木质纤维素原料和酶液的边混合边输送。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：在木质纤维素原料进口处设置螺杆进料单元，包括进料斗、电机、螺杆和螺杆套管等；进料斗为倒扣的锥形结构，下方出口连接螺杆进料单元的入口；螺杆进料单元的出口与木质纤维素原料进口连接；通过螺杆进料单元可以把原料自动连续打入到卧式酶解反应器前端的螺杆装置中。

7.根据权利要求1或5所述的方法，其特征在于：卧式酶解反应器的长径比为10:1～20:1。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：搅拌桨的叶片设置成针状搅拌刺儿，搅拌刺的长度是反应器半径的0.7～0.9倍，排列方式为错位排列。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：控制螺杆推进物料的速度以及蠕动泵流加酶液的速度，螺杆进料速度为0.1～0.5rpm，蠕动泵流加速度为1.0～3.0rpm。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）所述的酵母菌为酿酒酵母FE-B，来自中国石化抚顺石油化工研究院专利菌种，保藏编号为CGMCC No. 2735。

11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在发酵罐Ⅰ中，控制同步糖化发酵的温度为为34～38℃，停留时间为24h～48h；在发酵罐Ⅱ中，控制同步糖化发酵的温度为39℃～42℃，停留时间为48h～96h；发酵过程中进行充分搅拌。

12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）控制减压蒸馏的压力为20～35kPa。