CN104568882A - 一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法 - Google Patents
一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104568882A CN104568882A CN201410846028.7A CN201410846028A CN104568882A CN 104568882 A CN104568882 A CN 104568882A CN 201410846028 A CN201410846028 A CN 201410846028A CN 104568882 A CN104568882 A CN 104568882A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- graphite oxide
- oxidase
- auncs
- preparing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
本发明属于化学分析领域，提供了一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法，包括1）氧化石墨的制备，2）金纳米簇的制备，3）将氧化石墨进行氨基功能化得到带正电荷的GO-NH2，4）将带正电荷的GO-NH2与在中性环境中与带负电荷的金纳米簇混合，通过自组装制备金纳米簇复合的氧化石墨材料，5）负载天然氧化酶，通过静电引力自组装制得天然蛋白酶特异性底物的光学传感器。与现有技术相比，氧化石墨的引入不仅可以作为金纳米簇与天然氧化酶的载体，而且还极大地改善了金纳米簇及天然蛋白酶的二级结构，使得酶的催化功能被放大，并且金纳米簇与天然蛋白酶之间的协同效应使得反应更加高效灵敏。此光学传感器制备方法简便，绿色无污染，有很大的实际应用价值。
Description
技术领域
本发明属于化学分析领域，特别涉及一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法。
背景技术
金纳米簇是由几十至几百个原子构成的直径小于2 nm的金属纳米材料，因其独特的尺寸及立体结构从而产生与金材料本身相差甚远的性质。金纳米簇因具有良好的生物相容性、极好的荧光稳定性而且无毒无害等优点已广泛应用于催化、传感、生物成像和药物开发与机理研究等领域。因金纳米簇是由位于中心的金原子和表面的稳定剂构成，中心金原子与表面稳定剂多数通过Au-S结合，多种金属离子可通过与中心金原子或者表面稳定剂产生作用而猝灭荧光，从而实现这些金属离子的准确定量检测。氧化石墨及复合材料因具有丰富的理化性质而被广泛应用于包括生物反应催化在内的多个领域，因其具有较大的比表面积和良好的生物亲和性可为生物体内多步反应及非均相反应提供优良的反应载体。目前已有研究报道将Fe3O4磁性纳米颗粒、量子点、金纳米颗粒与Au-Pd双金属纳米颗粒等纳米材料成功的附着于氧化石墨烯表面制备了金属纳米材料修饰的氧化石墨烯（Xiao-ze Shi, Hua Gong, Ying-jie Li, Chao Wang, Liang Cheng, Zhuang Liu, Biomaterials, 2013, 34, 4786-4793）。这些新型纳米材料的成功制备使得氧化石墨的应用领域进一步拓展，更加丰富了氧化石墨在生物医药领域的应用价值。
目前，金纳米簇的应用仅限于金属离子检测与生物成像领域，使得新型材料的功能单调化，关于金纳米簇复合材料的制备与应用研究还处于起始阶段，本发明首先研究了生物领域常用的氧化石墨与金纳米簇的复合方法，制备了均匀分散于氧化石墨表层的金纳米簇（Yu Tao,You-hui Lin, Zhen-zhen Huang, Jin-Song Ren, Xiao-gang Qu, Advanced Materials, 2013, 25(18), 2594-2599）。后面将此复合纳米材料与天然蛋白酶结合应用于特异性底物检测，氧化石墨的加入除了作为金纳米簇与天然蛋白酶的反应基底，缩短两者的空间距离，大大增加反应速率以外，表面含有的基团与金纳米簇及天然蛋白酶之间的作用力进一步改善了金纳米簇表面蛋白质与天然蛋白酶的二级结构，使得金纳米簇与天然蛋白酶的活性中心更加暴露，有利于反应的快速进行，并进一步提高了该光学传感器的灵敏度，该方法提供了一种操作简单，省时、省力且绿色无污染的检测途径。
发明内容
本发明致力于探索功能化氧化石墨与金纳米簇的复合方法，制备金纳米簇均匀分散于氧化石墨表层的多功能复合材料。本发明提供了一种新型简单的复合方法，通过对氧化石墨表面改性从而改变氧化石墨表面电荷类型，通过静电引力自组装于氧化石墨表面进行改性从而与金纳米簇复合的方法制备了对特异性底物响应灵敏的光学传感器，
为解决上述技术问题所，本发明采用的技术方案是：
一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法，包括以下步骤
1）利用Hummers法制备高氧化程度的氧化石墨；
2）在35℃-37℃的恒温水浴中，将氯金酸溶液滴加于牛血清蛋白水溶液，加入强碱性溶液调节pH值至设定值，孵化后得到深棕色金纳米簇AuNCs；
3）将氧化石墨超声分散于二次蒸馏水中，加入至磷酸缓冲溶液PBS中，再向磷酸缓冲溶液PBS中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺EDC溶液，反应1-3h，活化后在25℃室温下加入一定量的乙二胺，搅拌，透析除去多余乙二胺，得到氨基功能化氧化石墨溶液GO-NH2；
4）将步骤量2）所制备的金纳米簇及步骤3）所制备的氨基功能化氧化石墨加入PBS中，震荡充分混合，得到AuNCsGO-NH2复合材料的水溶液。将已配置好的氧化酶溶液OXI加入到复合材料的水溶液中，充分混合，冷冻干燥得到AuNCs/OXI GO-NH2粉末；
5）将步骤4）中所制备的适量AuNCs/OXI GO-NH2复合材料溶于PBS中，加入氧化酶特异性底物，充分反应后测定溶液的荧光强度。
进一步地，所述步骤2）中强性碱溶液是氢氧化钠和氢氧化钾中的一种或者两种的混合溶液， pH值设定值为10-12。
进一步地，所述步骤2）中孵化时间时间与温度分别为12-24 h，30-40℃。
进一步地，所述步骤3）中超声充分分散的时间为2-6 h。
进一步地，所述步骤3）中优选活化时间为1-3 h。
进一步地，所述步骤3）GO与乙二胺的添加比为1:1.5-1:5（mg:g）。
进一步地，所述步骤4）中氨基化氧化石墨与金纳米簇的最佳比例范围为1:5-1:20（mg:g）。
进一步地，所述步骤4）中氧化酶可以是葡萄糖氧化酶或多酚氧化酶等天然蛋白酶。
进一步地，所述步骤4)中氧化酶与金纳米簇的添加比例范围为1:2-1:10（mg:g）。
再进一步地，所述步骤5）中反应的条件是反应温度为20-50℃，反应时间为15 -40 min，震荡速率200-500 r/min，，荧光强度测定的条件为：pH为6-8，温度为20-50℃，激发波长为365 nm。
本发明的一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法 应用一较佳的实施例包括以下步骤：
1）将天然鳞片石墨在搅拌下缓慢加入到装有浓硫酸的2000 mL的大烧杯中，维持低温，再缓慢加入硝酸钠和高锰酸钾的混合物，反应2h以后，在恒温水浴（30-40℃）中，搅拌下保温，缓慢加入超纯水，使温度上升至高温（90-100℃），在此温度下维持15 min。用温水稀释，倒入一定量的H2O2 （5%），趁热过滤，用稀HCl充分洗涤滤饼，直至滤液中无SO4 2-。于50℃在P2O5存在下真空干燥24 h，密封保存得到氧化石墨；
2)37℃恒温水浴中，将5 mL，10 mM氯金酸（HAuCl4）在强烈搅拌下滴加于5 mL，50 mg/ mL牛血清白蛋白（BSA）水溶液中，两分钟后，0.5 mL，1 M NaOH溶液或KOH溶液加入其中，混合液在37℃条件下保持适当时间（12-24 h），溶液颜色由浅黄色变至浅棕，最后至深棕色，得到的金纳米簇(AuNCs)；
3)将2 ml 0.5 mg/mL的氧化石墨水溶液在350KW超声中充分分散3-6 h后，加入到3 mlPBS（20 mM, pH7.4）中，再加入50 mM的EDC溶液（溶于20 mM, pH7.4 PBS中）500 μL，室温下活化（1 h-3 h），加入一定比例的乙二胺溶液（GO:乙二胺=1:1.5-1:5（mg:g）），于室温下搅拌过夜，透析除去多余乙二胺，得到氨基功能化的氧化石墨溶液(GO-NH2)；
4）将一定量步骤2）所制备的金纳米簇溶液及步骤3）所制备的氨基功能化氧化石墨加入PBS中（GO:AuNCs=1:5-1:20（mg:g）），充分震荡混合，得到AuNCsGO-NH2复合材料水溶液。将已配置好的适量葡萄糖氧化酶溶液（GOD）加入到上述水溶液中（GOD:AuNCs=1:2-1:10（mg:g）），充分震荡混合，冷冻干燥，得到的粉末（AuNCs/GODGO-NH2）于4℃条件下保存；
5）将一定量步骤4）中制备的复合材料AuNCs/GODGO-NH2溶于PBS中，加入的葡萄糖溶液，氧化酶与金纳米簇的添加比例范围为1:2-1:10（mg:g），震荡充分反应（反应温度20-50℃，反应时间为15-40 min，震荡速率200-500 r/min）。 之后在测定混合液的荧光强度（pH为6-8，测定温度20-50℃，激发波长365 nm）。
在该较佳实施例中，利用改进HUMMERS法制备高氧化程度的氧化石墨；氯金酸与牛血清蛋白在碱性环境中制备金纳米簇；将制备的氧化石墨通过活化后与乙二胺反应制备氨基功能化的氧化石墨；以氨基功能化的氧化石墨为载体制备氧化蛋白酶特异性底物的光学传感器。研究表明，所得到的光学传感器对特异性底物响应灵敏而且线性范围跨6个数量级，线性相关系数达0.99以上。
本发明的各优选方案可互相组合使用。
与现有技术相比，本发明具有以下显著优势：
（1）本发明采用氧化石墨作为金纳米簇与天然蛋白酶的载体，大大缩短了两者之间的空间距离，因此金纳米簇与天然蛋白酶之间的协同效应因空间距离的缩短而增大。另外氧化石墨表面官能团的存在与金纳米簇和天然蛋白酶之间产生静电引力，该作用力的存在在一定程度上改善了两者的二级结构，使得金纳米簇表面蛋白质的α-螺旋比例增加，增加了金纳米簇的结构稳定性，并且在一定程度上使天然蛋白酶的活性中心更加暴露，有利于反应的进行，增大了反应速率，提高了该传感器的灵敏度。
（2） 在该传感器中采用金纳米簇与天然蛋白酶结合的方法对蛋白酶的特异性底物进行检测，两者之间无明显的干扰，并且由于天然蛋白酶与底物的反应产物进一步与金纳米簇作用而被消耗，从而拉动了整个反应的进程，两者之间的协同效应使得反应快速进行。
（3）本方法制备的光学传感器利用荧光信号来定量分析，在温度及反应环境确定的前提下信号产生迅速稳定，由于酶的特异性使得该传感器特意强，线性范围达6个数量级，线性相关系数达0.99以上，可用于实际样品的快速分析。
具体实施方式
下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
下述实施例中，荧光测定采用的容量为0.35 mL的石英比色皿测定条件为365 nm，入射狭缝为5 mm，出射狭缝为10 mm，测定荧光强度。
实施例1
将10 g天然鳞片石墨在搅拌下缓慢加入到装有230 mL浓硫酸的2000 mL的大烧杯中，温度维持在（0±1）℃，再缓慢加入5 g硝酸钠和30 g高锰酸钾的混合物，在搅拌下维持温度，2 h以后反应完全，在35℃恒温水浴中，搅拌下保温30 min，缓慢加入超纯水，使温度上升至98℃，在此温度下维持15 min。用温水稀释，倒入一定量的H2O2 （5%），趁热过滤，用5% HCl充分洗涤滤饼，直至滤液中无SO4 2-。在P2O5存在于50℃下真空干燥24 h，得到氧化石墨。 37℃恒温水浴中，将5 mL，10 mM氯金酸（HAuCl4）在强烈搅拌下滴加于5 mL，50 mg/ mL牛血清白蛋白（BSA）水溶液中，两分钟后，0.5 mL，1 M NaOH溶液加入其中，混合液在37℃条件下保持24 h，溶液颜色由浅黄色变至浅棕，最后至深棕色，得到的金纳米簇。将2mL， 0.5 mg/mL的氧化石墨水溶液在350KW超声中充分分散4 h加入到3mL PBS（20 mM, pH7.4）中，再加入50 mM的EDC溶液（溶于20 mM, pH7.4 PBS中）500 μL，在室温下活化1 h，加入2 mL乙二胺溶液，并于室温下搅拌过夜反应，透析除去多余乙二胺，得到氨基功能化的氧化石墨溶液。将制备好的1 mL氨基功能化氧化石墨加入到PBS中，并将15mL金纳米簇加入其中,震荡充分混合，得到AuNCsGO-NH2复合材料水溶液。将已配置好的2 mg/mL葡萄糖氧化酶溶液（GOD）2 mL加入到上述材料中。充分震荡混合，并于冷冻干燥仪中冷冻干燥，得到的粉末（AuNCs/GODGO-NH2）于4℃条件下保存。将制备好的复合材料AuNCs/GODGO-NH2溶于15 mLPBS中，取500 μL复合材料加入100 μL不同浓度的葡萄糖溶液，37℃，500 r/min的恒速震荡下反应20 min，之后在37℃，365 nm激发波长下测定混合液的荧光强度。
实施例2
将10 g天然鳞片石墨在搅拌下缓慢加入到装有230 mL浓硫酸的2000 mL的大烧杯中，温度维持在（0±1）℃，再缓慢加入5 g硝酸钠和30 g高锰酸钾的混合物，在搅拌下维持温度，2 h以后反应完全，在35℃恒温水浴中，搅拌下保温30 min，缓慢加入超纯水，使温度上升至98℃，在此温度下维持15 min。用温水稀释，倒入一定量的H2O2 （5%），趁热过滤，用5% HCl充分洗涤滤饼，直至滤液中无SO4 2-。在P2O5存在于50℃下真空干燥24 h，得到氧化石墨。 37℃恒温水浴中，将5 mL，10 mM氯金酸（HAuCl4）在强烈搅拌下滴加于5 mL，50 mg/ mL牛血清白蛋白（BSA）水溶液中，两分钟后，0.5 mL，1 M KOH溶液加入其中，混合液在37℃条件下保持24 h，溶液颜色由浅黄色变至浅棕，最后至深棕色，得到的金纳米簇。将2mL，0.5 mg/mL的氧化石墨水溶液在350KW超声中充分分散4 h加入到3 mL PBS（20 mM, pH7.4）中，再加入50 mM的EDC溶液（溶于20 mM, pH7.4 PBS中）500 μL，在室温下活化1 h，加入4 mL乙二胺溶液，并于室温下搅拌过夜反应，透析除去多余乙二胺，得到氨基功能化的氧化石墨溶液。将制备好的1 mL氨基功能化氧化石墨加入到PBS中，并将20 mL金纳米簇加入其中,震荡充分混合，得到AuNCsGO-NH2复合材料水溶液。将已配置好的2 mg/mL葡萄糖氧化酶溶液（GOD）3 mL加入到上述材料中。充分震荡混合，并于冷冻干燥仪中冷冻干燥，得到的粉末（AuNCs/GODGO-NH2）于4℃条件下保存。将制备好的复合材料AuNCs/GODGO-NH2溶于15 mLPBS中，取500 μL复合材料加入100 μL不同浓度的葡萄糖溶液，30℃，500 r/min的恒速震荡下反应20 min，之后在30℃，365 nm激发波长下测定混合液的荧光强度。
实施例3
将10 g天然鳞片石墨在搅拌下缓慢加入到装有230 mL浓硫酸的2000 mL的大烧杯中，温度维持在（0±1）℃，再缓慢加入5 g硝酸钠和30 g高锰酸钾的混合物，在搅拌下维持温度，2 h以后反应完全，在35℃恒温水浴中，搅拌下保温30 min，缓慢加入超纯水，使温度上升至98℃，在此温度下维持15 min。用温水稀释，倒入一定量的H2O2 （5%），趁热过滤，用5% HCl充分洗涤滤饼，直至滤液中无SO4 2-。在P2O5存在于50℃下真空干燥24 h，得到氧化石墨。 37℃恒温水浴中，将5 mL，10 mM氯金酸（HAuCl4）在强烈搅拌下滴加于5 mL，50 mg/ mL牛血清白蛋白（BSA）水溶液中，两分钟后，0.5 mL，1 M NaOH溶液加入其中，混合液在37℃条件下保持12 h，溶液颜色由浅黄色变至浅棕，最后至深棕色，得到的金纳米簇。将2 mL，0.5 mg/mL的氧化石墨水溶液在350KW超声中充分分散4 h加入到3mL PBS（20 mM， pH7.4）中，再加入50 mM的EDC溶液（溶于20 mM, pH7.4 PBS中）500 μL，在室温下活化3 h，加入3 mL乙二胺溶液，并于室温下搅拌过夜反应，透析除去多余乙二胺，得到氨基功能化的氧化石墨溶液。将制备好的1 mL氨基功能化氧化石墨加入到PBS中，并将10 mL金纳米簇加入其中,震荡充分混合，得到AuNCsGO-NH2复合材料水溶液。将已配置好的2 mg/mL葡萄糖氧化酶溶液（GOD）1 mL加入到上述材料中。充分震荡混合，并于冷冻干燥仪中冷冻干燥，得到的粉末（AuNCs/GODGO-NH2）于4℃条件下保存。将制备好的复合材料AuNCs/GODGO-NH2溶于15 mLPBS中，取500 μL复合材料加入100 μL不同浓度的葡萄糖溶液，40℃，500 r/min的恒速震荡下反应20 min，之后在40℃，365 nm激发波长下测定混合液的荧光强度。
实施例4
将10 g天然鳞片石墨在搅拌下缓慢加入到装有230 mL浓硫酸的2000 mL的大烧杯中，温度维持在（0±1）℃，再缓慢加入5 g硝酸钠和30 g高锰酸钾的混合物，在搅拌下维持温度，2 h以后反应完全，在35℃恒温水浴中，搅拌下保温30 min，缓慢加入超纯水，使温度上升至98℃，在此温度下维持15 min。用温水稀释，倒入一定量的H2O2 （5%），趁热过滤，用5% HCl充分洗涤滤饼，直至滤液中无SO4 2-。在P2O5存在于50℃下真空干燥24 h，得到氧化石墨。 37℃恒温水浴中，将5 mL，10 mM氯金酸（HAuCl4）在强烈搅拌下滴加于5 mL，50 mg/ mL牛血清白蛋白（BSA）水溶液中，两分钟后，0.5 mL，1 M NaOH溶液加入其中，混合液在37℃条件下保持18 h，溶液颜色由浅黄色变至浅棕，最后至深棕色，得到的金纳米簇。将2 mL，0.5 mg/mL的氧化石墨水溶液在350KW超声中充分分散4 h加入到3 mL PBS（20 mM， pH7.4）中，再加入50 mM的EDC溶液（溶于20 mM, pH7.4 PBS中）500 μL，在室温下活化3 h，加入4 mL乙二胺溶液，并于室温下搅拌过夜反应，透析除去多余乙二胺，得到氨基功能化的氧化石墨溶液。将制备好的1 mL氨基功能化氧化石墨加入到PBS中，并将20 mL金纳米簇加入其中,震荡充分混合，得到AuNCsGO-NH2复合材料水溶液。将已配置好的2 mg/mL葡萄糖氧化酶溶液（GOD）3 mL加入到上述材料中。充分震荡混合，并于冷冻干燥仪中冷冻干燥，得到的粉末（AuNCs/GODGO-NH2）于4℃条件下保存。将制备好的复合材料AuNCs/GODGO-NH2溶于15 mLPBS中，取500 μL复合材料加入100 μL不同浓度的葡萄糖溶液，25℃，500 r/min的恒速震荡下反应20 min，之后在25℃，365 nm激发波长下测定混合液的荧光强度。
实施例5
将10 g天然鳞片石墨在搅拌下缓慢加入到装有230 mL浓硫酸的2000 mL的大烧杯中，温度维持在（0±1）℃，再缓慢加入5 g硝酸钠和30 g高锰酸钾的混合物，在搅拌下维持温度，2 h以后反应完全，在35℃恒温水浴中，搅拌下保温30 min，缓慢加入超纯水，使温度上升至98℃，在此温度下维持15 min。用温水稀释，倒入一定量的H2O2 （5%），趁热过滤，用5% HCl充分洗涤滤饼，直至滤液中无SO4 2-。在P2O5存在于50℃下真空干燥24 h，得到氧化石墨。 37℃恒温水浴中，将5 mL，10 mM氯金酸（HAuCl4）在强烈搅拌下滴加于5 mL，50 mg/ mL牛血清白蛋白（BSA）水溶液中，两分钟后，0.5 mL，1 M NaOH溶液加入其中，混合液在37℃条件下保持24 h，溶液颜色由浅黄色变至浅棕，最后至深棕色，得到的金纳米簇。将2 mL，0.5 mg/mL的氧化石墨水溶液在350KW超声中充分分散6 h加入到3 mL PBS（20 mM， pH7.4）中，再加入50 mM的EDC溶液（溶于20 mM, pH7.4 PBS中）500 μL，在室温下活化3 h，加入3 mL乙二胺溶液，并于室温下搅拌过夜反应，透析除去多余乙二胺，得到氨基功能化的氧化石墨溶液。将制备好的1 mL氨基功能化氧化石墨加入到PBS中，并将20 mL金纳米簇加入其中,震荡充分混合，得到AuNCsGO-NH2复合材料水溶液。将已配置好的2 mg/mL葡萄糖氧化酶溶液（GOD）3 mL加入到上述材料中。充分震荡混合，并于冷冻干燥仪中冷冻干燥，得到的粉末（AuNCs/GODGO-NH2）于4℃条件下保存。将制备好的复合材料AuNCs/GODGO-NH2溶于15 mLPBS中，取500 μL复合材料加入100 μL不同浓度的葡萄糖溶液，10℃，500 r/min的恒速震荡下反应20 min，之后在10℃，365 nm激发波长下测定混合液的荧光强度。
Claims (4)
1.一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）利用Hummers法制备氧化石墨GO；
2）在35℃-37℃的恒温水浴中，将氯金酸溶液滴加于牛血清蛋白水溶液中，加入碱性溶液调节pH值，孵化后得到深棕色金纳米簇AuNCs；
3）将氧化石墨超声分散于二次蒸馏水中，加入至磷酸缓冲溶液PBS中，再向磷酸缓冲溶液PBS中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺EDC溶液，反应1-3h，活化后在25℃室温下加入一定量的乙二胺，搅拌，透析除去多余乙二胺，得到氨基功能化氧化石墨溶液GO-NH2；
4）将一定量步骤2）所制备的金纳米簇和步骤3）所制备的氨基功能化氧化石墨加入PBS中，震荡充分混合，得到AuNCsGO-NH2复合材料的水溶液，将已配置好的氧化酶溶液OXI加入到复合材料水溶液中，充分混合，冷冻干燥得到AuNCs/OXI GO-NH2粉末；
5）将步骤4）所制备的AuNCs/OXI GO-NH2粉末溶于PBS中，加入氧化酶特异性底物，震荡反应后测定溶液的荧光强度。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤2）中碱性溶液是氢氧化钠或氢氧化钾中的一种或者两种混合溶液；所述pH值的设定范围为10-12。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤4）中的氧化酶为葡萄糖氧化酶或多酚氧化酶等天然蛋白酶，所述的氧化酶与金纳米簇溶液的优选比例范围为OXI:AuNCs=1:2-1:10（mg:g）。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤5）中反应温度为20-50℃，pH为6-8，反应时间为15-40 min，震荡速率为200-500 r/min，测定温度20-50℃，激发波长365 nm。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410846028.7A CN104568882A (zh) | 2014-12-31 | 2014-12-31 | 一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410846028.7A CN104568882A (zh) | 2014-12-31 | 2014-12-31 | 一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104568882A true CN104568882A (zh) | 2015-04-29 |
Family
ID=53085451
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410846028.7A Pending CN104568882A (zh) | 2014-12-31 | 2014-12-31 | 一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104568882A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108031859A (zh) * | 2017-11-29 | 2018-05-15 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 合成金纳米簇的方法及其产品和应用 |
| CN108181360A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-06-19 | 齐鲁医药学院 | 基于巯基功能化石墨烯自组装的酸性磷酸酯酶生物传感器的构建方法 |
| CN109406507A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-03-01 | 鲁东大学 | 一种比色检测海水中银离子的稳定化探针的制备与应用 |
| CN114324524A (zh) * | 2021-09-13 | 2022-04-12 | 北方民族大学 | 一种高灵敏度非酶葡萄糖传感器及其制备方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102507693A (zh) * | 2011-11-03 | 2012-06-20 | 桂林医学院 | 基于功能化材料的葡萄糖生物传感器及其制备方法 |
-
2014
- 2014-12-31 CN CN201410846028.7A patent/CN104568882A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102507693A (zh) * | 2011-11-03 | 2012-06-20 | 桂林医学院 | 基于功能化材料的葡萄糖生物传感器及其制备方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| WU XIAOFEI 等: "Synthesis of gold nanoclusters/glucose oxidase/graphene oxide multifunctional catalyst with surprisingly enhanced activity and stability and its application for glucose detection", 《RSC ADVANCES》 * |
| XIAN-XIANG WANG 等: "BSA-stabilized Au clusters as peroxidase mimetics for use in xanthine detection", 《BIOSENSORS AND BIOELECTRONICS》 * |
| YEN-HSIU LIN 等: "Ultrasensitive Sensing of Hg2+ and CH3Hg+ Based on the Fluorescence Quenching of Lysozyme Type VI-Stabilized Gold Nanoclusters", 《ANAL. CHEM.》 * |
| 杨秀云 等: "葡萄糖生物传感器检测方法的研究进展", 《应用化学》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108031859A (zh) * | 2017-11-29 | 2018-05-15 | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 | 合成金纳米簇的方法及其产品和应用 |
| CN108181360A (zh) * | 2017-12-22 | 2018-06-19 | 齐鲁医药学院 | 基于巯基功能化石墨烯自组装的酸性磷酸酯酶生物传感器的构建方法 |
| CN109406507A (zh) * | 2018-12-10 | 2019-03-01 | 鲁东大学 | 一种比色检测海水中银离子的稳定化探针的制备与应用 |
| CN109406507B (zh) * | 2018-12-10 | 2021-09-24 | 鲁东大学 | 一种采用稳定化金纳米粒子检测海水中银离子的方法 |
| CN114324524A (zh) * | 2021-09-13 | 2022-04-12 | 北方民族大学 | 一种高灵敏度非酶葡萄糖传感器及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tian et al. | Hierarchical assembled nanomaterial paper based analytical devices for simultaneously electrochemical detection of microRNAs | |
| Zhang et al. | Sensitive colorimetric detection of glucose and cholesterol by using Au@ Ag core–shell nanoparticles | |
| Jiang et al. | Electrochemiluminescence of luminol enhanced by the synergetic catalysis of hemin and silver nanoparticles for sensitive protein detection | |
| Han et al. | Electrochemiluminescent biosensing of carbohydrate-functionalized CdS nanocomposites for in situ label-free analysis of cell surface carbohydrate | |
| Wang et al. | A solid-state electrochemiluminescence biosensing switch for detection of thrombin based on ferrocene-labeled molecular beacon aptamer | |
| CN108455652B (zh) | 一种类过氧化物酶的氢氧化铜纳米棒的制备方法及应用 | |
| Wu et al. | Fabrication of a LRET-based upconverting hybrid nanocomposite for turn-on sensing of H 2 O 2 and glucose | |
| Sun et al. | A highly selective and sensitive detection of insulin with chemiluminescence biosensor based on aptamer and oligonucleotide-AuNPs functionalized nanosilica@ graphene oxide aerogel | |
| CN108802133A (zh) | 一种检测胃癌肿瘤标志物夹心型免疫传感器的制备方法及应用 | |
| US8172997B2 (en) | Cerium oxide nanoparticle regenerative free radical sensor | |
| Wang et al. | Multiple signal amplification electrogenerated chemiluminescence biosensors for sensitive protein kinase activity analysis and inhibition | |
| CN107828772B (zh) | 一种用于比率荧光检测的固定化酶反应器及其制备方法 | |
| CN104568882A (zh) | 一种葡萄糖光学纳米传感器的制备方法 | |
| CN106984354B (zh) | 一种钯掺杂石墨相氮化碳纳米材料的制备方法及其应用 | |
| CN110669499B (zh) | 一种基于普鲁士蓝纳米粒子的荧光适配体探针及其制备方法和应用 | |
| CN105699368B (zh) | 一种基于二维复合材料构建的双功能过氧化氢无酶传感器的制备方法及应用 | |
| CN102175736A (zh) | 一种检测杂色曲霉素的酶电极及其制备与用途 | |
| Zhou et al. | A chiral responsive carbon dots–gold nanoparticle complex mediated by hydrogen peroxide independent of surface modification with chiral ligands | |
| Zhang et al. | Detection of choline and hydrogen peroxide in infant formula milk powder with near infrared upconverting luminescent nanoparticles | |
| Wang et al. | Catalase active metal-organic framework synthesized by ligand regulation for the dual detection of glucose and cysteine | |
| Huang et al. | Immobilization of cholesterol oxidase on magnetic fluorescent core-shell-structured nanoparticles | |
| CN113588752B (zh) | 一种电致化学发光适配体传感器的制备方法及应用 | |
| Chaichi et al. | Chitosan-induced Au/Ag nanoalloy dispersed in IL and application in fabricating an ultrasensitive glucose biosensor based on luminol–H2O2–Cu2+/IL chemiluminescence system | |
| Tang et al. | Facile colorimetric smartphone-based biosensor for rapid detection of organophosphorus pesticides residues in environment using the aptamer-enhanced oxidase activity of octahedral Ag2O particles | |
| CN113376132A (zh) | 一种基于介孔硫化铜复合材料、制备方法及检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20150429 |