CN1045962C - 吡啶并哒嗪酮或吡啶并哒嗪硫酮化合物,制备它的中间体,含它的药物组合物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明揭示了如下式的苯并或吡啶并哒嗪酮和吡啶并哒嗪硫酮或其药物上可接受的酯、醚或盐，

其中，X、Y、Z、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、详见说明书，用于作为消炎剂、平喘剂、免疫抑制剂、抗同种移植排斥、抗移植物对宿主排斥、抗自体免疫疾病剂或止痛剂。

Description

吡啶并哒嗪酮或吡啶并哒嗪硫酮化合物，制备它的中间体，含它的药物组合物及其用途

本发明涉及苯并和吡啶并哒嗪酮和哒嗪硫酮(pyridazinthiones)，用于作为消炎剂、平喘剂、免疫抑制剂、抗同种移植排斥剂、抗移植物抗宿主疾病剂、抗自体免疫剂或止痛剂，还涉及它们的中间体，它们的制法和涉及使用本发明的化合物的药物组合物。

环3′,5′-单磷酸腺苷(cAMP)调节哺乳动物的多种细胞和生理机能，例如，细胞分裂、内分泌机能、和免疫应答。cAMP的水平在一定程度上受到一类称作磷酸二酯酶的酶的控制，这类酶能催化降解cAMP。根据它们的功能，磷酸二酯酶可分为五类。例如，从人血小板细胞中分离出来的磷酸二酯酶Ⅲ(PDEⅢ)能调节血小板的凝聚。另一类磷酸二酯酶，(PDEⅣ)，系在多种细胞中发现，而它是人白细胞的主要形式。伴随着免疫应答及炎症这种酶能调节白细胞活力和功能。这两种磷酸二酯酶的控制作用是通过调节它们各自所在细胞内的cAMP的水平来实现的。这样，通过阻滞磷酸二酯酶就提供了一种调节任何由cAMP控制的细胞和身体机能的方法。

作为非特异性磷酸二酯酶抑制剂的化合物是已知的，这些化合物抑制所有或多数类型的磷酸二酯酶。[参见，Beavo,J.A.and D.H.Reifsyder,Trends in Pharm.Science,11:150-155(1990)；andNicholson,C.D.,R.A.J.Challiss and M.Shahid,Trends in Pharm,Science,12:19-27(1991).]

由于相当多的副作用，非特异性磷酸二酯酶抑制剂的价值受到限制。因为在贯穿整个身体的如此多的机能中都包括cAMP，所以非特异性磷酸二酯酶抑制剂具有潜在改变所有由cAMP调节的机能的可能。

业已惊奇地发现，某些苯并和吡啶并哒嗪酮是磷酸二酯酶Ⅳ(PDEⅣ)的有效的选择性抑制剂。这些化合物很适于用作治疗任何PDEⅣ起作用的紊乱，例如那些包括白细胞的活力或白细胞功能之处。具体地，这些化合物特别适于用作消炎剂、平喘剂、免疫抑制剂、抗同种移植排斥剂、抗移植物抗宿主疾病剂或抗自体免疫疾病制剂。

本发明一方面涉及苯并或吡啶并哒嗪酮和哒嗪硫酮，即，式Ⅰ的化合物，或其药学上可接受的酯醚或盐：

其中：

X和Y是N或C，并规定至少一个是C，而Z是O或S；

R¹是H，低级烷基，芳基，杂芳基，或杂环低级亚烷基；

R²,R³,R⁴,R⁵和R⁶分别选自H，低级烷基，卤素，羧基，烷氧基羰基，氨基甲酰基，酰基，酰卤基，硫代甲基，三氟甲基，氰基或硝基。

另一方面，本发明涉及包含治疗有效量的式Ⅰ化合物或其药物上可接受的酯或盐与至少一种药物上可接受的赋形剂相混合的药物组合物。

又另一方面，本发明涉及通过用有效量的式Ⅰ化合物或其药物上可接受的酯或盐来治疗需要治疗的哺乳动物用药，以用作消炎剂、平喘剂、免疫抑制剂，抗同种移植排斥剂、抗移植物抗宿主排斥剂、抗自体免疫剂或止痛剂。

又另一方面，本发明涉及通过对磷酸二酯酶(PDE)Ⅳ的选择性抑制治疗上述情况或疾病。

又另一方面，本发明涉及用于制备式Ⅰ化合物及其药物上可接受的盐和酯的前体，如式Ⅱ所示，或其药学上可接受的脂、醚或盐：

其中：

X和Y是N或C原子，并规定至少一个是C；

R²,R³,R⁵和R⁶分别选自H、低级烷基、卤素、羧基、烷氧基羰基，氨基甲酰基，酰基，酰卤基，硫代甲基，三氟甲基，氰基或硝基；

R⁴是H，低级烷基，碘代，溴代，氯代，羧基，酯，氨基甲酰基，酰基，酰卤基或硝基；和

R⁷是H或低级烷基。

又一方面，本发明涉及制备式Ⅰ化合物和其药物上可接受的盐和酯的制备方法。例如，式Ⅰ化合物(其中Z是O)是由式Ⅱ化合物与适当取代的肼反应制得的。或者，式Ⅰ化合物(其中Z是O)用于酮类的硫杂化剂，如，用Lacoessonn′s试剂处理，得到相应的Z是S的式Ⅰ化合物。

又一方面，本发明涉及通过式Ⅰ化合物(其中R¹是H)与适当取代的醇反应剂制备式Ⅰ化合物(其中R¹是低级烷基、芳基或杂环低级亚烷基)的方法。

又一方面，本发明提供了一种组合物，通过将其用作消炎剂、平喘剂、免疫抑制剂、抗同利移植排斥剂、抗移植物抗宿主排斥剂、抗自体免疫疾病剂、或止痛剂而用来治疗炎症、哮喘、免疫抑制同种移植排斥、移植物对宿主或自体免疫情况或疾病，或止痛。该组合物包含治疗有效量的上述式Ⅰ化合物和药物上可接受的赋形剂。

以下给出的定义用以阐明和限定用于在此描述本发明的各种术语的意义和范围。

术语“烷基”表示环状、支链或直链的一价烷基基团，具有1到24个碳原子。

术语“低级烷基”表示环状、取代环状、支链或直链的一价烷基基团，具有1到9个碳原子。该术语可进一步由以下这些基团例证，甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基甲基、异丁基、正丁基、叔丁基、戊基、环戊基、环戊基甲基、正己基、环己基、环己基甲基、环己基乙基、正庚基、环庚基、环庚基甲基或环庚基乙基。

术语“低级烷氧基”表示-O-R′基团，其中R′是低级烷基。

术语“羧基”表示-C(O)OH基团。

术语“烷氧基羰基”表示-C(O)OR基团，其中R是烷基。

术语“酰卤基”表示-C(O)X基团，其中X是卤素。

术语“氨基甲酰基”表示-C(O)NR′R″，其中R′和R″分别是H或低级烷基。

术语“芳基”表示一价不饱和芳香碳环基团，具有一个单环(如，苯基)或两个稠环(如，萘基)，可任意分别被羟基(酚基)、低级烷基(亚苄基或苄基)、低级烷氧基、氯、氟、三氟甲基、氨基甲酰基、硝基和/或氰基一、二、三、四或五取代。

术语“低级亚烷基”表示含1到6个碳原子的分支或不分支的饱和的具有的双游离基的烃链，如亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚异丙基和亚丁基。

术语“杂芳基”表示含有1到4个，较好是1到3个，相同或不同的杂原子如N、O或S的5或6员环。典型的例子是：吡啶基、吡啶基-N-氧化物、噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡咯烷基、咪唑基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、吡唑基、吡啶酮基(pyridonyl)等等。

术语“卤素”指F、Br、Cl、I。

术语“杂环”指饱和、不饱和或芳香的一价单或多碳环基团，这些基团具有至少一个杂原子(如N、O或S)或合并具有，可任意分别被例如羟基、氨基、亚氨基、低级烷基、低级烷氧基、羧基、氨基甲酰基、酰基、酰卤基、芳基、卤素、和/或氰基取代。而且该术语也包括在杂环中有一个原子被氧化的情况，例如，N-氧化物、亚砜化物、砜化物、或氧代化物。例如，典型的具有一个或多个N或S原子的杂环是吡咯、咪唑、咪唑啉、咪唑烷(inidazolidine)、吡唑、吡嗪、吡咯烷、吡咯烷酮、吡唑烷、哌啶、哌嗪、吗啉、吡啶、吡啶酮、三唑、噁唑、噁二唑(oxadiazole)、噻唑等等。

术语“杂环低级亚烷基”指杂环-R-基团，其中杂环如上定义，而R代表如前定义的低级亚烷基。典型的杂环低级亚烷基基团是，例如，4-吡啶基甲基、3-吡啶基乙基、2-吡啶基乙基、2-吡啶基丙基、3-噻吩基甲基、或2-噻吩基乙基。

术语“N-氧化物”指含氮杂环环上的N原子是被氧化的，例如，4-吡啶基-N-氧化物、3-吡啶基-N-氧化物、或2-吡啶基-N-氧化物。

术语“酯化试剂”指一种试剂(如，重氮甲烷、甲醇、碘甲烷、碘乙烷或乙醇)，当与羧基基团接触结果能形成相应的烷氧基羰基基团。

术语“烷基化试剂”指卤素取代的烷基、芳基或杂环化合物(例如，碘乙烷、2-碘丙烷、碘丁烷、碘戊烷、4-吡啶甲基氯、3-吡啶甲基氯或苄基溴)，在碱存在下，可将烷基、芳基或杂环部分接到氮原子上。

术语“化合物”，在用于关于式Ⅰ化合物的详细描述中时，大多指该化合物的药物上可接受的盐、酯或醚，除非另外明确指出，例如“游离碱形式的式Ⅰ化合物”。

术语“药物上可接受的盐”指任何从无机或有机酸或碱得到的盐。术语“药学上可接受的阴离子”指这类酸加成盐的阴离子。术语“药学上可接受的阳离子”指这类碱加成盐的阳离子。该盐、阴离子和/或阳离子选择那些不是生物学上或其它不希望有的。

阴离子来自无机酸，如盐酸、氢溴酸、硫酸(得到硫酸盐和硫酸氢盐)、硝酸、磷酸等等，以及有机酸如乙酸、丙酸、己酸、庚酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、邻-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、苯磺酸、对氯苯磺酸、2-萘磺酸、肉桂酸、扁桃酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、1,2-乙烷二磺酸，2-羟乙烷磺酸、水杨酸、对甲苯磺酸等等。

阳离子来自碱，如碱土金属氢氧化物，包括氢氧化钙，氢氧化钾，碳酸钾，氢氧化钠，氢化钠，氢氧化锂等，较好是氢氧化钠。

术语“药物上可接受的酯”和“药物上可接受的醚”指那些式Ⅰ的化合物，其中氧或氮已被修饰的，如通过加成上-C(=O)-W基团而酰化的，其中W是一个含1到20个碳原子的烷基基团，包括金钢烷基、芳基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、一个含1到20个碳原子的烷氧基基团，-CH₂-O-CH₃，或-CH₂-NH₂。本发明期望那些式Ⅰ的化合物是在此所述的酯，同时也是其药物上可接受的加成盐。

术语“惰性有机溶剂”或“惰性溶剂”指一种后面所述的反应条件下是惰性的[例如，包括苯、甲苯、乙腈、四氢呋喃(“THF”)、二甲基甲酰胺(“DMF”)、氯仿、亚甲基氯(或称二氯甲烷)、乙醚、吡啶等等]。除非特别注明例外情况，用于本发明的反应中的溶剂是惰性有机溶剂。

如在此所用的，术语“自体免疫疾病”指紊乱失调，其时，哺乳动物的免疫系统建立了一个对哺乳动物自身组织或对本身并不固有地伤害哺乳动物的抗原剂的体液或细胞的免疫应答，从而造成该哺乳动物的组织伤害。这种紊乱的例子包括全身性红斑狼疮、类风湿性关节炎和Ⅰ型糖尿糖，但并不限于此。

如在此所用的，术语“同种移植排斥”指在哺乳动物接受了组织不相容的另一同类哺乳动物的移植组织后其免疫系统建立了体液或细胞的免疫应答，从而造成该哺乳动物的组织伤害。

如在此所用的，术语“移植物抗宿主疾病”指源于组织移植的免疫应答，特别是移植的骨髓组织。它直接影宿主组织，从而造成宿主组织伤害。

如在此所用的，术语“治疗”或“进行治疗”指对哺乳动物疾病的任何治疗，包括：

(ⅰ)预防出现状况或疾病，即，避免疾病的任何临床症状；

(ⅱ)抑制出现的状况或疾病，即，阻止临床症状的发展和进行；和/或

(ⅲ)缓解出现的状况或疾病，即，引起临床症状的消退。

如在此所用的，术语“治疗有效量”指式Ⅰ化合物的量，当对需要的哺乳动物给药时，足以有效地治疗(如上定义)，作为一种消炎剂、平喘剂、免疫抑制剂、抗同种移植排斥剂、抗移植物抗宿主疾病剂、抗自体免疫疾病剂或止痛剂。怎样的量能成为“治疗有效量”依化合物、病况及其严重程度、和所要治疗的哺乳动物而不同，但是这对该领域内的普通技术人员结合他自己的知识与本发明所揭示的内容，是可以按常规方法决定的。

如在此所用的，术语“q.s.”指数量增加到足以达到一个固定的值，例如，使一溶液达到预期的体积(如100ml)。

除非特别注明例外的情况，在此所述的反应是在大气压力下在约-100℃到200℃温度范围内，更好是约10℃到50℃，最好是在约室温(或称“环境温度”)，如约20℃下进行。

在此所述的化合物或中间体的分离和纯化是能实现的，如果需要的话，可通过任何合适的分离或纯化步骤，例如，过滤、萃取、结晶、柱色谱层析、制备型高压液相色谱(制备型HPLC)、薄层层析色谱或厚层层析色谱、或者这些方法的结合。合适的分离方法的具体说明可参考后文的实施例。但是，当然也能采用其它相当的分离方法。化合物的命名

由于本发明的化合物包含吡啶并哒嗪酮环部分，其中X是N，Y是C，而Z是O(即，吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮化合物)，所以可采用以下编号体系：所代表的化合物在以下例子中命名。

式Ⅰ化合物，其中X是N,Y是C,Z是O,R¹是吡啶基甲基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是H，可命名为6-(4-吡啶基甲基)-8-苯基吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮。

式Ⅰ化合物，其中X是N,Y是C,Z是O,R¹是4-吡啶基-N-氧化物-甲基，R³是Cl,R²、R⁴、R⁵和R⁶是H，可命名为6-(4-吡啶基-N-氧化物-甲基)-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮。

式Ⅰ化合物，其中X是N,Y是C,Z是S,R¹是苄基，R³是Cl,R²、R⁴、R⁵和R⁶是H，可命名为6-苄基-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-硫酮。

由于本发明的化合物包含吡啶并哒嗪酮环部分，其中X是C，Y是N，而Z是O(即，吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮化合物)，故采用以下编号体系：式Ⅰ化合物，其中X是C,Y是N,Z是O,R¹是苄基，R³是硝基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是H，可命名为7-苄基-5(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

由于本发明的化合物包含苯并哒嗪酮环部分(即，式Ⅰ化合物，其中X和Y是C原子，而Z是O)，故采用以下编号体系：

式Ⅰ化合物，其中X和Y是C,Z是O,R¹是4-吡啶基-N-氧化物-甲基，R³是Cl,R²、R⁴、R⁵和R⁶是H，可命名为4-(3-氯苯基)-2-(4-吡啶基-N-氧化物-甲基)-1-(2H)-2,3-二氮杂萘酮。式Ⅰ和式Ⅱ化合物的合成

参考反应流程A的描述合成式Ⅰ和式Ⅱ的化合物。如反应流程A中所用的，X和Y是N或C原子，并规定至少其中一个是C原子，而Z是O。R¹是H、低级烷基、芳基、杂芳基或杂环低级亚烷基；而R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶分别选自H、低级烷基、卤素、羧基、烷氧基羰基、氨基甲酰基、酰基、酰卤基、硫代甲基、三氟甲基、氰基或硝基。

反应流程A说明了新颖的苯并或吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中X是N,Y是C，和Z是O)和相应的中间体苯并或吡啶并芳基酮酯(式Ⅱ)的制备。

反应流程B说明了用有机锂、有机镉或格氏试剂制备中间体苯并或吡啶并芳基酮酯(式Ⅱ，其中X和Y是C或N，并规定其中至少一个为C)。

反应流程C说明了另一种从苯并或吡啶并哒嗪其中R¹是H制备新颖的苯并或吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中Z是O)。

反应流程D说明了中间体苯并或吡啶并芳基酮酯(式Ⅱ，其中X和Y是C或N，并规定至少其中一个是C，和R³是硝基)的制备。

反应流程E说明了从吡啶并哒嗪(式Ⅰ)其中R¹是H制备新颖的吡啶基-N-氧化物-甲基取代的吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ)。

反应流程F和G说明新颖的任意取代的式Ⅰ化合物的交替的制备方法，其中X是N,Y是C,Z是O，和R¹是H。

反应机理F中所示的是任意取代的硝基苯基杂芳基杂原子-氧化物吡啶并哒嗪酮的制备(式Ⅰ化合物，其中X是N,Y是C,Z是O,R¹是杂芳基杂原子-氧化物，和R³是硝基)。

反应机理G中所示的是任意取代的氯苯基杂芳基杂原子-氧化物吡啶并哒嗪酮的制备(式Ⅰ，其中X是N,Y是C,Z是O,R¹是杂芳基杂原子-氧化物，和R³是Cl)。

                   反应流程A

其中R¹是芳基，和杂芳基起始物质

关于反应流程A，大多数式1化合物可从市场上购得，AldrichChemicals和ICN出品。同样，许多取代的肼(式7)可从市场购得，Aldrich Chemicals出品，那些不能购得的，可按S.R.Sandler andW.Karo.“Organic Functional group Preparations”2nd Ed.1983,Vol12-Ⅰ,Acadenic Press,New York所揭示的内容制备。式2的制备

将苯基或吡啶并二羧酸酐(式1)溶于溶剂中[如，一种醇(甲醇或乙醇)，较好是甲醇]并加热约2到20分钟，较好为约10分钟，温度为约80到120℃，较好为约100℃。直接得到产物可用于下一步，不必纯化。式4的制备

将任意取代的苯基或吡啶基酸酯(式2)加入约5.0mol当量的任意取代的苯甲醛(式3)和约5mol当量的溶剂中，如对异丙基苯甲烷、二溴苯、硝基甲苯、溴代苯甲醚或二甲苯，较好是对异丙基苯甲烷。混合物在约150℃到210℃，较好是约180℃加热2到6小时，较好是4小时。将溶液冷却，除去过量的苯甲醛和溶剂，得到所需的任意取代的苯并或吡啶并内酯(式4化合物)。所需化合物可用硅胶层析色谱法或类似方法纯化，但是，较好的是所需化合物不经纯化直接用于下一步。式5的制备

将任意取代的苯并或吡啶并内酯(式4)悬浮在碱溶液中(如，在溶剂如甲醇或乙醇中的KOH、NaOH或NH₄OH，较好的是KOH在甲醇中，比例为约4.5g/100ml)并回流约3到9小时，较好为6小时。冷却混合物并除去溶剂得苯基或吡啶基苯甲基羟基酸(式5)。式6的制备

将苯基或吡啶基苯甲基羟基酸(式5)悬浮在对氧化剂惰性的溶剂中(如，二氯甲烷、氯仿或四氯化碳，较好是二氯甲烷)。向该溶液加入约1.0mol当量的氧化剂，如重铬酸吡啶鎓、氯铬酸吡啶鎓或二氧化锰，较好是重铬酸吡啶鎓。溶液在约0℃到50℃温度范围，较好是约21℃(室温)下搅拌约9到27小时，较好是18小时，得到所需的任意取代的苯基或吡啶基苯甲酸(式6)。所需产物可分离纯化，但较好的是不经纯化而直接用于下一步。式Ⅱ的制备

将苯基或吡啶基苯甲酸(式6)溶于溶剂中(如二氯甲烷、氯仿或四氯化碳，较好是二氯甲烷)并冷却至约-20℃到20℃温度范围，较好是约0℃。向溶液加入约1.2mol当量酯化试剂，如重氮甲烷，并搅拌约1到5小时，较好用TLC监测反应终点(约2小时)。通过除去溶剂然后用层析色谱法分离并纯化所需的任意取代的苯基或啶啶基苯甲酰酯(式Ⅱ)。

或者，任意取代的苯基或吡啶基苯甲酰酯(式Ⅱ)可通过将适当取代的苯基或吡啶基苯甲酸(式6)溶于溶剂中(如，甲醇、乙醇或类似的，较好是甲醇)并向其中加入约1mol当量的强酸(如，浓H₂SO₄,HCl气体)，BF₃Et₂O，较好是浓H₂SO₄)而制备。在所用溶剂的回流温度下搅拌溶液约6到30小时，较好是约18小时。将溶液冷却并碱化。所需的任意取代的苯基或吡啶基苯甲酰酯(式Ⅱ)或通过层析色谱法分离和纯化。

如已指出过的，所需化合物可用硅胶色谱层析法或类似方法纯化，但是，较好的是所需化合物无需进一步纯化而直接用于下一步。式Ⅰ的制备

将任意取代的苯基或吡啶基苯甲酰酯(式Ⅱ)悬浮在溶剂中(约15ml/mmol)(如，乙醇、甲醇或类似的，较好是乙醇)。向该悬浮液加入约2mol当量的非取代或取代的肼(式7，其中R¹是H、低级烷基、芳基、杂芳基、杂环低级亚烷基)。将混合物回流约4到240小时。具体时间依赖于肼的取代基(即，R¹)。较好地用TLC监测反应终点。让混合物冷却并过滤，得到粗产物。用萃取法和色谱层析法纯化和分离所需的苯并或吡啶并苯甲酰哒嗪酮(式Ⅰ)。

其它的任意取代的式Ⅰ化合物是通过将适当取代的式Ⅰ化合物，其中R¹是H，悬浮在溶剂中(约10到100ml/mmol)制备的。向该悬浮液加入约1到20mol当量合适的碱(如，氢化钠、碳酸钾、碘化钾)和约1到20mol当量的合适的烷基化试剂(如，碘乙烷、4-吡啶甲基氯，2-碘丙烷)。混合物在惰性气氛下回流约6到48小时，较好是约18小时，最好用TLC监测反应终点。将混合物冷却并用标准色谱技术纯化，得到所需的苯并和吡啶并苯甲酰哒嗪酮(式Ⅰ)。

                       反应流程B

式Ⅱ的另一种制备

或者，式Ⅱ的化合物可用有机锂或有机镉试剂，如“芳甲酰苯甲酸的制取，苯二甲酸酐和芳基锂的反应”(“Preparation of Aroyl-benzoic Acid.Reaction of Aryllithium Reagents with Phthalic An-hydride”),J.Organic Chem.,41(7),1268(1976)所阐述的，或用格氏试剂制备。

反应流程B(其中M是Mg)说明了格氏试剂的制法。格氏试剂的制备可通过向任意取代的卤化芳基化合物(式8)在溶剂(如，四氢呋喃或乙醚，较好是四氢呋喃)的溶液中加入约1mol当量的镁，然后在惰性气氛下搅拌12到24小时，较好是18小时，温度为约0℃到50℃，较好是室温并在惰性气体气氛下。并在约0℃到-150℃，较好是-78。，将格氏试剂(式8)在2小时内逐渐加入至在溶剂(如四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿或乙醚，较好是四氢呋喃)中的苯基或吡啶基二羧酸酐(式1)中。加完后，搅拌溶液约15到75分钟，较好是45分钟。向溶液中加入摩尔数稍过量的酸(如，1NHCl)并搅拌约1小时。当式1为吡啶并二羧酸酐时(即，其中X或Y是N)，结果制得式6的两个位置异构体，即，式6a和式6b。依照所需产物，即，式Ⅰ其中X是N和Y是C，或式Ⅰ其中X是C和Y是N，分离和纯化合适的式6的异构体(式6a或6b)，并作为式6化合物用于以后的制备。式Ⅱ的制备

任意取代的苯基或吡啶基苯甲酰酯(式Ⅱ)可由苯基或吡啶基苯甲酸(式6)按已经提出的反应流程A给出的步骤制备。

                   反应流程C

式Ⅰ，其中R¹是H    式Ⅰ制备式Ⅰ，其中R¹是低级烷基、芳基或杂环

或者，任意取代的苯并或吡啶并哒嗪酮化合物(式Ⅰ，其中R¹是低级烷基、芳基、杂芳基、或杂环低级亚烷基)可由苯并或吡啶并哒嗪化合物(式Ⅰ)其中R¹是H，按Mitsunobu反应条件，如，O.Mit-sunobu,Synthesis,1,1981(引用在此作为参考)的说明来制备。

向苯并或吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ)其中R¹是H在溶剂中(如，四氢呋喃、乙醚、二噁烷，较好是四氢呋喃)的悬浮液加入约1mol当量的任意取代的醇(式9，其中R¹是低级烷基、芳基、杂芳基、或杂环低级亚烷基)和约1.5mol当量的三取代膦，较好是三苯基膦。向该溶液逐渐加入约1.5mol当量的二取代的偶氮二羧酸酯，如偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)或偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)，较好是一般用偶氮二羧酸二异丙酯。在约0℃到50℃，较好是约21℃(室温)下，搅拌该溶液约12到24小时，较好是18小时。除去溶剂，用色谱法分离和纯化所需的任意取代的苯并或吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中R¹是低级烷基、芳基、杂芳基或杂环低级亚烷基)。

                      反应流程D

制备式Ⅱ，其中X是C和Y是Z

按照美国专利4,806,535的方法可制备吡啶基苯基酮酯(即，式Ⅱ，其中X和Y是C或N，并规定至少一个是C，而R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是H)。制备式Ⅱ，其中X是C,Y是N和R³是硝基

吡啶基(3-硝基苯甲酰)酮酯(式Ⅱ，其中X是C,Y是N和R³是硝基)制备如下：将在酸中(如盐酸、硝酸、硫酸，较好是硫酸)的吡啶基苯基酮酯滴加入硝酸和硫酸的溶液中(约1到3mol当量的硝酸与对每mol当量硝酸的2ml硫酸)。溶液搅拌约10到60分钟，较好是30分钟，冷却并调节pH值至约7到8。除去溶剂，用色谱法分离和纯化所需的任意取代的苯并或吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中X是C,Y是N和R³是硝基)。制备式Ⅰ的盐

式Ⅰ的药物上可接受的盐制备如下：将式Ⅰ化合物溶于合适的溶剂中(如甲醇)，在搅拌下加入1到3mol当量(较好是约2mol当量)的合适的酸(如盐酸)或碱(如碱土金属氢氧化物，如，Li-OH、Ca(OH)₂、KOH、NaOH，较好是NaOH)。冷却干燥或沉淀分离出盐，所用技术对技术熟练者是容易理解的。

                    反应流程E

       式Ⅰ，其中R¹是H                    式Ⅰ ，其中R¹是

                                               N-氧化物杂环芳基制备式Ⅰ，其中R¹是吡啶-N-氧化物-烷基

任意取代的吡啶基-N-氧化物-烷基吡啶并哒嗪酮可按Mit-sunobu条件制备，如O.Mitsunobu,Synthesis,1,1981中所说明的，引用在此作为参考。将任意取代的吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ)，其中R¹是H，混合入约1.1mol当量任意取代的吡啶基甲醇N-氧化物、约1.5mol当量三苯基膦在溶剂中(如，四氢呋喃、乙醚、二噁烷，较好是四氢呋喃)的悬浮液中。在12到36℃，较好在约24℃，将悬浮液搅拌约12到24小时，较好是约18小时。除去溶剂，分离出所需的任意取代的吡啶基-N-氧化物-烷基吡啶并哒嗪酮，采用色谱层析法，如，用100％乙酸乙酯洗脱，然后采用10％的甲醇/乙酸乙酯或类似的溶剂体系。

           反应流程F

              式Ⅰ，其中

              R¹是H和

              R³是硝基

                                    式Ⅰ，其中R⁸是杂芳基和

                                     R³是硝基式Ⅰ，其中R⁸是杂芳基              式Ⅰ，其中R⁶是杂芳基杂原子-

                  ----------→R³是硝基                          氧化物和R³是硝基制备式11化合物

将吡啶并二羧酸酐(式1，其中X是N和Y是C)悬浮于溶剂中(如甲苯、乙酸乙酯、四氢呋喃，较好是乙酸乙酯)并加入伯胺(式10，其中R⁷是低级烷基，如，乙基、丙基、丁基、己基、或正丁基，较好是正丁基)。温度保持在约-10℃到80℃，较好是在室温。经过约10分钟到24小时后，较好是1小时，加入脱水剂(如，乙酸酐、三氟乙酸酐、五氧化二磷、亚硫酰氯，较好是亚硫酰氯)。温合物温度保持在约0℃到80℃(依赖于脱水剂)，保持约30分钟到4小时，较好是约1小时。用层析色谱法或结晶法分离出所得的吡啶并酰亚胺(式11，其中X是N,Y是C和R⁷是低级烷基)，较好是用结晶法。制备式13的化合物

将吡啶并酰亚胺(式11)溶于对格氏试剂和有机锂试剂惰性的溶剂中(如，四氢呋喃、乙醚、甲苯，较好是甲苯)并冷却至约-100℃至室温，较好是-65℃。以使溶液内部温度保持在约-78℃到室温，较好是约-45℃的速率加入约0.5到3.0mol当量，较好是约1.0mol当量的在四氢呋喃或乙醚，较好是四氢呋喃中的任意取代的苯基格氏试剂或任意取代的苯基有机锂试剂，较好是任意取代的苯基格氏试剂(式8)。过约10分钟到5小时，较好是约30分钟，用稀盐酸、稀醋酸、氯化铵水溶液、稀硫酸或类似物，较好是氯化铵水溶液骤冷以终止反应。所得的苯基吡啶并内酰胺化合物(式13，其中X是N,Y是C,R⁷是低级烷基，和R³是H)可用层析色谱、结晶分离，或者用作下一步的粗混合物，较好的是用结晶法分离出产物。制备式14的化合物，其中R³是硝基

将苯基吡啶并内酰胺化合物(式13)悬浮于硫酸中并冷却至约-10℃到40℃，较好是室温。以使温度保持低于约60℃，较好是低于约45℃的温度加入硝酸。加入硝酸后，将混合物搅拌约10分钟到6小时，较好是约30分钟。然后将混合物加入水中并用与水不混溶的溶剂萃取(如，乙醚、乙酸乙酯、甲苯、二氯甲烷，较好是乙酸乙酯)。所得任意取代硝基苯基吡啶并内酰胺化合物(式14，其中X是N，Y是C，和R³是硝基)可用色谱法、结晶法分离或较好是直接用于下一步。制备式15的化合物，其中R³是硝基

将先前制得的任意取代的硝基苯基吡啶并内酰胺化合物(式14)溶于或悬浮于约2到6mol当量，较好是约3mol当量的稀酸中(如，盐酸、氢溴酸、硫酸，较好是盐酸)，并加热回流约4到48小时，较好是约24小时。任意取代的硝基苯基吡啶并内酰胺化合物(式15，其中X是N,Y是C，和R³是硝基)可由过滤或中和萃取之后结晶或层析色谱分离，较好是用过滤。制备式Ⅰ化合物，其中R¹是氢和R³是硝基

将任意取代的硝基苯基吡啶并内酰胺化合物(式15)与惰性的且可与肼混溶的溶剂混合(如，甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺，较好是甲醇)，并加热至约室温到80℃，较好是约65℃。搅拌反应约1到24小时，较好是约18小时后，过滤分离出任意取代的硝基苯基吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中X是N,Y是C,Z是O,R¹是H，和R³是硝基)。制备式Ⅰ化合物，其中R¹是杂芳基和R³是硝基

将任意取代的硝基苯基吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中X是N,Y是C,R¹是H和R³是硝基)溶于非质子传递溶剂中(如，四氢呋喃、二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，较好是二甲基甲酰胺)，并用碱处理(如，氢化钠、氢化钾，较好是氢化钠)。所得溶液加热至约室温到95℃，较好是约65℃。加入约1.2mol当量的任意取代的芳基或杂芳基烷基化试剂(式16，其中R⁸是杂芳基)。所得任意取代的硝基苯基杂芳基吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中X是N,Y是C,Z是O,R¹是杂芳基，和R³是硝基)用结晶法或色谱法分离，较好是结晶法。制备式Ⅰ化合物，其中R¹是杂芳基杂原子-氧化物和R³是硝基

将任意取代的硝基苯基杂芳基吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中X是N,Y是C,R¹是杂芳基和R³是硝基)溶于可与过氧酸相容的溶剂中(如乙酸乙酯、甲苯、二氯甲烷、乙酸，较好是二氯甲烷)，并加入过氧酸(如，间氯过氧苯甲酸、过氧乙酸、三氟过氧乙酸、单过氧邻苯二甲酸镁，较好是间氯过氧苯甲酸)。所得混合物在约0℃到50℃，较好是室温下搅拌约1到48小时，较好是约18小时。所得任意取代的硝基苯基杂芳基杂原子-氧化物吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中X是N,Y是C,Z是O,R¹是杂芳基杂原子-氧化物和R³是硝基)用结晶法或层析色谱法分离，较好是用结晶法。

                      反应流程G

            式Ⅰ，其中R¹是H和

             R³是Cl

                                        式Ⅰ，其中R⁸是杂芳基

                                        和R³是Cl

式Ⅰ，其中R⁸是杂芳基                   式Ⅰ，其中R⁸是杂芳基杂原子-

                  -------------→

  R³是Cl                               氧化物和R³是Cl制备式18化合物，其中R³是Cl

按照反应流程F给出的制备式13的步骤制备任意取代的间氯苯基吡啶并内酰胺。用任意取代的间氯格氏试剂或有机锂试剂(式17)替代式12，得到所需的任意取代的问氯苯基吡啶并内酰胺(式18，其中X是N,Y是C和R³是Cl)。制备式19的化合物，其中R³是Cl

按反应流程F给出的制备式15的步骤制备任意取代的间氯苯基吡啶并内酯(式19，其中R³是Cl)制备式Ⅰ的化合物，其中R¹是H和R³是Cl

按反应流程F给出的制备式Ⅰ其中R¹是H和R³是硝基的步骤制备任意取代的间氯苯基吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中R¹是H和R³是Cl)。制备式Ⅰ化合物，其中R¹是杂芳基和R³是Cl

按反应流程F给出的制备式Ⅰ其中R¹是杂芳基和R³是硝基的步骤制备任意取代的间氯苯基杂芳基吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中R¹是杂芳基和R³是Cl)。制备式Ⅰ化合物，其中R¹是杂芳基杂原子-氧化物和R³是Cl

按反应流程F给出的制备式Ⅰ其中R¹是杂芳基杂原子-氧化物和R³是硝基和步骤制备任意取代的间氯苯基杂芳基杂原-氧化物吡啶并哒嗪酮(式Ⅰ，其中R¹是杂芳基和R³是Cl)。优选的化合物

目前优选的是其中X是N,Y是C,Z是O,R³是Cl或硝基和R¹是乙基、2-丙基、4-吡啶基甲基、4-吡啶基-N-氧化物-甲基、3-吡啶基甲基、3-吡啶基-N-氧化物-甲基、苄基、3-噻吩基甲基或环戊基甲基的式Ⅰ化合物。

优选的是其中R³是Cl和R¹是乙基、4-吡啶基甲基、4-吡啶基-N-氧化物-甲基、3-吡啶基甲基、3-吡啶基-N-氧化物-甲基、苄基或3-噻吩基甲基的式Ⅰ的化合物；

特别是其中R²、R⁴、R⁵和R⁶是H的化合物。

相似的优选的是其中R³是硝基和R¹是4-吡啶基甲基、4-吡啶基-N-氧化物-甲基、3-吡啶基甲基、3-吡啶基-N-氧化-甲基、苄基、3-噻吩基甲基、2-丙基或环戊基的式Ⅰ的化合物；

特别是其中R²、R⁴、R⁵和R⁶是H的化合物。

最优选的化合物是6-(4-吡啶基甲基)-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-(4-吡啶基-N-氧化物-甲基)-8-(3-硝基苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-(3-吡啶基甲基)-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-(3-吡啶基-N-氧化物-甲基)-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-苄基-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-乙基-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮和6-(3-噻吩基甲基)-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮。同样最优选的化合物是6-(4-吡啶基甲基)-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-(4-吡啶基-N-氧化物-甲基)-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-(3-吡啶基甲基)-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-(3-吡啶基甲基)-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-苄基-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-(2-丙基)-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，6-环戊基-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，和6-(3-噻吩基甲基)-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮。优选的方法和最后步骤

制造任意取代的吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮、吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮或苯并哒嗪-1-酮化合物的优选方法必须使适当取代的2-苯甲酰基-3-甲氧基羰基吡啶与适当取代的肼接触。

制备任意取代的2-苯甲酰基-3-甲氧基羰基吡啶的优选的方法必须使适当取代的2-苯甲酰基-3-羧基吡啶与酯化试剂接触。

制备任意取代的2-苯甲酰基-3-羧基吡啶的优选的方法必须使适当取代的苯并或吡啶并二羧酸酐与适当取代的格氏试剂接触。

制备6-取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮的优选的方法必须使6-非取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮与适当的碱接触，然后加入烷基化试剂。

制备7-取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮的优选的方法必须使7-非取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮与适当的碱接触，然后加入烷基化试剂。

制备2-取代苯并哒嗪-1-酮的优选的方法必须使2-非取代的苯并哒嗪-1-酮与适当的碱接触，然后加入烷基化试剂。

制备6-取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮的优选的方法必须使6-非取代的吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮化合物与适当取代的醇和三苯基膦接触，然后与偶氮二羧酸二异丙酯反应(即，Mitsunobu反应条件)。

制造7-取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮的优选的方法必须使7-非取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮化合物与适当取代的醇和三苯基膦接触，然后与偶氮二羧酸二异丙酯反应(即，Mitsunobu反应条件)。

制备2-取代苯并哒嗪-1-酮的优选的方法必须使2-非取代苯并哒嗪-1-酮化合物与适当取代的醇和二苯基磷接触，然后与偶氮二羧酸二异丙酯反应(即，Mitsunobu反应条件)。

制备6-取代的吡啶并N-氧化物烷基[2,3-d]哒嗪-5-酮的优选的方法必须使6-非取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮化合物悬浮于适当取代的吡啶基甲醇N-氧化物和三苯基膦中，然后接触偶氮二羧酸二异丙酯(即，Mitsunobu反应条件)。

制造7-取代的吡啶并-N-氧化物-烷基[2,3-d]哒嗪-8-酮的优选的方法必须使7-非取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮化合物悬浮于适于取代的吡啶基甲醇N-氧化物和三苯基膦中，然后接触偶氮二羧酸二异丙酯(即，Mitsunobu反应条件)。

将6,8-二取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮转变成相应的6,8-二取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-硫酮的优选的制备方法必须用使酮硫化的试剂(如Lawesson′s试剂或五硫化二磷)在适当的溶剂中，较好是在回流下处理6,8-二取代吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮。使用、测试和给药一般使用

本发明的化合物，包括其药物上可接受的盐和酯，以及包含它们的组合物，特别用作消炎剂、平喘剂、免疫抑制剂，抗同种移植排斥剂，抗移植物抗宿主疾病剂、抗自体免疫疾病剂或止痛剂。本发明的化合物是PDE Ⅳ选择性抑制剂，因而能调节cAMP水平。这样，这些化合物可用作治疗由白细胞cAMP调节的状况或疾病。

例如，炎症、免疫抑制、自体免抑疾病、移植物抗宿主疾病和同种移植排斥是由淋巴细胞增生表现出的状况。增生是由特定水平的cAMP的存在而触发的。淋巴细胞增长的抑制系伴随着由于淋巴细胞磷酸二酯酶的抑制而引起的cAMP水平的增加。测试

作为PDEⅣ抑制剂的化合物的效力和选择性由以下测定，例如，实施例46所述的方法或其改进。

本发明化合物的免疾调节和消炎活性可用多种体外和体内测试方法测定。

对促有丝分裂刺激引起的淋巴细胞增生的抑制可由Greaves,et al.[“Activation of human T and B Lymphocytes by polyclondmitogens，”(用多克隆促有丝分裂剂活化人类T及B淋巴细胞)，Nature,248,698-701(1974)]所述的方法或其改进来测定(参见，实施例48)。

淋巴细胞的活化随之而来的抗原性激发的免疫应答的抑制，可按Wunderlich,et al.,Nature(1970),Vol,228,P.62描述的对溶细胞的T-细胞的抑制作用的测试方法或其改进来进行体外测定。

免疫调节可按Jerne Hemolytic Plaque Assay[Jerne,et al.,“The agar plaque technique for recognizing antiobody,producingcells,”Cell-bound Antibodies,Amos,B.and Kaprowski,H.edi-tors(Wistar Institute Press,Philadelphia)1963,p.109]，或其改进来测定(参见实施例47)。

消炎活性可由Arachidonic Acid-Induced Mouse,Ear EdemaAssay[Young,et al.,J.Invest.Derm.,82:367-371(1984)]测定(参见实施例49)。

止痛活性可按Phenylquinone-induced Mouse Writhing Assay[Hendershot,et al.,J.Pharmacol.Exp,Ther.,125:237-240(1959)]测定。给药

本发明的化合物以治疗有效剂量给药，即，当对需要的哺乳动物给药，该量足以效治疗，如上所述(例如，减轻或其它治疗哺乳动物的炎症、疼痛和/或发热)。在此所述的活性化合物或盐可以以任何可接受的习用的剂型给药。

配方中的药物含量可在技术熟练者的采用的全部范围内变动，如，对配方物总量的从约0.01重量百分比(％w)到约99.99％w的药物和约0.01％w到99.99％w的赋形剂。较好的是药物存在量为约10％w到约70％w。

通常，可接受的日剂量为每天每千克受药者体重约0.0001到150mg，较好是每天每千克体重约0.01到75mg，而最好是每天每千克体重约0.1到30mg。这样，对70kg的人给药，剂量将每天约0.007mg到10.5g，较好是每天约0.7mg到5.25g，而最好是每天约7.0mg到2.1g。

给药可通过任可接受的全身性或局部途径，例如，经非肠道、口服(特别对婴儿配方)、静脉、经鼻、经皮或表面途径，以固体、半固体或液体剂型的形式，例如，片剂、栓剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、溶液、悬浮液、气雾剂、乳剂或类似的，较好是便于给药的精确的单位剂量形式。组合物可包括常规的药物载体或赋形剂和式Ⅰ的活性化合物，另外，也可包括其它的药剂(medicinal agents)、制药用药剂(pharmaceutical agents)、载体、辅剂等等。载体可选自多种油，包括那些来自石油、矿物油、植物油或合成的，例如，花生油、豆油、矿物油、芝麻油、以及类似物。水、盐水、葡萄糖水溶液、和乙二醇类是优选的液体载体，尤其是作为注射液。合适的药物载体包括淀粉、纤维素、滑石、葡萄糖、乳溏、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、甘油硬脂酸酯、氯化钠、干脱脂乳、甘油、丙二醇、水、乙醇、和类似的。其它合适的药物载体及其配方物记述在“Remington’s Pharmaceutical Sciences”by E.W.Martin中。

如果需要，给药的药物组合物也可包括少量无毒辅剂，如湿润剂或乳化剂、pH缓冲剂和类似的，例如，乙酸钠、单月桂酸脱水山梨糖醇酯、三乙醇胺油酸酯，等等。

本发明的化合物通常以区物组合物的形式给药，它包括相互合用的药物赋形剂与式Ⅰ化合物。配方中的药物含量可在技术熟练者所采用的全部范围内变动，如，对配方物总量的约0.01重量百分比(％w)到99.99％w的药物和约0.01％w到99.99％w的赋形剂。较好地，配方物的约3.5到60％w为药物活性化合物，其余为合适的药物赋形剂。静脉给药

业已证实，静脉注射是抗病毒剂的重要给药途径。本发明的化合物可由此途径给药，例如，通过将化合物、其盐、酯或醚溶解到适当的溶剂中(如水或盐水)或混入脂质体配方中接着用可接受的输注液处理。本发明的化合物的典型的每日剂量可一次输注给药，或者一系列周期性的间歇输注。口服给药

口服给药可用于传输式Ⅰ化合物，采用合适的每日剂量制，剂量可根据病情程度或对肾的损害程度而决定或为了补偿同时服用的其它药物的毒性而进行调节。对于这种口服给药，一种药物上可接受的、无毒的组合物可由与任何通常使用的赋形剂混合而形成，例如，药物级甘露糖醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、葡萄糖、明胶、蔗糖、碳酸镁等。这种组合物的形式是溶液、混悬液、片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、缓释配方相等。这种组合物可含0.01wt/wt％到99.99wt/wt％的式Ⅰ化合物，但较好的是这种组合物含25wt/wt％到约80wt/wt％。

较好地，组合物是胶囊、丸剂或片剂的形式，这样，组合物则包括与活性组分一起的稀释剂如乳糖、蔗糖、磷酸二钙等；崩解剂如淀粉或其衍生物；润滑剂如硬脂酸镁等；以及粘合剂如淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、阿拉伯树胶、明胶、纤维素及其衍生物等。对婴儿口服给药较好采用液体配方(如糖浆或悬浮液)。脂质体配方

用脂质体为基础的药物组合物近来已达到人类临床试验阶段。它们的优点据认为是与在体内组织的分布中有良好的变化和由药物的脂质体包裹而产生的良好药物动力学参数有关，并且技术熟练者可以将它使用于本发明的化合物。

可以将处方设计成或者对疾病部位的靶向药物[见：Lopez-Berestein et al.,J.Infect.Dis.,151:704-710(1985)；Gotfred-sen et al.,Biochemical Pharmacology,32:3389-3396(1983)]；或者对网状内皮系统[见Eppstein et al.,Int.J.Immunotherapy,2:115--126(1986)]，对提高药物作用的耐授性[见：Gabizon etal.,Cancer Res.,42:4734(1982)；Eppstein et al.，肽类药物的传递系统(Delivery Systems for Peptide Drugs,)Eds.S.S.Davis,L.Illum and E.Tomlinson,Plenum Pub.Corp.,New York,PP.277-283；C.A.Hunt,Biochemica et Biophysica Acta.,719:450-463(1982)；and Senior et al.,Biochemica et Biophysica Ac-ta.,839:1-8(1985)]，或将药物从对它的毒性影响特别敏感的器官转移[见：Weinstein et al.,Pharmac.Ther.,24:207-233(1983)；Olson et al.,Eur.J.Cancer Clin.Oncol.,18:167-176(1982)；and Gabzion et al.,supra.].

用于注射或口服给药的控释脂质体液体药剂处方被记述在美国专利4,016,100中。也已有人建议将冻干的脂质体/肽药物混合物填于肠衣胶囊而用于口服药物释放的脂质体使用方式，参见美国专利4,348,384。前述均在此引入作为参考。栓剂

通过栓剂用于全身性给药，传统的粘合剂和载体包括，例如，聚烷基二醇(polyalkaline glycol)或井油三酯(如，PEG1000(96％)和PEG4000(4％)]。这些栓剂可以用含有活性组分约0.5wt/wt％至约10wt/wt％的混合物制成，优选为约1wt/wt％至约2wt/wt％。液剂

液体药剂给药组合物的制备可以例如通过溶解，分散等一种活性化合物(约0.5％至约20％)，如上所述，以及在载体中的任意药用辅料，如水，盐水，葡萄糖水溶液，甘油，乙醇和类似物，由此形成一种溶液或悬浮液。

对那些技术熟练者，制备这些剂量形式的确切方法是已知的或明显的；例如，见Remington′s Pharmaceutical Sciences,Mack Pu-bilshing Company,Easton,Pennsylvania,16th Ed.,1980.

给药的组合物，在任何情况下，含有药学有效量的活性化合物(S)，用于缓解所需治疗的按照本发明所述的内容。

                      实施例

下列制备方法和实施例的给出使那些技术熟练者能更清晰地理解并实施本发明。不应该将它们认作为本发明范围的限定。而是仅作为用作说明的和具有代表性的本发明内容。

                      实施例1

       7-(3-硝基苯基)-呋喃并(furo)[3,4-b]吡啶

                  -5-酮的制备1．式4，其中X为氮，Y为碳，R³为硝基，并且R²、R⁴、R⁵及R⁶为氢。

将2,3-吡啶基二羧酸酐(20g,134mmol)在25ml无水甲醇中的溶液回流30分钟。除去甲醇，并且分离得到二个位置异构体(2-羧基-3-甲氧基羰基吡啶及2-甲氧基羰基-3-羧基吡啶并且将二者分离。将2-羧基-3-甲氧基羰基吡啶加入至3-硝基苯甲醛(101.35g,670mmol)在对一甲基异丙基苯(105ml,670mmol)中的溶液中，并且在180℃加热13.5小时。将溶液冷却，过滤，并使用一个Kugelrohr仪器通过球至球蒸馏(bulb to bulb distillation)除去过量的3-硝基苯甲醛和对-甲基异丙基苯。将残余物与二氯甲烷共研，弃去固体残余物。从滤液中分离产物得到12.7g 7-(3-硝基苯基)-呋喃并[2,3-d]吡啶-5-酮(37.2％)。

                     实施例2

              2-(羟甲基-3-硝基苯基)-3

                  -羧基吡啶的制备2．式5，其中X为氮，Y为碳，R³为硝基，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

将7-(3-硝基苯基)-呋喃并[2,3-d]吡啶-5-酮混悬于甲醇(100ml)中，向其中加入固体氢氧化钾(4.5gm,80mmol)，将混合物在一惰性氛下回流6小时，得到2-(羟甲基-3-硝基苯基)-3-羧基吡啶。

                     实施例3

        2-(3-硝基苯甲酰基)-3-羧基吡啶的制备3．式5，其中X为氮，Y为碳，R³为硝基，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

将2-(羟甲基-3-硝基苯甲酰基)-3-羧基吡啶溶于20ml二氯甲烷中，加入吡啶鎓重铬酸盐(4.63克12.3mmol)，在室温22℃搅拌18小时。将该溶液过滤除去溶剂得3.43克粗制品2-(3-硝基苯甲酰基)-3-羧基吡啶。

                    实施例4

       2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶式Ⅱ．其中X为氮，Y为碳，R³为硝基，及R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

将2-(3-硝基苯甲酰基)-3-羧基吡啶溶于20ml二氯甲烷中，并将溶液在冰水浴中冷却，将25ml(0.33M)重氮甲烷加至溶液中并搅拌2小时。除去溶剂，残留物经层析色谱法纯化(用二氯甲烷)得0.26克2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧羰基吡啶。

                       实施例5

            8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]

                   哒嗪-5-酮的制备5．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R⁶为硝基，并且R¹,R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

向2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧基羰基-吡啶(0.58g,2mmol)溶于乙醇(50ml)的溶液中加入单水合肼(0.25ml,5.1mmol)。将混合物回流4小时，冷却并加入乙酸乙酯(50ml)。收集固体物质并干燥，得到0.58g 8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，mp.302℃。

                        实施例6

              6-苯基-8-(3-硝基苯基)-吡啶

               并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备6．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为苯基，R³为硝基，并且R²,R⁴及R⁶为氢。

向2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶(0.26g,0.97mmol)溶于乙醇(50ml)中的溶液中加入苯肼(0.25ml. 2.4mmol)。将混合物回流168小时。除去溶剂，固体从乙醇中沉淀，将其干燥，得到0.07g 6-苯基-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(21％)，mp167℃。

                         实施例7

               6-苄基-8-(3-硝基苯基)-吡啶

                并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备7．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为苄基，R³为硝基，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

向2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶(0.20g,0.75mmol)溶于乙醇(50ml)中的溶液中加入盐酸苄肼(0.36g,1.86mmol)。加热混合物至85℃144小时。通过色谱层析纯化混合物，得到0.11g 6-苄基-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(41％)，mp132℃。

                         实施例8

               6-乙基-8-(3-硝基苯基)-吡啶

                并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备8．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为乙基，R³为硝基，并且R²,R⁴,R⁶及R⁵为氢。

将8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.20g,0.75mmol)，氢化钠(0.04g,0.9mmol)和碘乙烷(0.3ml,3.75mmol)溶液25ml四氢呋喃中，将在氮气氛下回流18小时。除去溶剂，对产物进行色谱层析并用100％二氯甲烷洗脱，得到0.05g 6-乙基-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3 d]哒嗪-5-酮(22.6％),mp.138℃。

                       实施例9

          6-(4-吡啶基甲基)-8-(3-硝基苯基)-

            吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备9．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为4-吡啶基甲基，R³为硝基，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

向8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.16g,0.6mmol)的四氢呋喃(50ml)溶液中加入碳酸钾(0.19g,7.1mmol),碘化钾(1.0g,6.0mmol)和4-吡啶基甲基氯(0.98g,6.0mmol)。搅拌混合物并在惰性气氛下回流18小时。真空除去溶剂。将残余物在甲醇/乙酸乙酯(1∶1)中分配，先在100％己烷中后在100％乙酸乙酯中进行色谱层析。除去残留的溶剂，得到0.58g粗6-(4-吡啶基甲基)-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，将其从甲醇中重结晶，得到0.08g纯化合物(37.1％),mp.167-168℃。

                    实施例10

          7-(3-氯代苯基)-呋喃并[2,3-d]

                 吡啶-5-酮的制备10．式4，其中X为氮，Y为碳，R3为氯，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

将2,3-吡啶基二羧酸酐(20.0克，134mmol)在甲醇(25g,617mmol)中的溶液回流10分钟后除去溶剂。将溶液过波并除去残留溶剂。将残余物加入至3-氯代苯甲醛(76ml,671mmol)和对-甲基异丙基苯(105ml,671mmol)，在一种惰性气氛下在180℃搅拌混合物18小时。除去溶剂并对残余物进行色谱层析，得到7-(3-氯代苯基)-呋喃并[2,3-d]吡啶-5-酮。

                      实施例11

       2-(羟甲基-3-氯代苯基)-3-羧基吡啶的制备11．式5，其中X为氮，Y为碳，R³为氯，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

将7-(3-氯代苯甲酰基)-呋喃并[2,3-d]吡啶-5-酮(4.77g,19.4mmol)和0.2N氢氧化钠(21.4mmol)溶于甲醇和四氢呋喃(100ml,1∶1)中。加热混合物至75℃并搅拌3小时后冷却。向混合物中加入1N盐酸(20ml)和水(200ml)。产生的溶液用乙酸乙酯萃取并用Na₂SO₄干燥。过滤溶液并除去溶剂，得到4.94g(96.8％)2-(羟甲基-3-氯代苯基)-3-羧基吡啶。

                      实施例12

         2-(3-氯代苯甲酰基)-3-羧基吡啶的制备12．式6，其中X为氮，Y为碳，R³为氯，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

将2-(羟甲基-3-氯代苯基)-3-羧基吡啶溶于一种二氯甲烷/冰醋酸(5∶1)的溶液。加入吡定鎓重铬酸盐(10.95g,29mmol)，在一种惰性气氛下室温搅拌溶液。除去溶剂，得到2-(3-氯代苯甲酰基)-3-羧基吡啶。

                  实施例13

         2-(3-氯代苯甲酰基)-3-甲氧基

                羰基吡啶的制备13．式Ⅱ，其中X为氮，Y为碳，R³为氯，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

将2-(3-氯代苯甲酰基)-3-羧基吡啶溶于一种10％甲醇和二氯甲烷溶液中。加入重氮甲烷，室温搅拌溶液1小时。溶液先用100％二氯甲烷后用二氯甲烷+1％甲醇萃取。合并从重结晶(乙酸乙酯/己烷)和从滤液中得到的目的产物，得到1.23g 2-(3-氯代苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶。

                     实施例14

                8-(3-氯代苯基)-吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备14．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为氢，R³为氯，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

一种2-(3-氯代苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶(0.55g,2.0mmol)，水合肼(0.15ml,3.0mmol)在乙醇(50ml)中的溶液，在100℃在一种惰性气氛下将其搅拌18小时。将溶液冷却并收集溶液中的固体，用乙酸乙酯洗涤并干燥，得到0.26g 8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(50.5％),mp268-269℃。

                     实施例15

              6-苯基-8-(3-氯苯基)-吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备15．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为苯基，R³为氯，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

一种2-(3-氯代苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶(0.30g,1.09mmol)，苯肼(0.27ml,2.72mmol)在乙醇(18ml)中的溶液，将其在100℃搅拌72小时。冷却溶液并除去溶剂。将残余物与甲醇共研以生成一种白色固体，将其收集并在空气中干燥，得到0.26g 6-苯基-8-(3-氯苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(71.55％),mp.144-145℃。

                      实施例16

            6-苄基-8-(3-硝基苯基)-吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备16．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为苄基，R³为氯，并且R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

将一种2-(3-氯代苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶(0.30g,1.09mmol)，盐酸苄肼(0.53ml,2.72mmol)在乙醇(18ml)中的溶液回流132小时(5天)。将溶液冷却并除去溶剂。将残余物溶于乙醇(用最少量)并放入冰箱诱导结晶。收集溶液中的固体物质进行色谱层板，用100％二氯甲烷洗脱，从甲醇中结晶，得到0.21g 6-苄基-8-(3-硝基苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(55.4％),mp.141℃。

                      实施例17

            6-乙基-8-(3-氯代苯基)-吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备17．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为乙基，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

向8-(3-氯代苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.32g,1.24mmol)在四氢呋喃(50ml)中的混悬液中加入氢化钠(0.06g,1.4mmol)。室温搅拌混合物1小时。加入碘乙烷(0.48g,3.1mmol)并将溶液在惰性氛下回流18小时。冷却混合物并加入50ml 1N HCl使其酸化。通过用乙酸乙酯萃取分离目的化合物(萃取至水层中检测不到产物)，用碳酸氢钠，盐水洗涤并用硫酸镁干燥。过滤溶液并除去溶剂，得到0.85g粗目的产物。将产物从甲醇中重结晶纯化，得到0.24g6-乙基-8-(3-氯代苯基-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(67.8％)，mp.117-118℃。

                      实施例18

6-(2-丙基)-8-(3-氯代苯基)-吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备18．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为丙基，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

向8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.33g,1.28mmol)在四氢呋喃(50ml)中的混悬液中加入氢化钠(0.07g,1.53mmol)。将混合物在一惰性气氛下室温搅拌30分钟。加入2-碘丙烷(0.64ml,6.4mmol)并回流混合物48小时。冷却混合物并通过加入50ml 1N HCl使其酸化。用乙酸乙酯(3×50ml)萃取混合物并用硫酸镁干燥。过滤溶液并除去溶剂，得到粗产品。通过结晶作用(乙酸乙酯/己烷)纯化，得到0.15g 6-(2-丙基)-8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(39％),mp80-81℃。

                     实施例19

        6-(4-吡啶基甲基)-8-(3-氯代苯基吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备19．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为4-吡啶基甲基，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

向8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.50g,1.90mmol)在二甲基甲酰胺(50ml)中的混悬液中加入碳酸钾(3.22g,23.3mmol)。在惰性气氛下，室温搅拌混合物1小时。加入4-吡啶甲基氯化物(1.59g,9.7mmol)和碘化钾(1.61g.9.7mmol)，在80℃搅拌混合物168小时(7天)。冷却混合物，滤出不可溶物质并除去溶剂，得到2.13g粗产品。将产品用色谱层析纯化，用100％乙酸乙酯洗脱，并从甲醇中结晶，得到0.091g 6-(4-吡啶基甲基)-8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(13.7％),mp152℃。

                    实施例20

         使用格利雅(grignard)试剂制取

         2-(3-氯代苯甲酰基)-3-羧基吡啶和

         2-羧基-3-(3-氯代苯甲酰基)吡啶20．式6，其中X为氮，Y为碳，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

通过用一种镁(2.43g,100mol)在四氢呋喃(100ml)中的混悬液中加入1-溴代-3-氯代苯(11.75ml,100mmol)制备格利雅试剂，在一惰性气氛下室温搅拌18小时。在-78℃持续2小时将格利雅试剂滴加至2,3-吡啶基二羧酸酐(M.91ml,100mmol)在四氢呋喃(200ml)中的溶液中。加毕后再搅拌溶液45分钟。加入1N HCl(110ml)并再搅拌溶液1小时。用乙酸乙酯萃取目的产物，用盐水洗涤并用Na₂SO₄干燥，得到2-(3-氯代苯甲酰基)-3-羧基吡啶和2-羧基-3-(3-氯代苯甲酰基)吡啶。

2-(3-氯代苯甲酰基)-3-羧基吡啶(式6，其中X为氮，Y为碳，R³为氯，R²、R⁴、R⁵和R⁶为氢)能分别按实施例13-19步骤被转化为式Ⅱ和式Ⅰ的相应的化合物。

                        实施例21

      2-甲氧基羰基-3-(3-氯代苯甲酰基)吡啶的制备21．式Ⅱ，其中X为碳，Y为氮，R³为氯，R²,R⁴,R⁶及R⁵为氢。

按实施例13的步骤，用2-羧基-3-(3-氯代苯甲酰基)吡啶代替2-(3-氯代甲酰基)-3-羧基吡啶，得到2-甲氧基羰基-3-(3-氯代苯甲酰基)吡啶。

                     实施例22

          5-(3-氯代苯基)吡啶基[2,3-d]

                 哒嗪-8-酮的制备22．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R³为氯，R¹,R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例14的步骤，用2-甲氧羰基-3-(3-氯代苯甲酰基)吡啶代替2-(3-氯代苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶，得到5-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                     实施例23

            5-(3-氯代苯基)-7-苯基吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-8-酮的制备23．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R¹为苯基，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例15的步骤，用2-甲氧基羰基-3-(3-氯代苯甲酰基)吡啶代替2-(3-氯代苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶，得到5-(3-氯代苯基)-7-苯基吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                      实施例24

             5-(3-氯代苯基)-7-苄基吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-8-酮的制备24．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R¹为苄基，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例16的方法，用2-甲氧基羰基-3-(3-氯代苯申酰基)吡啶代替2-(3-氯代苯甲酰基)-3-甲氧羰基吡啶，得到5-(3-氯代苯基)-7-苄基吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                     实施例25

              5-(3氯代苯基)-7-乙基吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-8-酮的制备25．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R¹为乙基，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例17的步骤，用5-(3-氯代苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮代替8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，得到5-(3-氯代苯基)-7-乙基吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                      实施例26

           5-(3-氯代苯基)-7-(2-丙基)吡啶

             并[2,3-d]哒嗪-8-酮的制备26．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R¹为2-丙基，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例18的步骤，用5-(3-氯代苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮代替8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，得到5-(3-氯代苯基)-7-(2-丙基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                     实施例27

          5-(3-氯代苯基)7-(4-吡啶基甲基)

           吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮的制备27．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R¹为4-吡啶基甲基，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例19的步骤，用5-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮代替8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，得到5-(3-氯代苯基)-7-(4-吡啶基甲基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                    实施例28

        2-甲氧基羰基-3-苯甲酰基吡啶的制备28．式Ⅱ，其中X为碳，Y为氮，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

在50-55℃下，搅拌2,3-吡啶基二羧酸酐(10g,67.1mmol)在干燥的苯(80ml,888mmol)中的溶液，并逐渐加入三氯化铝(AlCl₃,20g,148mmol)。回流混合物18小时。将反应混合物冷却并倒入250ml5％HCl水溶液中并用乙酸乙酯萃取。除去乙酸乙酯并将残余物真空干燥。将残余物溶解在500ml甲醇中并加入4ml浓H₂SO₄(67.1mmol)。在80℃回流溶液24小时。冷却混合物，用饱和碳酸氢钠中和并用乙酸乙酯萃取。用饱和盐水洗涤乙酸乙酯萃取液并用硫酸钠干燥。过滤溶液并真空除去乙酸乙酯，得到2-甲氧基羰基-3-苯甲酰基吡啶(7.92g,32.8mmol,49％粗产品得率)。产物用色谱柱层析纯化，用5％乙酸乙酯的二氯甲烷液洗脱，得到从醚中结晶的纯产物(5.61g,23mmol,35％产率)，mp85-86℃。

                       实施例29

      2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶的制备29．式Ⅱ，其中X为氮，Y为碳，R³为硝基，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

将2-苯甲酰基-3-甲氧基羰基吡啶(3.86g,16.0mmol)溶于H₂SO₄(10ml)，向其中滴加入HNO₃(0.88ml)和H₂SO₄(2.0ml)的混合物。搅拌反应混合物30分钟后，将其倒在冰上。搅拌溶液60分钟，用饱和碳酸氢钠将其碱化至pH7.8并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机乙酸乙酯溶液并用硫酸镁干燥。过滤溶液并除去溶剂，得到4.49g粗产物，2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶。

                       实施例30

      5-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮的制备30．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R³为硝基，R¹,R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例5的步骤，用按实施例29B制备的2-甲氧基羰基-3-(3-硝基苯甲酰基)吡啶代替2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧基羰基吡啶，得到5-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                     实施例31

        5-(3-硝基苯基)-7-苯基吡啶并[2,3-d]

                  哒嗪-8-酮的制备31．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R¹为苯基，R³为硝基，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例6的步骤，用2-甲氧基羰基-3-(3-硝基苯甲酰基)吡啶代替2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧羰基吡啶，得到5-(3-硝基苯基)-7-苯基吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                    实施例32

           5-(3-硝基苯基)-7-苄基吡啶

           并[2,3-d]哒嗪-8-酮的制备32．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R¹为苄基，R³为硝基，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例7的步骤，用2-甲氧基羰基-3-(3-硝基苯甲酰基)吡啶代替2-(3-硝基苯甲酰基)-3-甲氧羰基吡啶，得到5-(3-硝基苯基)-7-苄基吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                     实施例33

            5-(3-硝基苯基)-7-乙基吡啶

            并[2,3-d]哒嗪-8-酮的制备33．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R¹为乙基，R³为硝基，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例8的步骤，用5-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮代替8(3-硝基苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，得到5-(3-硝基苯基)-7-乙基吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                     实施例34

        5-(3-硝基苯基)-7-(4-吡啶基甲基)吡啶

              并[2,3-d]哒嗪-8-酮的制备34．式Ⅰ，其中X为碳，Y为氮，Z为氧，R¹为4-吡啶基甲基，R³为硝基，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

按实施例9的步骤，用5-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮代替8-(3-硝基苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，得到5-(3-硝基苯基)-7-(4-吡啶基甲基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮。

                    实施例35

         6-(3-噻吩基甲基)-8-(3-氯代苯基)

           吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备35A．式Ⅰ，其中X为氮，Y为碳，Z为氧，R¹为3-噻吩甲基，R³为氯，R²,R⁴,R⁵及R⁶为氢。

向8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.21g,0.82mmol)在四氢呋喃(25ml)中的混悬液加入3-噻吩甲醇(0.085ml,0.9mmol)和三苯膦(0.32g,1.22mmol)。向此混合物中滴加入二异丙基偶氮二羧酸酯(0.24ml,1.22mmol)在四氢呋喃(5ml)中的溶液。室温搅拌溶液3小时。除去溶剂，将残余物自热甲醇色谱层析，得到0.15g6-(3-噻吩基甲基)-8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，mp165-166℃。35B．制备式Ⅰ的其它化合物，其中X为氮，Y为碳，Z为氧。

按实施例35A的步骤，用下列物质代替3-噻吩甲醇：

4-(2-羟乙基)吗啉；

3-吡啶丙醇；

2-(羟乙基)吡啶；

1-(2-羟乙基)吡咯烷；以及

1-(2-羟乙基)-2-吡咯烷酮，得到下列化合物：

6-[4-(2-羟乙基)吗啉基]-8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，mp135℃；

6-(3-吡啶基丙基)-8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，mp91℃；

6-[2-(羟乙基)吡啶基]-8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，mp98℃；

6-[1-(2-羟乙基)吡咯烷基]-8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮，mp149℃；以及

6-[1-(2-羟乙基)-2-吡咯烷酮基]-8-(3-氯代苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，mp78℃。

                      实施例36

         6-(4-吡啶基甲基)-8-(3-硝基苯基)吡啶

           并[2,3-d]哒嗪-5-酮盐酸盐的制备

向6-(4-吡啶基甲基)-8-(3-硝基苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮在甲醇中的悬浮液中滴加5％HCl/MeOH并搅拌直至得到透明溶液。除去溶剂。产生的固体与乙酸乙酯共研。滤出产物并真空干燥，得到6-(4-吡啶基甲基)-8-(3-硝基苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮盐的盐。

相似地，所有式Ⅰ的化合物可以通过用合适的酸处理转化为酸的加成盐，这些酸例如，氢溴酸，硫酸(提供硫酸盐或硫酸氢盐)，硝酸，磷酸以及类似物。

                  实施例37通过实施例1-36的步骤制备下列化合物：式Ⅰ，当X是氮，Y是碳，Z是氧。

R³是氯，R¹是2-丙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点80℃；

R³是氯，R¹是4-吡啶甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点152℃；

R³是氯，R¹是N-乙基吗啉基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点135℃；

R³是氯，R¹是N-乙基吡咯烷酮基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点78℃；

R³是氯，R¹是3-噻吩甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点165℃；

R³是氯，R¹是4-甲氧基-3-吡啶甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点145℃；

R³是氯，R¹是3-吡啶甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点165℃；

R³是氯，R¹是正-丁基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点119℃；

R³是氯，R¹是甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点180℃；

R³是氯，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点111-112℃；

R³是氯，R¹是乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点117℃；

R³是氯，R¹、R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点268-269℃；

R³是氯，R¹是苯基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点144-145℃；

R³是氯，R¹是N-甲基哌啶基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点142℃；

R³是氯，R¹是2-吡啶乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点98℃；

R³是氯，R¹是3-吡啶丙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点91℃；

R³是氯，R¹是苯乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点108℃；

R³是氯，R¹是环戊基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点93℃；

R³是氯，R¹是环己基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点98℃；

R³是氯，R¹是N-乙基吡咯烷基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点149℃；

R³是氯，R¹是正-丙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点93℃；

R³是氯，R¹是叔-丁基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点105℃；

R³是氯，R¹是2-甲基氨基乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点90℃；

R³是氯，R¹是环戊基甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点125℃；

R³是氯，R¹是2-噻吩基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点175℃；

R³是氯，R¹是糠基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点164℃；

R³是氯，R¹是4-吡啶基-N-氧化物-甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点175-176℃(甲醇中重结晶)。

R³是氯，R¹是二甲基氨基乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点90℃；

R³是氟，R¹是4-吡啶甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点158℃；

R³是氟，R¹是3-吡啶甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点151℃；

R³是氟，R¹是乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点117-118℃；

R³U是氟，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点130-131℃；

R³是硝基，R¹是4-吡啶甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点172℃；

R³是硝基，R¹是3-吡啶甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点190℃；

R³是硝基，R¹是3-噻吩甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点175℃；

R³是硝基，R¹是苯基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点167-168℃；

R³是硝基，R¹是乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点138-139℃；

R³是硝基，R¹、R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点302-304℃；

R³是硝基，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点141℃；

R³是硝基，R¹是环戊基甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点88℃；

R³是硝基，R¹是二甲基氨基乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点108℃；

R³是硝基，R¹是2-四氢呋喃甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点109℃；

R³是硝基，R¹是3-四氢呋喃甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点76℃；

R³是硝基，R¹是环丙基甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点101℃；

R³是硝基，R¹是4-吡啶基-N-氧化物-甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点208℃；

R³是硝基，R¹是2-丙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点126℃；

R³是硝基，R¹是1,2-亚甲基二氧苯-5-甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点199℃；

R³是硝基，R¹是2-溴乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点163℃；

R³是硝基，R¹是2-氟乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点167℃；

R³是硝基，R¹是2-氯乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点166℃；

R³是硝基，R¹是3-甲基环丁基-3-甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点159℃；

R³是硝基，R¹是2-氰乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点145℃；

R³是硝基，R¹是3-甲基-3-丁烯基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点97℃；

R³是硝基，R¹是甲基硫代乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点96℃；

R³是硝基，R¹是3-甲基-2-丁烯基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点119℃；

R³是硝基，R¹是甲氧乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点135℃；

R³是硝基，R¹是甲基硫代丙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点71℃；

R³是硝基，R¹是3,4-二氯苯基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点168℃；

R³是硝基，R¹是2-羟乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点155℃；

R³是硝基，R¹是2-噻吩基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点173℃；

R³是硝基，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点141℃；

R³是硝基，R¹是1-吡咯烷基乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点149℃；

R³是硝基，R¹是糠基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点159℃；

R³是硝基，R¹是2-乙酰氧乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点116℃；

R³是三氟甲基，R¹是氰乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点133℃；

R³是三氟甲基，R¹是乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点116℃；

R³是三氟甲基，R¹是3-吡啶基甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点142℃；

R³是三氟甲基，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点137℃；

R³是三氟甲基，R¹是正-丁基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点103℃；

R³是氰基，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点158℃；

R³是甲基，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点88℃；

R³是甲氧羰基，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点128-130℃；

R¹是苄基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点169-170℃；

R¹是4-吡啶基甲基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点175-176℃；

R¹、R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点230-231℃；

R¹是乙基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点114-115℃；和式Ⅰ，当X是碳，Y是氮，和Z是氧

R¹是苯基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，具有熔点221-222℃；

R¹,R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，具有熔点232-233℃；

R¹是乙基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，具有熔点164-165℃；

R¹是苄基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，具有熔点210-211℃；和

R¹是4-吡啶基甲基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，具有熔点230-231℃。式Ⅰ，当X是碳，Y是碳，和Z是氧。

R³是氯，R¹是正-丁基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点100℃；

R¹是正-丁基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点105℃；

R¹是正-戊基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点93℃；

R³是氯，R¹是4-吡啶基甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点131℃；

R³是氯，R¹是乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点104℃；

R¹是甲基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点162℃；

R³是氯，R¹是环戊基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点139℃；

R³是氯，R¹是2-丙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点85℃；

R¹是正-丙基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点104℃；

R³是三氟甲基，R¹是甲基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点136℃；

R³是硝基，R¹是乙基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点161℃；

R³是硝基，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点150℃；

R³是氯，R¹是己基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点123℃；

R³是氯，R¹是N-甲基吗啉基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点157℃；

R³是三氟甲基，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点54℃；

R³是氯，R¹是N-甲基哌啶基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点143℃；

R¹是2-丙基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点128℃；

R³是氯，R¹是叔-丁基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点105℃；

R³是氯，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点137℃；

R¹、R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点227℃-228℃；

R¹是苄基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点175-176℃；

R¹是乙基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点120-121℃；和

R¹是4-吡啶基甲基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点201-203℃。式Ⅰ,X是氮，Y是碳而Z是硫

R³是氯，R¹是苄基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢，熔点132℃。

                      实施例38

        6-(4-吡啶基-N-氧化物-甲基)-8-(3-氯苯基)

               吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮制备38．式Ⅰ，当X是氮，Y是碳，Z是氧，R¹是4-吡啶基-N-氧化物-甲基，R³是氯和R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢。

在一种含8-(3-氯苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.50g,1.94mmol),4-吡啶基甲醇N-氧化物(0.27g,2.13mmol)，三苯基膦(0.76g,2.9mmol)的四氢呋喃(50ml)的悬浮液中，滴加二异丙基偶氮羧酸酯(0.57ml,2.9mmol)。在室温和氮气下将悬浮液搅拌18小时。除去溶剂，产物用层析色谱法来纯化，用100％乙酸乙酯和10％甲醇/乙酸乙酯洗脱得到0.382g的6-(4-吡啶基-N-氧化物-甲基)-8-(3-氯苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(54％),mp99℃。

                     实施例39

       6-(4-吡啶基-N-氧化物-甲基)-8-(3-硝基

         苯)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备39．式Ⅰ，当X是氮，Y是碳，Z是氧，R¹是4-吡啶基-N-氧化物-甲基，R³是硝基和R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢。

在一种含8-(3-硝基苯)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.40g,1.5mmol),4-吡啶基甲醇N-氧化物(0.205g,1.64mmol)，三苯基膦(0.587g,2.24mmol)的四氢呋喃(50ml)的悬浮液中，滴加二异丙基偶氮羰酸酯(0.44ml,2.24mmol)。将悬浮液在室温氮气下搅拌18小时。除去溶剂，产物用层析色谱纯化，即，用100％乙酸乙酯和10％甲醇/乙酸乙酯洗脱。合并组分，除去溶剂得到0.390g产物，以甲醇重结晶得到0.237g的6-(4-吡啶基-N-氧化物-甲基)-8-(3-硝基苯)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(42.1％),mp208℃。

                  实施例40

式2的另一种制法，当X是硝基和R¹是正-丁基

用400ml乙酸乙酯制备一种2.3-吡啶二羧酸酐(式1)(90g,603mmol)的悬浮液。混合物冷至3℃，在保持温度低于25℃的情况下加入正丁胺(61ml,610mmol)。加入之后，移去冷浴，在保持温度低于50℃的情况下加入亚硫酰氯(51ml,700mmol)。混合物搅拌1小时，然后将得到的悬浮液冷至5℃并在保持温度低于35℃情况下加入稀的氢氧化钠(240ml 6M的溶液，1.4mmol)。分离所得的液层，用常压蒸馏除去大部分乙酸乙酯。然后加入甲醇(500ml)，再蒸馏到只剩250ml溶液。使溶液冷却这时出现结晶。加入水(250ml)，混合物放置18小时，产物用过滤分得，并用200ml1∶1(V∶V)的水和甲醇液洗二次。干燥后得到115g的产物(式2)。式4的制备，当X是氮，R¹是正-丁基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢。

将酰亚胺(式2)(40.4g,198mmol)溶于甲苯(1L)并冷至-65℃,15分钟内加入苯基氯化镁(100mL,2MTHF溶液，200mmol)。除去冷浴，混合物升温至-10℃。加入25ml饱和氯化铵溶液使反应停止。室温下溶液加500ml乙酸乙酯和500ml水来稀释。分离液层，常压蒸馏除去大部分的有机溶剂。当剩余的溶液体积到150ml时，将混合物冷却至80℃以下并加入1L己烷。产生的晶体过滤后干燥，得到50.6g产物(式4)。式4的制备，当X是氮，R¹是正-丁基，R³是硝基，R²、R³、R⁴、R⁵和R⁶是氢。

格利雅加成得到的产物(47.15g,167mmol)与250ml浓硫酸(96％)混合。得到混合物放置在冷浴中。在保持低于45℃的温度下加入硝酸(70％,12ml,189mmol)。将混合物搅拌30分钟，并倒入冰(500g)中并加入1L水稀释，混合物用700ml乙酸乙酯萃取二次。除去有机溶剂，将反应产物直接用于下步反应。式5的制备，当X是氮，R³是硝基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢。

从上步反应得到的粗产物与500ml水混合并加入250ml浓盐酸液。混合物加热回流20小时，冷却后加500ml水稀释并过滤除去固体。用水(500ml)和甲醇(200ml)洗涤固体，干燥得到39.85g的产物。式6的制备，当X是氮，R³是硝基，R²、R⁴、R⁵和R⁶是氢。

上步反应得到的产物(38.6g,142mmol)与800ml甲醇混合。在这种非均相混合物中加入35ml无水肼。所得的溶剂加热回流5小时。室温下放置17小时后，产物用过滤分得，用甲醇(250ml)洗二次，干燥得25.6g产物。式8的制备，当X是氮，R³是硝基，R²、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰是氢。

上步反应所得的产物(5.12g,19.1mmol)，氢化钠(50％的油溶液，1g,20.1mmol)在100ml1-甲基-2-吡咯烷酮中混合后加热至65℃。在一个分液漏斗中混合4-吡啶甲基氯化物的盐酸盐(式7的HCl盐，其中R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰是氢，4.5g,27.4mmol),20ml饱和碳酸钾溶液和75ml的甲苯，分离之后，甲苯溶液在1小时内加入到反应混合物。反应混合物用水(250ml)稀释并用乙酸乙酯(200ml)萃取二次，有机层浓缩之后，加入甲醇和己烷(各75ml)并在室温下搅拌17小时，物料过滤并干燥得到5.29g产物。式9的制备，当X是氮，R³是硝基，R²、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰是氢。

将上步反应得到的产物(4.2g,11.5mmol)溶于100ml的二氯甲烷，在这一溶液中加入间-氯过氧苯甲酸(85％,4.2g,20.7mmol)。将溶液搅拌17小时，在二氯甲烷碳酸钾之间分配之后，有机层液直接用硅胶色谱层析。产物用20％甲醇的乙酸乙酯液洗脱，除去溶剂得到的固体物质用甲醇(200ml)重结晶，过滤后得到3.2g产物。

                  实施例41式4的制备，当X是氮，R¹是正-丁基，R³是氯，R²、R⁴、R⁵、R⁶是氢。

将酰亚胺(式2)(20g,98mmol)溶于甲苯(500ml)并冷至-65℃。在这种混合物中加入3-氯代苯基溴化镁(通过加热回流2.5g金属镁，20g 3-氯溴苯和100ml四氢呋喃1小时制备)并保持反应温度低于-40℃。反应完全后，移去冷浴让混合物升温至0℃，加入用乙酸乙酯(250ml)和水(250ml)稀释的氯化铵水溶液(25ml)来停止反应。分离所得的二层液体后，有机层硫用硫酸钠(50g)干燥。过滤，除去溶剂得到一种直接用于下步反应的油状物。式5的制备，当X是氮，R¹是正-丁基，R³是氯，R²、R⁴、R⁵、R⁶是氢。

在上步所得的粗产物中加入500ml水，250ml的浓盐酸并加热回流24小时，然后过滤溶液，冷却并用氢氧化钠碱化。用乙酸乙酯萃取以除去没有水解的起始物质，然后所得水溶液用盐酸调至pH为2。用乙酸乙酯(250ml)萃取水溶液2次，除去溶剂后得到16g产物，直接用于下步反应。式6的制备，当X是氮，R¹是正-丁基，R³是氯，R²、R⁴、R⁵、R⁶是氢。

上步得的产物与100ml甲醇混合，在这一混合物中加入20ml无水肼。混合物加热回流2小时并在其间加入另外100ml甲醇和200ml二甲苯，将混合物加热回流17小时。加入另外的二甲苯(200ml)并蒸出200ml溶剂。通过冷却和过滤混合物以分离产物。用甲苯(200ml)洗涤所得的晶料并干燥得到14.2g产物。式6的制备，当X是氮，R¹是正-丁基，R³是氯，R²、R⁴、R⁵、R⁶是氢。

上步得的产物(14.2g,55mmol)和氢化钠(50％的油溶液，2.7g,55mmol)在150ml1-甲基-2-吡咯烷酮中混合并加热混合物至55℃。在一分液漏斗中，将4-吡啶甲基氯化物的盐酸盐(式7的HCl盐，其中R⁷、R⁸、R⁹、R¹⁰是氢，11g,67mmol),50ml饱和碳酸钾溶液和150ml甲苯混合。分离之后，甲苯液在30分钟内滴加到反应混合物中，并将混合物另外加热30分钟，冷却至室温并倒入300ml水中。混合物用乙酸乙酯(500ml)萃取二次。有机组分用硫酸钠(50g)干燥后，过滤并除去溶剂，粗产物从乙酸异丙酯(300ml)中结晶。物料过滤并干燥得到10.5g的产物。通过浓缩过滤液和过滤晶体物质得到第二批4.6g产物。式8的制备，当X是氮，R¹是正-丁基，R³是氯，R²、R⁴、R⁵、R⁶是氢。

从上步得到的产物(6g,17.2mmol)在二氯甲烷(50ml)中与间-氯过氧苯甲酸(85％,4.5g,22.1mmol)混合。混合物在室温下搅拌2小时。分离所得的液层中加入饱和碳酸钠溶液(25ml)再用硫酸钠(25g)干燥二氯甲烷组份。过滤后，除去溶剂，所得固体用甲醇(20ml)结晶，过滤并干燥得到3.8g产物。

                    实施例42

           8-(3-氯苯基)-6-苄基吡啶并

            [2,3-d]哒嗪-5-硫酮的制备

将式1，当X是氮，Y是碳，Z是氧，R¹是苄基，R³是氯，R²、R⁴、R⁵、R⁶是氢时的一种吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮转化为相应的式Ⅰ，其中X是氮，Y是碳和Z是硫的吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-硫酮。

在室温和氮气氛下，在8-(3-氯苯基)-6-苄基吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.96g,2.76mmol)的甲苯(100ml)溶液中，加入固体的2,4-双(4-甲氧苯基)-1,3-二硫-2,4-双磷酯烷(diphosphetane)-2,4-二硫化物(Lawesson’s试剂)(0.67g,1.66mmol)。将反应混合物加热回流18小时，然后冷却和浓缩。用乙酸乙酯/己烷(1∶4)在硅胶上进行色谱层析得到0.233g产物(23.2％)mp132℃。

                    实施例43

       8-(3-氯苯基)-6(6-甲氧-3-吡啶基-甲基)

          吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮的制备式1，当X是氮，Y是碳，Z是氧，R¹是6-甲氧-3-吡啶甲基，R³是氯，R²、R⁴、R⁵、R⁶是氢。

在一含8-(3-氯苯基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.515g,2.0mmol),6-甲氧-3-羟甲基吡啶(0.306g,2.2mmol)和三苯基膦(0.792g,3.0mmol)的THF(50ml)的悬浮液中，加入二异丙基-偶氮二羧酸酯(0.6ml,3.0mmol)。反应混合物在室温下搅拌18小时，除去溶剂，产物用色谱分析(乙酸乙酯/己烷，2∶3)纯化并用甲醇重结晶得到0.588g的8-(3-氯苯基)-6-(6-甲氧-3-吡啶基甲基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，mp145℃。

                     实施例44

      制备8-(3-氯代苯基)-6-(3-吡啶酮-6-基甲基)

               吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮式1，其中X是氮，Y是碳，Z是氧，R¹是3-吡啶酮-6-基甲基，R³是氯，和R²、R⁴、R⁵、R⁶是氢。

向8-(3-氯代苯基)-6-(6-甲氧基-3-吡啶甲基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.566g,1.5mmol))在乙腈中的溶液中加固体NaI(0.224g)。混悬液在室温下搅拌30分钟，然后加入三甲基氯硅烷(0.19ml,1.5mmol)。反应混合物在回流下加热18小时，然后冷却。加水(50ml)。该溶液用乙酸乙酯萃取，用10％硫代硫酸钠和饱和盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并浓缩。用10％甲醇/乙酸乙酯色谱层析法得到0.317g 8-(3-氯代苯基)-6-(3-吡啶酮-6-基甲基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，mp233℃。

                   实施例45

    制备8-(3-氯代苯基)-6-(1-甲基-3-吡啶酮-6-

        基甲基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮式1，其中X是氮，Y是碳，Z是氧，R¹是1-甲基-3-吡啶酮-6-基甲基，R³是氯，以及R²、R⁴、R⁵、R⁶是氢。

向8-(3-氯代苯基)-6-(3-吡啶酮-6-基甲基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮(0.35g,0.96mmol)在DMF(15ml)中的悬浮液中加入碳酸钾(0.16g,1.15mmol)。在氮气氛下在室温下将该悬浮液搅拌1小时，然后用注射器缓慢加入甲基碘(0.12ml)。反应混合物回流加热18小时，然后冷却。加入1N HCl(35ml)，收集固体物质，干燥并用色谱层析用乙酸乙酯再用5％甲醇/乙酸乙酯，得到0.055g 8-(3-氯代苯基)-6-(1-甲基-3-吡啶酮-6-基甲基)吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮，mp171℃。

                     实施例46

            PDEⅣ抑制剂的效价和活性的测定

             制备人血小板磷酸二酯酶(PDEⅢ)

按照先前在描述的记述于Mol.Pharmacol.20；302-309,Al-varez,R.,Taylor,A.,Fazarri,J.J.,and Jacobs,J.R.(1981)中的方法可从人血中得到血小板高亲合性cAMP PDE(PDEⅢ)。

把血液收集到抽真的盛有EDTA(7.7mM)，最终浓度)的试管中。在4℃以200×g在聚碳酸酯试管中离心血液15分钟可得到PRD。将血小板小球混悬于一定体积的含有1mM MgCl₂的缓冲剂A中(0.137M NaCl,12.3mMN-三羟甲基氨基甲烷(Tris)-HCl缓冲剂，pH7.7)。将低渗的溶解的血小板混悬液在48,000×g离心15分钟，保留上清液。将小球在干冰上冷冻并迅速在22℃熔化。将上清液与小球混合，所得混悬液在48,000×g离心30分钟。上清液部分以0.5ml等分在-20℃贮存，用作可溶性PDE。通过用10mM冷的Tris-HCl缓冲剂稀释，pH7.7，将酶活性调整至在培养10分钟后有10-20％水解的能力。制备人淋巴细胞磷酸二酯酶(PDEⅣ)

在7％CO₂下在含L-谷氨酰胺和10％的Nu-血清的RPMI1640中，在37℃培养人B细胞系(43D)。在测试前，约1.5×10⁸的细胞在一只台式临床上用的(table top clinical)离心机中以1000rpm离心10分钟。将小球再混悬于2-3ml的45mM Tris-HCl缓冲剂中，pH7.4。将混悬液均匀化并在4℃以12,000×g离心10分钟。用Tris-HCl缓冲液将上清液稀释至28ml，并直接用于测定或在-20℃贮藏。DMSO在PDE培养基中的最终浓度为1％。在每个测试中都用硝喹宗(Nitraquazone)作为参考标准(10和100μM)。人血小板cAMP磷酸二酯酶的测定

磷酸二酯酶培养基在1.0ml总体积中含有10mM Tris-HCl缓冲剂，pH7.7,10mMMgSO₄,0.1-1μM[³H]-AMP(0.2μCi)。在加入酶后，将内容物混合并在30℃培养10分钟。将试管浸没于沸水中90秒以终止反应。将试管在冰水浴中冷却后，每个试管中加入0.1ml(100μg)取自蛇毒的5’-核苷酸酶(Crotalus atrox,Sigma V-7000)。将内容物混合并在30℃培养30分钟。核苷酸酶反应是由将试管浸于沸水中60秒来终止的。按照Anal.Biochem.,52:505-516(1973),Filburn,C.R.,and Karn,J.中描述的方法用氧化铝柱分离出带标记的腺苷。测定重复进行三次。cAMP水解范围在10-20％。将测试化合物溶于DMSO中。当用达0.1mM的化合物测试时，DMSO在磷酸二酯酶测定中的最终浓度为1％，当以化合物增至1mM测试时，DMSO浓度为10％，并且这个活性是与对照的PDE在10％DMSO存在下的活性作比较。人淋巴细胞cAMP磷酸二酯酶的测定

磷酸二酯酶培养介质在1ml总体积中含有40mM Tris-HCl缓冲剂，pH7.7,0.1mM MgSO₄,3.75mM巯基乙醇，和0.1-1.0μM[³H]cAMP(0.2μCi)。反应按照前面所用的对人血小板PDE的方法进行。DMSO最终浓度为1％。

当用这种方法测试时，本发明的化合物显示出作为PDEⅣ抑制剂的效力和选择性。对人淋巴细胞PDEⅣ的抑制

化合物Ⅰ    IC₅₀:    0.005μM

化合物Ⅱ    IC₅₀:    0.014μM

化合物Ⅰ是式Ⅰ的化合物，其中X是N和Y是C,R¹是4-吡啶甲基，R²是硝基，R³、R⁴、R⁵和R⁶是H，即6-(4-吡啶甲基)-8-(3-硝基苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮。

化合物Ⅱ是式Ⅰ的化合物，其中X是N和Y是C,R¹是4-吡啶甲基，R³是Cl,R²、R⁴、R⁵和R⁶是H，即6-(4-吡啶甲基)-8-(3-氯代苯基)-吡啶并[2,3-d]哒嗪-5-酮。

                      实施例47

    用形成溶血性空斑的细胞测试法测定免疫抑制活性

该方法是“用于识别产生抗体的细胞的琼脂空斑技术”，是首先被Jerne等氏所叙述的[Cell-bound Antibodies,Amos andKaprowski editors(Wistar Institute Press,Philadelphia,1963).p.109]的改进。

用1.25×10⁸羊血红细胞(SRBC)敏化每组5-6只成年C3H雌鼠，并同时用试验物质在水性载体中的口服剂处理。对照组的动物接受同样体积的载体。接种培养SRBC四天后，将脾脏在玻璃均浆器中分散。测定成核的细胞数(WBC)，并将脾细胞混悬液与SRBC、实验物补体和0.5％的琼脂溶液混合。上述混合物的各等分部分(每个0.1ml)滴加到一个培养平皿的四个隔开的四分之一圆上并盖上盖玻片。在37℃培养两小时后，用解剖显微镜计算围绕着在形成空斑的细胞(PFC)的溶血区域中的细胞数。对每只鼠脾计算总的WBC/脾、PFC/脾和PFC/10⁶WBC(PPM)。然后与载体处理的对照组比较。计算每处理组的几何平均值。

用这种方法测试时，本发明的化合物显示出免疫抑制活性。化合物Ⅰ和Ⅱ的免疫抑制活性

              免疫PFC    AAE

              ED₅₀      ED₅₀

化合物Ⅰ    1mg/kg    0.003mg/kg

化合物Ⅱ    3mg/kg    0.009mg/kg

                    实施例48

用人外周血淋巴细胞对促细胞分裂剂的反应来测定免疫抑制活性。

本方法是最初Greaves等人“用多克隆有丝分裂剂活化人类T及B淋巴细胞”[“Activation of human T and B lymphocytes bypolyclonal mitogens,)”Nature,248,698-701(1974)]所述方法的改进。

在水溶性聚蔗糖(Ficoll-Paque)(Pharmacia)中通过用密度梯度离心，从抗凝血化(肝素化)的全血中分离出人单核细胞(PBL)。洗涤后，将5×10⁴个细胞/管在微量滴定盘中培养，用最少量的基本介质，其余用1％人血清、庆大霉素、碳酸氢钠、2-巯基乙醇、谷酰胺、非必需氨基酸、和丙酮酸钠补充。以2μg/ml的浓度使用促细胞分裂剂伴刀豆球蛋白A(Sigma)。试验材料以10^-4到10^-10M浓度试验，在0时加入至培养基中。建立四次重复的培养液并在37℃在含5％CO₂的潮湿气氛中培养48小时。在最后4小时加入1.0μCi/管脉冲的³H-胸苷。细胞收集在带自动收集器的玻璃纤维过滤器中并用标准闪烁计算器法测定放射性。作图确定对促细胞分裂刺激的50％抑制浓度(“IC₅₀”)。当用这种方法测试时，本发明的化合物显示出免疫抑制活性。

化合物对在兴奋状态下人PBL对伴刀豆球蛋白的促细胞分裂的反应的作用

浓度              ％抑制度

             化合物Ⅰ    化合物Ⅱ

100μM         100         100

10μM          85          87

1μM           80          83

0.1μM         83          74

％抑制率代表测试管的计数减去底值(无伴刀豆球蛋白A的试管)除以对照管数(无化合物的管减去底值乘以100)。

                    实施例49

     用花生四稀酸诱发的鼠耳浮肿测定消炎活性

本方法是Young et al.,J.Invest,Derm,82:367-371(1984)所描述的方法的改进。

对23-27g的雌性Charles River ICR鼠用0.2ml试验物质给药。然后在耳部对鼠局部施加20ml花生四烯酸进行激发1小时后，测定一个8mm圆片的重量。计算耳塞重量的实际增加。具消炎活性的物质能防止耳塞重量增加。

当用这种方法测试时，本发明的化合物显示出消炎活性。

                      实施例50

                     胶囊剂配方

本实施例阐述用于口服给药的含式Ⅰ活性化合物的代表性药物组合物的制备。

组分                数量(mg/胶囊)

活性化合物          200mg

乳糖、喷雾干燥的    148mg

硬脂酸镁            2mg

将上述组份混合并引入一个硬壳明胶胶囊。

                    实施例51

                    口服剂配方

本实施例阐述含式Ⅰ活性化合物的代表性配方物的制备。

制备含以下组分的口服给药的混悬液：

组分              数量活性物质              1.0g富马酸                0.5g氯化钠                2.0g甲基Paraben           0.1g糖颗粒                25.5g山梨糖醇(70％溶液)    12.85gVeegum K(Vander-      1.0gbilt Co.)香味剂                0.035mL着色剂                0.5mg蒸馏水                加100mL

其它式Ⅰ的化合物，如那些实施例1-45中制备的可用作制备本实施例的口服给药配方物中的活性化合物。

                    实施例52

                    片剂配方

本实施例阐述含活性式Ⅰ化合物的代表性药物配方物的制备。

制备具有以下组分的口服给药的片剂：

组分           含量(mg/片)活性物质             400mg谷物淀粉             50mg乳糖                 145mg硬脂酸镁             5mg

将上述组分密切混合并压制成划单线的药片。

其它式Ⅰ化合物，如那些按照实施例1-45制备的可用作制备本实施例的片剂配方物的活性化合物。

                    实施例53

                    可注射的配方

本实施例阐述含有式Ⅰ活性化合物的代表性药物配方物的制备。

制备具有以下组分的可注射物：

组分              数量活性化合物            200mg水(蒸馏、灭菌)        加水20.0mL

其它式Ⅰ化合物，如那些按照实施例1-45制备的可用以制备本实施例的注射给药配方物的活性化合物。

                    实施例54

                    栓剂配方

本实施例阐述含有式Ⅰ活性化合物的代表性药物配方物的制备。

制备具有以下组分的共2.5g的栓剂：

组分              数量活性物质              0.5gNitepsol H-15^*       加至2.5g

(“甘油三饱和植物脂肪酸酯Riches-Nelson,Znc.，出品，New York,N,Y.)。

其它式Ⅰ的化合物，如那些按实施例1-45制备的可用作制备本实施例的栓剂配方物的活性化合物。

其它式Ⅰ的化合物，如那些按实施例1-45制备的可用作制备本实施例的注射给药配方物的活性化合物。

                      毒理学

品种：                        小鼠

化合物：                      化合物Ⅰ、Ⅱ

剂量：                        3到25mg/kg/天

给剂持续的时间：              2星期

结论                          任何剂量水平试验

                              均款出现死亡

Ames试验阴性(体外沙门氏菌诱变性(Salmonella mutagenic-ity)试验法)。

Claims (14)

1．一种如下式的化合物或其药物上可接受的酯或盐：

其特征在于，其中：

X和Y是C或N，并规定两者不相同；Z是O或S；

R¹是H；含1-9个碳原子的低级烷基，任选地被卤素、低级烷氧基或硝基取代的苯基，苄基；杂环或杂环低级烷基，该杂环选自任选地被低级烷基或低级烷氧基取代的吡啶基，吡啶基-N-氧化物，吗啉基，吡咯烷酮基，吡咯烷基，哌啶基，噻吩基或糠基；

R²,R³,R⁴,R⁵和R⁶分别是H，低级烷基，卤素，低级烷氧基羰基，三氟甲基，氰基或硝基；

条件是当R¹是低级烷基，环丙基，环戊基，环己基，环丙基甲基，环戊基甲基或苄基时，R²,R³,R⁴,R⁵和R⁶分别是H，氰基或硝基。

2．如权利要求1的化合物，其特征在于，其中低级烷基选自2-羟基乙基，甲氧基乙基，甲基硫代乙基，甲基硫代丙基，2-甲基氨基乙基，二甲基氨基乙基，2-乙酰氧基乙基，2-溴乙基，2-氟乙基，2-氯乙基，2-氰乙基，环丙基，环戊基，环己基，环丙基甲基和环戊基甲基。

3．如权利要求1的化合物，其特征在于，其中X是N,Y是C，以及Z是O。

4．如权利要求3的化合物，其特征在于，其中R³是H，卤素或硝基，以及R²,R⁴,R⁵和R⁶是H。

5．如权利要求4的化合物，其特征在于，其中R¹是H，乙基，2-丙基，环丙基甲基，环戊基甲基，苄基或杂环低级烷基，所述杂环选自任选地被低级烷基或低级烷氧基取代的吡啶基，吡啶基-N-氧化物，吗啉基，吡咯烷酮基，吡咯烷基，哌啶基，噻吩基或糠基。

6．如权利要求5的化合物，其特征在于，其中R¹是乙基，2-丙基，4-吡啶基甲基，4-吡啶基-N-氧化物-甲基，3-吡啶基甲基，3-吡啶基-N-氧化物-甲基，3-吡啶基甲基，3-吡啶基-N-氧化物-甲基或3-噻吩基甲基。

7．如权利要求1的化合物，其特征在于，其中X是C,Y是N，以及Z是O。

8．如权利要求7的化合物，其特征在于，其中R¹是H，乙基，2-丙基，环丙基甲基，环戊基甲基，苄基或杂环低级烷基，所述杂环选自任选地被低级烷基或低级烷氧基取代的吡啶基，吡啶基-N-氧化物，吗啉基，吡咯烷酮基，吡咯烷基，哌啶基，噻吩基或糠基，R³是H，卤素或硝基，以及R²,R⁴,R⁵和R⁶是H。

9．如权利要求1的化合物，其特征在于，其中X是N,Y是C，以及Z是S。

10．如权利要求9的化合物，其特征在于，其中R³是H，卤素或硝基，以及R²,R⁴,R⁵和R⁶是H。

11．一种如下式的化合物或其药物上可接受的酯或盐：

其特征在于，其中：

X和Y是C或N，并规定两者不相同；

R²,R³,R⁵和R⁶分别选自H，低级烷基，卤素，烷氧基羰基，三氟甲基，氰基和硝基；

R⁴是H，低级烷基，碘代，溴代，氯代或硝基；和

R⁷是低级烷基；条件是当X是C,Y是N以及R⁷是甲基时，R²,R³,R⁴,R⁵和R⁶不都是H。

12．如权利要求11的化合物，其特征在于，其中R³是H，卤素或硝基，

13．一种药物组合物，它包含药学上可接受的赋形剂和治疗有效果的如权利要求1的化合物。

14．权利要求1的化合物或其药物上可接受的酯或盐在用于制造治疗哺乳动物的哮喘、疼痛、炎症、同种移植排斥、移植物抗宿主排斥、和自体免疫疾病的药物中的用途。